脑卒中后抑郁大鼠海马齿状回5-羟色胺1A受体的表达

目的 观察脑卒中后抑郁(PSD)大鼠海马齿状回5-羟色胺1A(5-HT1A)受体的表达.方法 将SD雄性大鼠分为正常对照组、卒中组、应激抑郁对照组和PSD组,每组6只.应用左侧大脑中动脉阻塞(MCAO)联合不可预见的慢性温和应激(CMS)刺激及孤养法建立PSD大鼠模型,采用荧光实时定量聚合酶链反应和Western印迹法检测并比较各组大鼠CMS第19天和第28天齿状回5-HT1A受体(mRNA)和蛋白表达水平.结果 (1)CMS第19天,PSD组5-HT1A受体mRNA表达(O.012±0.001)低于正常对照组(0.361±0.010)和卒中组(0.039±0.002;P＜0.001);其5-HT1A受体蛋白表达(0.400±0.030)低于正常组(1.320±0.060)和卒中组(0.610±0.060;均P＜0.001).(2)CMS第28天,PSD组5-HT1A受体mRNA(0.013±0.001)低于正常对照组(0.336±0.011)、卒中组(0.063±0.006;均P＜0.001);其5-HT1A受体蛋白表达(0.080±0.020)低于正常组(0.620 ±0.030)、卒中组(0.260±0.040)和应激抑郁组(0.320±0.020;均P＜0.001).结论 PsD大鼠海马齿状回5-HT1A受体表达水平降低,此改变可能是PSD发病的分子机制之一.     

大鼠颅脑损伤后损伤脑组织Nogo-A及其受体的表达变化

目的探讨Nogo—A及其受体（NgR）在大鼠颅脑损伤后损伤脑组织的表达变化。方法将136只SD大鼠按随机数字表法分成对照组、假损伤组、轻型颅脑损伤组、中型颅脑损伤组、重型颅脑损伤组,采用自制改良的Feeney’s自由落体装置制作大鼠颅脑损伤模型;伤后12h、24h、3d、7d和14d采用免疫组化染色法检测损伤脑组织中Nogo—A和NgR蛋白的表达。结果伤后各时间点,各型颅脑损伤组Nogo—A表达水平均明显高于假损伤组（P〈0.05）;重型、中型、轻型颅脑损伤组之间Nogo—A表达均有显著差异（P〈0．05）。而NgR的表达水平则在伤后3、7、14d各型颅脑损伤组才明显高于假损伤组（P〈0．05）,各损伤组之间也有统计学差异（P〈0．05）。结论Nogo—A和NgR在不同程度的损伤脑组织中表达差异显著,且有各自的表达规律。     

雌激素对脑卒中后抑郁大鼠蓝斑c-fos表达的影响

目的：探讨雌激素对脑卒中后抑郁（PSD）大鼠蓝斑c-fos基因表达的影响，以期揭示雌激素在PSD的中枢调控机制。方法：雌性SD大鼠30只，经Open-Field行为学评分随机分成对照组、PSD组和雌激素治疗组，所有大鼠均行卵巢切除术（去卵巢）。对照组为常规喂养；PSD组去卵巢后7d，采用线栓法制备局灶性脑缺血并结合孤养、束缚应激制成PSD大鼠模型；雌激素治疗组对去卵巢后的PSD大鼠模型皮下包埋雌激素释放管（17β-雌二醇维持在生理浓度）。观察雌激素对PSD大鼠自发性行为和蓝斑c-fos表达的改变。结果：与对照组比较，PSD大鼠旷场实验中水平和垂直得分明显减少，蓝斑c-fos表达明显增加。与PSD组比较，雌激素治疗组能增加大鼠在旷场实验中得分，蓝斑c-fos表达减少。结论：雌激素对PSD大鼠的脑保护作用可能与下调c-fos基因表达有关。     

pcDNA3/NT-3真核表达载体的构建及其表达

目的构建大鼠神经营养因子3（NT-3）基因真核表达载体并观察其在真核细胞内的表达情况。方法采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术从大鼠脑组织总RNA中扩增NT-3基因cDNA序列,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以阳离子脂质体Li-pofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和western blot鉴定NT-3在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为822bp的特异片段,重组质粒pcDNA3/NT-3酶切后产生822bp和5.2kb的片段,DNA测序证实822bp片段的碱基序列与大鼠NT-3基因序列完全一致,成功构建了pcDNA3/NT-3重组质粒。将其转染真核细胞后,免疫细胞化学、western blot结果表明NT-3能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒载体pcDNA3/NT-3,为后续的研究奠定基础。     

