JNK信号通路参与Aβ毒性对大鼠海马神经元的损伤

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)毒性对大鼠海马神经元的损伤以及JNK信号转导通路在此过程中的作用。方法应用Aβ1-40注射大鼠双侧海马CA1区建立毒性损伤模型,通过HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫组化法、透射电镜并结合图像分析技术研究海马的病理学变化以及神经元的存活与凋亡、超微结构及p-JNK阳性细胞率。结果与对照组比较,大鼠注射Aβ后,海马CA1区锥体细胞排列松散,数目减少,神经元固缩、浓染,胶质细胞明显增生,超微结构可见明显凋亡特征,TUNEL阳性细胞数明显增多(P<0.01),p-JNK阳性细胞比例明显升高(P<0.01)。结论 Aβ可明显诱导海马神经元凋亡,JNK信号转导通路参与了Aβ的神经毒性损伤作用。     

雷洛昔芬可减弱β-淀粉样蛋白对原代海马神经元的毒性作用

目的研究雌激素受体调节剂雷洛昔芬对原代海马神经元的保护作用。方法将原代培养的海马神经元分为五组:对照(A)组;β-淀粉样蛋白(Aβ)(B)组;Aβ+17β雌二醇(C)组;Aβ+苯甲酸雌二醇(D)组;Aβ+雷洛昔芬(E)组。用MTT方法观测各组海马神经元活力;通过AnnexinV-FITC双染流式细胞术检测各组海马神经元的凋亡。结果 B组海马神经元活力(72.5±10.7)%,显著低于A组的100%(P<0.01);B组凋亡率(31.5±1.9)%,明显高于与A组的(9.0±0.6)%(P<0.01)。C、D、E组海马神经元活力均高于与B组(P<0.05或P<0.01),而凋亡率均降低(P<0.05),但C、D、E三组之间差异无统计学意义。结论雷洛昔芬可减弱Aβ对原代海马神经元的毒性作用;雷洛昔芬对原代海马神经元的保护作用与雌激素相似。     

艾司西酞普兰对Aβ25-35诱导的大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的研究艾司西酞普兰(escitalopram,ESC)对β-淀粉样肽片段(β-amyloid peptide,Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病海马神经元细胞损伤的保护作用,并探讨其可能机制。方法以Aβ25-35诱导大鼠海马神经元细胞建立阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)模型,随机分为空白对照组、Aβ组、不同ESC组(0.5、1.0、1.5μmol·L-1)、Aβ+不同ESC(0.5、1.0、1.5μmol·L-1)组。通过荧光显微镜观察腺病毒(adenoviruses-enhanced green fluorescent protein,Ad-EGFP)转染的神经元细胞形态,MTS法检测细胞活性,Western blot检测脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达。结果与空白组比较,Aβ组及Aβ+不同浓度艾司西酞普兰组神经元细胞分支及长度均减少,细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.05),BDNF释放减少;与Aβ组比较,Aβ+不同ESC组神经元细胞分支数目及长度均增加,细胞活力上升,差异有统计学意义(P<0.05),BDNF释放增多。结论艾司西酞普兰能显著改善阿尔茨海默病模型神经元的存活率,发挥细胞保护作用,其机制可能是通过上调BDNF、减缓神经元退行性变以促进神经元的修复。     

糖皮质激素促进β-淀粉样蛋白对海马神经元损伤的研究

目的在体外实验条件下,观察糖皮质激素是否促进β-淀粉样蛋白的神经元毒性作用。方法通过LDH释放率法检测细胞活力、TUNEL法测细胞凋亡以及LSCM测胞内Ca2 浓度的变化。结果单独的地塞米松(10-8,10-7,10-6mol.L-1)组或Aβ25-35(0.5μmol.L-1)组分别作用海马神经元后,细胞活力变化不明显(P>0.05);但与同剂量的DEX、Aβ25-35组相比,DEX Aβ25-35组的细胞活力明显降低(P<0.05),同时胞内Ca2 显著上升(P<0.05),神经元的凋亡率增加明显,细胞内出现凋亡的典型形态学特征。结论糖皮质激素可能通过促进Aβ引起海马神经元胞内Ca2 升高增加神经元毒性作用。     

β-乳香酸对海马神经元细胞氧糖剥夺损伤的改善作用

目的:研究β-乳香酸对大鼠海马神经元细胞氧糖剥夺损伤的改善作用.方法:将大鼠海马神经元细胞分为正常对照组、模型组和β-乳香酸低、中、高浓度组(1、10、100μmol/L),除正常对照组外,其余各组细胞加入相应含药培养基,并进行氧糖剥夺培养以复制氧糖剥夺损伤模型.采用MTT法检测细胞的存活率,采用化学比色法检测细胞上清...     

