天然DNA和细胞因子对SLE患者淋巴细胞体外分泌抗双链DNA抗体的影响

我们检测了6例活动期、6例缓解期SLE患者和10例正常人血清和外周血单个核细胞(PBMC)自发及经天然DNA(nDNA)、rIL—2、rIL—6和rIFN—γ诱导后分泌IgG类抗双链DNA(dsDNA)特异性抗体水平,观察到活动期患者血清和自发分泌量显著高于缓解期,后者又显著高于正常人,且体外细胞分泌平与血清中的含量密切相关(r=0.9882)。nDNA能特异地激发SLE患者的FBMC分泌抗dsDNA抗体,但对正常人无作用。rIL—2和rIFN—γ皆能增强SLE患者PBMC产生抗dsDNA抗体,表明即使缓解期病人,血中仍有表达IL—2受体的激活的B细胞存在。nDNA和rIL—2联合应用时,对活动期患者PBMC分泌抗dsDNA抗体有协同作用。本文未见外源性rIL—6对抗dsDNA抗体分泌的影响。     

可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮病人外周血T细胞亚群的表达及与临床的关系

目的　检测可诱导共刺激分子(inducibleco stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础。方法　采用流式细胞术检测第二军医大学附属长海医院住院和门诊SLE患者 (n=51)以及健康体检者 (n=30)外周血T细胞亚群表面ICOS及其他免疫分子CD45RO、CD45RA、HLA DR的表达水平,观察ICOS在不同细胞亚群表达水平与SLE活动程度、病程、血清抗dsDNA抗体和血清免疫球蛋白含量间的关系。结果　与正常人相比,活动期及稳定期SLE患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表达ICOS的水平显著升高,但活动期患者与稳定期患者之间无统计学差异(P≥0 05);同一SLE患者在疾病活动期,外周血CD4+、CD8+、CD45RO+、CD4+CD45RO+和CD8+CD45RO+细胞表面ICOS的表达水平明显高于该患者经过治疗疾病缓解阶段(P<0 05);初发SLE患者CD45RO+细胞表达ICOS水平明显高于复发患者 (P<0 05);血清抗dsDNA抗体( +)及免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA中任何一种 )异常升高的患者外周血CD45RO+及CD4+CD45RO+细胞表达ICOS的水平分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( -)和免疫球蛋白含量正常的患者(P<0 05)。结论　SLE患者外周血某些T     

系统性红斑狼疮患者高表达的CD154促进自身抗体分泌

 目的】探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）CD154表达水平、及CD40/CD154对SLE患者分泌自身抗体的影响和地塞米松（Dex）对此的作用。【方法】选择SLE活动期患者（10例）和正常对照者（11例）,分离PBMC,检测其CD154的表达水平;培养PBMC,应用CD40 mAb和Dex进行干预,使用ELISA法检测培养液上清抗dsDNA水平。【结果】①活动期组PBMC CD154表达水平明显高于对照组6.4%±2.1%vs 1.5%±1.2%,（P〈0.05）;②活动期组培养液上清抗dsDNA抗体水平明显高于对照组[（11.8±6.8）U/mL vs（5.6±2.3）U/mL（RPMI 1640）,（11.4±7.0）U/mL vs（6.3±2.1）U/mL（IgG）,P均〈0.05];③CD40 mAb使两组培养液上清抗dsDNA抗体水平明显增高[活动期组：（18.6±7.7）U/mL vs（11.8±6.9）U/mL,对照组：（8.3±4.4）U/mL sv（5.6±2.3）U/mL,P均〈0.05]。④在活动期组,Dex明显抑制CD40 mAb引起的PBMC培养液上清抗dsDNA抗体水平的增高[（8.8±5.2）U/mL vs（18.6±7.7）U/mL,P〈0.05],使其低于非特异性处理时水平[（8.8±5.2）U/mL vs（11.8±6.8）U/mL,P〈0.05];Dex不影响对照组。【结论】活动期SLE患者PBMC表达的CD154水平升高,此能够促进抗dsDNA抗体的分泌,而Dex能够抑制其作用。     