雌激素对脑卒中后抑郁大鼠抑郁行为学及前额叶BDNF表达的影响

目的:探讨雌激素对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠的影响及分子机制.方法:应用大脑中动脉栓塞和慢性不可预见温和刺激方法制备大鼠PSD模型.将PSD大鼠分为雌激素组(PSD大鼠皮下注射雌二醇),PSD组(PSD大鼠皮下注射大豆油)和对照组(假手术,皮下注射大豆油).3组的不同干预均持续14 d.观察各组大鼠行为学和前额叶脑源性生长因子(BDNF)的含量改变.结果:雌激素组在雌二醇干预后强迫游泳测试结果表明行为学显著改善:不动时间减少,与PSD组比较(18.4±4.84 vs 52.1±5.38)差异有显著统计学意义(P<0.01),雌激素组挣扎时间增加,与PSD组比较(63.8±12.31 vs 36.3±5.22)差异有统计学意义(P<0.05).前额叶BDNF含量在雌激素组也显著增高:雌激素组与PSD组比较,P<0.05;PSD组与对照组比较,P<0.01.结论:雌激素可能通过BDNF通路改善PSD大鼠的抑郁症状.     

脑卒中后抑郁

国外关于脑卒中后抑郁(PSD)的研究始于20世纪70年代。80年代后随着人们对生活质量要求的提高,以及神经影像学的发展,PSD的研究取得了很大的进展,但有许多争议性的问题尚未解决。我国在这方面的研究明显滞后,直到近几年来国内文献才陆续出现相关报道,并且缺乏系统性、规模性的调查研究。现就目前PSD研究的一些进展以及尚需进一步澄清的诸多问题作一综述。     

脑卒中后抑郁

卒中后抑郁(poststroke Dopressian,PSD)是常见的脑血管并发症,随着脑卒中发病率明显的升高,由此而产生的精神问题也日益增多,但脑卒中后抑郁的表现尚未能引起临床医师的足够重视。为此,现将脑卒中后抑郁的现状综述如下。1 临床特征与诊断 由于脑卒中后抑郁没有特异的生物学指标,而脑卒中的急性期往往伴有意识障碍和失语,康复期又可能有智能障碍,故使脑卒中后抑郁的诊断易被忽略,导致漏诊。 脑卒中后抑郁的症状群与原发性抑郁病人的临床特征极为相似。Starkstein等根据DSM-Ⅲ标准将脑卒中后抑郁     

BDNF及其受体TrkB mRNA在脑缺血后适应大鼠模型中的表达变化

目的检测脑源性性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)在脑缺血后适应大鼠模型再灌注不同时间窗的表达,探讨BDNF/TrkB在脑缺血后适应中的作用。方法 Wistar大鼠随机分成对照组、缺血-再灌注组(IR)和缺血后适应组(IP),后两组根据再灌注时间的不同各分为6h、12h、24h、48h、72h 5个亚组。线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注模型。TTC染色测定脑梗死体积,原位杂交法检测BDNF/TrkB mRNA的表达。结果 IP组大鼠梗死体积较IR组明显减小(P0.05)。IP组各时间点BDNF mRNA及TrkB mRNA表达较IR组均明显升高(P0.05)。结论脑缺血后适应能增加脑缺血-再灌注后BDNF及TrkB的表达,减轻脑梗死体积,BDNF/TrkB在脑缺血后适应后脑缺血-再灌注损伤中发挥了重要保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注后Nogo-A及其受体mRNA和蛋白表达的变化

目的探讨脑缺血再灌注后大鼠缺血中心区及周围区大脑皮质髓鞘相关的抑制分子Nogo-A及其受体NgR的mRNA和蛋白表达的变化规律及意义。方法采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,分为假手术对照组、缺血2h再灌注6h、12h、24h、48h、72h、7d和14d组．通过HE染色进行病理观察,逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测mRNA,免疫组织化学的方法检测蛋白表达,观察脑缺血再灌注后缺血中心区及周围区大脑皮质Nogo-A及其受体NgR的变化。结果Nogo-A mRNA及蛋白表达在缺血中心区6h即有下降(与对照组相比,P＜0．05),并随再灌注时间延长表达逐渐减少,24h降低最为明显并持续至14d；而缺血周边区,再灌注48h前无显著性变化．72h表达增加(与对照组相比,P＜0．05),7d增加更为显著,14d降至正常。NgR mRNA及蛋白表达在缺血中心区再灌注6h后开始下降(与对照组相比,P＜0．05),48h降低最为明显；而缺血周围区NgR mRNA及蛋白表达在各个时间点无显著变化(P＞0．05)。结论脑缺血后灶周Nogo-A mRNA及蛋白表达增加持续至再灌注后7d以上,针对其表达的规律进行干预可能成为脑梗死后改善轴突生长的有效措施；灶周NgR的表达无显著变化,显示Nogo-A的作用尚有其他受体介导。     

