姜黄素诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡

目的：研究姜黄素（Cur）诱导人胃癌BGC－823细胞凋亡的作用。方法：细胞增殖抑制采用MTT法,细胞凋亡采用流式细胞仪检测。结果;Cur27－168μmol/L呈剂量依赖性抑制人胃癌BGC－823细胞增殖（r＝0．994,P＜0．01）。Cur 27μmol／L浓度开始出现BGC－823细胞Apo峰,68－136μmol/L出现明显的Apo峰,细胞凋亡峰在24－72h内随作用时间延长逐渐增高。结论：姜黄素可诱导BGC－823细胞凋亡,该作用有时间和剂量依赖性。     

半夏泻心方及其配伍药组含药血清对人胃癌BGC-823细胞增殖及bcl-2表达的影响

目的研究半夏泻心方不同配伍药组含药血清对BGC-823细胞凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法观察半夏泻心方配伍药组含药血清对BGC-823细胞增殖的影响,S-P免疫组化法检测凋亡相关基因bcl-2的表达。结果半夏泻心方配伍中辛开组、苦降组和由其组成的辛苦组可明显抑制BGC-823细胞的生长,显著高于辛甘组、苦甘组、甘补组和全方组(P<0.05),呈剂量-效应关系,同时可下调bcl-2的表达。结论半夏泻心方中辛开、苦降的配伍形式可抑制BGC-823细胞增殖,其诱导细胞凋亡作用与下调bcl-2有关。辛开、苦降配伍后(辛苦)有显著的协同增效趋势,而其它配伍药组可能存在拮抗作用。提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌的主要治则治法之一。     

半夏泻心方配伍药组含药血清对人胃癌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的研究半夏泻心方不同配伍药组含药血清对人胃癌BGC-823细胞凋亡及凋亡相关基因的影响。方法采用S-P免疫组化法检测凋亡相关基因bcl-2、bax的表达。结果半夏泻心方配伍中辛开组、苦降组和由其组成的辛苦组凋亡指数显著高于辛甘组、苦甘组、甘补组和全方组(P<0.05),呈剂量-效应关系。辛苦组可显著下调bcl-2基因的表达,上调bax基因的表达。结论半夏泻心方中辛开、苦降的配伍形式可能通过促进bax的蛋白表达、抑制bcl-2蛋白表达达到诱导细胞凋亡作用。辛开、苦降配伍后(辛苦)有显著的协同增效趋势,而其它配伍药群可能存在拮抗作用。提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌的主要治则治法之一。     

天南星醇提取液诱导人胃癌BGC823细胞凋亡的实验研究

目的:探讨天南星醇提取液对人胃癌细胞(BGC 823)的细胞凋亡作用。方法:采用四唑盐比色法(MTT)测定,天南星醇提取液对BGC 823的细胞抑制作用;同时利用电子显微镜技术观察天南星醇提取液对BGC 823细胞的形态学改变。结果:天南星醇提取液可明显抑制BGC 823细胞株的增殖,具有抑制作用且有一定的量效及时效关系,实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01)。电镜观察发现天南星醇提取液处理后的BGC 823细胞的胞核染色质浓缩,边集,核固缩,线粒体肿胀,空泡样变,胞浆出现大量空泡等凋亡的形态学改变。结论:提示天南星醇提取液能抑制体外培养BGC 823细胞的增殖,可能是通过诱导BGC 823细胞的凋亡来实现的。     

补中益气汤含药血清诱导SGC-7901人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨补中益气汤含药血清对人胃癌细胞株的抑制与诱导凋亡作用。方法：以人胃腺癌细胞株SGC-7901为实验模型,用补中益气汤大鼠血清和顺铂大鼠血清对SGC-7901人胃癌细胞株处理48小时,在光、电镜下观察细胞凋亡的的形态学变化。结果：光镜下,药物组细胞由梭形细胞变为圆形或卵圆形,核染色质密集;电镜下细胞变圆,微绒毛及突起明显减少,伪足消失,线粒体空泡化,核染色质凝集,可见凋亡小体;凋亡细胞发生率与药物浓度呈正相关。结论：补中益气汤具有诱导SGC-7901人胃癌细胞株凋亡作用。     

