加巴喷丁通过PI3K-AKT信号通路减轻大鼠心肌缺血—再灌注损伤北大核心CSCD

目的观察加巴喷丁对心肌缺血-再灌注损伤的影响,并进一步探讨其机制。方法清洁级雄性SD大鼠60只,10周龄,体重250 g~300 g,采用随机数字表法分为5组,每组12只:假手术组(Sham组)、心肌缺血-再灌注组(I/R组)、加巴喷丁组(Gap组)、LY294002组(LY组)和加巴喷丁+LY294002组(Gap+LY组)。采用左冠状动脉前降支结扎30 min和再灌注120 min,制备心肌缺血-再灌注损伤模型。记录心肌缺血前基线(T0)、缺血30 min(T1)和再灌注120 min(T2)时大鼠的心率(Heart rate,HR)、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和心率血压乘积(Rate pressure product,RPP),评价心肌缺血再灌注期间血流动力学变化;记录室性早搏(Premature ventricular complexes,PVCs)和室速/室颤(ventricular tachycardia/ventricular fi brillation,VT/VF)次数,评价缺血-再灌注期间心律失常。术毕取心肌组织采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triph enyltetrazoliumchloride,TTC)染色法,检测心肌梗死面积;免疫印迹法检测心肌组织PI3K和p-AKT蛋白表达水平。结果与I/R组相比,Gap组心肌梗死面积显著下降,PVCs和VT/VF次数显著减少,PI3K蛋白表达水平和p-AKT/AKT比值显著升高(P<0.05)。与Gap组相比,Gap+LY组心肌梗死面积显著增加,PVCs和VT/VF次数显著升高,PI3K蛋白表达水平和p-AKT/AKT比值显著降低(P<0.05)。结论加巴喷丁可以减轻心肌缺血再灌注损伤,与激活PI3K-AKT信号通路有关。     

促红细胞生成素对大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的影响

目的:观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的影响并探讨其作用机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支30min再灌注120min的方法建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型。将60只SD大鼠随机分为3组(假手术组、缺血-再灌注组、EPO治疗组)。连续监测肢体Ⅱ导联心电图记录再灌注心律失常情况;测定再灌注末心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的变化。结果:EPO降低再灌注室性心律失常的发生率与持续时间,使心律失常评分显著降低;EPO减少再灌注末心肌MDA含量,提高心肌GSH-Px、CAT、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性,对心肌SOD活性无影响。结论:EPO具有抗心肌缺血-再灌注室性心律失常的作用,其机制可能与减轻氧自由基及钙超载的损害有关。     

常压氧疗治疗缺血性脑卒中的实验研究

[目的]研究常压氧疗对缺血性脑卒中的作用和机制。[方法]将30只健康雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(S组),缺血再灌注组(I/R组),常压氧疗治疗组(NBO组)。I/R组和NBO组采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制备局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2h后拔出线拴行再灌注,其中NBO组于缺血后15min给予3h的NBO(100%氧)。再灌注24h时进行神经功能缺陷评分、测定脑梗死体积,并检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)含量。[结果]与S组比较,I/R组大鼠神经功能缺陷评分、脑梗死体积、TNF-α、IL-1β和MDA含量均增加(P<0.05),SOD和GSH-PX活性降低(P<0.05);与I/R组比较,NBO组神经功能缺陷评分、脑梗死体积、TNF-α、IL-1β和MDA含量均降低(P<0.05),SOD和GSH-PX活性升高(P<0.05)。[结论]常压氧疗对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,能改善神经功能,减小梗死体积,其作用机制可能与通过减轻氧化应激及抑制炎性反应有关。     

