丹星通络汤对脑缺血再灌注大鼠Caspase-3表达的影响

目的：观察丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞Caspase-3蛋白表达的影响，探讨其神经保护作用机制。方法：40只健康雄性Wistar大鼠，采用大脑中动脉线栓法建立局灶脑缺血再灌注大鼠模型，并随机将大鼠分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（L／R）、丹星通络汤大、小剂量组和尼莫地平组，每组8只。丹星通络汤组分别按15mL／kg（大剂量），7．5mL／kg（小剂量），尼莫地平组10mL／kg，术前连续灌胃给药7天，每天1次。假手术组和缺血再灌组分别灌以10mL／kg的生理盐水。大鼠局灶性脑缺血2h，然后进行再灌注。在再灌注24h断头取脑组织，采用免疫组织化学法检测脑组织中Caspase-3蛋白的表达，并与病理组织学改变进行对照。结果：丹星通络汤能明显降低大脑皮质及海马Caspase-3的表达，减轻神经细胞损伤。结论：丹星通络汤能减轻脑组织的缺血再灌注损伤，改善神经功能缺失，其作用机制可能与抑制Caspase-3蛋白表达有关。     

丹星通络汤治疗大鼠脑缺血再灌注Bax蛋白表达的影响

目的观察丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤海马区细胞凋亡调控基因Bax蛋白表达的影响,探讨丹星通络汤预防与治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用。方法 SD大鼠40只,随机分成假手术组、模型组、尼莫地平组、丹星通络汤小剂量组、丹星通络汤大剂量组,每组8只。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注模型。HE染色检测大鼠脑组织海马区的病理学变化,免疫组织化学法和医学图像分析法检测大鼠脑组织海马区Bax蛋白的平均光密度（OD）值。结果与模型组比较,丹星通络汤大、小剂量组大鼠脑组织海马区Bax蛋白的OD值明显减低（P〈0.05）,并且丹星通络汤大剂量组与尼莫地平组相比有统计学意义（P〈0.05）。结论丹星通络汤可能通过下调Bax蛋白的表达,从而抑制脑组织的凋亡机制发挥对脑组织的保护作用。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后热休克蛋白70的影响

目的观察芪棱汤对脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(Hsp 70)的影响,为益气养阴活血法治疗脑梗死提供实验依据。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组及芪棱汤组,并予相应药物腹腔注射。采用颈内动脉线栓加环扎法复制大鼠脑缺血再灌注模型。于再灌注后不同时间点观察大鼠缺血脑组织Hsp 70的表达。结果假手术组无Hsp70蛋白表达,其他各组Hsp70蛋白表达较假手术组高,芪棱汤组在再灌注24h、48h段Hsp70表达较模型组高,且芪棱汤组在再灌注24h段增加Hsp70蛋白表达方面优于补阳还五汤组。结论芪棱汤可以促进Hsp70的蛋白表达,对脑缺血再灌注所导致的脑损伤起保护作用。     

血栓通对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞HSP70表达的影响

目的观察血栓通对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞热休克蛋白70(heat shockprotein 70,HSP70)表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法将大鼠随机分为5组,其中川芎嗪组术前3 d腹腔注射川芎嗪注射液80 mg/kg,血栓通大、小剂量组术前3 d分别腹腔注射血栓通10 mg/kg和5 mg/kg。除假手术组外,其余4组用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,于脑缺血30 min再灌注24 h后断头取脑,用免疫组织化学法检测脑组织中HSP70表达,并与病理组织学改变进行对照。结果血栓通能明显增强大脑皮质及海马HSP70的表达,减轻神经细胞损伤。结论血栓通能减轻脑组织的缺血再灌注损伤,改善神经功能缺失,其作用机制可能与增加HSP70表达有关。     

