藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞协同抑制作用的研究

目的 探索藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞的协同抑制作用及相关调控机制。方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,设置空白对照组（DMSO）、藏红花素组（400 μg·mL^-1）、顺铂组（5 μg·mL^-1）、联合组（藏红花素400 μg·mL^-1+顺铂5 μg·mL^-1）。干预48 h后,CCK-8检测HeLa细胞增殖抑制率,采用CompuSyn软件计算藏红花素与顺铂的联合指数（CI）,Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting检测激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、周期蛋白依赖激酶2（CDK2）的表达。结果 与顺铂组比较,联合组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,CI为0.68,具有中度协同效应;细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞比例显著升高（P<0.05）,而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.05）,Cyclin D1、CDK2蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与空白对照组比较,藏红花素组G₀/G₁期细胞比例显著升高而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.01）,Cyclin D1、CDK2表达水平显著降低（P<0.05）。结论 藏红花素联合顺铂可协同抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖和生长,其作用机制可能与调控凋亡相关蛋白的表达从而促进细胞凋亡、阻滞细胞周期进程有关。     

地榆鞣质提取物对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞增殖的影响

摘 要 目的： 通过观察地榆鞣质提取物（STE）对生长转化因子（TGF-β₁）诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖的影响,探讨地榆在防治肾间质纤维化方面的作用。方法: 将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养,实验分为5组：空白对照组、TGF-β₁组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁）、干预1组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁+12.5 μg·mL^-1 STE）、干预2组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁+25μg·mL^-1 STE）、干预3组（5 ng·mL^-1 TGF-β₁+50μg·mL^-1 STE）,孵育24 h。在倒置显微镜下观察各组细胞形态的改变,并通过CCK8法测定地榆鞣质对细胞增殖的影响。结果: TGF-β₁ 5 ng·mL^-1能显著诱导人肾小管上皮细胞增殖,并促进其细胞形态向纤维化转变,相比于空白对照组具有显著差异（P<0.05）;但与地榆鞣质提取物（STE）共同作用后,其促进细胞增殖的作用受到一定抑制（P<0.05）,细胞形态也趋于正常,且呈剂量依赖性。结论:地榆鞣质提取物能抑制HK-2细胞的增殖,在一定程度上具有防止肾间质纤维化的作用。     

GC-MS/MS测定坎地沙坦酯片中基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯

目的 建立GC-MS/MS分析方法测定坎地沙坦酯片中基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯。方法 采用DB-5MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm)毛细管柱,程序升温,初始温度80 ℃,以20 ℃·min^–1的速率升至300 ℃,维持5 min,以氦气为载气,流速1.0 mL·min^–1,多反应监测模式检测。结果 1-氯乙基环己基碳酸酯在4.4~437.8 ng·mL^–1内线性关系良好,定量限为4.4 ng·mL^–1,检测限为2.2 ng·mL^–1,平均回收率为95.6%(RSD=6.3%,n=9)。结论 本法操作简单、灵敏度高、准确性好,适用于坎地沙坦酯片中基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测。     

LC-MS/MS法测定人血浆中左舒必利含量的不确定度评定

摘 要 目的：评定LC MS/MS法测定人血浆中左舒必利含量的不确定度。方法: 对测定过程中不确定度的来源进行分析评定,包括称量、纯度、仪器误差、标准溶液的配制、含药血浆样本的配制、标准曲线拟合、重复性、血浆样本的处理等,分析各分量的不确定度与合成不确定度,最终计算扩展不确定度。结果: 人血浆中低(9.0 ng·mL^-1)、中(150.0ng·mL^-1)、高(3 200.0 ng·mL^-1) 3个浓度的扩展不确定度分别为2.46,10.42,173.77 ng·mL^-1(k=2,P=95%)。结论:LC-MS/MS法测定人血浆中左舒必利含量的不确定度主要由血浆样本的处理,仪器误差、标准溶液的配制及标准曲线拟合（低浓度）引入。     