半夏泻心方及其配伍药组含药血清对人胃癌BGC-823细胞生长抑制作用及p53表达的影响

目的:研究半夏泻心方不同配伍药组含药血清对BGC-823细胞的生长抑制作用及对p53表达的影响.方法:采用MTT法观察半夏泻心方配伍药组含药血清对BGC-823细胞生长的影响,S-P免疫组化法检测凋亡相关基因p53的表达.结果:半夏泻心方配伍中辛开组、苦降组和由其组成的辛苦组可明显抑制BGC-823细胞的生长,显著高于辛甘组、苦甘组、甘补组和全方组(P<0.05),呈剂量-效应关系,可使 p53基因表达下调.结论:半夏泻心方中辛开、苦降的配伍形式能抑制BGC-823细胞增殖,其诱导细胞凋亡作用与下调p53有关.辛开、苦降配伍后(辛苦)有显著的协同增效趋势,提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌的主要治则治法之一.     

半夏泻心汤对H2O2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制研究

目的探讨半夏泻心汤对H_2O_2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制。方法大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,300μM H_2O_2干预RIN-m5F细胞,测定半夏泻心汤最佳浓度,后随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、Western blot检测各组蛋白表达。结果半夏泻心汤含药血清最佳浓度为10%(P0.05);与模型组比较,半夏泻心汤含药血清可显著降低RIN-m5F细胞凋亡率(P0.05),下调Caspase-3、Bax的表达(P0.05),上调Bcl-2、PAKT的表达(P0.05)。结论半夏泻心汤含药血清可抑制RIN-m5F细胞凋亡,其机制可能与PI3K/AKT通路的活化有关。     

半夏泻心汤对H2O2诱导的RIN-m5F细胞凋亡和胰岛素分泌的影响

目的探讨半夏泻心汤对胰岛β细胞凋亡及胰岛素分泌的影响。方法 33只雄性SD大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,H2O2处理RIN-m5F细胞建立氧化应激细胞凋亡模型,造模成功后探索半夏泻心汤最佳浓度并随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、放免法检测胰岛素分泌浓度。结果 H2O2半数致死浓度为300 mmol/L,半夏泻心汤最佳浓度为10%(P0.01);半夏泻心汤可显著增强胰岛细胞活力,降低胰岛细胞凋亡率,增加胰岛素分泌(P0.05)。结论半夏泻心汤可抑制胰岛细胞凋亡,促进胰岛素分泌,其机制有待进一步探讨。     

扶正消癥方药液诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究扶正消方药液对人胃癌细胞SGC-7901细胞凋亡的诱导作用,探讨扶正消方药液治疗胃癌的可能作用机理。方法:MTT法检测扶正消方药液对SGC-7091细胞增殖的影响;应用电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:扶正消方药液能抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖。在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下,72小时内药物作用时间越长,抑制作用越明显。流式细胞仪检测在细胞周期G1期前出现低于2倍体的凋亡峰,电镜检测到胃癌细胞SGC-7901发生典型的凋亡形态学改变。结论:扶正消方药液能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的体外生长,其作用机制可能与抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖和诱导细胞凋亡有关。     

苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的:研究苦瓜蛋白对诱导K562细胞凋亡相关基因P53和Bcl-2表达的影响。方法:采用CCK-8法检测苦瓜蛋白对K562细胞体外生长的影响;采用Giemsa染色和电镜观察细胞形态学变化;利用流式细胞仪,采用Anexinn-V法检测苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡的作用;采用流式细胞仪检测苦瓜蛋白对Bcl-2和突变型P53蛋白表达的影响。结果:K562细胞经苦瓜蛋白处理后,细胞生长受到明显抑制,光镜和电镜下见到典型的细胞凋亡形态学变化;Anexinn-V法检测到细胞凋亡,凋亡率随药物作用时间延长而升高,5μg/ml苦瓜蛋白诱导凋亡效果最明显;Bcl-2和突变型P53表达下降。结论:苦瓜蛋白能够诱导K562细胞凋亡,发生机理与其调控Bcl—2和突变型P53的表达有关。     