栀子苷预处理对大鼠心肌缺血再灌注后PI3K/Akt信号通路的研究

目的探索栀子苷(GEN)对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)后心肌细胞氧化应激水平及心肌凋亡的影响极其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法60只SD大鼠随机分为3组:缺血再灌注组(I/R),栀子苷预处理+缺血再灌注组(GEN+I/R),栀子苷+缺血再灌注组+PI3K/Akt信号通路抑制剂(LY294002)组(GEN+I/R+LY),GEN+I/R组在I/R造模前给予50 mg/kg GEN预处理,GEN+I/R+LY组在GEN预处理前给予0.3 mg/kg LY294002。ELISA法检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)以及钙泵(Ca~(2+)-ATPase)水平;Western blot检测心肌组织p-e NOS,p-Akt,Akt以及Bcl-2、Bax蛋白表达;免疫组织化学染色检测p-e NOS,p-Akt蛋白表达。结果与I/R组比较,GEN+I/R组LDH、MDA含量显著降低,SOD、Ca~(2+)-ATPase显著升高(P0.05);与GEN+I/R组比较,GEN+I/R+LY组LDH、MDA含量显著升高,SOD、Ca~(2+)-ATPase显著降低(P0.05)。并且,与I/R组比较,GEN+I/R组p-eNOS、p-Akt、Akt、Bcl-2表达量以及p-e NOS,p-Akt免疫荧光强度显著提高(P0.05),Bax蛋白表达显著降低(P0.05);与GEN+I/R组比较,GEN+I/R+LY组p-eNOS、p-Akt、Akt、Bcl-2表达量以及pe NOS、p-Akt免疫荧光强度显著降低,Bax蛋白表达量显著升高(P0.05)。结论栀子苷可通过激活PI3K/Akt信号通路抑制心肌缺血再灌注后氧化应激及细胞凋亡从而发挥保护作用。     

乌司他丁对大鼠缺血-再灌注肝脏Toll样受体表达的影响

目的 观察乌司他丁对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤以及缺血肝叶Toll样受体2(TLR2)表达的影响.方法 SD大鼠36只,随机分为假手术组、缺血-再灌注组(I/R组)及乌司他丁组.于再灌注120 min后采集标本,测定血清ALT、AST,取缺血-再灌注肝叶组织,测定组织超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)活性,实时定量PCR法测定TLR2表达水平.结果 乌司他丁组大鼠血清ALT、AST和肝组织MDA水平低于I/R组(P ＜0.05);肝组织SOD水平高于I/R组(P＜0.05);再灌注后TLR2表达水平明显升高,而乌司他丁组TLR2表达低于I/R组(P＜0.05).结论 乌司他丁可以对部分肝叶缺血引起的再灌注损伤有保护作用,其机制可能为抑制TLR2的表达.     

活血解毒中药配伍对大鼠缺血后适应心肌组织的保护作用

目的 观察活血中药川芎、当归和解毒中药黄连有效组分配伍后处理联合缺血后适应(IPOC)干预对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤后炎症因子和氧化应激的作用.方法 将75只SD大鼠按随机数字表法分为5组,每组15只.①假手术组:左冠状动脉(冠脉)前降支下穿线不结扎;②I/R组:结扎左冠脉前降支致心肌缺血30 min后,再灌注1 h;③IPOC组:结扎左冠脉前降支30 min后,给予短暂再灌注10 s,再次缺血10 s,重复3次后持续再灌注1 h;④西药对照组:连续灌胃福辛普利钠(0.9 mg/kg)14 d后行IPOC;⑤活血解毒组:连续灌胃中药复方川芎胶囊(有效成分川芎嗪3.20 mg/g、阿魏酸1.73 mg/g)0.40 g/kg和黄连生物碱(0.16 g/kg)2 ml,14 d后行IPOC.假手术、I/R、IPOC组连续14 d灌胃等量蒸馏水.实验结束后腹主动脉取血,检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平;取心肌组织,光镜下观察其形态结构,并计算大鼠左室梗死率.结果 与I/R组比较,IPOC组大鼠血清CK-MB活性和cTnT含量显著降低,左室梗死率显著下降,氧化应激指标明显改善,血清炎症因子IL-1β、IL-6和hs-CRP含量均显著降低(P<0.05或P<0.01).活血解毒中药预处理与IPOC联合作用可进一步降低大鼠左室梗死率和CK-MB活性,并可升高血清SOD水平,降低IL-6水平(P<0.05或P<0.01).结论 活血解毒中药配伍联合IPOC可显著减轻I/R所造成的炎症反应及氧化应激,抑制心肌酶的释放,减小动物心肌梗死面积,保护心肌组织.     

