温度对荧光检测5-羟色胺及5-羟吲哚乙酸的影响

荧光分光法检测生物标本内5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)具有效率高、灵敏度比较满意的优点。用邻苯二甲醛(OPT)法,检测荧光温度一般采用100℃,亦有采用低于100℃的。经研究,荧光检测5-HT与5-HIAA的灵敏度,在60—80℃为好,尤以80℃为最佳反应温度。在100℃时,5-HIAA的检测灵敏度已下降到0℃水平。实验如下: 各试管按下列各项依次加试液(单位为ml),然后在不同温度下反应。     

损毁大鼠内侧前脑束对针刺镇痛和脑内5—羟色胺和5—羟吲哚乙酸含量的影响

中缝核5-羟色胺能系统在针剌镇痛过程中发挥积极的作用已有若干报导,但是脑干中缝核群神经元的轴突在中枢神经系统内的分布较广泛,其上行纤维到达端脑和间脑,下行纤维进入脊髓,在脑干内部还和网状结构中的一些核团如兰斑核,巨细胞核     

针刺镇痛与脑脊髓内5—羟色胺和5—羟吲哚乙酸含量的变化

近年来在针麻原理的研究中,对于中枢神经系统内某些结构及其介质参与针剌镇痛已作了不少工作,积累了许多资料,其中以脑干中缝核系统及其末梢释放的介质5-羟色胺(5-HT)在针剌镇痛过程中发挥积极作     

高效液相荧光检测法同时测定人体内5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸

目的建立高效液相荧光检测法(HPLC-FLD)来同时测定人体血浆、血小板、脑脊液中5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸的含量。方法样本经预处理后用高效液相色谱仪进行测定。色谱柱为KromasilC18(250mm×4.6mm,7μm),流动相:甲醇和0.1mol/L磷酸二氢钾(15:85),流速1.5ml/min,Ex=254.nm,EM=338nm,柱温为35℃。结果5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸得到良好分离,线性范围5-羟色胺为1.1328～1160ng/ml,5-羟吲哚乙酸为0.9765～2000ng/ml,日内RSD分别为0.743%和1.470%,日间RSD分别为1.310%和2.043%;5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸的平均回收率:血浆中分别为98.32%、98.50%,血小板中分别为91.41%、88.05%,脑脊液中分别为92.84%、93.51%。结论该法具有取样量少、简单、快速、准确、灵敏等特点,可作为临床检测的常规方法。     

清醒大鼠下丘脑后部5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸的释放及药物对其释放的影响

应用推-挽灌流法和高效液相电-化学检测技术，研究清醒大鼠下丘脑后部5-羟色胺（5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的释放及药物对其释放的影响。结果表明：5-HT的基础释放量为4～15fmol／min，而5-HIAA为50～150fmol／min，高K~+（80、100mmol/L）可依剂量性增加5-HT的释放，对5-HIAA无明显影响，藜芦定（Veratridin，lμmol／L）也有类似的作用,而河豚毒素（Tetrodotoxin，5μmol／L）使其释放减少。     

高效液相色谱-电化学检测法同时测定血浆中5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸

Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆｓｅｒｏｔｏｎｉｎａｎｄ５－ｈｙｄｒｏｘｙ－ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃＡｃｉｄｉｎｐｌａｓｍａｕｓｉｎｇｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｍｅｔｈｏｄａｎｄｅｌｅｃ...     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定抑郁大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法,同时检测抑郁模型大鼠脑脊液中5-羟色胺及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的水平,并观察氟西汀治疗后抑郁模型大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-HIAA的含量变化。方法 将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组和氟西汀治疗组,每组8只。造模第35天,待行为学测试后取大鼠脑脊液,用蛋白沉淀法进行前处理,然后采用UPLC-MS/MS测定5-羟色胺和5-HIAA的含量。色谱柱为ACE C₁₈-PFP柱（4.6 mm×150 mm,3 μm）,流动相为乙腈-0.2%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温为25℃,质谱检测采用动态多反应监测（DMRM）模式。结果 大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-HIAA分别在0.10~100.00 ng/mL和1.00~1 000.00 ng/mL浓度范围内线性关系良好（r>0.999）,日内和日间精密度均<15.00%,提取回收率为86.86%~98.49%,基质效应为89.80%~95.25%,样品稳定性良好。与对照组比较,模型组大鼠脑脊液中5-羟色胺的含量降低（P<0.01）,5-HIAA含量上升（P<0.01）;与模型组比较,氟西汀组大鼠脑脊液中5-羟色胺含量上升（P<0.01）,5-HIAA含量降低（P<0.01）。结论 本实验所建立的方法操作简便,结果准确,灵敏度高,重现性好,适用于检测抑郁大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸水平。     