HPLC双波长法同时测定美辛唑酮红古豆醇酯栓中的2种有效成分

摘 要 目的：建立同时测定美辛唑酮红古豆醇酯栓中呋喃唑酮和吲哚美辛含量的高效液相色谱双波长分析方法。方法: 采用ZORBAX Extend C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈和0.035 mol·L^-1的磷酸二氢钾水溶液（冰醋酸调节pH至3.0）为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,检测波长分别为364 nm和318 nm,柱温30℃,进样量20 μl。结果: 在选定的色谱条件下,呋喃唑酮和吲哚美辛在0.005～0.05 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 9,检测限分别为20 ng·mL^-1和26 ng·mL^-1,定量限分别为70 ng·mL^-1和90 ng·mL^-1,平均回收率分别为99.4%（RSD=0.6%,n=9）和99.4%（RSD=0.3%,n=9）。结论: 所建立的方法简便快速,专属性强,结果准确可靠,可用于美辛唑酮红古豆醇酯栓中呋喃唑酮及吲哚美辛的检测分析。     

肺瘤消积方联合吉非替尼治疗痰瘀互结型晚期非小细胞肺癌的临床疗效

目的 探讨肺瘤消积方联合吉非替尼治疗痰瘀互结型晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的临床疗效及对血清肿瘤标志物和炎性因子水平的影响。方法 选取2019年2月—2021年2月于我院就诊的痰瘀互结型晚期NSCLC患者100例,根据随机数字表法分为对照组和治疗组（n=50）。对照组患者口服吉非替尼片,治疗组患者在对照组的基础上加用肺瘤消积方,以21 d为1个治疗周期,两组患者均治疗4周期。对比分析两组血清肿瘤标志物和炎性因子水平、生活质量评分、无进展生存期（PFS）、中医症状分级、临床疗效、不良反应。结果 治疗后,两组细胞角质蛋白19片段抗原21-1（CYFRA21-1）、糖类抗原19-9（CA19-9）、癌胚抗原（CEA）、白细胞介素-1（IL-1）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平以及癌症患者生命质量测定量表（QLQ-C30）评分均低于治疗前,且治疗组低于对照组（P<0.05）;治疗组PFS显著长于对照组（P<0.05）;两组中医症状分级均显著改善,且治疗组优于对照组（P<0.05）;治疗组客观缓解率（ORR）、疾病控制率（DCR）（68.00%、84.00%）均显著高于对照组（42.00%、62.00%）（P<0.05）;治疗组皮肤反应、腹泻总发生率（22.00%、50.00%）均显著低于对照组（42.00%、74.00%）（P<0.05）。结论 肺瘤消积方联合吉非替尼治疗痰瘀互结型晚期NSCLC患者疗效显著,可有效降低患者血清CYFRA21-1、CA19-9、CEA、IL-1、IL-6、TNF-α水平,改善患者病情,且安全性较高。     

新疆维吾尔族、汉族癫痫患儿拉考沙胺血药浓度、临床疗效和安全性的差异性研究

目的 探讨新疆维吾尔族、汉族癫痫患儿拉考沙胺(lacosamide，LCM)血药浓度与临床疗效的相关性和差异性。方法 采用超高效液相色谱法测定100例维吾尔族癫痫患儿和194例汉族癫痫患儿的血药浓度，观察其疗效和不良反应，运用Logistic回归和受试者操作特征曲线分析患儿血药浓度和疗效的相关性。结果 维吾尔族患儿的LCM癫痫治疗有效率显著低于汉族患儿(65.00%和78.68%，P<0.05)。维吾尔族患儿的LCM血药浓度显著高于汉族患儿[(7.13±2.88)μg·mL^–1和(6.27±2.53)μg·mL^–1，P<0.05]。维吾尔族、汉族有效组患儿接受LCM单一治疗的比例显著高于无效组，接受LCM合并细胞色素P450酶诱导剂治疗的比例显著低于无效组(P<0.05)。维吾尔族、汉族癫痫患儿的不良反应发生率分别为29.00%和36.60%，发生不良反应的维吾尔族患儿的LCM血药浓度显著高于未发生不良反应组患儿[(8.20±3.60)μg·mL^–1和(6.70±2.43)μg·mL^–1，P<0.05]。结论 临床使用LCM治疗不同民族癫痫患儿的过程中，有必要监测LCM稳态谷浓度，以提高疗效和降低不良反应发生率。     

