小檗碱对缺血性脑损伤保护作用的实验研究

本研究采用Pulsinelli—Brierley四管阻塞脑缺血模型,观察了小檗碱对大鼠缺血性脑损伤的作用.结累发现:(1)可降低脑缺血性癫痫发生率(P<0.05)与死亡率(P<0.025);(2)小檗碱可提高脑缺血再灌流早期(120min)缺血易损区中的海马CA1区超微结构对缺血性损伤的耐受力,(3)小檗碱可减轻脑缺血再灌流晚期(7d)缺血易损区中的海马CA1区迟发性神经元死亡(P<0.01).提示小檗碱对缺血性脑损伤具有保护作用.     

当归对缺氧缺血性脑损伤幼年大鼠神经元的保护作用

目的探讨脑缺氧缺血对幼年大鼠海马齿状回神经元的影响及当归注射对其保护作用。方法取7日龄健康SD新生大鼠33只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各11只。缺氧组和当归组新生大鼠在无菌环境下结扎左侧颈总动脉,术后护理2 h后置于三气培养箱持续缺氧2 h/d,连续7 d,制作新生鼠缺氧缺血性脑损伤模型,对照组仅行假手术,不结扎左侧颈总动脉、不缺氧。术后第8 d开始,缺氧组和对照组大鼠经腹腔注射生理盐水（8 ml/Kg）,连续7 d;当归组用等量当归注射液（250 g/L）代替生理盐水。于生后第40 d取大鼠脑组织,常规石蜡包埋、经海马切片,行神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫组化染色,图像分析海马齿状回NSE阳性细胞的积分光密度（IOD）值。结果缺氧组大鼠海马齿状回NSE阳性细胞的IOD值较对照组降低,而当归组NSE阳性细胞的IOD值较缺氧组增高。结论脑缺氧缺血可降低幼年大鼠海马齿状回NSE的表达,而当归注射液对缺氧缺血性脑损伤幼年大鼠神经元可能具有保护作用。     

雌二醇增强大鼠空间记忆能力的研究

目的：探讨雌激素对学习记忆能力的影响。方法：３月龄雌性 ＳＤ大鼠 ２８只,体重 ２００ ｇ,分用药组（雌二醇肌注０．２５ ｍｇ／ｋｇ／日）和对照组各１４只,每组有９只动物用Ｍｏｍｓ水迷宫技术测试大鼠学习记忆能力,另５只在用药 １０天后用 Ｇｏｌｇｉ－Ｃｏｘ染色,观察海马 ＣＡＩ区锥体细胞树突棘的变化。结果：（１）用药 １０天后,定位航行实验显示：后 ４个时间段用药组和对照组潜伏期分别为 ８． ６±３．１秒和 １４．１±４．２秒,差别显著（Ｐ＜０．０５）;Ｇｏｌｇｉ－Ｃｏｘ染色显示对照组中段树突棘数为 １９．５±２． ３,用药组为 ２４．８±３．２,差别显著（Ｐ＜０．０５）。（２）用药 ３０天后,用药组和对照组潜伏期分别为１７．４±６．２秒和３５．９±９．３秒,在原有平台像限游泳路线长度占总长度４２．３±４．３％和３１．７±４．６％;跨越平台次数分别为３．１次和１．６次,差别显著（Ｐ＜０．０５）。结论：雌二醇能增强大鼠学习记忆能力,特别是记忆能力。     

缺血性脑损伤海马神经元磷酸肌醇系统的变化及其机制的探讨

采用四动脉闭塞全脑缺血模型，观察大鼠缺血３０ｍｉｎ再灌注２１ｄ不同时间中，外源性谷氨酸对海马脑片磷脂酰肌醇代谢的影响和偶联该系统的Ｇ蛋白功能变化。。结果显示，Ｇｌｕ对正常和缺血再灌注海马脑片肌醇磷酸生成均具有明显的促进作用，其中以缺血再灌注后ＩＰ的升高为显著。     

缺血性脑损伤的分子生物学研究进展

分子生物学技术推动了缺血性脑损伤的实验研究进展 ,大量研究从分子水平揭示了脑组织损伤 (死亡 )发生的机制并创造了新的治疗方法。本文就缺血性脑损伤研究中的分子生物学应用、立及早基因的表达、细胞凋亡机制及基因治疗方法等进行综述     