系统性红斑狼疮外周血淋巴细胞上bcl-2抗原的表达及与疾病活动的相关性

目的　研究系统性红斑狼疮 (SLE)外周血淋巴细胞上bcl-2抗原的表达及与疾病活动的相关性。方法　通过流式细胞仪 ,采用微量全血直接双标记免疫荧光染色方法 ,对 60例活动期SLE、3 0例类风湿性关节炎 (RA)及 3 0例正常人外周血CD3 + ,CD4+ ,CD8+ 淋巴细胞亚群上bcl-2抗原进行检测。结果　活动期SLE患者外周血CD3 + ,CD4+ ,CD8+ 淋巴细胞亚群上bcl-2抗原的表达较RA组和正常人降低 (P <0 0 0 1) ,bcl-2抗原的表达与SLE的活动性呈负相关 (r =-0 73 2 ,P <0 0 0 1) ;SLE患者中有 3 6例抗dsDNA抗体阳性 ,抗dsDNA抗体 ( +)患者组T淋巴细胞上bcl -2抗原的表达较抗dsDNA抗体 ( -)组更低 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　SLE患者T淋巴细胞表面bcl -2抗原表达降低 ,导致淋巴细胞凋亡异常 ,刺激机体产生抗dsDNA等多种自身抗体 ,是SLE免疫功能紊乱的原因之一。     

合并丙型肝炎病毒感染的系统性红斑狼疮患者临床与免疫学特征

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者丙型肝炎病毒(HCV)感染的发生率及其临床意义。方法用ELISA-3、RIBA-3及PCR检测134例SLE患者和200名正常献血者的HCV感染情况,并分析临床与免疫学其特征。结果15名SLE患者(13 %)和2名正常对照(1%)HCV抗体阳性(P<0.001)。与未合并HCV感染的SLE患者相比,合并HCV感染的SLE患者皮肤表现、dsDNA抗体阳性发生率低(P=0.01,P<0.001),肝脏损害、低补体血症、冷球蛋白血症发生率高(P<0.001,P<0.05,P=0.03)。结论SLE患者合并HCV感染的发生率显著高于正常人群,HCV抗体阳性SLE患者显示出特异的临床和免疫学表现。     

B细胞刺激因子在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞上的表达及意义

目的 探讨B细胞刺激因子(Blys)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞上的表达情况及临床意义.方法 应用流式细胞仪技术,检测50例SLE患者(其中活动期和稳定期各25例)外周血单个核细胞上Blys的表达,与25例健康献血人员作比较.并分析SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达与病情活动、其他实验指标及自身抗体的关系.结果 SLE患者外周血单个核细胞上表达Blys的百分率上调(P＜0.001),活动期和稳定期SLE患者Blys的表达率均高于健康对照组(P＜0.001和P＜0.05);其中,活动期和稳定期SLE患者比较,活动期患者Blys的表达更高(P＜0.05).SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.702,P＜0.001),与免疫球蛋白IgG、IgM呈正相关(r=0.695,P＜0.001和r=0.356,P＜0.01),与补体C3、C4呈负相关(r=-0.42,P＜0.001和r=-0.31,P＜0.05).dsDNA抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达较dsDNA抗体(-)组高(P＜0.05).Clq抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达也较C1q抗体(-)组高(P＜0.05).结论 Blys在SLE外周血单个核细胞上的表达率升高.Blys的表达在一定程度上反映了病情的活动,并与自身抗体的产生相关.     