川芎嗪对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及机制研究★

目的 探讨川芎嗪（TMP）对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 以DMSO（空白对照组）、不同浓度（50、100、200 μg·mL^-1）的TMP和奥沙利铂（L-OHP，25 μg·mL^-1）干预对数生长期人结直肠癌SW480细胞48 h。采用MTT法和EdU插入实验检测各组SW480细胞增殖率，细胞克隆实验观察SW480细胞克隆形成能力，流式细胞术、Western blotting检测细胞周期、凋亡和蛋白表达。结果 与空白对照组比较，经50、100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显降低SW480细胞增殖率，提高细胞凋亡率；经100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显抑制细胞克隆形成能力，阻滞细胞周期于G₀/G₁期，提高PTEN、Cleaved Caspase-3、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值，降低p-Akt、cyclin D1、Bcl-2表达量和Akt磷酸化率，差异均具有统计学意义（P<0.05）。与L-OHP 25 μg·mL^-1组比较，经TMP 200 μg·mL^-1干预能够明显降低SW480细胞增殖率、提高凋亡率，提高PTEN、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值，降低p-Akt、cyclin D1表达量和Akt磷酸化率，差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 TMP可能通过上调PTEN抑制PI3K/Akt通路，进而抑制SW480细胞增殖并促进其凋亡。     

丙戊酸钠和丙戊酸镁在大鼠体内的药动学研究

目的 研究丙戊酸钠和丙戊酸镁在大鼠体内的药动学特征,评价其优势丙戊酸盐,为临床合理用药提供参考。方法 SD大鼠随机分为2组,分别灌胃给予丙戊酸钠片和丙戊酸镁片。于不同时间点眼眶取血。采用HPLC测定血清中丙戊酸的血药浓度,计算2种丙戊酸盐在大鼠体内的药动学参数,并比较2种丙戊酸盐之间的差异。结果 HPLC测定丙戊酸血药浓度方法专属性好,血清丙戊酸浓度在10.00~110.00 μg·mL^-1内线性关系良好。精密度、稳定性和回收率均符合要求。丙戊酸钠和丙戊酸镁在大鼠体内的主要药动学参数：T_1/2分别为（14.02±3.86） h和（12.11±1.95） h;T_max分别为（3.67±0.58） h和（2.67±0.26） h;C_max分别为（67.10±10.87）μg·mL^-1和（75.67±12.94）μg·mL^-1;AUC_（0-t）分别为（969.86±72.08）μg·mL^-1·h和（1 093.56±48.69）μg·mL^-1·h;AUC_（0-∞）分别为（1 178.10±185.29）μg·mL^-1·h和（1 279.35±109.18）μg·mL^-1·h;MRT_0-t分别为（10.73±2.05） h和（13.06±3.24） h。V_d分别为（16.31±2.18） L和（23.47±2.19） L;CL分别为（0.056 3±0.009） L·h^-1和（0.051 1±0.004） L·h^-1。结论 与丙戊酸钠相比,丙戊酸镁在大鼠体内的药动学参数具有一定的优势,可能是一种更具有治疗优势的丙戊酸盐。     

LC-MS/MS测定阿齐沙坦及其盐在大鼠血浆中的药动学研究

目的 建立液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度并研究其药动学。方法 大鼠血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（50 mm×3.0 mm,1.8 μm）;流动相（乙腈：水=60：40）,流速为0.35 mL·min^-1,柱温为40℃;采用Agilent 6430三重四极杆串联质谱仪,离子化方式：电喷雾-正离子（API-ES）;监测方式：MRM;阿齐沙坦监测离子对457.3/233.1,缬沙坦监测离子对436.2/291.4,用作内标。SD大鼠灌胃给予阿齐沙坦1.0 mg·kg^-1及阿齐沙坦盐1.2 mg·kg^-1。结果 阿齐沙坦在5~30 000 ng·mL^-1内线性关系良好;回收率为85%~115%,精密度RSD在±15%内。阿齐沙坦盐大鼠体内主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（12.9±3.2）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（14.2±4.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（3.8±0.3）μg·mL^-1,T_1/2为（13.4±0.5）h。阿齐沙坦的主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（8.1±2.6）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（9.7±3.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（2.3±0.5）μg·mL^-1,T_1/2为（10.5±0.5）h。结论 本法经方法学验证,适用于大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度测定,可用于阿齐沙坦及其盐大鼠体内药动学研究。     