雌二醇对巨噬细胞的激活作用

目的: 研究17β-雌二醇对腹腔巨噬细胞的影响,试图分析其在子宫内膜异位症病理过程中的作用及作为药物研究靶点的可能性。方法:扫描电镜观察巨噬细胞表面形态;Griess's试剂检测NO的含量;TNF-α采用L929细胞为靶细胞的细胞毒MTT法测定;激光扫描共聚焦显微镜检测胞浆内钙离子浓度[Ca²⁺]i。结果:17β-雌二醇:(1)使细胞表面微绒毛增多、增粗、密集,细胞表面有较多颗粒状隆起,皱褶增多;(2)促进巨噬细胞释放NO;(3)诱导巨噬细胞产生TNF-α;(4)100 nmol/L 17β-雌二醇使巨噬细胞的[Ca²⁺]i 明显提高(提高39.8%)。结论:一定浓度的17β-雌二醇激活巨噬细胞,是内异症的病理环节之一。     

研究麦芽醇对大鼠海马不完全性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的　研究麦芽醇对大鼠海马组织不完全性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :Wistar大鼠双侧颈总动脉夹闭 3 0min ,造成不完全脑缺血 ,松开动脉夹即为灌注。大鼠随机分为三组 :(1 )假手术对照组 (SOC) ,相同手术操作 ,但不夹闭动脉 ;(2 )缺血再灌注组 (IR) ,再灌注 1h ;(3 )麦芽醇治疗组 (MT) ,夹闭动脉前后静脉注射 70 0μmol/L麦芽醇生理盐水。 3组动物均于再灌注后测海马组织中的丙二醛 (MDA)值 ,超氧化物歧化酶 (SOD)和ATP酶活性。结果 :缺血再灌注组MDA明显升高 (P <0 .0 1 ) ,SOD、ATP酶活性明显降低 (P <0 .0 1 ) ;MT能降低升高的MDA值 ,改善ATP酶活性 (P <0 .0 1 ) ,但不能改善SOD活性。结论 :麦芽醇能清除氧自由基 ,减少脂质过氧反应 ,改善ATP酶活性 ,从而减轻海马组织缺血再灌注损伤     

雌二醇对离体大鼠缺氧—复氧心脏的保护作用

本实验采用离体大鼠心脏灌注模型，观察雌二醇对缺氧－复氧心脏收缩功能及超微结构的影响。结果表明，雌二醇对缺氧－复氧心肌具有一定的保护作用，这一作用此雌激能相对提高缺氧－复氧心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶活性和相对降低其Ｃａ＾２＋含量有关。     

高血糖加重缺血性脑损伤

目的：探讨高血糖对脑缺血损伤的影响。方法：采用大鼠高血糖全脑缺血模型,用HE和TUNEL染色,对比检测脑细胞损伤和凋亡。结果：高血糖组在缺血再灌注后与血糖正常组相比,纹状皮质脑水肿和神经元变性、死亡明显加重;海马CA1区损伤神经元计数无显著性差异;海马CA3区损伤神经细胞数明显多于血糖正常组。TUNEL染色可见,在纹状皮质、海马CA1区和CA3区高血糖组和血糖正常组阳性细胞明显多于对照组;在缺血或再灌注后,正常血糖组和高血糖组的TUNEL阳性细胞数均无显著性差异。结论：高血糖可加重缺血引起的神经元损伤。     

Protective effect of estrogen in endothelin-induced middle cerebral artery occlusion in female rats

Estrogen is a powerful endogenous and exogenous neuroprotective agent in animal models of brain injury, including focal cerebral ischemia. Although this protection has been demonstrated in several different treatment and injury paradigms, it has not been demonstrated in focal cerebral ischemia induced by intraparenchymal endothelin-1 injection, a model with many advantages over other models of experimental focal ischemia. Reproductively mature female Sprague–Dawley rats were ovariectomized and divided into placebo and estradiol-treated groups. Two weeks later, halothane-anesthetized rats underwent middle cerebral artery (MCA) occlusion by interparenchymal stereotactic injection of the potent vasoconstrictor endothelin 1 (180 pmoles/2 μl) near the middle cerebral artery. Laser-Doppler flowmetry (LDF) revealed similar reductions in cerebral blood flow in both groups. Animals were behaviorally evaluated before, and 2 days after, stroke induction, and infarct size was evaluated. In agreement with other models, estrogen treatment significantly reduced infarct size evaluated by both TTC and Fluoro-Jade staining and behavioral deficits associated with stroke. Stroke size was significantly correlated with LDF in both groups, suggesting that cranial perfusion measures can enhance success in this model.     