丹羚心舒胶囊对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用

目的:研究丹羚心舒胶囊(Danlingxinshu capsule,DLXSS)对大鼠离体心脏缺血/再灌注(myocardial i schemia/reper f usion,I/R)损伤的作用及其作用机制。方法:SD大鼠35只,随机分为5组(n=7),分别是空白对照组(normal)、模型组(I/R)、DLXSS高(I/R+H)、中(I/R+M)、低剂量组(9I/R+L)(96,32,11 mg/kg)。DL X SS给药组大鼠每天灌胃给药1次,连续给药7 d,空白对照组和模型组同时给予同体积生理盐水。末次给药60 min后,分离心脏置于Langendorff离体灌流装置上,平衡灌注20 min后,全心停灌20 min,再灌注60 min;正常对照组连续灌流100 min。于大鼠左心房插入水囊导管,采用labchart生物信号采集仪器记录观察各受试药物组左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左心室发展压(lef t ventr icular developed pressure,LVDP)、心率(hear t rate,HR)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtMa x)、左心室内压最大下降速率(–dp/dtMa x)等心动力学指标的影响,同时在相应的时间点分别测定冠脉流出液中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、SOD、MDA活性。HE观察组织形态学改变。结果:与模型组相比较,DLXSS不同剂量组可明显改善缺血/再灌注所致的大鼠的心功能损伤,LVDP、±dp/d tM a x明显升高(P0.05或者P0.01);冠脉流出液中LDH、CK、活性明显低于I/R组(P0.05或者P0.01),而SOD活性高于I/R组,MDA含量明显低于I/R组(P0.05)。H E染色结果显示,DL X SS高、中、低剂量组均不同程度的减轻了I/R造成的心肌损伤。结论:DLXSS对心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与改善心肌舒缩功能,清除氧自由基有关。     

1,6-二磷酸果糖预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨1,6-二磷酸果糖(FDP)预处理对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法应用Langendorff离体心脏灌注系统制备离体大鼠心脏全心缺血再灌注模型。雄性SD大鼠16只,随机分为2组,每组8只:缺血再灌注组(I/R组)和1,6-二磷酸果糖预处理组(FPC组),所有心脏予以缺血30 min,再灌注60 min。FPC组在持续缺血前用含FDP的K-H液灌注15 min做预处理。记录各组心脏在平衡30 min(T0)、缺血30 min(T1)、再灌注5 min(T2)、再灌注15 min(T3)、再灌注30 min(T4)、再灌注60 min(T5)时的左心室发展压(LVDP)和左心室压力最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室舒张末压(LVEDP)和左心室压力最大下降速率(-dp/dtmax)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、心率(HR)、冠状动脉流量(CF),并计算(LVSP-LVDP)3心率。实验结束后取心肌组织用比色法测定其中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;常规石蜡固定切片,以免疫组化法测定Bcl-2和Bax的表达及以TUNEL法检测凋亡指数。结果与I/R组相比,FPC组的LVDP、(LVSP-LVDP)3HR、CF在T3~5时点、+dp/dtmax在T2~5时点、HR在T4~5时点升高显著(P<0.05,P<0.01),而LVEDP在T2~5时点降低显著(P<0.05,P<0.01),表明FPC组的心功能显著优于I/R组,且FPC组心肌中的SOD增加而MDA减少、Bcl-2升高而Bax降低、心肌凋亡指数也显著下降。结论 FDP预处理可明显改善大鼠离体缺血再灌注的心功能和减少氧自由基的生成及其对质膜的脂质过氧化作用而保护心肌。     