乙酰胆碱对脑内5-羟色胺代谢的影响

本文观察了乙酰胆碱(ACh)对大鼠脑内5-羟色胺(5-HT)代谢的影响。发现:胆碱酯酶抑制剂毒扁豆碱和ACh合成阻断剂密胆碱(HC_(-3))不仅可分别升高或降低脑内ACh的水平,而且可分别升高或降低脑内5-HT及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的水平。认为ACh对脑内5-HT的代谢发生明显的影响。     

东莨菪碱对吗啡成瘾大鼠脊髓和心房中5－羟色胺、5－羟吲哚乙酸含量的影响

采用高效液相色谱－电化学检测法测定吗啡成瘾大鼠脊髓和心房中５－羟色胺、５－羟吲哚乙酸的含量。吗啡成痛大鼠随机分为自然戒断组和东莨菪碱组（ｎ＝６）。结果显示，吗啡成瘾大鼠脊髓中５－羟色胺、５－羟吲哚乙酸含量高于正常对照（Ｐ＜０．０１），东莨菪碱组二者含量降低。停用吗啡后１天，自然戒断组大鼠脊髓５－羟色胺含量降至正常水平以下，东莨菪碱组大鼠则升高。停用吗啡后６天，二实验组大鼠脊髓５－羟色胺含量均高于正常对照组。东莨菪碱对吗啡刺激的大鼠心房中５－羟色胺含量的升高无影响，结果提示，胆碱能Ｍ受体可能参与吗啡成瘾大鼠脊髓中５－羟色胺代谢的调控。     

东莨菪碱对吗啡成瘾大鼠脊髓和心房中5—羟色胺,5—羟吲哚乙酸…

采用高效液相色谱－电化学检测法测定吗啡成瘾大鼠脊髓和心房中５－羟色胺、５－羟吲哚乙酸的含量。吗啡成瘾大鼠随机分为自然戒断组和东菪碱组。结果显示，吗啡成瘾大鼠脊髓中５－羟色受、５－羟吲哚乙酸含量高于正常对照，东莨菪碱组二者含量降低。     

鼠脑和脊髓中5-羟色胺、5-羟吲哚醋酸、去甲肾上腺素和多巴胺的快速测定法

脑内单胺类神经递质是一类调节机体生理活动的重要物质。这些物质在组织中的含量是反映神经递质生物合成、释放、摄取、失活等过程的生化指标;在研究神经原的功能状态或研究药物对神经组织作用的影响时,亦常用这些生化指标。因此很有必要选择一种灵敏度高、重复性好,快速简便又同     

肝性脑病患者血氨、血清色氨酸、5-羟色胺及5-羟吲哚乙酸的测定

血氨浓度、血清游离色氨酸浓度及游/总色氨酸比值在肝性脑病患者明显高于失代偿性肝硬化、原发性肝癌与亚急性重症肝炎(P<0.01)。在肝性脑病患者血清5-羟色胺浓度增高不显著,但血清5-羟吲哚乙酸浓度明显高于正常对照(P<0.01)。血清游离色氨酸浓度及游/总比值与肝性昏迷的分级呈密切正相关。血氨浓度与肝性昏迷分级无相关性。文章对氨代谢和色氨酸代谢紊乱在肝性脑病发生机理中的重要作用进行了讨论     

碳纤维微电极实时在线研究钩藤对小鼠脑内5-羟色胺的影响

目的 建立碳纤维微电极实时在线测定小鼠脑内海马区5-羟色胺含量的方法.方法 制备火焰刻蚀的碳纤维微电极,利用循环伏安法,建立生理pH条件下5-羟色胺与氧化峰电流的线性关系.在线测定钩藤给药小鼠脑内海马区5-羟色胺随时间的变化,同时与空白组和安定对照组小鼠进行比较.结果 5-羟色胺在碳纤维微电极上的氧化峰电位为0.40 V,峰电流与5-羟色胺在1.0× 10-8～1.0× 10-5 mol/L范围内呈良好的线性关系,检测限为1.0× 10-8 mol/L.钩藤给药小鼠脑内海马区5-羟色胺在给药1h后含量最高,随后呈逐渐降低的趋势.结论 碳纤维微电极制作简单,稳定性和重现性良好,火焰刻蚀后灵敏度大大提高,干扰少.该法用于活体实时在线测定,结果与药理实验具有一致性.     