LC-MS测定大鼠脑脊液与血浆中西达本胺浓度及其药动学研究

目的建立快速检测SD大鼠脑脊液和血浆中西达本胺浓度的LC-MS测定方法,并应用于大鼠静脉注射西达本胺后的脑脊液和血浆中药动学研究。方法对建立的检测大鼠脑脊液和血浆中西达本胺浓度的LC-MS分析方法进行专属性、精密度、准确性、基质效应及稳定性等考察验证。♂SD大鼠12只,分为2组,每组6只,分别静脉注射给予西达本胺3,6 mg·kg^–1剂量,于给药后0.083,0.25,0.5,1,1.5,2,3 h采集脑脊液和血浆,采用LC-MS测定大鼠脑脊液和血浆中西达本胺的浓度变化,并利用DAS药动学软件拟合脑脊液和血浆中AUC、C_max、T_max、t_1/2等主要药动学参数,计算血脑屏障透过率。结果方法学研究显示,大鼠脑脊液中西达本胺线性范围为0.2～64 ng·mL^–1(r=0.999 0,定量下限为0.2 ng·mL^–1),血浆中西达本胺的线性范围为2～1 000 ng·mL^–1(r=0.999 1,定量下限为2 ng·mL^–1     

HPLC-MS/MS法测定人体色甘酸钠血浆浓度及其药代动力学研究

采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中色甘酸钠浓度，进行其滴鼻液和鼻用喷雾剂的药代动力学研究并评价其生物等效性。采用高效液相分离系统，流动相为乙酸铵-甲醇(含50%乙腈)(15∶85)，固定相为AGT Venusil XBP C₁₈(250 mm×4.6 mm ID， 5 μm)色谱柱。采用质谱检测系统， ESI离子源， 正离子模式， 多级反应监测(MRM)方式， m/z 469→263.1(色甘酸钠)， m/z 447.2→327.1(内标，普伐他汀钠)。在0.3～20 ng·mL^-1色甘酸钠血药浓度呈线性关系， 定量限为0.3 ng·mL^-1， 回收率在94.1%以上， 日内日间的RSD均小于14.3%。单剂量给药色甘酸钠鼻用喷雾剂或滴鼻液， 其药代动力学参数T_1/2分别为(1.82±0.54)和(1.59±0.52) h； T_max分别为(0.47±0.12)和(0.44±0.15) h； C_max分别为(9.79±4.66)和(10.88±4.05) ng·mL^-1， AUC_{0-5 h}分别为(11.52±3.46)和(12.63±4.23) ng·mL^-1·h。色甘酸钠鼻用喷雾剂相对生物利用度F_r为(93.6±13.8)%。本法灵敏度高， 适用于色甘酸钠治疗药物监测及其药代动力学和生物利用度研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中的左西孟旦及其主要代谢物

建立快速、 灵敏、 易操作的LC-MS/MS法测定人血浆中的左西孟旦及其代谢物OR-1855和OR-1896的浓度。根据待测物的不同性质， 采用两套液相色谱系统和电离方式分别测定人血浆中的左西孟旦和代谢物OR-1855、 OR-1896。测定左西孟旦时， 用瑞舒伐他汀为内标， 血浆样品经甲醇沉淀蛋白， 以甲醇-15 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸(55∶45∶0.02， v/v/v)为流动相， Capcell MG III C₁₈柱(35 mm×2.0 mm ID， 3 μm)进行分离， 采用电喷雾电离源，以选择反应监测(SRM)方式进行负离子检测。测定代谢物OR-1855和OR-1896时， 用多索茶碱为内标， 血浆样品经乙酸乙酯萃取， 以甲醇-15 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸(65∶35∶0.1， v/v/v)为流动相， Zorbax Extend C₁₈柱(150 mm×4.6 mm ID， 5 μm)进行分离， 采用电喷雾电离源， SRM方式进行正离子检测。测定血浆中左西孟旦方法的线性范围为0.10～50.0 ng·mL^-1， 定量下限可达0.10 ng·mL^-1； 测定血浆中代谢物OR-1855和OR-1896方法的线性范围均为0.20～100 ng·mL^-1， 定量下限均可达0.20 ng·mL^-1。本方法专属性好， 准确、 快速， 适用于左西孟旦注射液的临床药代动力学研究。     