开心散对Aβ25-35诱导损伤SH-N-K神经细胞的保护作用及机制

目的观察开心散对神经毒性物质β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导损伤的SK-N-SH细胞的保护作用。方法用Aβ25-35处理人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞),模拟阿尔茨海默病(AD)病人脑内神经元病理损伤,并以含开心散(KXS)药物血清拮抗其作用。以MTT法测定细胞存活率,酶反应法检测细胞内超氧化物歧化酶SOD水平变化,流式细胞技术检测细胞凋亡率。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测淀粉样肽蛋白前体(APP)基因、Aβ降解酶NEP基因的表达情况,Westernblots法检测APP蛋白表达。结果试验显示暴露Aβ25-35后培养SK-N-SH细胞存活率明显下降,凋亡细胞比例增加。而含开心散药物血清处理能显著提高Aβ25-35损伤细胞的存活率,减少细胞凋亡率,同时提高细胞内SOD的活力(P<0.01)。RT-PCR结果显示开心散可降低Aβ代谢相关的APP基因的表达并提高NEP基因的表达,APP蛋白表达显著减少。结论AD病理相关的Aβ25-35能造成神经元细胞损伤死亡,开心散对毒性Aβ25-35诱导的神经细胞损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与开心散能增加抗氧化酶SOD活力,同时下调内源性APP基因表达,上调NEP基因表达,减少内源Aβ产生,从而抑制细胞死亡有关。     

慢性应激对大鼠海马神经元睫状神经营养因子及其mRNA表达水平的影响

目的　观察慢性应激对大鼠海马神经元CNTF及其mRNA表达水平的变化。方法　采用慢性不可预见性中等强度应激 ,运用旷场实验观察大鼠行为 ;运用免疫组化和原位杂交的方法 ,观察大鼠海马神经元CNTF及其mRNA表达水平的变化。结果　与对照组相比 ,慢性应激组大鼠海马CNTF免疫阳性颗粒数目减少 ,着色浅淡 ;CNTFmRNA杂交阳性信号减少。结论　慢性应激可造成大鼠海马神经元CNTF及其mRNA表达水平降低     

知母皂苷元改善淀粉样β蛋白引起的体外培养乳大鼠海马神经元的损伤

目的 探讨知母皂苷元(Sar)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ_1-42)引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法 取出生24 h内SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d,先加入Sar 10, 30和100 μmol·L^-1作用1 h,然后加入Aβ_1-42 50 nmol·L^-1作用24 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色观察神经元树突的生长;应用Hoechst33258 核染色检测神经元凋亡;Western蛋白质印迹法检测海马神经元突触囊泡蛋白(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD95)和活性胱天蛋白酶 3表达。结果 加入Aβ_1-42作用24 h,可使培养海马神经元树突静脉曲张样改变和突起回缩,树突总长度和末梢分枝数明显减少。与正常对照组相比,SYP和 PSD95蛋白表达水平明显降低(P<0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与Aβ_1-42模型组相比,先分别加入Sar 30和 100 μmol·L^-1可明显对抗Aβ_1-42引起的这些改变,培养海马神经元树突总长度(μm)和末梢分枝数从277±76和6±2分别增加到359±144和8±3以及370±158和8±3,神经元SYP 和PSD95蛋白表达水平明显增加(P<0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3表达水平明显降低(P<0.01)。结论 Sar能够改善Aβ_1-42引起的海马神经元损伤。     

消渴脉康颗粒质量标准研 究简

目的 建立消渴脉康颗粒的质量控制方法.方法 采用薄层色谱（TLC）法对组方中牛膝、丹参、枸杞子、桑寄生、延胡索和黄芪进行定性鉴别,采用高效液相色谱（HPLC）法对芍药苷进行定量测定.结果 薄层色谱清晰,分离良好,阴性无干扰.芍药苷的平均回收率为96.95％,RSD为1.81％.结论 该方法简便易行、灵敏准确、专属性强,可用于消渴脉康颗粒的质量控制.     

胃癌患者的大肠癌同步发生率研 究简

目的 研究胃癌患者的大肠癌同步发生情况.方法 选取164例胃癌患者和328例年龄及性别匹配的非胃癌患者进行分析.结果 大肠癌的发病率在胃癌组为32.93％,显著高于对照组的16.46％ （P ＜0.01）.大肠癌胃癌患者的比值比（OR）为3.11;95％置信区间（CI）为1.70 ～ 5.62.特别是大肠癌发病率的差异更加突出,在50岁以上的患者OR为3.53; 95％ CI为1.78 ～6.97.结论 胃癌患者大肠癌的同步患病率高于非胃癌患者,故胃癌患者应视为大肠癌的高危险群,应进行筛选推荐和大肠镜检查.     