音乐治疗对慢性应激大鼠脑内5-羟色胺及微管蛋白的影响

目的 探讨音乐治疗对慢性轻度不可预测性应激（CUMS）大鼠脑内前额叶、海马、下丘脑等脑区5-羟色胺及微管蛋白的水平及可能作用机制.方法 随机将24只SD雄性大鼠分为音乐治疗应激组（n=8）、应激组（n=8）和正常对照组（n=8）.采用慢性轻度不可预测性应激（CUMS）模型连续刺激大鼠21 d,音乐治疗应激组在应激的同时给予音乐治疗.实验结束后对每组大鼠进行行为学观察,然后处死大鼠,检测下丘脑、海马和前额叶皮质中5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量和微管蛋白的表达.结果 旷场试验的中央格停留时间比较,应激组大鼠显著低于对照组（P＜0.01）,而音乐治疗应激组与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.与应激组相比,对照组和音乐治疗应激组的海马、前额叶中5-HT及5-HIAA含量均显著升高（P＜0.01）;但三组下丘脑中5-HT及5-HIAA含量差异无统计学意义（P＞0.05）.与应激组相比,对照组和音乐治疗应激组的海马中乙酰化微管蛋白表达均显著降低（P＜0.01）,酪氨酸化微管蛋白表达均显著升高（P＜0.01）;但三组的前额叶和下丘脑中乙酰化微管蛋白、酪氨酸化微管蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 音乐治疗能改善应激所致的前额叶、海马5-羟色胺水平的低下和海马微管蛋白的降低.     

胃癌、慢性胃炎患者血、唾液、胃液中5-羟色胺与5-羟吲哚乙酸检测的临床意义

测定正常人及胃癌、慢性胃炎(浅表性或萎缩性)患者的血、唾液按刘氏及Shellenberger方法测定5—羟色胺(5-HT)与5—羟吲哚乙酸(5—HIAA)的含量,其正常参考值(x±S)分别为:血液0.151±0.04μg/ml与0.194±0.07μg/ml;唾液0.0745±0.05μg/ml与0.1096±0.05μg/ml.与正常值比较,患者血中5-HT及5-HIAA量均增高(p<0.01),而唾液中仅5-HIAA增高(p<0.05).经胃镜抽取胃液作5-HT及5-HIAA测定则胃癌患者胃液中5-HT含量(x±S)为0.2834士0.1436μg/ml,显著高于慢性胃炎患者胃液中的含量(p<0.05),但二者5-HIAA含量并无显著差异.     

人参总皂甙和西洋参茎叶总皂甙对贫血小鼠造血影响的比较

目的观察人参总皂甙(Total saponin of Panax Ginseng, TSPG)和西洋参茎叶总皂甙(Panaxquinquefoliuml saponin, PNS)对贫血小鼠造血恢复的影响,并比较二者作用的异同.方法采用Co60照射﹑注射环磷酰胺、氯霉素复合造模建立贫血小鼠模型,应用全自动血球分析仪和造血祖细胞体外培养技术,检测外周血和三系造血祖细胞集落.结果 TSPG与PNS都可以促进贫血小鼠骨髓有核细胞(BMC)和红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HB)、血小板(PLT)的回升(P＜0.01或P＜0.05),;对白细胞总数(WBC),TSPG与PNS显示相反的作用,TSPG有较弱的提升WBC的作用(P＞0.05),PNS则抑制 WBC的回升(P＜0.05).在造血祖细胞体外给药培养中,TSPG在25～100μg/mL范围内对三系祖细胞增殖都有促进作用,对红系、巨核系最适刺激浓度是25μg/mL,对粒系的最适刺激浓度是50ug/mL.PNS浓度为50～100μg/mL时对红系、巨核系有促进作用,其中巨核系作用冒险(P＜0.01);25～50μg/mL时对粒系增殖没有明显影响,100μg/mL时则表现抑制作用(P＜0.05). 结论人参总皂甙和西洋参茎叶总皂甙都可以促进贫血小鼠造血功能的恢复,但其作用各有特点.     

天麻水煎剂对慢性束缚应激小鼠行为学和5-羟色胺含量的影响

[目的]观察电针(electroacupuncture,EA)对吗啡耐受(morphine tolerance,MT)模型大鼠机械性痛阈(mechanical paw-withdrawal threshold,MPWT)、脊髓背角NOD样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体及其炎症因子表达的调控。[方法]将18只健康雌性SD大鼠按完全随机法分为3组,包括空白组、模型组和EA组,每组6只。模型组和EA组大鼠于鞘内连续注射吗啡7d,制备MT模型,分别于开始造模后第1、3、5、7天检测大鼠左足MPWT。建模成功后,模型组和EA组继续予鞘内注射吗啡,连续7d,EA组在予鞘内吗啡注射后0.5h,予双侧"足三里""昆仑"穴位EA治疗,1次/d,连续7d,各组分别于建模成功后第1、3、5、7天检测左足MPWT。以Western blot法检测大鼠脊髓背角NLRP3炎症小体、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达。[结果]与空白组比较,模型组大鼠注射吗啡后第1、3、5天MPWT显著升高(均P0.01),但注射吗啡7d后降低至基础水平,与空白组比较差异无统计学意义(P0.05),说明MT模型造模成功。与模型组比较,EA组大鼠第3、5、7天的MPWT升高(P0.01)。与空白组比较,模型组大鼠脊髓背角中NLRP3炎症小体、IL-18和IL-1β表达增高(均P0.01);与模型组比较,EA组大鼠脊髓背角中NLRP3炎症小体、IL-18和IL-1β表达减低(均P0.01)。[结论]EA能缓解吗啡耐受效应,其机制可能与下调脊髓背角NLRP3炎症小体、IL-18和IL-1β的表达有关。     

