毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查中的应用

目的:探讨毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血早期筛查中的应用价值。方法:运用毛细管电泳技术对4 137份新生儿脐血标本进行Hb Bart's定量分析,对阳性标本(含Hb Bart's、Hb H及异常血红蛋白区带)召回做PCR地中海贫血基因分析。结果:4 137份新生儿脐血标本共筛查出阳性病例229例,阳性率5.5%;对召回复查的阳性病例121例全部进行了地贫基因分析,其中(-α3.7/αα)22例,(-α4.2/αα)8例,(--SEA/αα)74例,(--SEA/αα)/(41-42/N)1例,(-α3.7/--SEA)1例,(--SEA/-α4.2)2例,共108例,阳性率为89.3%。结论:毛细管电泳筛查脐血Hb Bart's与α-地中海贫血PCR基因诊断符合率较高。应用Hb毛细管电泳技术筛查α-地中海贫血简便、快速、经济并能实现早期初诊,值得推广应用。     

新生儿脐血血红蛋白电泳对α-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断的价值

目的研究脐血血红蛋白电泳在α-珠蛋白生成障碍性贫血及异常血红蛋白病中的诊断价值,了解东莞厚街地区新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率、基因类型和异常血红蛋白种类。方法用脐血标本进行血红蛋白电泳,对电泳区带进行扫描定量分析,对检出HbBart's带的标本进行α-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断。结果2369例脐血标本共检出HbBart's带的标本有92例,携带率为3.88%;经基因诊断为α-珠蛋白生成障碍性贫血的有87例,其中--SEA/69例占79.3%,-α3.7/12例占13.8%,-α4.2/6例占6.9%;检出异常血红蛋白病11例占0.46%。2369例标本中母亲为α-珠蛋白生成障碍性贫血基因携带者,新生儿脐血检出HbBart's带的有16例。结论脐血血红蛋白电泳对新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血及异常血红蛋白病的筛查和诊断是一种简便、有效的方法。     

干血斑毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查中的应用

目的:探讨基于干血斑的毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查中的应用价值。方法:新生儿出生48~72 h从足跟内或外侧采血4滴制成干血斑,利用毛细管电泳技术对干血斑中Hb Bart’s进行定量分析,对阳性标本(含Hb Bart’s)进行地中海贫血基因诊断;同时,抽取筛查阴性100例进行α-地中海贫血基因诊断。结果:共筛查新生儿干血斑标本58 150例,筛查出α-地中海贫血阳性2 635例,阳性率4.53%;对召回复查的271例初筛阳性病例进行地贫基因诊断,其中αCSα/αα26例、αQSα/αα5例、--SEA/αα184例、(--SEA/αα)/(-28/N)1例、(--SEA/αα)/(17/N)1例、(--SEA/αα)/(41-42/N)4例、--SEA/αWSα3例、(--SEA/αα)/(654/N)1例、-α3.7/-α3.7 1例、-α3.7/αα4例、-α3.7/αCSα1例、-α3.7/αWSα1例、--SEA/-α3.7 9例、-α3.7/-α4.2 2例、-α4.2/αα2例、αα/αα26例,阳性共245例,阳性率90.41%。100例筛查阴性者中,发现地贫基因携带者2例,其中-α3.7/αα1例、-α4.2/αα1例,均为静止型,假阴性率为2.00%。结论:利用毛细管电泳技术对新生儿干血斑中Hb Bart’s进行定量分析,对新生儿α-地中海贫血筛查准确性高。利用干血斑替代脐血进行新生儿α-地中海贫血筛查,标本运输和保存更方便,更利于此项目的广泛开展和新生儿疾病筛查的管理,值得广泛推广应用。     

血细胞分析鉴别珠蛋白生成障碍性贫血与缺铁性贫血的价值

目的 探讨血细胞分析鉴别诊断成人珠蛋白生成障碍性贫血与缺铁性贫血的价值。方法 选取2020年2月—2021年2月福建医科大学附属泉州第一医院收治的珠蛋白生成障碍性贫血成人患者150例与缺铁性贫血成人患者205例,为其开展红细胞（red blood cell,RBC）、血红蛋白（hemoglobin,Hb）、平均红细胞比容（mean hematocrit,MCV）、红细胞/血红蛋白（RBC/Hb）等指标检测,比较缺铁性贫血患者、珠蛋白生成障碍性贫血患者、常模的Hb、MCV、RBC、平均红细胞血红蛋白浓度（mean erythrocyte hemoglobin concentration,MCHC）、平均红细胞血红蛋白量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）、RBC/Hb及红细胞分布宽度（erythrocyte distribution width,RDW）水平。结果 缺铁性贫血患者、珠蛋白生成障碍性贫血患者的Hb、MCV、RBC、MCHC、MCH低于常模水平,RBC/Hb及RDW水平高于常模水平,差异有统计学意义（P <0.05）;珠蛋白生成障碍性贫血患...     