复方蒲黄颗粒对局灶性脑缺血再灌注大鼠热休克蛋白70及其mRNA表达的影响

目的 观察复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后热休后蛋白70(HSP-70)及其mRNA表达的影响. 方法 75只雄性SD大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为假手术组、模型组,蒲黄颗粒大、中、小剂量组,每组15只.各组大鼠分别在缺血2小时再灌注6、24、72小时断头取脑组织,每时间点5只.再灌注24小时进行神经功能缺陷评分,采用Nissl染色观察神经元形态学变化;采用原位杂交检测HSP-70 mRNA的表达;采用免疫组化法检测HSP-70蛋白的表达. 结果 蒲黄颗粒大、中剂量组在缺血再灌注24小时时神经功能改善显著优于模型组(P＜0.05);Nissl染色结果显示,模型组大脑皮层神经元形态不规则,体积缩小,胞核固缩深染,细胞间质水肿,尼氏体减少,可见明显的神经元丢失,而蒲黄颗粒各剂量组未见明显的神经元损伤和丢失;模型组在再灌注6～72小时HSP-70及其mRNA的表达均增加,与假手术组比较各时间点差异均具有统计学意义(P＜0.01),蒲黄颗粒各剂量均能增强HSP-70及其mRNA的表达,与模型组各时间点的差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 复方蒲黄颗粒能促进脑缺血再灌注后HSP-70的表达,减轻缺血再灌注损伤.     

柔肝通络汤对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨柔肝通络汤对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2蛋白表达的影响.方法 将78只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组及柔肝通络汤高、中、低剂量组.假手术组及模型组连续1周灌胃蒸馏水.柔肝通络汤各剂量组分别给予高、中、低剂量的柔肝通络汤灌胃,最后一次灌胃30 min后,制成大脑中动脉栓塞模型,保持缺血状态2h后,分别...     

电针对局灶性脑缺血大鼠热休克蛋白70表达的影响

目的观察电针对局灶性脑缺血大鼠热休克蛋白70(Hsp70)表达的影响。方法采用免疫组化法检测大鼠脑局灶性缺血24h后Hsp70表达,以及电针干预后Hsp70表达的变化。结果大鼠局灶性脑缺血后Hsp70大量表达,电针可上调Hsp70的表达。结论电针能促进缺血后细胞凋亡相关基因Hsp70的表达,可能是其抗缺血性脑损伤的机制之一。     

电针对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中自由基及热休克蛋白70表达的影响

目的:探讨电针干预脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:成年Wistar大鼠63只,分为7组,脑缺血2h/再灌注1h组、脑缺血2h/再灌注1h+电针组、脑缺血2h/再灌注3h组、脑缺血2h/再灌注3h+电针组、脑缺血2h/再灌注6h组、脑缺血2h/再灌注6h+电针组和假手术组。建立局灶性脑缺血再灌注动物模型。电针取“水沟”、双侧“中冲”及“风府”穴,疏密波,4-60Hz,强度2mA左右,在大脑中动脉阻断1h后给予电刺激15min。分别用羟胺法和硫巴比妥酸盐反应法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法测定脑组织中热休克蛋白(HSP)70的表达。结果:与假手术组相比,各缺血再灌注组SOD活性明显下降,MDA含量显著增加,HSP70表达增加。与缺血再灌注组比较,各电针组SOD活性明显上升,MDA含量明显下降,HSP70表达进一步增加。结论:电针干预脑缺血再灌注损伤的作用机制与降低大鼠脑组织中自由基含量,增强SOD活性和HSP70表达有关。     