马疫锥虫间接免疫荧光试验测定抗双链DNA抗体和抗核抗体

用马疫锥虫间接免疫荧光试验测305例血清抗双链DNA(dsDNA)抗体和抗核抗体(ANA),其中包括50例系统性红斑性狼疮(SLE),43例其它结缔组织病(CTD),76例银屑病,82例其它疾病和52例正常人对照。结果表明全部23例活动期SLE患者显示抗dsDNA和ANA阳性反应,27例非活动期SLE患者抗dsDNA仅1例阳性而ANA24例(88.9％)阳性。其它各组除1例播散性盘状狼疮和1例肺癌外,抗dsDNA均为阴性反应。     

系统性红斑狼疮患者高表达的CD154促进自身抗体分泌

【目的】探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）CD154表达水平、及CD40/CD154对SLE患者分泌自身抗体的影响和地塞米松（Dex）对此的作用。【方法】选择SLE活动期患者（10例）和正常对照者（11例）,分离PBMC,检测其CD154的表达水平;培养PBMC,应用CD40 mAb和Dex进行干预,使用ELISA法检测培养液上清抗dsDNA水平。【结果】①活动期组PBMC CD154表达水平明显高于对照组6.4%±2.1%vs 1.5%±1.2%,（P〈0.05）;②活动期组培养液上清抗dsDNA抗体水平明显高于对照组[（11.8±6.8）U/mL vs（5.6±2.3）U/mL（RPMI 1640）,（11.4±7.0）U/mL vs（6.3±2.1）U/mL（IgG）,P均〈0.05];③CD40 mAb使两组培养液上清抗dsDNA抗体水平明显增高[活动期组：（18.6±7.7）U/mL vs（11.8±6.9）U/mL,对照组：（8.3±4.4）U/mL sv（5.6±2.3）U/mL,P均〈0.05]。④在活动期组,Dex明显抑制CD40 mAb引起的PBMC培养液上清抗dsDNA抗体水平的增高[（8.8±5.2）U/mL vs（18.6±7.7）U/mL,P〈0.05],使其低于非特异性处理时水平[（8.8±5.2）U/mL vs（11.8±6.8）U/mL,P〈0.05];Dex不影响对照组。【结论】活动期SLE患者PBMC表达的CD154水平升高,此能够促进抗dsDNA抗体的分泌,而Dex能够抑制其作用。     

检测血清抗核小体抗体水平在SLE诊断及转归中的研究

目的:研究血清抗核小体抗体(AnuA)水平监测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定62例SLE,52例亚急性皮肤型红斑狼疮(SCLE),10例皮肌炎和30例健康人血清AnuA水平,采用SLE疾病活动指数0.05)。AnuA水平与SLEDAI有明显相关性(P=0.015,r=0.441),SLE患者治疗后血清AnuA水平与治疗前相比明显降低(P<0.05)。结论:AnuA水平高低对诊断SLE、监测病情活动和判断疗效有意义。     

系统性红斑狼疮患者血浆血小板膜颗粒蛋白的变化及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆血小板膜颗粒蛋白(GMP-140)的变化及其意义。方法:用ELISA法检测39例SLE患者和15名正常人血浆血小板GMP-140的含量,同时用全自动血细胞分析仪检测血常规及用魏氏法测定血沉(ESR)。结果:1.活动期SLE患者(n=27)患者血浆血小板GMP-140含量[(49.81±5.85)μg/L]明显高于缓解期SLE患者[(21.92±3.67)μg/L],(n=12)和正常对照组[(15.74±2.33)μg/L](n=15),P均<0.01。而缓解期SLE患者血浆血小板GMP-140的含量也高于正常对照组(P<0.05)。27例活动期患者中有20例进行了治疗前后的对比观察,治疗后SLE患者血浆血小板GMP-140较治疗前明显下降,但仍高于正常(P<0.05)。2.活动期SLE患者血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(Bpc)均明显低于缓解期患者(P<0.01),而血沉(ESR)高于缓解期患者(P<0.01)。3.血浆血小板GMP-140的变化与ESR呈直线正相关(r=0.67,P<0.01),与血常规参数均无相关性。结论:SLE患者体内存在有血小板活化,SLE患者在活动期血浆血小扳GMP-140升高,治疗后明显下降,且与FSR呈直线正相关,说明GMP-140的变化与疾病活动性有关,可作为SLE疾病活动的指标之一;同时对部分临床表现的解释有一定的临床意义。     

Toll-like receptor 9 is correlated to disease activity in Chinese systemic lupus erythematosus population

Background  Toll like receptor (TLR) 9 has been shown to play a crucial role in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus (SLE) in animal models. Its pathogenic role in human SLE, however, was poorly elucidated. This study was performed to investigate the role of TLR9 involved in the aberrant signaling pathway and its correlation with disease activity in SLE.

