异氟醚预处理延迟相对兔心肌缺血-再灌注损伤核因子-κB的影响

目的 探讨异氟醚预处理延迟相对心肌缺血-再灌注损伤的保护机制.方法 雄性新西兰兔30只,体质量2.0～2.5 ks.随机分成3组(n=10):假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、2.0%异氟醚预处理组(S组).C组吸入100%氧气2 h,24 h后仅行左冠脉套线而不阻断160 min,I/R组吸入100%氧气2 h,24 h后行左冠状动脉前降支阻断40 min,再灌注120 min;S组吸入2.0%异氟醚+100%氧气2 h,24 h后处理同I/R组.各组分别于左冠前降支阻断前20 min(TI)、左冠前降支阻断20 min(T2)、左冠前降支阻断40 min(T3)、心肌再灌注1 h(T4)、心肌冉灌注2 h(T5)五个时点抽取颈内动脉血ELISA法测血清IL-10和TNF-α水平.再灌注结束后观察心肌细胞超微结构的变化,免疫印记法测心肌核因子-κB(NF-κB)活性水平,同时用伊文思蓝和TTC染色法测心梗面积.计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,用SPSS 13.0统计学软件进行分析,组间采用方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 与I/R组比,S组IL-10明显升高(P<0.05),TNF-α明显降低(P<0.05),NF-κB表达降低(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05).结论 异氟醚预处理延迟相通过抑制心肌NF-κB的活性,调控炎性细胞因子平衡来减轻心肌缺血-再灌注损伤发挥保护作用.     

七氟醚预处理大鼠肾缺血-再灌注损伤中HSP70的表达及保护机制

目的 观察七氟醚预处理大鼠肾缺血-再灌注损伤模型中HSP70的表达变化,探讨其保护作用机制.方法 72只SD雄性大鼠随机分为对照组(C组)、缺血-再灌注组(I/R组)、七氟醚预处理组(S组),每组各三个时相(4、12、24 h).所有大鼠于实验结束时测定肾组织过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平及血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平.观察肾组织病理变化,免疫组化法检测大鼠肾组织热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达情况.结果.与C组比较,I/R组和S组HSP70表达均显著增加(P<0.05);与I/R组比较,S组HSP70表达在12 h达到高峰,并且显著高于I/R组;C组NF-κB几乎不表达,I/R组NF-κB表达显著增加(P<0.05),并且随再灌注时间的延长而增加;S组再灌注4、12、24 h NF-κB表达显著低于I/R组(P<0.05).与C组比较,I/R组和S组MDA显著升高而SOD显著降低(P<0.05);与I/R组比较,S组SOD显著升高而MDA显著降低(P<0.05);与C组比较,随再灌注时间的延长,I/R组和S组BUN、Cr均显著升高;与I/R组比较,S组12、24 h BUN、Cr均显著低于I/R组;S组肾损伤的病理变化较I/R组显著减轻.结论.七氟醚预处理能诱导肾缺血-再灌注大鼠模型HSP70的表达增强和提早表达,减弱NF-κB活化,增加肾缺血-再灌注后氧自由基的清除能力,实现对肾缺血-再灌注损伤的保护作用.     

异氟醚预处理延迟相对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨不同浓度异氟醚预处理延迟相对兔心肌缺血再灌注损伤的影响。方法30只健康新西兰雄性大白兔随机分成三组:1组:缺血再灌注组,行冠状动脉左前降支阻断40 min,再灌注120 min;2组:1.0%异氟醚预处理组,予以1.0%异氟醚 100%氧气持续吸入2 h后停止吸入异氟醚,于24 h后同1组处理;3组:2.0%异氟醚预处理组,予以2.0%异氟醚 100%氧气持续吸入2 h后停止吸入异氟醚,于24 h后同2组处理。各组分别于左冠前降支阻断前20 min(T1)、左冠前降支阻断20 min(T2)、左冠前降支阻断40 min(T3)、心肌再灌注1 h(T4)心肌再灌注2 h(T5)五个时点取颈内动脉血测定肌钙蛋白(cTnI)浓度。再灌注结束后观察心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及心肌细胞超微结构的变化。用伊文思蓝和TTC染色法测心梗面积,同时观察心肌细胞超微结构变化。结果①2组和3组肌钙蛋白增高程度低于1组(P<0.05)。②心肌梗死面积:2组(24.2%±2.1%)和3组(19.7%±2.8%)低于1组(37.8%±1.7%)(P<0.05)。③心肌细胞电镜观察显示预处理组心肌细胞损伤轻于对照组。④2组和3组MDA较1组降低(P<0.05),SOD较1组增高(P<0.05)。结论异氟醚预处理延迟相对兔心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