乳化异氟醚强化停跳液对成年大鼠心肌作用的研究

目的探讨乳化异氟醚对成年大鼠离体心脏心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的影响。方法32只成年SD大鼠随机分成4组:STH液组,脂肪乳组,乳化异氟醚H组(5 mmol/L),乳化异氟醚L组(1 mmol/L)。每组均接受4℃停跳后,在30℃下接受60 min停灌,37℃复灌60 min。测定各组心脏机械功能,冠脉流出液中心肌肌钙蛋白I(cTnI)的含量,取左室心肌测定丙二醛(MDA)含量及电镜检查。结果乳化异氟醚L组和脂肪乳组可显著增强左室发展压,减少冠脉流出液中cTnI的含量(P<0.01),减少心肌丙二醛(MDA)含量;心肌细胞电镜观察显示两组心肌细胞损伤轻于STH液组。H组乳化异氟醚显著减低左室发展压,增加冠脉流出液中中cTnI的含量(P<0.01),增加心肌丙二醛(MDA)含量;心肌细胞电镜观察显示心肌细胞损伤明显高于其余各组。结论低浓度乳化异氟醚强化停跳液可改善心脏机械功能,促进离体成年大鼠心脏心肌缺血-再灌注(I/R)后血流动力学恢复,对成年大鼠心肌缺血-再灌注损伤有保护作用。     

不同缺血预处理对未成熟心肌保护作用的研究

目的研究不同部位缺血预处理对未成熟心肌的保护作用,探讨未成熟心肌保护方法.方法采用经典心脏缺血预处理、双下肢缺血预处理及肾缺血预处理动物Langendorff灌注模型比较三种方法对缺血/再灌注(I/R)未成熟心肌损伤的效应.分为5组,正常对照组(NC,n=6)仅灌注KH液70min;缺血/再灌组(I/R,n=6)工作心15min后缺血45min,恢复灌注15min改为工作心30min;心脏缺血预处理组(IPC,n=6)工作心15min后反复2次缺血5min,再灌注5min,然后重复I/R组方法;双下肢缺血预处理组(DL-IPC,n=6)反复3次捆扎双下肢5min,松开5min,然后重复I/R组方法;肾缺血预处理组(K-IPC,n=6)反复3次阻断左肾动脉5min,放开5min,然后重复I/R组方法.以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、心肌组织ATP和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及电镜作为观察指标.结果IPC、DL-IPC及K-IPC组在左室功能恢复方面优于I/R组(P＜0.05),在ATP含量、SOD活性及心肌超微结构方面均优于I/R组(P＜0.01),在心肌含水量方面低于I/R组(P＜0.05),在MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于I/R组(P＜0.01).结论缺血预处理对未成熟心肌具有明显保护作用,不同缺血预处理可诱发同等的心肌保护作用.     

加巴喷丁通过PI3K-AKT信号通路减轻大鼠心肌缺血—再灌注损伤

目的观察加巴喷丁对心肌缺血-再灌注损伤的影响, 并进一步探讨其机制。方法清洁级雄性SD大鼠60只, 10周龄, 体重250 g～300 g, 采用随机数字表法分为5组, 每组12只:假手术组(Sham组)、心肌缺血-再灌注组(I/R组)、加巴喷丁组(Gap组)、LY294002组(LY组)和加巴喷丁+LY294002组(Gap+LY组)。采用左冠状动脉前降支结扎30 min和再灌注120 min, 制备心肌缺血-再灌注损伤模型。记录心肌缺血前基线(T0)、缺血30 min(T1)和再灌注120 min(T2)时大鼠的心率(Heart rate, HR)、平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)和心率血压乘积(Rate pressure product, RPP), 评价心肌缺血再灌注期间血流动力学变化;记录室性早搏(Premature ventricular complexes, PVCs)和室速/室颤(ventricular tachycardia/ventricular fibrillation, VT/VF)次数, 评价缺血-再灌注期间心律失常。术毕取...     