间尼索地平控释微丸Beagle犬体内药动学研究

目的建立间尼索地平血药浓度的高效液相色谱-质谱联用方法,研究Beagle犬单剂量口服间尼索地平控释微丸的药动学。方法用HPLC-MS法测定健康Beagle犬单剂量口服间尼索地平控释微丸和普通微丸的血药浓度,以DAS 2.0软件计算药动学参数。结果单剂量给药后,控释微丸和普通微丸的tmax分别为(11.154±0.5077)h和(2.213±0.3225)h,Cmax分别为(79.40±10.60)ng.mL1和(116.7±20.35)ng.mL1,AUC分别为(1227.8±296.0)ng.h.mL1和(867.8±146.7)ng.h.mL1,控释微丸的相对生物利用度为141.5%。结论本方法准确、灵敏,间尼索地平控释微丸血药浓度平稳,可较长时间保持血药浓度。     

硫酸沙丁胺醇渗透泵控释片的人体药代动力学与生物利用度

目的:研究自制硫酸沙丁胺醇渗透泵控释片与进口控释片的人体药代动力学与生物利用度。方法:利用高效液相色谱荧光检测法,采用交叉实验设计对本品和进口硫酸沙丁胺醇控释片进行人体生物利用度对照研究。结果:硫酸沙丁胺醇控释片与进口硫酸沙丁胺醇控释片的血药浓度曲线下面积AUC 分别为(63.67 ±10.37)ng·h·mL^-1和(60.21 ±11.95) ng·h·mL^-1,最大血药浓度C_max 分别为(8.60 ±1.93) ng·mL^-1 和(8.20 ±1.40)ng·mL^-1,达峰时间T_max 分别为(6.3 ±1.0) h 和(6.8 ±1.3) h,多剂量给药达稳态时血药浓度波动系数FD 分别为1.09 ±0.23 和1.14±0.25。结论:经方差分析和双单侧检验,两种制剂生物等效。     

埃克替尼联合TP化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及对miR-204-5p、miR-1269表达的影响

目的 从miR-204-5p、miR-1269表达变化方面观察埃克替尼联合TP化疗治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的临床有效性和安全性。方法 前瞻性选取2019年2月—2020年12月河北北方学院附属第一医院胸外科NSCLC患者82例,计算机随机数字生成法分为对照组（n＝41）、试验组（n＝41）。对照组给予TP化疗,紫杉醇剂量175 mg·m^-2,第1天静脉滴注;卡铂剂量300 mg·m^-2,第2天静脉滴注。4周为1个周期,治疗4个周期。试验组在对照组TP方案治疗基础上加用埃克替尼,TP化疗方案及操作同对照组,同时口服埃克替尼,每次125 mg,每天3次,当患者出现3级及以上不良反应时,可暂停（1～2周）服用,待症状缓解或消失再次恢复每次125 mg,每天3次。4周为1个周期,治疗4个周期后进行效果评价。比较两组临床疗效、不良反应发生情况,分别于治疗前、治疗2个周期、治疗4个周期检测两组患者肺功能［第1秒呼气容积（FEV₁）、最大呼气容积（FVC）］、肿瘤标志物［糖类抗原125（CAl25）、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）］、miR-204-5p、miR-1269水平。结果 治疗4个周期后,试验组客观缓解率（ORR）为43.90%,疾病控制率（DCR）为82.93%,分别高于对照组的24.39%、63.41%（P<0.05）;治疗前两组患者FEV₁、FVC比较,差异无统计学意义（P>0.05）;治疗2个周期、4个周期后两组FEV₁、FVC均较治疗前升高,且同时间点试验组高于对照组（P<0.05）。治疗前两组患者CA125、CEA、CYFRA21-1比较,差异无统计学意义（P>0.05）;治疗2个周期、4个周期后两组CA125、CEA、CYFRA21-1较治疗前降低,且同时间点试验组低于对照组（P<0.05）;治疗前两组患者miR-204-5p、miR-1269表达水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;治疗2个周期、4个周期后两组miR-204-5p较治疗前升高,miR-1269较治疗前降低,且同时间点试验组miR-204-5p高于对照组,miR-1269低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 埃克替尼联合TP化疗治疗晚期NSCLC效果显著,可有效改善患者肺功能,降低肿瘤标志物水平,调节miR-204-5p、miR-1269表达,且安全性高。     