Akt／GSK-3β信号通路和线粒体渗透性转换孔在吸入性麻醉药预处理对老年大鼠心肌缺血保护的研究

目的Akt／GSK．3β信号通路的激活参与了吸人麻醉药心肌保护预处理。在该研究中观察了老年和成年大鼠在异氟醚心肌保护预处理中的差异,包括Akt／GSK-3β信号通路和线粒体渗透性转换孔在异氟醚预处理中的差异。方法雄性Fisher344大鼠按照各自的年龄,成年（3—5月）、老年（20～24月）,随机分配到阴性对照组（sc）、缺血再灌注组（I／R）、异氟醚组（ISO）中。ISO组,大鼠接受30min1．0MAC的异氟醚预处理。I／R组,大鼠接受30min的心肌缺血。方案A中,大鼠接受2h再灌注,用来检测梗死面积。方案B中,大鼠接受10min再灌注,用Westcrn来检测P-Akt,Akt,P—GSK-3β,GSK．3β的表达;并且用分光光度法分析组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）水平,作为反映线粒体渗透性转换孔（mPTP）开放的指标。结果成年组大鼠,异氟醚预处理组（YISO＋I／R）心肌梗死面积为29．9％±1．9％,明显低于缺血再灌注组（YI／R,51．8％±2．1％,P〈0．001）。而老年组大鼠,异氟醚预处理失去心肌保护作用（OISO＋I／R--39．9％4-3．7％VSOI／R=46．9％±2．5％,P〉0．05）。比较成年阴性对照组（YSC组）和成年缺血再灌注组（YI／R组）,异氟醚预处理显著提高了成年异氟醚组（YISO组）和成年异氟醚＋缺血再灌注组（YISO＋I／R组）的Akt和GSK-3B的磷酸化水平（P〈0．05）。但是老年组大鼠,Akt和GSK-39磷酸化水平已经在阴性对照组（osc组）提高（对比YSC组）。异氟醚预处理没有进一步提高老年异氟醚组（OISO组）和老年异氟醚＋缺血再灌注组（OISO＋I／R组）的Akt和GSK-3B的磷酸化水平（P〈0．05）。同样,异氟醚预处理减少了成年组大鼠心肌组织中NAD’的减少,而异氟醚预处理失去了对老年组大鼠的NAD＋流失保护作用。结论老年大鼠失去异氟醚预处理心肌保护作用,失去进一步提高Akt、GSK．3β的磷酸化水平能力和失去关闭mPTP是其机理之一。     