针灸预处理对心肌缺血再灌注损伤兔不同时间热休克蛋白27、70、90表达的影响

目的:探讨针灸预处理诱导热休克蛋白(HSP)表达对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)兔延迟保护作用的机制。方法:新西兰大耳白兔随机分为假手术组、模型组、电针组和艾灸组,每组18只,各组按预处理后不同时相再分为0、24、48h3个亚组,每组6只。电针组及艾灸组造模前电针或艾灸"内关",每次20min,每日1次,共治疗5d。各组于预处理5d后0、24、48h行冠脉结扎法复制心肌缺血再灌注模型。HE染色观察左心室肌病理变化,电镜观察左心室肌超微结构变化。免疫组化法检测兔心肌组织HSP 27、HSP 70、HSP 90的表达。结果:各组预处理家兔的HE染色及超微结构结果显示,与假手术组比较,模型组心肌损伤较严重,肌纤维紊乱,部分溶解,小血管扩张;与模型组比较,电针组及艾灸组心肌损伤较轻,肌纤维大多正常,肌丝间局灶性水肿减少,线粒体丰富。在不同时相,模型组心肌HSP 27、HSP 70、HSP 90表达与假手术组比较差异均无统计学意义(P0.05)。在0h时,各组兔心肌HSP 27表达差异均无统计学意义(P0.05);在24、48h时,电针及艾灸组比模型组的心肌HSP 27表达均明显增强(P0.05,P0.01)。在0、24h时,艾灸组的HSP 70表达均高于模型组(P0.05,P0.01),而且在24h时,艾灸组HSP 70的表达明显高于电针组(P0.05);在48h时,艾灸组及电针组HSP 70的表达均明显高于模型组(P0.01)。0、24、48h各组的HSP 90表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论:电针与艾灸"内关"对兔MIRI均有预保护作用,可减轻兔心肌组织病理改变,其作用与心肌组织HSP 27及HSP 70表达的增强有关,且这种预保护效应存在时间差异,体现在24、48h时更为明显,提示电针与艾灸均具有延迟性保护作用。     

补阳还五汤及其有效部位组方对沙土鼠脑缺血再灌注后脑组织热休克蛋白70表达的影响

目的 :比较补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型 ,分别腹腔注射补阳还五汤及其有效部位组方 ,于缺血15min再灌注 4 8h后 ,以Northernblot检测脑组织HSP70mRNA的表达 ,以Westernblot检测其蛋白表达。结果 :沙土鼠脑缺血再灌注后 ,脑组织HSP70mRNA和蛋白表达显著增加 ,补阳还五汤及其有效部位组方可使脑缺血再灌注后HSP70mRNA表达减少 ,补阳还五汤的抑制作用强于有效部位组方 ;但两者对脑缺血再灌注后HSP70蛋白表达的增加均无明显影响。结论 :补阳还五汤及其有效部位组方可能通过抗缺血作用而抑制了缺血后HSP70mRNA的表达。     

乌司他丁对大鼠肾脏烫伤后肾脏热休克蛋白70表达的早期影响

目的研究烫伤后早期给予乌司他丁对大鼠肾脏组织细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨乌司他丁对大鼠肾脏的保护作用和可能的作用机制。方法选用健康Wistar大鼠45只,随机分为对照组(非烫伤,n=5)、烧伤组(单纯烫伤,n=20)、治疗组(烫伤后给予乌司他丁,n=20)。建立30%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型。用HE染色方法、免疫组织化学方法检测各组创伤后1 h、6 h、12 h、24 h肾脏组织中HSP70蛋白的表达。结果①对照组肾脏组织中HSP70蛋白呈弱阳性表达。与对照组比较,烧伤组在烫伤后6 h HSP70表达增强(P<0.05)。治疗组肾组织中HSP70表达在1 h、6 h、12 h明显高于烧伤组(以12 h点最为显著,P<0.05)。②正常大鼠肾脏外观呈现马蹄形或蚕豆形,圆润,颜色红。烧伤组外观较对照组肿胀变大,颜色暗红,充血明显。烫伤后12 h改变最为明显。治疗组外观较对照组略肿胀,颜色暗红,充血不明显。③烫伤后各个时间段肾组织出现不同程度损伤性改变,6 h最为明显。肾小球毛细血管丛缩小,肾小球囊腔扩大。肾小管细胞肿胀、变性坏死、管腔扩张。近曲小管上皮细胞扁平,刷状缘脱落,个别上皮细胞脱落,基底膜尚完整。治疗组上述改变明显减轻,仅见部分肾小管细胞肿胀、管腔扩张、无明显变性坏死。结论严重烧伤早期大鼠肾脏组织损伤明显,早期应用乌司他丁具有保护肾脏组织的作用。HSP70在烧伤大鼠早期肾脏组织的表达可能具有细胞保护作用和作为应激反应强度标志的作用。乌司他丁能够明显增强烧伤早期大鼠组织细胞内HSP70的表达,这可能是其抗肾脏组织细胞凋亡,保护肾脏组织的机制之一。     