半夏泻心汤对溃疡性结肠炎大鼠炎性细胞因子含量的影响

目的探讨辛开苦降合法及单法(辛开法、苦降法、甘调法)对UC模型大鼠细胞因子含量的影响。方法采用醋酸直肠刺激法复制大鼠UC模型,检测合方组及拆方组对大鼠UC模型血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量的影响。结果模型组TNF-α及IL-6含量明显增高,与正常组比较有差异性;合方组与拆方组含量较模型组明显降低,与模型组比较有差异性;辛开组与苦降组无统计学意义;而与合方组比较,各组均有统计学意义。结论辛开、苦降、甘调同时应用能够增强其对溃疡性结肠炎的治疗作用。     

基于文献计量学和系统药理学方法探究半夏泻心汤对慢性胃炎的作用＊

目的 利用文献计量学方法筛选出治疗慢性胃炎的主要方药，并通过系统药理学方法分析其作用机理。方法 从中国知网、万方数据库查找自建库以来所有与慢性胃炎相关的文献，筛选出中医药治疗慢性胃炎的主要药物或复方。利用TCMSP搜索复方或药物的有效药物组成及作用靶点，从TTD、CTD、OMIM等数据库查找与慢性胃炎发病机制相关的靶点，取复方的作用靶点和慢性胃炎发病机制相关靶点的重叠靶点，利用生物信息学方法分析重叠靶点并利用分子对接技术验证化合物与靶点的结合性。结果 经过文献计量学分析，得到治疗慢性胃炎的主要方药是半夏泻心汤，其有效化合物有125个，这些化合物共有81个作用靶点，其中与性胃炎发病机制相关靶点重叠的有29个靶点，这些靶点参与50种生物学过程并富集50条信号通路，分子对接结果表示药物对特定靶标的亲和力及结合特性良好。结论 本研究通过系统药理学方法初步探究了半夏泻心汤对慢性胃炎的作用机制，为下一步的基础研究提供参考。     

基于网络药理学探讨半夏泻心汤治疗消化不良的作用机制

目的:运用网络药理学方法研究半夏泻心汤治疗消化不良的作用机制。方法:运用TCMSP数据库获取半夏泻心汤有效成分及预测药物作用靶点,运用毒性与基因比较数据库(CTD数据库)获取消化不良疾病基因,运用STRING在线工具构建蛋白互相作用网络,使用Cytoscape软件进行蛋白网络可视化处理,使用DAVID工具进行GO及KEGG信号通路分析,运用cytoHubba、MCODE插件筛选关键基因。结果:半夏泻心汤靶点与消化不良疾病的交集基因共147个,功能涉及药物反应、一氧化氮合成、血管收缩、神经激素受体等方面,KEGG信号通路分析结果显示交集基因富集于与神经系统密切相关的神经活性配体-受体互作通路、胆碱能、5-羟色胺能、多巴胺能突触,及与胃肠动力密切相关的钙信号、cAMP信号、cGMP-PKG信号通路。筛选得DRD2、ADRA2C、ADRA2A、CXCL8、CHRM4、OPRM1、OPRD1、PTGER3、ADRA2B、DRD4、CHRM2共11个关键靶点基因,这些基因或蛋白与神经递质和受体、胃肠动力和感觉密切相关。结论:半夏泻心汤治疗消化不良是多靶点、多通路的复杂过程,其机制与调节神经递质、...     

半夏泻心汤及其拆方对胃腺癌SGC-7901细胞周期和凋亡的影响

目的:从细胞增殖、凋亡、细胞周期角度,研究半夏泻心汤治疗胃癌机制。方法:把半夏泻心汤拆分为苦降、辛开和补益3个组方,1×104细胞/孔接种于96孔板,药物浓度为4,2,0.5,0.125 g·L-1,MTT法检测细胞增殖;1×105/孔接种于6孔板,全方和苦降高、低浓度为0.5,0.125 g·L-1,辛开和补益高、低浓度为4,2 g·L-1,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。观察半夏泻心汤及其拆方对胃癌细胞SGC-7901增殖、细胞周期和凋亡的影响,并与5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)比较。结果:半夏泻心汤全方及苦降、辛开组方能够抑制SGC-7901细胞增殖,全方IC50为1.645 g·L-1,苦降组为1.446 g·L-1,辛开组为3.867 g·L-1;它们增加SGC-7901细胞S期和G0-G1期百分比,促进细胞凋亡,高浓度强于低浓度,但补益组方对此没有作用。结论:半夏泻心汤及其拆方能够一定程度的抑制细胞增殖,以苦降组为最,补益组作用甚微,其机制可能与药物阻滞细胞至G1/S期和诱导细胞凋亡有关。     