美满霉素联合栀子苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察美满霉素联合栀子苷对大鼠缺血性脑损伤神经元凋亡的拮抗作用和对脑组织的保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、美满霉素组、栀子苷组和美满霉素联合栀子苷组。用线栓法建立大鼠右侧局灶性脑缺血再灌注模型,在体分别观察美满霉素和栀子苷单一和两者联合干预缺血性脑损伤。TTC染色观察脑梗死面积,H-E染色观察海马神经元形态学的变化,TUNEL染色观察凋亡情况。结果:美满霉素和栀子苷均能有效促进脑损伤后海马组织的恢复并能拮抗神经元的凋亡,与脑缺血再灌注组相比差异具有统计学意义;两者联合应用较单一使用具有较好的效果。结论:美满霉素联合栀子苷对缺血性脑组织具有保护作用并能有效拮抗神经元的凋亡。     

氯化血红素预处理对全脑缺血/再灌注大鼠海马神经元的保护作用

目的 研究氯化血红素对大鼠全脑缺血/再灌注后海马神经元的保护作用。方法 84只雄性Wistar大鼠采用4血管闭塞法制造大鼠全脑缺血模型,观察不同剂量氯化血红素对大鼠全脑缺血/再灌注后海马CA1区神经元形态学的影响,并应用流式细胞仪检测海马神经元凋亡率。结果 氯化血红素预处理组与缺血/再灌组相比海马神经元凋亡率下降,海马CA1区锥体细胞组织学分级明显降低,神经元密度明显升高(p<0.05)。而氯化血红素治疗组与缺血/再灌组相比无统计学意义(p>0.05)。结论 氯化血红素预处理对大鼠全脑缺血/再灌注后海马CA1区锥体神经元具有明显的保护作用。     

脑缺血大鼠脑血流量和微血管形态的定量分析

用生物微球法和图象分析法分别测量了大鼠脑缺血三小时和重灌流30分钟的脑血流量和脑微血管某些形态学参数。实验结果表明,重灌流后脑血流量只恢复到缺血前的80%,脑微血管壁增厚、管腔面积缩小。提示缺血后重灌流时脑微血管的这些变化是脑血流量不能完全恢复的一个原因。     

一氧化氮合酶抑制剂对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响

目的:观察一氧化氮(NO)和不同类型的一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对大鼠局灶性脑缺血损伤后的影响。方法:用线栓法复制大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)模型后注射氨基胍(AG)和N^G－硝基－L-精氨酸(L-NA),观察大鼠脑缺血后脑梗死体积和脑组织中NO、MDA含量和NOS、SOD活性的变化。结果:AG有明显的减轻局灶性脑缺血损伤作用;L-NA在缺血后1 h、6 h时给药,有保护作用,但在3 h时给药,无显著改变。结论:AG对局灶性脑缺血损伤有治疗作用;L-NA在不同时间给药,对脑缺血损伤也有明显治疗作用。     

MicroRNA-155对糖尿病大鼠脑缺血损伤血管再生的调控

目的:观察microRNA-155(miRNA-155)表达对糖尿病大鼠脑缺血损伤及CD31、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨miRNA-155对糖尿病加重脑缺血血管再生的调控作用。方法:SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,继而应用栓线法建立永久性局灶性脑缺血模型。随机分为5组:(1)假手术组(sham组);(2)脑缺血组(CI组);(3)糖尿病脑缺血组(DCI组);(4)糖尿病脑缺血+miRNA-155抑制物组(inhibitor组);(5)糖尿病脑缺血+阴性对照组(scramble组)。于缺血后24 h采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miRNA-155的表达水平;参照Zea-Longa 5分制行神经功能缺损评分;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测梗死体积;Western blotting检测血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1/CD31)、VEGF的表达水平。结果:糖尿病脑缺血+miRNA-155抑制物组大鼠脑缺血侧皮质区的miRNA-155表达水平显著低于糖尿病脑缺血组(P0.05)。miRNA-155表达下调可显著减少糖尿病脑缺血大鼠的神经功能缺损评分及脑梗死体积,但显著增加CD31表达水平与VEGF表达水平(均P0.05)。结论:miRNA-155对糖尿病加重脑缺血损伤血管再生有重要的调控作用,miRNA-155表达下调可显著减轻糖尿病大鼠脑缺血损伤。     