瘦素预处理和缺血预处理在小鼠心肌缺血/再灌注损伤中的心肌保护机制

目的 观察瘦素预处理和缺血预处理(IPC)对心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)模型小鼠的心肌保护作用,探讨瘦素参与的机制.方法 将36只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组:①假手术组(12只);②短暂缺血/再灌注(I/R)组(6只):缺血3 min后再灌注5 min,进行3个短暂的循环;⑨标准I/R组(6只):缺血30 min后再灌注120 min,④IPC组(6只):行3个短暂I/R循环后再进行标准I/R操作;⑤瘦素预处理组(6只):缺血前30min腹腔注射50μg/kg小鼠重组瘦素.假手术组和短暂I/R组分别于再灌注后0(RP刻)、5、30、120 min取血,动态监测血清瘦素水平;其余各组于再灌注后120 min处死小鼠,观察心肌梗死面积、心肌瘦素水平、髓过氧化物酶(MPO)活性,以及血清瘦素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平.结果 短暂I/R处理后5 min血清瘦素水平即较假手术组同期显著升高[(6.24±2.34)μg/L比(1.35±0.45)μg/L],30 min达峰值[(12.36±1.33)μg/L],之后逐渐下降,与假手术组水平同期比较差异无统计学意义[(1.96±1.33)μg/L比(1.16±0.25)μg/L,P＞0.05].与标准I/R组比较,瘦素预处理组与IPC组均可显著缩小梗死面积[(11.50±2.86)%、(9.00±1.90)%比(37.00±2.53)%],降低心肌瘦素[(8.36±3.42)μg/g、(6.71±2.03)μg/g比(15.51±3.92)μg/g]、MPO((17.10±3.95)μg/g、(13.33±2.88)μg/g比(30.83±4.06)μg/g]以及血清瘦素[(15.03±1.87)μ/L、(11.85±0.72)μg/L比(29.55±2.31)μg/L]、TNF-α[(35.10±10.12)ng/L、(27.04±5.18)ng/L比(81.34±14.20)ng/L]、IL-6[(167.39±72.83)ng/L、(149.13±37.69)ng/L比(477.30±29.09)ng/L]水平(均P＜0.01).结论 低剂量瘦素预处理可模仿经典的IPC以减轻MIRI,瘦素参与IPC的心肌保护机制可能与减轻炎症反应有关.     

七氟醚预处理早期对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞自噬的影响

目的探讨七氟醚预处理早期对大鼠心肌缺血再灌注心肌保护作用及对心肌细胞自噬的影响。方法清洁级雄性SD大鼠45只,8~12周龄,体质量200~240 g。随机分为假手术组(Sham组,n=15)、缺血再灌注组(I/R组,n=15)和七氟醚预处理组(Sevo组,n=15)。采用冠脉阻断30 min再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。Sevo组于缺血前30 min行七氟醚预处理:吸入2.5%七氟醚15 min,洗脱15 min。随后结扎左前降支,阻断冠脉血流30 min后,解除阻断再灌注120 min。再灌注120 min时测定肌钙蛋白I(c Tn I)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的浓度、心肌梗死面积、LC3-Ⅱ和Beclin-1的蛋白表达情况。结果与Sham组比较,I/R组心肌c Tn I和CK-MB浓度升高,心肌梗死面积增加,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达上调(P0.05);与I/R组比较,Sevo组心肌c Tn I和CK-MB浓度降低,心肌梗死面积减少(P0.05),LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。结论七氟醚预处理早期能减轻心肌缺血再灌注损伤,但是七氟醚预处理早期未显著影响心肌细胞自噬水平。     

七氟醚预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清NF-κB、TNF-α、IL-6表达的影响

目的探究七氟醚(SEVO)预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清核因子(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法雄性SD大鼠70只,随机分为7组(n=10):(1)Shame组(假手术组)。(2)I/R组(单纯缺血再灌注组)。(3)BW1组:缺血前注射NF-κB特异性激动剂灰树花β-葡聚糖BW1 1.0 mg/kg,30 min后进行缺血再灌注。(4)SEVO+NO组:缺血前先吸入SEVO 30 min后,停止吸入165 min,不进行缺血再灌注。(5)SEVO组:缺血前30 min吸入SEVO维持30 min。(6)BW1+SEVO组:缺血前先注射BW1,30 min后,吸入SEVO。(7)SEVO+BW1组:缺血前先吸入SEVO 30 min后,立即注射BW1。对于SEVO处理组,SEVO持续吸入30 min后,停止吸入15 min以排除SEVO,心肌缺血30 min后,再灌注2 h。比较各组麻醉后即刻、吸入SEVO 15 min、缺血前、缺血15 min、再灌注1 h、再灌注2 h时的心率(HR)、平均动脉压(MAP)、收缩压与心率的乘积(RPP)情况。采用三苯基四唑氯化物(TTC)染色法测定心肌危险区域梗死面积和梗死区域面积。30只大鼠随机分为3组,每组10只,Shame组、I/R组、SEVO组大鼠处理同上。再灌注2 h后,腹主动脉取血,采用放射性免疫法分别测各组血清NF-κB、TNF-α、IL-6水平。结果吸入SEVO 15 min时,SEVO-NO组、SEVO组、BW1+SEVO组、SEVO+BW1组的HR、MAP、RPP水平均显著低于麻醉后即刻水平(P0.05)。各组危险区面积差异无统计学意义(P0.05)。与I/R组相比,SEVO组和BW1+SEVO组梗死区面积显著减小(P0.05);与SEVO组相比,SEVO+BW1组梗死面积显著增加(P0.05)。与Shame组相比,I/R组NF-κB、TNF-α、IL-6水平显著增加(P0.05);与I/R组相比,SEVO组NF-κB、TNF-α、IL-6水平显著下调(P0.05)。结论七氟醚预处理,可减少大鼠心肌缺血再灌注后梗死面积,保证血流动力学稳定,并通过抑制NF-κB信号通路活性来抑制TNF-α、IL-6分泌,保护心脏以免于受缺血再灌注的损伤。     