落新妇苷对抑郁症小鼠脑内单胺递质多巴胺和5-羟色胺水平的影响

目的探讨落新妇苷对抑郁症小鼠的抗抑郁作用,并初步探讨其作用机制。方法将72只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、落新妇苷(AST)低剂量组、落新妇苷中剂量组、落新妇苷高剂量组及丙米嗪(IMI)组,每组12只。对照组小鼠正常饲养,模型组、AST低剂量组、AST中剂量组、AST高剂量组及IMI组小鼠给予为期3周的慢性不可预见性应激,制备抑郁症模型,同时分别每天腹腔注射生理盐水、10、20、40 mg·kg-1AST和10 mg·kg-1IMI,然后进行悬尾、强迫游泳、糖水消耗以及敞箱实验等,对6组小鼠的行为学变化进行检测。采用高效液相色谱法(HPLC)检测各组小鼠前额叶皮层内多巴胺(DA)及5-羟色胺(5-HT)水平。结果对照组、模型组、IMI组及AST低、中、高剂量组小鼠水平运动次数和垂直运动次数两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组小鼠悬尾实验和强迫游泳实验中持续不动时间显著增加(P<0.05)、糖水偏嗜度及前额叶皮层DA和5-HT水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,AST低、中、高剂量组和IMI组小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中持续不动时间均显著降低(P<0.05),糖水偏嗜度及前额叶DA水平显著升高(P<0.05);AST中、高剂量组和IMI组小鼠前额叶皮层5-HT水平高于模型组(P<0.05),ASP低剂量组小鼠前额叶皮层5-HT水平与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组、IMI组及AST低、中、高剂量组小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中持续不动时间及糖水偏嗜度组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论落新妇苷对抑郁症小鼠具有显著的抗抑郁作用,其作用机制可能与上调前额叶皮层内DA和5-HT水平有关。     

脑内5-羟色胺受体亲和力的测定

5-羟色胺(5-HT)是参与体内许多生理活动调节过程的重要神经介质。由于5-HT必须通过受体才能发挥其生理作用,因此,5-HT受体亲和力的测定,已经成为近年来研究神经生理、神经药理学的一个不可缺少的方法。 目前测定脑内5-羟色胺受体亲合力的方法很多。我们主要依据Perontka和Snyder(1979)方法,初步建立了脑内5-HT受体亲和力的测定方法,现简要报告如下:     

白芷香豆素对炎性疼痛小鼠脑组织中5-羟色胺及5-吲哚乙酸和多巴胺含量的影响

目的观察白芷香豆素(CAD)对炎性疼痛小鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-吲哚乙酸(5-HIAA)及多巴胺(DA)含量的影响。方法昆明小鼠50只分为对照组、模型组及CAD高、中、低剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组小鼠右足底部注射完全福氏佐剂(FCA)复制炎性疼痛模型,造模后对照组及模型组灌服生理盐水,CAD高、中、低剂量组分别灌服5、10、15 g·L~(-1)CAD提取液,连续灌胃给药3 d,末次给药后1 h,高效液相色谱法测定脑组织中5-HT、5-HIAA和DA含量。结果模型组小鼠脑组织中5-HT、5-HIAA及DA的含量与对照组比较差别无统计学意义(P>0.05)。CAD高、中及低剂量组小鼠脑组织中5-HT及5-HIAA的含量与对照组和模型组相比均显著升高(P<0.05,P<0.01)。随着CAD剂量的增加,小鼠脑组织中5-HT和5-HIAA含量也逐渐升高,其中CAD高剂量组5-HT和5-HIAA含量明显高于CAD低剂量组(P<0.05);CAD高剂量组5-HT含量高于CAD中剂量组,差别有统计学意义(P<0.05),5-HIAA含量增加不明显(P>0.05);CAD中剂量组与CAD低剂量组相比,5-HT和5-HIAA含量稍增高但无统计学意义(P>0.05);DA含量CAD高、中及低剂量组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论CAD的镇痛作用机制可能与神经递质5-HT和5-HIAA的含量有关。