补阳还五汤对实验性脑缺血再灌注损伤抗氧化作用的研究

观察了大鼠脑缺血 4 5 m in再灌注 3 d后血清及脑组织 MDA含量和 SOD活力的变化及补阳还五汤的作用。结果显示 ,脑缺血再灌注后大鼠血清及脑组织 MDA含量显著升高 ,脑组织 SOD活力显著降低 ,而补阳还五汤能有效地防止这些变化。提示补阳还五汤可通过抗氧化而发挥抗脑缺血再灌注损伤的作用     

丁苯酞预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的干预研究

目的探讨预防性应用丁苯酞对SD大鼠脑缺血再灌注损伤是否具有保护作用及其可能机制。方法 36只SD大鼠随机分为假手术组、对照组、预处理组(均n=12);预处理组制模前给予丁苯酞80 mg/(kg.d)灌胃14 d。改良Zea Longa线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻断(MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,于再灌注后24 h行Zea Longa评分标准进行神经功能缺损评分;2%氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量梗死体积;免疫组化法观察Caspase-3的表达。结果对照组和预处理组神经功能缺损评分较假手术组均明显增高(P均<0.01);预处理组神经功能缺损评分较对照组明显降低(P<0.01);对照组和预处理组脑梗死体积较假手术组均明显增高(P均<0.01);预处理组脑梗死体积较对照组明显减少(P<0.01);对照组和预处理组的Caspase-3表达较假手术组均明显增高(P均<0.01);预处理组的Caspase-3表达较对照组明显降低(P<0.01)。结论预防性应用丁苯酞可以减轻SD大鼠神经功能缺损症状,缩小梗死体积,减少Caspase-3表达;预防性应用丁苯酞具有神经保护作用,其机制可能与减少Caspase-3表达抑制细胞凋亡有关。     

益肾降浊汤对大鼠缺血再灌脑组织SOD和MDA的影响

目的 :观察益肾降浊汤对大鼠脑缺血再灌注致脑损伤模型中脑组织内 SOD活性和 MDA含量动态变化的影响。方法 :在造成大鼠低血压的基础上 ,进行脑缺血再灌注 ,分别于造模后第 1,7,15天断头取脑。用羟胺法测 SOD活性 ,TBA法测 MDA含量。结果 :与模型相比较 ,益肾降浊汤能明显提高脑组织内 SOD活性 ,降低 MDA含量 ( P<0 .0 5 ) ;经中药治疗后 ,7天组、 15天组分别同 1天组相比 ,15天组 SOD活性提高 ,MDA含量降低更为显著 ( P<0 .0 1)。结论 :益肾降浊汤有一定的抗脑缺血再灌注致脑损伤的作用。     

针刺保肝护脑对脑缺血再灌注肝损伤大鼠SODmRNA表达的影响

目的:探讨针刺保肝护脑对脑缺血再灌注肝损伤大鼠SODmRNA表达的影响.方法:将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺对照组、针刺保肝护脑组.线栓法制作缺血再灌注大鼠模型,测试大鼠行为学、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、SOD活性、肝组织SODmRNA含量.结果:模型组、针刺对照组和针刺保肝护脑组缺血2h(电针治疗前)时神经功能缺损评分无显著差异;经10次电针治疗结束后:与模型组比较,针刺对照组和针刺保肝护脑组神经功能缺损评分有极显著差异(P＜0.01);与针刺对照组比较,针刺保肝护脑组神经功能缺损评分变化更为显著(P＜0.05).电针治疗前,与假手术组、针刺对照组和针刺保肝护脑组比较,模型组血清ALT、AST水平显著增高(P＜0.01),而血清SOD、肝组织SODmRNA明显降低(P＜0.01);经10次电针治疗结束后:与模型组比较,针刺对照组和针刺保肝护脑组血清ALT、AST水平明显降低(P＜0.01),同时血清SOD、肝组织SODmRNA显著升高(P＜0.01);与针刺对照组比较,针刺保肝护脑组血清ALT、AST、SOD和肝组织SODmRNA各项变化更为显著(P＜0.05).结论:针刺保肝护脑对脑缺血再灌注大鼠的治疗效果较单纯头穴针刺更为显著,其治疗机制与促进肝脏SODmRNA表达相关.     