半夏泻心汤改善伊立替康致小细胞肺癌荷瘤鼠脾虚的作用

目的:观察半夏泻心汤对伊立替康(Irinotecan,CPT-11)致于小细胞肺癌(Small-cell lung cancer,SCLC)荷瘤鼠脾虚的改善作用。方法:取荷瘤鼠,按高、中、低剂量灌胃给予半夏泻心汤,对照组给水,连续8天,第3天开始尾静脉注射CPT-11,连续4天,观察荷瘤鼠全身情况及活动能力、体重及腹泻,第8天眼球取血,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,EL ISA)测定血清中胃泌素含量。结果:空白组荷瘤鼠活动能力下降,半夏泻心汤给药组荷瘤鼠活动能力有明显改善,体重下降减缓,并能减少腹泻的发生,但对血清胃泌素的影响无统计学差异。结论:半夏泻心汤对CPT-11作用于SCLC荷瘤鼠后的脾虚具有改善作用。     

基于网络药理学与分子对接的半夏泻心汤治疗腹泻型肠易激综合征作用机制研究

目的：通过网络药理学及分子对接研究半夏泻心汤治疗腹泻型肠易激综合征（IBS-D）的分子作用机制。方法：从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）中检索半夏泻心汤主要的有效成分和靶标。在GeneCards、OMIM、DrugBank、PharmGKB数据库中寻找IBS-D的疾病效应靶点,并应用Cytoscape软件构建半夏泻心汤药物-活性成分-靶点网络。对药物成分靶点与疾病靶点取交集,利用STRING数据库建立蛋白质的交互作用网络,以解析蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）关系。对核心靶点展开基因本体（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。采用AutoDock软件对主要的活性成分与核心蛋白进行分子对接,以评价其结合能力。结果：半夏泻心汤中含有143个活性化合物;化合物靶点与IBS-D疾病靶点有58个交集靶点;通过药物-活性成分-靶点网络推测半夏泻心汤治疗IBS-D的关键成分有槲皮素、汉黄芩素、山柰酚、金合欢素、甘草查耳酮A、黄芩素等,PPI网络中核心靶点为原癌基因蛋白Jun (JUN)、FOS、核转录因子-κB (NF-κB) p65 (RELA)、蛋白激酶B1 ...     

半夏泻心汤对伊立替康致小细胞肺癌荷瘤鼠胃损伤的改善作用

目的:观察半夏泻心汤对伊立替康(irinotecan,CPT-11)致小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC)荷瘤鼠胃损伤是否具有改善作用。方法:建立SCLC荷瘤鼠,将40只荷瘤鼠随机分成4组,高、中、低3个给药组半夏泻心汤剂量分别为20、10、5g.kg-1.d-1,空白组给等量水,灌胃给药,共8天。第3天开始尾静脉注射CPT–11,35 mg.kg-1.d-1,共4天。观察荷瘤鼠食量情况;第8天处死荷瘤鼠,取胃组织,显微镜下观察其病理形态改变,免疫组化测胃黏膜环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)表达;另取胃组织,行组织匀浆,离心,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,EL ISA)检测胃组织中血栓烷B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keta-PGF1α)含量;取舌黏膜组织,显微镜下观察其病理形态改变。结果:半夏泻心汤给药组相较于空白组食量增加,空白组胃黏膜内及黏膜下少量血管有扩张,稍有水肿表现,舌黏膜空白组表皮完整,少量细胞空泡变性,鳞状上皮增生,表面角质层增厚,给药组均好于空白组。胃组织中TXB2和6-keta-PGF1α含量及胃黏膜COX-2表达情况各组无统计学差异。结论:半夏泻心汤对CPT-11致SCLC荷瘤鼠胃损伤具有一定的改善作用。