Methods  mRNA level of TLR9 and interferon (IFN) regulatory factor 5 (IRF5) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were determined by real-time polymerase chain reaction (PCR). IFN-a expression was measured in the serum of the SLE patients by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

Results  TLR9 expression was significantly higher in SLE patients than that in health controls (P=0.011). SLE patients with positive anti-dsDNA antibody had significantly higher expression of TLR9 than that with negative anti-dsDNA antibody (P=0.001). TLR9 expression was positively correlated with fever (P=0.017), alopecia (P=0.046), safety of estrogens in lupus erythematosus national assessment SLE disease activity index (SELENA-SLEDAI) score (r_s=0.385, P=0.003), and the level of IRF5 (r_s=0.35, P=0.027) and IFN-a (r_s=0.627, P=0.001) in SLE patients.

Conclusion  TLR9 is associated with SLE disease activity and might be involved in the IFN-a pathway of SLE.

     

ZBTB20在SLE患者外周血B细胞中的表达和临床意义

目的 研究锌指和BTB结构域蛋白20 (ZBTB20)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞中的表达,并探讨ZBTB20在SLE中的临床意义.方法 采用RT-PCR技术检测36例SLE患者(SLE组)和30例健康对照者(对照组)外周血CD19+B细胞中ZBTB20 mRNA的表达水平;Western blot检测分析外周血ZBTB20蛋白水平;流式细胞术检测B细胞亚群所占比例.分析SLE患者B细胞中ZBTB20 mRNA的表达与B细胞亚群比例变化的关系及与临床指标(抗ds-DNA抗体、抗核抗体、免疫球蛋白IgG、抗ENA抗体)的相关性.结果 SLE组外周血CD19+B细胞中ZBTB20 mRNA的表达明显高于对照组(P＜0.05);SLE组患者外周血ZBTB20蛋白水平高于对照组(P＜0.05).与对照组相比,SLE患者外周血B细胞亚群,CD19+B细胞比例降低(P＜0.05),CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞之间的比值及CD19-CD138+浆细胞比例明显增高(P＜0.05);SLE患者B细胞中ZBTB20 mRNA的表达水平与CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞的比值呈正相关(P＜0.05);ZBTB20 mRNA与抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白IgG、抗核抗体、抗ENA抗体均呈正相关(P＜0.05).结论 ZBTB20可能通过促进B细胞分化从而参与SLE发病.     

高亲合力抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的探讨高亲合力抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）在系统性红斑狼疮（SLE）病人中的分布情况以及与性别、年龄、狼疮肾炎等指标之间的关系。方法收集2017年8月至2018年4月广东省中医院抗dsDNA抗体阳性的血清标本共155例,其中SLE组116例,非SLE组39例,分别使用酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光法（IIF）同时测定血清样本的总抗dsDNA抗体和高亲合力抗dsDNA抗体水平;采用Kappa分析探讨不同检测方法间结果的一致性;Spearman相关系数分析高亲合力dsDNA抗体与性别、年龄等临床指标的相关性。结果在非SLE组中IIF法总抗dsDNA抗体（dsDNA-IIF）阴性,ELISA法总抗dsDNA抗体（dsDNA-ELISA）阳性的例数为15例,说明dsDNA-ELISA检测结果对SLE的特异性不高。dsDNA-IIF与dsDNA-ELISA的总体符合率为58.7%（91/155）,Kappa=0.172 < 0.4,两种方法的一致性较低（P < 0.01）;而dsDNA-IIF与高亲合力抗dsDNA抗体的总体符合率为61.9%（96/155）,Kappa=0.514,0.4 < Kappa < 7.5,两种方法的一致性一般（P < 0.01）。高亲合力抗dsDNA水平与dsDNA-IIF和dsDNA-ELISA水平呈正相关（P < 0.01）,与性别、年龄、是否是狼疮肾炎无相关性（P>0.05）;dsDNA-IIF和高亲合力抗dsDNA抗体联合诊断敏感率为90.5%（105/116）,特异性为100%（39/39）。结论dsDNA-IIF和高亲合力抗dsDNA抗体水平的联合检测更有助于对SLE的诊断。高亲合力抗dsDNA抗体与年龄、性别和是否为狼疮性肾炎无相关性。     