糖皮质激素促进β-淀粉样蛋白对海马神经元损伤的研究

目的在体外实验条件下,观察糖皮质激素是否促进β-淀粉样蛋白的神经元毒性作用。方法通过LDH释放率法检测细胞活力、TUNEL法测细胞凋亡以及LSCM测胞内Ca²⁺浓度的变化。结果单独的地塞米松(10^-8,10^-7,10^-6mol·L^-1)组或Aβ25-35(0.5μmol·L^-1)组分别作用海马神经元后,细胞活力变化不明显(P>0.05);但与同剂量的DEX、Aβ_25-35组相比,DEX+Aβ_25-35组的细胞活力明显降低(P<0.05),同时胞内Ca²⁺显著上升(P<0.05),神经元的凋亡率增加明显,细胞内出现凋亡的典型形态学特征。结论糖皮质激素可能通过促进Aβ引起海马神经元胞内Ca²⁺升高增加神经元毒性作用。     

万古霉素相关肾毒性的主动监测研 究简

目的：研究应用计算机辅助系统实现主动监测住院患者万古霉素肾毒性的可行性和关键要素.方法：基于住院患者药品不良事件主动监测与评估警示系统,通过团队论证的方式设定住院患者万古霉素肾毒性主动监测的事件配置器,回顾性调取2012 年10 月1 日－2013 年8 月27 日我院经静脉途径应用万古霉素的住院患者,对系统提示的阳性预警病例进行人工再评价.结果：实际共筛查病例619 例次,系统提示的阳性预警病例为9 例次,经人工再评价的实际阳性病例为4 例次,阳性预警率为0.65%.结论：住院患者药品不良事件主动监测与评估警示系统对万古霉素肾毒性的阳性预警率与文献报道结果相符,应用系统进行主动监测研究中事件配置器的参数设置为关键要素,应基于不同目标药物和药品不良事件特点进行个体化设置.     

伊柔抗皱美白精华素的安全性试验研 究简

目的 对伊柔抗皱美白精华素的安全性进行考察.方法 采用小鼠皮肤刺激性试验、毒性试验及大白兔眼刺激性试验.结果 伊柔抗皱美白精华素对小鼠完整、破损皮肤均无急性吸收毒性和刺激性,对大白兔眼睛无眼刺激.结论 伊柔抗皱美白精华素使用安全、可靠.     

抗脑衰胶囊对Aβ25-35诱导的神经元损伤作用的影响

目的探讨抗脑衰胶囊对Aβ25-35诱导的皮质神经元损伤作用的影响。方法采用Aβ25-35（10μmol/L）处理原代培养的大鼠皮质神经元损伤模型,加入抗脑衰胶囊含药血清共培养24h,倒置显微镜下观察神经元的形态变化,应用MTT法测定神经元存活率。结果与模型组相比,抗脑衰胶囊含药血清共培养组神经元的生存状态明显改善,神经元存活率明显提高。结论抗脑衰胶囊可显著对抗Aβ25-35对神经元的神经毒性作用,提高细胞存活率。     

灵芝多糖对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制研究简

目的 研究灵芝多糖对糖尿病(DM)模型大鼠肾脏保护作用及分子机制.方法 建立DM大鼠模型,分为对照组、模型组和药物治疗组,药物治疗组用灵芝多糖治疗8周.观察3组大鼠肾功能指标、氧化-抗氧化指标、原位末端标记(TUNEL) 法检测肾脏细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Bax 在肾脏的蛋白表达水平.结果 药物治疗组的肾功能指标好于模型组,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);药物治疗组肾皮质的丙二醛(MDA)低于模型组,高于对照组;超氧化物歧化酶(SOD)高于模型组,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);药物治疗组肾脏细胞凋亡率低于模型组,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);药物治疗组肾皮质的Bcl-2蛋白表达水平高于模型组,低于对照组,BAX和TGF-β1蛋白表达水平低于模型组,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 灵芝多糖可能通过改善DM大鼠氧化应激水平和抑制肾脏细胞凋亡保护DM大鼠的肾功能.     