异氟醚预处理对缺血/再灌注复合内毒素大鼠肝脏损伤的影响

目的 观察再灌注期腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)对大鼠肝脏缺血/再灌注(I/R)损伤的影响以及异氟醚(ISO)预处理的干预作用.方法 将32只SD大鼠随机均分为4组:假手术(Sham)组、单纯肝脏I/R组、肝脏I/R复合LPS损伤(I/R+LPS)组及ISO预处理组.I/R+LPS组吸氧预处理后间隔0.5 h进行肝脏缺血1 h、再灌注4 h,再灌注开始时腹腔内注入LPS;ISO预处理组以ISO吸入预处理0.5 h,间隔0.5 h后进行I/R损伤操作,再灌注开始时腹腔内注入LPS.再灌注4 h处死各组动物,留取肝脏及血液标本;观察各组肝组织病理学改变,血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化以及肝组织TNF-α、髓过氧化物酶(MPO)活性的改变.结果 与Sham组比较,损伤各组血清ALT、AST、TNF-α及肝组织TNF-α、MPO活性均显著升高(P均＜0.01);与I/R组比较,I/R+LPS组肝脏损伤和炎症细胞因子反应明显较重(P＜0.05或P＜0.01)l与I/R+LPS组比较,ISO预处理组肝脏的病理损伤明显较轻,血清ALT、AST、TNF-α水平及肝组织MPO活性和促炎细胞因子TNF-α的表达水平均显著降低(P均＜0.05).结论 再灌注期复合LPS腹腔注射明显加重了肝脏的损伤和炎症细胞因子反应,ISO预处理可明显减轻复合损伤介导的炎症反应,保护肝脏.     

脉络宁注射液对缺血／再灌注骨骼肌丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶的影响

目的 探讨脉络宁注射液对骨骼肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用机制.方法 用45只健康成年新西兰大耳白兔建立后肢骨骼肌I/R损伤模型.将动物随机分为对照组、I/R组和脉络宁组,每组15只.缺血后4 h,脉络宁组自耳缘静脉注射脉络宁注射液2 ml/kg,对照组及I/R组注射等量生理盐水,注射完毕后立即恢复血流灌注.各组于再灌注后2 h自术侧抽取股静脉血分离血清,测定丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 I/R组血清MDA含量明显高于对照组[(5.81±0.62)μmol/L比(3.67±0.39)μmol/L],GSH-Px活性明显低于对照组[(99.87±9.81)U比(123.49±12.12)U],差异均有统计学意义(P均＜0.01).脉络宁组血清MDA含量[(3.93±0.60)μmol/L]较I/R组明显降低,GSH-Px活性[(118.22±10.78)U]较I/R组明显升高(P均<0.01);且均接近对照组水平(P均＞0.05).结论 脉络宁注射液可降低MDA含量,增加GSH-Px活性,从而减轻I/R对骨骼肌的损伤.     

异氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨异氟醚后处理对不同年龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法将成年健康雄性SD大鼠18只和老年健康雄性SD大鼠18只采用随机数字表法随机分为3组,对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、异氟醚后处理组(Iso PP组)。建立Langendorff离体心脏灌注模型,C组持续灌注130 min;I/R组平衡灌注10 min后缺血30 min再灌注90 min;异氟醚后处理组平衡灌注10 min缺血30 min,随后用含有1.5%异氟醚的灌注液灌注15 min,随后再灌注75 min。于平衡灌注末、再灌注30 min和90 min时记录HR、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左心室压力上升最大速率(+dp/dtmax)和左心室压力下降最大速率(-dp/dtmax)。灌注结束后,取心尖部心肌组织1 mm3电镜下观察线粒体结构并评分,剩余心脏组织采用TTC染色法测定心肌梗死面积。结果在成年鼠中,与I/R组相比,异氟醚后处理组心肌再灌注后的心功能指标改善,心肌梗死面积减小,线粒体损伤减轻(P<0.05);在老年鼠中,与I/R组相比,异氟醚后处理组心肌再灌注后的心功能指标、心肌梗死面积以及线粒体损伤程度均无明显改变(P>0.05)。结论异氟醚后处理减轻了成年老鼠的心肌再灌注损伤,而未能减轻老年鼠心肌的再灌注损伤。     

地塞米松诱导金属硫蛋白表达对大鼠缺血/再灌注损伤心肌的保护作用研究

目的 探讨地塞米松诱导金属硫蛋白(MT)表达对大鼠缺血/再灌注(I/R)损伤心肌的延迟保护作用.方法 将32只SD大鼠随机分成地塞米松组和对照组,分别予腹腔注射地塞米松和蒸馏水预处理.预处理24 h后构建Langendorff离体心脏I/R动物模型,缺血30 min后再灌注60 min.用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测MT表达;动态观测缺血前及再灌注期间血流动力学指标[左心室发展压(LVDP)、左室内压上升和下降最大速率(±dp/dt max)、冠状动脉循环流出量(CF)]、心律失常的变化;测定心肌梗死面积、冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)漏出率、心肌丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌-SOD(CuZn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平及心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果 与对照组比较,地塞米松组MT的表达水平显著增加(3.085±1.065比1.028±0.016,P＜0.05);再灌注期间LVDP、±dp/dt max及CF均得到明显改善(P均＜0.05);再灌注性室性心律失常评分明显减少[(2.00±1.41)分比(6.63±4.24)分,P＜0.05];心肌梗死面积明显缩小[(28.38±11.22)%比(47.39±8.30)%,P＜0.01];冠状动脉流出液CK-MB的漏出率明显降低[(8.69±4.16)U/g比(18.15±5.59)U/g,P＜0.01];心肌组织MDA含量降低(P＜0.05),T-SOD、CuZn-SOD、CAT、GSH-Px均明显升高(P＜0.05或P＜0.01);心肌细胞膜的Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性增加(P＜0.01和P＜0.05).结论 地塞米松可能通过上调MT的表达,对大鼠I/R损伤心肌起到延迟保护作用.     

Volatile anesthetic preconditioning attenuates myocardial apoptosis in rabbits after regional ischemia and reperfusion via Akt signaling and modulation of Bcl-2 family proteins

We tested whether isoflurane preconditioning inhibits cardiomyocyte apoptosis and evaluated the role of the phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)/Akt pathway in anesthetic preconditioning and determined whether PI3K/Akt signaling modulates the expression of pro- and antiapoptotic proteins in anesthetic preconditioning. Six-month-old New Zealand rabbits subjected to 40 min of myocardial ischemia followed by 180 min of reperfusion were assigned to the following groups: ischemia-reperfusion (I/R), isoflurane preconditioning and isoflurane plus PI3K inhibitors, wortmannin and 2-(4-morpholinyl)-8-phenyl-4H-l-benzopyran-4-one (LY294002) (0.6 and 0.3 mg/kg i.v., respectively). Sham-operated, wortmannin+I/R, wortmannin+sham, LY294002+I/R, and LY294002+sham groups were also included. Infarct size was assessed by triphenyltetrazolium chloride staining. Apoptosis was evaluated by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling and activated caspase-3 assays. Akt phosphorylation, Bax, Bcl-2, Bad, and phosphorylated Bad (phospho-Bad) expression was assessed by immunoblotting. Isoflurane preconditioning reduced infarct size compared with the I/R group: 22+/-4 versus 41+/-5% (p<0.05). The percentage of apoptotic cells decreased in the isoflurane group (3.8+/-1.2%) compared with the I/R group (12.4+/-1.6%; p<0.05). These results were also confirmed by the activated caspase-3 assay. Wortmannin and LY294002 inhibited the effects of isoflurane. Myocardial infarction increased to 44+/-3 and 45+/-2% and the percentage of apoptotic cells was 11.9+/-2.1 and 11.7+/-3.3%, respectively. Akt phosphorylation and Bcl-2 and phospho-Bad expression increased after isoflurane preconditioning, whereas Bax expression decreased. These effects were inhibited by wortmannin and LY294002. The data indicate that isoflurane preconditioning reduces infarct size and myocardial apoptosis after I/R. Activation of PI3K and modulation of the expression of pro- and antiapoptotic proteins may play a role in isoflurane-induced myocardial protection.     