BDNF和NT-3在糖尿病周围神经病大鼠肌肉中的表达

目的观察链脲佐菌素(Streptozotocin STZ)诱导的糖尿病周围神经病大鼠腓肠肌脑源性神经生长因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)的mRNA表达。方法用STZ复制Wistar大鼠糖尿病周围神经病模型。成模8周、12周麻醉后处死大鼠,提取腓肠肌组织RNA,应用RT-PCR半定量方法检测其BDNF及NT-3mRNA含量。结果糖尿病周围神经病组大鼠腓肠肌BDNF的mRNA含量明显高于正常对照组(P<0.01),12周糖尿病周围神经病大鼠组明显高于8周糖尿病周围神经病大鼠组(P<0.01);腓肠肌NT-3的mRNA含量各组间无显著性差异(P>0.05)。结论糖尿病周围神经病大鼠腓肠肌组织BDNF的mRNA含量随着病程逐渐增加,而NT-3的mRNA含量无明显变化,二者在糖尿病周围神经病中发挥不同作用。     

西酞普兰对脑卒中后抑郁大鼠海马齿状回5-羟色胺1A受体表达的影响

目的 观察西酞普兰对拟脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)大鼠海马齿状回5-羟色胺1A(5-HT1A)受体表达的影响,探讨其治疗PSD可能的药理机制.方法 将雄性SD大鼠分为3组正常对照组、拟PSD组和西酞普兰干预组.左侧大脑中动脉阻塞(MCAO)联合慢性不可预见温和应激刺激(CMS)及孤养法建立拟PSD动物模型,同时予西酞普兰(10 mg·kg-1·day-1)干预4周,荧光实时定量PCR和Western印迹方法检测并比较CMS开始后第19、28天各组大鼠海马齿状回5-HT1A受体的基因(mRNA表达水平)和蛋白表达水平.结果 CMS开始后第19天,西酞普兰组5-HT1A受体的基因和蛋白表达均高于拟PSD组[(0.131±0.008)vs(0.012±0.001)和(0.95±0.06)vs(0.40±0.03),P均小于0.001].第28天,西酞普兰组5-HT1A受体的基因和蛋白表达均高于拟PSD组[(0.224±0.012)vs(0.013±0.001)和(0.52±0.06)vs(0.08±0.02),P均小于0.001].结论 西酞普兰促进拟PSD大鼠海马齿状回5-HT1A受体的基因和蛋白表达,从而可促进海马神经重塑,这可能为西酞普兰治疗PSD的分子机制之一.     

脑卒中后抑郁障碍

近 1 0年来 ,脑卒中后抑郁障碍 (post- strokedepression,PSD)已引起国内神经科医师的关注 ,本文对此作一综述。作者单位 :2 10 0 2 9　南京医科大学附属脑科医院1　命名目前比较混乱 ,如脑卒中后抑郁[1] ,脑卒中后重性抑郁 [2 ] ,脑血管病后抑郁 [3] ,脑卒中后抑郁症 [4 ] ,脑卒中后抑郁性神经症[2 ] ,脑卒中后抑郁状态[5] ,脑中风后抑郁情绪 [6] ,脑卒中后的抑郁障碍 [7] ,脑卒中后的抑郁症状 [8] ,脑血管意外伴发抑郁症状群[9] ,脑血管意外后抑郁症状群 [10 ]等。2　发生率脑卒中后抑郁障碍的发生率大约为 30 %～70 % [2、3、7、9] 。…     

大鼠短暂性脑缺血后葡萄糖转运子3表达变化

目的 研究大鼠短暂性脑缺血葡萄糖转运子3（GLUT3）转录水平表达规律。方法 用插线法建立大鼠短暂性脑缺血模型。剥取缺血半暗带及中心区皮质组织,采用半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）,测定不同再灌注时间GLUT3mRNA水平的变化。结果 再灌注3h缺血半暗区GLUT3mRNA3h升高,48h达到高峰,再灌注1周后仍高于正常。结论 再灌注后,缺血半暗带GLUT3的表达明显上调,有可能是机体抗损伤性反应。     

脑卒中后抑郁状态

近十多年来,脑卒中患者的精神卫生问题已引起临床医生的普遍关注。本文拟对脑卒中后抑郁状态的研究现状作一概述。发生率及临床表现采用 DSM—Ⅲ/RDC 诊断标准研究表明,住院脑卒中患者的卒中后抑郁(PSD)发     

脑卒中后抑郁患者血清皮质醇含量的变化

卒中后抑郁（PSD）是一种继发于脑卒中后的情感障碍性疾患,文献报道其发病率达20%～50%[1].本文就PSD神经内分泌方面变化异常分析如下.     