κ-阿片受体激动剂U50488H对缺血/再灌注损伤大鼠冠状微循环和室性心律失常的影响

目的 探讨选择性κ-阿片受体激动剂U50488H对缺血/再灌注损伤大鼠冠状微循环和室性心律失常的影响,明确其对缺血/再灌注心肌是否有直接的保护作用.方法 32只大鼠按照随机原则分为四组,每组8只,分别为假手术组(A组)、缺血/再灌注(I/R)组(B组),U50488H I/R组(C组)和Nor-BNI(特异性阿片受体阻滞剂) U50488H I/R组(D组).实验组通过开胸结扎冠脉前降支制备大鼠缺血/再灌注模型,观察各组大鼠的心肌超微结构的改变和对室性心律失常的影响.结果 ①C组与B、D组比较,微血管显著扩张(P＜0.05);②C组与B、D组比较,室性心律失常的发生率明显下降.结论 U50488H可通过激活心脏κ-阿片改善缺血/再灌注大鼠的微循环、降低大鼠心肌缺血/再灌注室性心律失常的发生率,从而发挥心脏直接保护作用,该作用也可被选择性κ-阿片受体阻滞剂Nor-BNI所拮抗.     

乌司他丁对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及对肺组织Clara细胞分泌蛋白的影响

目的观察乌司他丁对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨乌司他丁对肺缺血再灌注损伤中肺组织Clara细胞分泌蛋白(CC16)的影响。方法将24只雄性SD大鼠使用随机数字表随机分为假手术组(Sham组,n=8)、缺血再灌注损伤组(I/R组,n=8)和乌司他丁组(ULI组,n=8)。I/R组使用止血钳夹闭大鼠左肺动静脉血管30min后松开止血钳,再灌注120 min后处死大鼠。Sham组大鼠不阻断肺血管,其他处理同I/R组。ULI组于再灌注开始时静脉给予ULI 0.5 ml(10 000 U/kg),其他处理同I/R组。检测三组大鼠动脉血氧分压(PaO_2)、二氧化碳分压(PaCO_2)和湿/干重比(W/D),测定肺组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD),采用ELISA方法测定肺泡灌洗液(BALF)中CC16蛋白含量,RT-PCR方法测定肺组织CC16 mRNA水平。结果与Sham组相比,I/R组和ULI组PaO_2、SOD、BALF中CC16含量和肺组织的mRNA表达水平均显著降低(P0.05),PaCO_2、W/D值和MDA均显著升高(P0.05);但是与I/R组相比,ULI组PaO_2、SOD、BALF中CC16含量和肺组织的mRNA表达水平均显著升高(P0.05),PaCO_2、W/D值和MDA均显著降低(P0.05)。结论乌司他丁可以缓解肺缺血再灌注导致的损伤和氧化应激水平,并且可以增加CC16蛋白的分泌和表达。     

缓激肽在苯那普利抗大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的：探讨缓激肽在苯那普利抗大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法：应用Langendorff离体装置，采用完全停灌复灌的方法制作心肌缺血再灌注模型，将24只SD大鼠随机平均分对照组（A），苯那普利组（B），苯那普利加缓激肽受体拮抗剂（Hoe140）组（C）。观察心律失常，冠脉流出量，心肌丙二醛（MDA），超氧化物歧化酶（SOD），一氧化氮（NO）含量和心肌超微结构。结果：（1）心律失常：再灌注60rain内，B组室速（VT）和室颤（VF）发生率均明显低于A组，C组上述指标均明显高于B组；（2）冠脉流出量（CF）：B组均明显高于A组，C组均明显低于B组；（3）MDA、SOD、NO含量：B组MDA明显低于A组，SOD和NO均明显高于A组。C组MDA明显高于B组，SOD和NO均明显低于B组；（4）心肌超微结构：B组心肌损伤明显轻于A组，C组损伤重于B组。结论：苯那普利抗心肌缺血再灌注损伤作用和抑制缓激肽降解有关。     