川芎嗪对脑缺血再灌注损伤保护作用的临床研究

目的探讨川芎嗪对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法将60例经脑血管造影证实的早期大脑中动脉(MCA)闭塞患者随机分为实验组和对照组各30例,2组均经右侧股动脉行介入溶栓及相同的常规辅助治疗,实验组同时给予川芎嗪静滴,疗程2周。术后2周查脑CT,观察是否存在脑梗死及测量脑梗死体积,并进行神经功能缺损评分。结果治疗2周后,实验组神经功能缺损评分与对照组相比有显著性差异(P<0.05),脑梗死体积小于对照组(P<0.05);2组在治疗过程中均未出现严重并发症。结论川芎嗪可有效对抗脑缺血再灌注损伤,其机制可能与川芎嗪具有抗氧化、减轻钙超载、抑制炎性反应作用有关。     

补阳还五汤对心肌缺血再灌注损伤过程中自噬的调控

目前心急梗死治疗主要以溶栓治疗和经皮冠状动脉介入治疗为主,能迅速开通闭塞血管,减少心肌梗死面积,但由于冠状动脉的骤然开通与血流恢复,可导致心肌缺血再灌注损伤(Myocardial Ischemia-reperfusion Injury,MI/RI),诱发病死率依然居高不下。而许多研究表明心肌MI/RI与心肌细胞过度自噬有关,自噬是真核细胞维持稳态的一种保守的降解过程。近年来,中医药在调节细胞自噬方面取得了一定的进展,越来越多的中药被证实可以通过调节心肌细胞的自噬水平,通过调控自噬,对受损心肌产生保护作用。而中医根据心肌MI/RI的临床表现将其归类为"胸痹""真心痛"范畴,认为其主要病机为气虚血瘀,治宜益气活血,以补阳还五汤为代表方,此方通过纠正心肌MI/RI后气虚血瘀、改善局部微环境及能量平衡、清除氧自由基等积聚,继而有效调控细胞自噬,减少心肌细胞损害。该文综述了心肌缺血再灌注损伤过程中自噬的主要分子机制和作用及补阳还五汤对其的调控。     

眼针对脑缺血再灌注大鼠脑内脑源性神经营养因子表达的影响

目的：观察眼针疗法与体针疗法对脑缺血再灌注损伤（CIRI）模型大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响,探讨眼针与体针效应的差异。方法：将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、眼针穴区组、眼针穴区外组与体针组,每组8只。线栓法制备大鼠大脑中动脉梗死再灌注模型。眼针穴区组取＂肝区＂＂上焦区＂＂下焦区＂＂肾区＂。眼针穴区外组选择眼针同名穴区的外3 mm处针刺。体针组取＂曲池＂＂足三里＂穴针刺。采用Zea Longa评分法进行大鼠神经功能评分,实时定量PCR方法检测缺血再灌注72 h后脑内BDNF mRNA的表达,蛋白免疫印迹法检测缺血再灌注后72 h脑组织BDNF蛋白的表达。结果：眼针穴区组和体针组大鼠神经功能缺损症状较模型组大鼠减轻（P〈0.01）,眼针穴区组与体针组相比差异无统计学意义（P〉0.05）;眼针穴区组和体针组较模型组大鼠脑内BDNF mRNA和蛋白含量均升高（P〈0.01）,眼针穴区组与体针组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：眼针与体针在改善脑缺血再灌注损伤中的作用接近,两种疗法的作用机制可能均与脑内BDNF的表达上调从而促进脑组织的修复有关。