家兔急性不完全性脑缺血及重灌流的实验研究

采用低压低灌流方法造成家兔急性不完全性脑缺血60分钟,缺血后进行重灌流。检测了脑电图(EEG)、心输出量、平均动脉血压及脑静脉血乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)活性以及大脑皮质水、钠、钾及环核苷酸含量,观察组织形态学改变。实验结果表明通过低压低灌流成功地复制了兔急性不完全性脑缺血模型。其特点为EEG严重抑制、大脑皮质水、钠含量升高、LDH及CPK活性显著升高。并见脑组织出现脑水肿改变。重灌流期间EEG先有所恢复后严重抑制,LDH及CPK活性仍显著升高。大脑皮质cAMP含量进一步升高,水肿程度加重。组织形态学呈现明显的缺血性损伤尤以亚微结构更为严重,表明重灌流后组织损伤加重。作者分析了上述改变发生的可能机制。     

MK-801对大鼠局灶性脑缺血损伤时的脑保护作用

目的：在大脑中动脉闭塞后,血脑屏障通透性的改变,脑水肿和脑梗塞是最常见的病理变化。本实验观察了MK－801（dizocilpine,一种高效非竞争性NMDA受体拮抗剂）在大鼠大脑中动脉闭塞时的脑保护作用。方法：用插线法制作局灶性脑缺血模型后,测定血脑屏障通透性,脑含水量,缺血损伤面积和体积。结果：缺血组梗塞侧皮质EB含量为：（8．82±1．35）μgweiht,在缺血前30min加入MK－801组梗塞侧皮质伊文思蓝（EB）含量下降为：（5．14±1．20）μg／gweight（P＜0．01）,在缺血后30min加入MK－801组梗塞侧皮质EB含量下降为：（6．44±1．09）μg／gweight（P＜0.05）;缺血组梗塞侧脑含水量为：（80．29±2．44）％,在缺血前对30min加入MK－801组梗塞侧脑含水量下降为：（75．62±1．84）％（P＜0．01）,在缺血后30min加入MK-801组梗塞侧脑含水量下降为：（76．39±2．20）％（P＜0．01）;缺血组梗塞体积为：（495.75±55．91）mm3,在缺血前30min加入MK-801组梗塞体积下降为：（180．65±9．67）mm3（P＜0．01）,在缺血后则30min加入MK-801组梗塞体积下降为：（316.08±．93）mm3（P＜0．05）。结论：MK-801不仅可防止脑梗塞体积扩大,还可改善血脑屏障通透性和降低脑水肿,而具有脑保护作用。     

等容血液稀释对大鼠局灶性脑缺血作用的研究

以血液稀释治疗血栓栓塞性脑缺血为目的,采用大脑皮层局部血流量(rCBF)、脑组织含水总量以及脂质过氧化物含量(LPO)为重要指标,共71只大鼠的实验研究,结果表明:大脑局灶性缺血24小时后经血液稀释治疗2小时,血细胞压积由49.4±3.5%降至39.3±3.77%,rCBF增加19.95%(n=16,P<0.005),脑组织含水量及LPO含量,对照组与稀释组分别为81.39±1.56%(n=12),79.00±1.08%(n=13,P<0.001);645.57±106.72nmol/100mgpro(n=11),360.47±117.46nmol/100mgpro,(n=14,P<0.001)。提出血液稀释可增加rCBF,减轻脑水肿,降低LPO。     

Hepatocyte growth factor suppresses ischemic cerebral edema in rats with microsphere embolism

The present study was aimed at determining whether human recombinant hepatocyte growth factor (HGF) ameliorates cerebral edema induced by microsphere embolism (ME). Rats were injected with 700 microspheres (48 microm in diameter). Continuous administration of HGF at 13 microg/3 days/animal into the right ventricle was started from 10 min after embolism to the end of the experiment by using an osmotic pump. On day 3 after the ME, the rats were anesthetized, and their brains were perfused with an isotonic mannitol solution to eliminate constituents in the vascular and extracellular spaces. Thereafter, tissue water and cation contents were determined. A significant increase in tissue water content of the right hemisphere by ME was seen. This ME-induced increase in water content was associated with increases in tissue sodium and calcium ion contents and decreases in tissue potassium and magnesium ion contents of the right hemisphere. The treatment of the animal with HGF suppressed the increases in water and sodium and calcium ion contents, but not the decreases in potassium and magnesium ion contents. These results suggest that HGF suppresses the formation of ischemic cerebral edema provoked intracellularly in rats with ME.