克罗卡林及优降糖对实验性急性心肌梗死的影响

目的：研究克罗卡林及优降糖对心肌梗死面积及梗死部位心肌细胞三磷酸腺苷（ＡＴＰ）含量的影响。方法：以Ｗｉｓｔａｒ大鼠为模型,开胸安置缺血－再灌注装置,将大鼠分为４组,Ａ组未作特殊处理;Ｂ组阻断冠状动脉（冠脉）１小时,再灌注２小时;Ｃ组冠脉阻断前０．５小时静注克罗卡林１００μｇ／ｋｇ,Ｄ组冠状阻断前０．５９胸注克罗卡林１００μｇ／ｋｇ,接着予优降糖０．３ｍｇ／ｋｇ。各组动物经上述处理后,抽股静脉血侧肌     

Effect of naloxone on expression of Bcl-2 protein and tumor necrosis factor-alpha in rats with acute myocardial ischemia/reperfusion injury]

OBJECTIVE: To investigate the effect of naloxone on myocardial cell apoptosis and apoptosis-related gene Bcl-2 in rats with acute myocardial ischemia/reperfusion (AMIR) injury, and explore the mechanism of protective effect of naloxone on myocardium. METHODS: Thirty SD rats were randomly divided into three groups (n=10): ischemia/reperfusion group, naloxone preconditioning group (naloxone was injected intraperitoneally 10 minutes before ischemia and 2 hours after reperfusion), and normal control group. The left anterior descending branch (LAD) of rat coronary artery was tied and untied in ischemia/reperfusion group and naloxone preconditioning group to establish the AMIR model in rats. The animals were then sacrificed and hearts were harvested. The expression of Bcl-2 protein was observed by immunohistochemical technique. Radioimmunoassay (RIA) was used to determine tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) in serum. RESULTS: In the normal control group, there was no Bcl-2 expression and TNF-alpha level was (0.39+/-0.06) mug/L. Higher expression of Bcl-2 and increased TNF-alpha levels were found in ischemia/reperfusion group. The expression of Bcl-2 protein increased significantly [(+++) vs. (+)], and TNF-alpha was significantly lower in naloxone preconditioning group than those in the normal control group [(0.55+/-0.12) microg/L vs. (0.86+/-0.11) microg/L, P<0.01]. CONCLUSION: Naloxone can protect myocardium from AMIR injury by inhibiting the apoptosis of cardiomyocytes induced by TNF-alpha and up-regulating protein expression of bcl-2 gene.     

远程缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨远程缺血预处理(RIPC)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤的影响。方法SD雄性大鼠70只,随机分组,每组10只。对照组仅行单纯缺血后再灌注;RIPC组按RIPC与脑缺血间隔时间不同分为30min及1、2、12、24和48h组,即反复3次夹闭双侧股动脉造成肢体缺血5min、再灌注5min后,分别间隔30min及1、2、12、24和48h后,行大脑中动脉栓塞(MCAO)120min、再灌注24h。对各组动物进行神经功能缺损评分,然后行氯化三苯四唑(TTC)染色,计算脑梗死容积。结果与对照组比较,RIPC1、2和24h组神经功能缺损评分显著下降,差异有显著性(P均<0.05);而RIPC30min、12h和48h组与对照组比较差异均无显著性(P均>0.05)。脑梗死容积百分比RIPC1h组〔(17.9±7.5)%,P=0.016〕、2h组〔(18.3±11.2)%,P=0.019〕和24h组〔(20.2±11.9)%,P=0.047〕均明显小于对照组〔(30.5±9.8)%〕;而RIPC30min、12h和48h组与对照组比较差异无显著性(P均>0.05)。结论RIPC对大鼠局灶性脑I/R损伤有保护作用,其保护时程为预处理后1～2h,24h后再次出现。     