H102对Aβ42致神经元毒性的保护作用

目的:观察H102在细胞水平上对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响,寻找最佳药物浓度及对Aβ42所致神经元毒性的保护作用。方法:将不同浓度的H102作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用噻唑蓝(MTT)法测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度;将人神经母细胞瘤株SY5Y细胞接种后分为对照组、Aβ42损伤模型组及Aβ42损伤加H102保护组,观察各组的MTT代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞形态。结果:H102在10～160μmol/L浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率(P<0.01),20μmol/L是增加细胞活性的最适浓度;与对照组相比,Aβ42损伤模型组MTT代谢率下降(P<0.05)、LDH漏出率增高(P<0.01),细胞突起损伤、死细胞增多,加入H102保护后可使上述指标恢复或接近正常。结论:H102具有神经保护作用,可减轻由Aβ42所致的神经元毒性。     

H102对Aβ342致神经元毒性的保护作用

目的：观察H102在细胞水平上对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响，寻找最佳药物浓度及对Aβ42所致神经元毒性的保护作用。方法：将不同浓度的H102作用于人神经母细胞瘤株SY5Y，利用噻唑蓝（MTT）法测定细胞的存活率，制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度；将人神经母细胞瘤株SY5Y细胞接种后分为对照组、Aβ42损伤模型组及Aβ42损伤加H102保护组，观察各组的MTT代谢率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞形态。结果：H102在10-160μmol／L浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率（P〈0．01），20μmol／L是增加细胞活性的最适浓度；与对照组相比，Aβ42损伤模型组MTT代谢率下降（P〈0．05）、LDH漏出率增高（P〈0．01），细胞突起损伤、死细胞增多，加入H102保护后可使上述指标恢复或接近正常。结论：H102具有神经保护作用，可减轻由Aβ42所致的神经元毒性。     

芹黄素对Aβ_(25-35)诱导损伤的海马神经元的保护作用

目的探讨中药提取单体芹黄素对体外原代培养条件下Aβ2535诱导的海马神经元损伤的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为5、10、20、40、80μmol·L-1的芹黄素预处理后,用10μmol·L-1的Aβ2535处理24h,MTT法比较神经元的存活情况、Hochesst荧光染色检测神经元的凋亡,并测定SOD活性及Bclxl蛋白表达的变化。结果芹黄素10、20、40μmol·L-1组可提高海马神经元存活率和引起Bclxl蛋白表达的增加,增加MnSOD活性、促进Cu与聚集型Aβ2535结合,而且10、20μmol·L-1芹黄素剂量组与雌二醇抗Aβ2535毒性损伤效果相同(P>0.05)。结论芹黄素对Aβ2535的毒性损伤的海马神经元具有保护作用,其保护作用可能与提高Bclxl蛋白表达、增加MnSOD活性、促进Cu与聚集型Aβ2535结合,使之转变成无毒性的可溶状态有关。     

孕酮及别孕烯醇酮对Aβ_(25-35)诱导的神经元损伤作用的影响

目的:研究孕酮及别孕烯醇酮对Aβ25-35诱导的神经元损伤作用的影响。方法:采用Aβ25-35(1μmol.L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元建立损伤模型,另分别加入不同浓度孕酮及别孕烯醇酮与Aβ25-35共孵育24h,观察神经元的形态学变化并测定存活率(MTT法)。结果:与模型组比较,孕酮共孵育组神经元生存状况明显改善,神经元存活率浓度依赖性地升高(r=0.757,P<0.01),高剂量组的存活率为(100.7±7.9)%,与对照组比较无统计学差异(P>0.05);别孕烯醇酮共孵育组神经元生存状况与模型组比较无明显改善,神经元存活率呈浓度依赖性降低(r=-0.841,P<0.01)。结论:神经甾体孕酮能浓度依赖性地抑制Aβ25-35诱导的神经毒性作用,提高细胞存活率;孕酮的代谢物别孕烯醇酮不能对抗Aβ25-35引起的神经元损伤,并浓度依赖性地加重上述损伤任用。     

吉西他滨相关性贫血的主动监测研 究简

目的：利用住院患者药品不良事件主动监测与评估警示系统分析吉西他滨致贫血的发生规律.方法：回顾性调取我院2013 年1－3 月期间的住院患者病例,设置吉西他滨相关性贫血主动监测的事件配置器参数,分析系统的阳性报警率以及不良反应发生率,并对吉西他滨致贫血的相关因素进行分析.结果：系统阳性报警率为94.74%,吉西他滨相关性贫血的发生率为25.53%;本研究未发现性别、年龄对吉西他滨致贫血的影响差异.结论：住院患者药品不良事件主动监测与评估警示系统可以实现化疗相关性贫血的主动监测,且系统报警准确率高,可以达到早期预防的目的,同时可降低临床用药风险,具有良好的应用前景.