颞叶癫大鼠海马轴突导向分子Sema3F及其受体Np2表达的变化

目的 研究颞叶癫(癎)大鼠海马轴突导向分子Sema3F及其受体Np2表达的变化.方法 给SD大鼠腹腔注射匹罗卡品、氯化锂制作颞叶癫(癎)模型.用免疫组化法和原位杂交技术对致(癎)后不同时间点大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回的Sema3F mRNA、Np2 mRNA和蛋白表达进行检测,并与正常对照组比较.结果 颞叶癫(癎)大鼠致(癎)后7 d、15 d,海马CA1区、CA3区Sema3F mRNA、Np2 mRNA和蛋白的表达明显低于正常对照组(P＜0.05～0.01), 致(癎)后30 d、60 d表达与正常对照组差异无统计学意义;而齿状回Sema3F mRNA、Np2 mRNA和蛋白的表达与正常对照组的差异无统计学意义.结论 颞叶癫(癎)大鼠海马CA1区、CA3区Sema3F、Np2表达在致(癎)后早期明显下调,而在慢性期恢复正常.     

人重组NT-3基因体外转染胚胎干细胞及其表达

目的 探讨神经营养素-3(NT-3)基因体外转染小鼠胚胎干细胞(ES)的可能性及其表达情况.方法 用脂质体介导的方法,将重组真核表达载体PCDNA-3.1(+).NT-3瞬时转染ES.用细胞免疫组化及RT-PCR检测转染细胞NT-3蛋白及mRNA表达.ELISA检测细胞分泌上清液中NT-3蛋白表达.结果 细胞免疫组化结果显示,转染NT-3基因的ES细胞胞浆呈红色染色;RT-PCR得到200 bp的基因片段;ELISA检测细胞分泌上清液中NT-3蛋白表达呈阳性,与对照组有显著差别(P＜0.05).结论 重组真核表达载体PCDNA-3.1(+).NT-3可成功转染ES,获得稳定表达NT-3的ES细胞株.     

糖尿病脑梗死大鼠血管内皮生长因子及其受体表达水平的变化

目的 研究糖尿病脑梗死(DMCI)早期半暗带等值区血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(FLT-1,FLK-1)表达水平的变化.方法 建立DMCI大鼠模型,在脑缺血后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h,采用原位杂交方法测定大鼠大脑缺血半暗带等值区VEGF、FLT-1、FLK-1 mRNA的表达水平;并与无糖尿病的脑梗死(NDMCI)大鼠比较.结果 DMCI组在脑缺血后各时间点脑缺血半暗带等值区VEGF mRNA的表达水平均显著低于NDMCI组(P＜0.05～0.01),FLK-1 mRNA表达水平在脑缺血后12 h显著低于NDMCI组(P＜0.01),FLT-1 mRNA表达水平在脑缺血后各时间点(除6 h)与NDMCI组差异无统计学意义.结论 DMCI早期VEGF和FLK-1 mRNA表达水平降低,这可能是DMCI血管、神经病变重的原因之一.     

大鼠代谢型谷氨酸受体1亚型基因片段的克隆及其在小脑的表达

目的：克隆大鼠代谢型谷氨酸受体1亚型（mGluR1)基因特异片段，制备cDNA探针。方法：从Wistar大鼠小脑中提取总RNA，以RT－PCR方法得到预期的599bp条带，将这一片段克隆到pGEM-T easy载体上，经酶切鉴定正确后送测序。将重组质粒经限制性内切酶酶切制备成线性模板，通过体外转录的方法 合成地高辛标记的mGluR1cRNA正义及反义探针。取成年Wistar大鼠小脑组织进行原位杂交实验，以检测探针的可靠性。结果：测序证实用RT－PCR的方法获得了mGluR1基因特异片段，成功地构建了pGEM-TmGluR1重组质粒。根据斑点杂交实验结果计算出正义、反义探针浓度分别为10ng/μl及30ng/μl。原位杂交实验的结果显示，用mGluR1反义探针进行杂交的阳性信号主要分布在大鼠小脑蒲肯野氏细胞胞浆，用正义探针杂交无阳性信号。结论：本实验克隆了mGluR1基因特异片段，并制备了cRNA探针，并用大鼠小脑进行的原位杂交实验显示，此探针灵敏度高，特异性好。     

脑卒中后抑郁患者血浆皮质醇变化的初步观察

脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)系指发生于脑卒中后经相关量表测定证实存在抑郁情绪或处于抑郁的状态,是急性脑卒中后的常见并发症之一。其发生率国内文献报道为22%～61%犤1犦,即约有半数的脑卒中患者在疾病过程中出现需要治疗的情绪低落、失眠、食欲减退或暴饮、暴