HSP70在无创性肢体缺血预适应中对心肌的保护作用

目的探讨无创性肢体缺血预适应对心肌梗死后心肌细胞凋亡及HSP70表达的影响。方法将健康成年雄性Wistar大鼠48只,随机平均分成4组:对照组(C),缺血再灌注组(I/R),经典缺血预适应组(IP),远程缺血预适应组(NDLIP)。各组分别在心肌梗死,再灌注过程中记录心电,再于实验末测定血清肌酸激酶(CK),肌酸激酶同工酶(CKMB),最后取心脏以免疫组化法检测热休克蛋白70(HSP70),以TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,行心脏缺血范围(AAR)和梗死范围测定(IA),并计算梗死范围与缺血范围(IA/AAR)的比值。结果 (1)CK和CKMB:远程预适应组同经典预适应组的血清CK和CKMB值与缺血再灌注组相比明显下降(P<0.05);(2)心肌梗死面积(坏死区占缺血范围心肌重量的百分比):远程预适应组同经典预适应组的心肌梗死面积与缺血再灌注组相比明显下降(P<0.05);(3)凋亡率:远程预适应组同经典预适应组的凋亡率与缺血再灌注组相比明显下降(P<0.05);(4)HSP70:远程预适应组同经典预适应组的HSP70表达与缺血再灌注组相比表达增强(P<0.05)。结论远程缺血预适应同经典缺血预适应一样对大鼠心肌具有保护作用,其保护机制可能部分通过上调热休克蛋白以降低心肌细胞凋亡实现。     

强力霉素预处理减轻在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤及基质金属蛋白酶-1/9的表达

目的 观察强力霉素预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤时基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和MMP-9表达的影响.方法 64只体重300～350 g的健康雄性SD大鼠被随机分为假手术组(n=16)、I/R组(n=24)和强力霉素预处理组(n=24).分别观察在体大鼠心肌缺血60 min再灌注120 min后的心肌I/R损伤,以及强力霉素预处理对其心功能、血浆肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平及心肌组织髓过氧化物酶(MPO)活性的影响;以免疫组化法检测心肌细胞MMP-1和MMP-9的蛋白表达.结果 心肌再灌注120 min时,I/R组左室收缩压(LVSP)、左室压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)均较假手术组显著下降,左室舒张末压(LVEDP)、血浆CK和LDH以及心肌组织MPO活性均显著升高,且MMP-1和MMP-9的蛋白表达明显增强(P＜0.05或P＜0.01).而强力霉素预处理组心功能各项指标以及血浆CK、LDH均明显改善,MMP-1和MMP-9的蛋白表达均明显受抑,与I/R组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 强力霉素预处理在减轻在体大鼠心肌I/R损伤的同时,还可抑制MMP-1和MMP-9的蛋白表达.     

细胞凋亡的线粒体信号通路在大鼠缺血延迟预适应抗心肌细胞凋亡机制中的作用

目的：以细胞凋亡的线粒体途径为切入点,探讨心肌缺血延迟预适应抑制心缺血再灌注（MI/R）后细胞凋亡的可能机制.方法：SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、延迟缺血预处理组.缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1h,再灌1h.延迟缺血预处理组采用缺血5min,再灌5min,反复循环3次,24h后缺血1h,再灌1h.流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,进行细胞色素C（CytC）和凋亡诱导因子（AIF）的Western blotting分析及Caspase-3活性测定,并利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌HSP70的表达.结果：与缺血再灌注组相比较,心肌缺血预处理24h后可以减少MI/R后心肌细胞凋亡率,抑制CytC和AIF自线粒体向胞浆的释放及caspase-3的活化,上调HSP70蛋白表达.结论：心肌缺血延迟预适应可以减少MI/R造成的细胞凋亡,机制与其诱导HSP70的生成,抑制细胞凋亡的线粒体信号转导途径有关.