米贝拉地尔对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响

[目的]观察米贝拉地尔(Mibefradit)对大鼠肠缺血再灌注后肠组织损伤的影响.[方法]复制SD大鼠肠缺血再灌注损伤模型.实验分为3组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、Mibefradil干预组(M组).比较各组大鼠肠黏膜丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性变化;用Chiu氏评分法观察肠黏膜的损伤情况.[结果]与S、M组相比:I/R组MDA含量明显增高(P＜0.01和P＜0.05),SOD及CAT活性明显降低(P＜0.01和P＜ 0.05);与S组相比,I/R组和M组小肠损伤评分明显升高(P＜0.01和P＜0.05);但M组小肠损伤评分明显好于I/R组(P＜0.05).[结论]米贝拉地尔对大鼠肠缺血再灌注后的肠道有保护作用,该保护作用可能与减少活性氧物质及改善肠道微循环有关.     

舒芬太尼预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探索舒芬太尼预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法健康雄性SD大白鼠50只,随机分为5组。采用结扎左冠状动脉前降支30分钟再灌注90分钟的方法制备心肌缺血再灌注模型。I/R组为缺血再灌注对比组,IPC组为缺血预处理组,SPC组为舒芬太尼预处理组,将其分为三个亚组,低剂量组(LS组0.20μg/kg);中剂量组(MS组2.0μg/kg);高剂量组(HS组5.0μg/kg)。应用Even’s blue-TTC法检测心肌梗死范围,以梗死区心肌重量/缺血区心肌重量(IS/AAR%)来表示。于实验结束时(再灌注末),利用硫代巴比妥酸反应法(TBA)测定MDA浓度,利用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。结果与1/R组比较,IPC组与SPC三个亚组的心肌梗死面积(IS/AAR)均有降低,其中舒芬太尼预处理组(SPC)三个亚组相互比较中,高剂量(HS)组IS/AAR的降低最为明显。与1/R组比较,IPC组及SPC三个亚组的MDA浓度均有下降,SOD活性均有升高。结论舒芬太尼预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,减少心肌梗死面积,抑制氧化产物的增加,提高机体的抗氧化能力,且呈剂量依赖性。     

异甘草酸镁对大鼠肝缺血—再灌注损伤后肝细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的探讨异甘草酸镁(MI)对大鼠肝缺血再灌注损伤(HIRI)后肝细胞凋亡和凋亡抑制基因bcl-2表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为I/R组20例和MI+I/R组20例,分别于HIRI后1、3、6、24 h测定血清SOD和MDA含量,并于HIRI后1h采用TUNEL法和免疫组化法分别检测2组大鼠肝细胞凋亡和bcl-2表达水平。结果 I/R组MDA含量逐渐升高,MI+I/R组MDA含量逐渐降低(P<0.05);2组SOD含量均逐渐升高,MI+I/R组SOD含量在HIRI后3 h、4 h时较I/R组显著升高(P<0.01)。HIRI后1 h,MI+I/R组阳性细胞核数量及其占总肝细胞核数的百分比均明显少于I/R组(P<0.01);而表达bcl-2蛋白阳性的肝细胞数及其占肝细胞总数的百分比均明显高于I/R组(P<0.01)。结论异甘草酸镁能显著清除氧自由基,减少大鼠HIRI后肝细胞凋亡,并能上调HIRI后肝细胞凋亡抑制基因bcl-2的蛋白表达水平,对HIRI有较好的治疗作用。     

异氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨异氟醚后处理对不同年龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法将成年健康雄性SD大鼠18只和老年健康雄性SD大鼠18只采用随机数字表法随机分为3组,对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、异氟醚后处理组(Iso PP组)。建立Langendorff离体心脏灌注模型,C组持续灌注130 min;I/R组平衡灌注10 min后缺血30 min再灌注90 min;异氟醚后处理组平衡灌注10 min缺血30 min,随后用含有1.5%异氟醚的灌注液灌注15 min,随后再灌注75 min。于平衡灌注末、再灌注30 min和90 min时记录HR、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左心室压力上升最大速率(+dp/dtmax)和左心室压力下降最大速率(-dp/dtmax)。灌注结束后,取心尖部心肌组织1 mm3电镜下观察线粒体结构并评分,剩余心脏组织采用TTC染色法测定心肌梗死面积。结果在成年鼠中,与I/R组相比,异氟醚后处理组心肌再灌注后的心功能指标改善,心肌梗死面积减小,线粒体损伤减轻(P<0.05);在老年鼠中,与I/R组相比,异氟醚后处理组心肌再灌注后的心功能指标、心肌梗死面积以及线粒体损伤程度均无明显改变(P>0.05)。结论异氟醚后处理减轻了成年老鼠的心肌再灌注损伤,而未能减轻老年鼠心肌的再灌注损伤。     

葛根素预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的通过建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,探讨葛根素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法在langendǒrff离体心脏体外灌注模型复制基础上,采用随机对照方法将50只雄性SD大鼠平均分为5组:对照组、缺血再灌注组、缺血预处理组、小剂量葛根素预处理组、大剂量葛根素预处理组,记录每只大鼠平衡灌注15 min、再灌注153、0 min的心功能变化,包括心率(HR)、左室最高压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力升高速率(+dp/dtmax)、左室压力降低速率(-dp/dtmax)。并于平衡灌注15 min、复灌1、3、5、10、15、30 min测定冠脉流出液中肌酸激酶(CK)的含量。测定心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量,并作电镜检查。结果缺血再灌注组可引起HR、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax下降,LVEDP升高以及CK释放增加,心肌MDA产生增多、SOD及NO含量降低,与对照组相比有显著性差异。缺血预处理组及葛根素预处理组均能显著改善缺血再灌注引起的心功能损伤,降低CK的释放,减少心肌组织MDA的生成,并增加心肌组织中SOD和NO含量,减轻心肌细胞超微结构的病理改变。大剂量葛根素预处理组比小剂量葛根素预处理组对上述指标的改善更为显著。结论葛根素预处理能减少脂质过氧化,明显改善心功能,提高心肌组织对后续缺血的耐受性。这种保护作用存在量效关系,其产生与心肌中SOD增高减轻了氧自由基损伤和NO增高扩张冠脉有关。     

阿托伐他汀预处理对大鼠缺血-再灌注心肌氧自由基和凋亡的影响

目的 观察短期阿托伐他汀预处理对心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)浓度、心肌细胞内Caspases-3、Caspases-8和NF-κB表达的影响,探讨阿托伐他汀的心肌保护作用机制.方法 将80只雄性SD大鼠随机等分为四组:假手术组(A组,生理盐水5 mL/d)、缺血再灌注组(B组,生理盐水5 mL/d)、阿托伐他汀标准剂量预处理组(C组,阿托伐他汀20 mg/d)和阿托伐他汀强化剂量预处理组(D组,阿托伐他汀40mg/d).灌胃3d后,第4天制作大鼠在体心肌I/R模型,结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min后,用比色法检测心肌中MDA和SOD浓度,Western blot检测活化Caspase-3、Caspase-8和NF-κB的表达.结果 与B组比较,C组SOD浓度明显增加(P＜0.05),MDA浓度明显减少(P＜0.05),Caspases-3和Caspases-8表达明显减少(P＜0.05),NF-κB表达明显减少(P＜0.05);与C组比较,D组SOD浓度增加更为明显(P＜0.05),MDA、Caspases-3和Caspases-8及NF-κB表达减少更为明显(P＜0.05).结论 阿托伐他汀预处理明显增强抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化损伤,降低细胞凋亡,减轻MIRI损伤,表现出较强的心肌保护作用,其机制可能与增加心肌NF-κB表达有关.