单核细胞趋化蛋白-1表达与狼疮肾炎

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在狼疮肾损伤中的作用.方法应用ELISA方法测定112例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例类风湿性关节炎患者、11例非SLE肾损伤患者及40例正常健康者血清MCP-1水平;应用RT-PCR方法,测定以上各组外周血单个核细胞(PBMCs)MCP-1 mRNA表达.结果狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,尤其是狼疮肾炎活动组患者PBMCs MCP-1 mRNA表达增加最为显著(P＜0.001),PBMCs MCP-1 mRNA表达不仅与总狼疮疾病活动指数评分呈正相关(r=0.6245,P＜0.001),而且与狼疮疾病活动指数肾评分呈正相关(r=0.6808,P＜0.001),而在类风湿性关节炎组和非狼疮肾脏疾病组仅低水平表达,与正常对照组水平相近似(P＞0.05).狼疮活动组血清MCP-1水平较非活动组及正常对照组均明显升高(P＜0.001),但活动性狼疮肾炎组与无肾损伤组之间血清MCP-1水平的差异无显著性(P＞0.05).结论狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,并与狼疮肾炎的疾病活动情况密切相关.     

系统性红斑狼疮患者外周血γδT细胞变化的临床意义

【目的】探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者外周血中16T细胞的变化及临床意义。【方法】选取46例SLE患者（实验组）、18名健康人（对照组）,采用流式细胞分析仪分析技术检测其外周血中CD3^＋、γδT细胞绝对数及百分率。【结果】与健康组相比,SLE患者18T细胞绝对计数明显低于健康对照组（P〈0．01）,且其γδT细胞凋亡率显著高于健康对照组细胞凋亡率（P〈0．05）。活动期SLE患者叮6T细胞绝对数明显低于非活动期（P〈0．05）,且与红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）及SLE疾病活动指数（SLE disease activity index,SLEDAI）评分均呈负相关（r=-0．282,r=-0．378,P=0．028,P=0．037）,但与血红蛋白浓度呈正相关（r=0．287,P=0．006）。【结论】SLE患者外周血中γδT细胞数量下降,且与病情活动相关;γδT细胞数量下降的机制可能与凋亡增加有关。     

61例SLE病人血清抗双链DNA抗体水平及意义

本文报道了61例 SLE 患者血清抗双链 DNA 抗体的检测结果。活动期41例100%阳性,缓解期20例10%阳性,76例非 SLE 的其他结缔组织病及非结缔组织病1.32%阳性。正常对照40份均为阴性。提示抗双链 DNA 的检测有助于 SLE 的诊断和病情监测。     

红细胞补体受体1水平与系统性红斑狼疮患者血细胞计数的相关性研究

目的探讨红细胞补体受体1(E-CR1)水平与系统性红斑狼疮(SLE)血细胞计数之间的相关性及其在SLE发病中的作用。方法采用流式细胞仪检测技术测定72例SLE患者和20例正常对照者血E-CR1水平,同时测定SLE患者血细胞计数——白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞比容(HCT)、平均红细胞容积(MCV)及血小板(PLT)。结果SLE患者E-CR1水平明显低于对照组(P<0.01)。SLE患者中E-CR1水平与HGB有非常明显的正相关性(P<0.01),与HCT有明显正相关性(P<0.05);在活动期SLE患者中,E-CR1水平与RBC、HGB、HCT均明显正相关(P<0.01);在非活动期SLE患者中,E-CR1水平与HGB及HCT有明显的负相关性(P<0.05)。结论E-CR1水平降低可能是引起SLE发病,造成HGB及HCT减少,病情加重的原因之一,亦可能是SLE病理免疫损伤的结果。