青天葵甲醇提取物通过ERK信号通路诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，2，3 mg·mL^-1）的NFME处理CNE-2细胞24，48 h对CNE-2细胞生长抑制率的影响；克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响；Western blotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞的增殖（P<0.05），抑制率为12.64%。而在给药48 h时0.25 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞增殖（P<0.05），抑制率为22.43%；克隆原形成能力试验表明，0.25 mg·mL^-1的NFME能够抑制CNE-2细胞集落的形成（P<0.05）；Hoechst33258凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到CNE-2细胞发生凋亡（P<0.05），凋亡率达到17.91%；Western blotting结果表明0.5 mg·mL^-1的NFME能使CNE-2细胞中caspase-3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.01），同时0.5 mg·mL^-1的NFME能够降低CNE-2细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 青天葵甲醇提取物能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。     

多剂量口服马来酸曲美布汀缓释片的药动学及生物等效性研究

目的 研究多剂量口服马来酸曲美布汀缓释片在中国健康人体内的药动学特征和生物等效性。方法 26名健康男性志愿者随机交叉多剂量早晚口服马来酸曲美布汀缓释片受试制剂或参比制剂300 mg,每日2次,连续6 d。采用HPLC-MS/MS测定血浆中曲美布汀和N-去甲基曲美布汀浓度,用DAS2.1药动学程序计算药动学参数,并进行生物等效性评价。结果 多剂量口服马来酸曲美布汀受试和参比制剂后,血浆曲美布汀C_max分别为(35.668±22.196),(33.022±16.077)ng·mL^-1,t_max分别为(3.154±1.875),(0.365±9.946)h,t_1/2分别为(20.793±13.305),(16.989±4.707)h,AUC_ss分别为(252.075±150.358),(224.106±95.405)ng·h·mL^-1;血浆N-去甲基曲美布汀C_max分别为(1 571.809±823.169),(1 623.535±536.813)ng·mL^-1,t_max分别为(-0.250±11.259),(2.481±1.237)h,t_1/2分别为(9.796±2.450),(9.220±2.009)h,AUC_ss分别为(11 254.863±5 746.620),(10 911.059±4 111.751)ng·h·mL^-1。受试制剂和参比制剂主要药动学参数均无显著性差异。结论 马来酸曲美布汀受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

纳米山药多糖对4种肿瘤细胞的作用

目的 研究纳米山药多糖的抗肿瘤活性,并对其作用机制进行探究。方法 细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8试剂盒)测定各给药组对肿瘤细胞抑制率的影响;Western blotting检测不同给药组给药48 h后对4种肿瘤细胞凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8表达情况的影响;细胞划痕实验检测各给药组对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果 CCK-8实验表明,与对照组相比,纳米山药多糖高剂量组(80 ng·mL^-1)、氟尿嘧啶组(80 ng·mL^-1)能够明显抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05);Western blotting实验显示纳米山药多糖高剂量组(80 ng·mL^-1)与氟尿嘧啶组(80 ng·mL^-1)肿瘤细胞凋亡蛋白caspase-3、caspase-8条带灰度降低,蛋白含量表达与对照组比较明显减少(P<0.05);细胞划痕实验表明纳米山药多糖作用于4种肿瘤细胞48 h后,细胞愈合率均有不同程度的下降(P<0.05)。结论 纳米山药多糖剂量的升高,促进肿瘤细胞凋亡蛋白caspase-3和caspase-8蛋白酶原的活化,酶原降解增多,抑制肿瘤细胞生长,促进肿瘤细胞凋亡,降低细胞划痕愈合率,具有抗肿瘤活性。     

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱的浓度及其药代动力学

建立同时测定大鼠灌胃给予三物黄芩汤后血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱含量的HPLC-MS分析方法，并计算了3种生物碱在大鼠体内的药代动力学参数。血浆样品经氯仿液-液萃取后，以乙腈-0.1%甲酸水溶液(10∶90)为流动相，用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm， 5 μm)分离， 采用电喷雾离子化源(ESI)单重四极杆串联质谱， 以选择离子检测(SIM)方式进行检测。苦参碱、 氧化苦参碱和氧化槐果碱分别在10～5 000 ng·mL^-1、 2～1 000 ng·mL^-1和2～1 000 ng·mL^-1呈良好线性关系，提取回收率分别为89.1%～93.5%、83.9%～91.3 %、85.4%～88.0%。日内及日间精密度均<15%。该法快速，灵敏，专属，适用于同时测定生物样本中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱的血药浓度。