珠蛋白生成障碍性贫血的分子诊断研究进展

珠蛋白生成障碍性贫血是一类发病率较高的常染色体显性遗传病,除输血及骨髓造血干细胞移植之外,目前尚无较好的治疗方法,产前诊断是防止重型地贫胎儿出生积极有效的应对措施。近年来,在血红蛋白异常筛查方面出现了全自动血红蛋白电泳、高效液相色谱、傅里叶变换红外光谱等新技术;在基因诊断领域出现了DNA芯片技术、悬浮点阵技术、DNA测序、多重PCR等。由于这些新的技术具有更准确、灵敏、方便等优点,它们正在逐渐取代以往所使用的旧方法。非侵入性产前诊断、种植前遗传诊断成为地贫产前诊断的重要发展方向。目前对胎儿的超声检查仍不能取代血红蛋白电泳在地贫高发地区对孕妇群体进行携带者筛查,种植前遗传诊断存在着一定的医疗风险,绝大多数病例的预防仍是通过对高风险胎儿进行产前基因诊断来实现。     

联合检验对缺铁性贫血/珠蛋白生成障碍性贫血的鉴别诊断价值

目的探讨联合检验在鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)与珠蛋白生成障碍贫血(又称地中海贫血,简称地贫)中的价值。方法选取我院2012年1月~2016年1月收治的IDA患者45例、地贫患者30例、健康体检者30例为研究对象,均进行平均红细胞比容(MCV)、血红蛋白(Hb)等联合检验,对比分析检验结果。结果地贫组MCV水平下降、Hb A2上升、RBC脆性下降;IDA组MCV水平下降、RDW上升、RBC脆性下降,分别与健康组比较差异有统计学意义(P﹤0.01);MCV联合Hb电泳、Hb电泳联合RBC脆性、MCV联合Hb电泳和RBC脆性并联试验的灵敏度较高,分别为100%,96.7%,100%,其串联试验的特异度较高,分别为96.7%,100%,100%。结论联合检验MCV、Hb A2、RBC脆性及RDW等血液学指标对准确鉴别诊断IDA与地贫有较高的应用价值。     

阳江市地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果分析

目的调查阳江市地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查检出阳性率及探讨对新生儿进行筛查的必要性。方法采用海伦娜全自动电泳仪对2863份新生儿脐血标本进行Hb电泳，对Hb区带进行扫描定量分析。结果2863份新生儿脐血进行Hb电泳定量分析中有Hb异常者293份。α珠蛋白生成障碍性贫血检出HbBart’s（≥1、0％）284份，检出阳性率为9．91％，其中静止型85份，标准型194份，HbH病5份，阳性率为2．96％、6．77％、0．17％；疑为β-珠蛋白生成障碍性贫血1份，阳性率为0．03％；其他异常Hb病8份，阳性率为0．28％。脐血电泳β-珠蛋白生成障碍性贫血阳性率（0．03％）与婚检、产检标本阳性率（4．4％）有显著性差异（p〈0．05）。结论阳江市地区是珠蛋白生成障碍性贫血高发地区，应用新生儿脐血Hb电泳筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血方便、快捷、经济、可靠，值得推广。欠缺之处是β-珠蛋白生成障碍性贫血检出率低，客观存在有难以判断的误差，脐血电泳筛查阴性者临床医生必须根据临床症状和其父母筛查情况建议1周岁后复查或做基因分析确诊，避免初筛漏诊和医疗纠纷。     

β珠蛋白生成障碍性贫血聚合酶链反应-反向点杂交法基因诊断

β珠蛋白生成障碍性贫血亦称 β地中海贫血是由于 β珠蛋白基因座位突变导致 β珠蛋白肽链合成减少或缺乏所引起的一类遗传性溶血性疾病。该病呈常染色体隐性遗传 ,在中国华南及西南地区是一种常见病 ,广东地区人群发生率达1.36 %～ 4 .90 %。本病的轻型患者可以没有临床症状 ,重症患者一般在出生后一年内开始表现出严重的贫血 ,终身需要输血治疗。由于缺乏有效的根治性手段 ,目前对β地中海贫血以预防为主。通过对人群中地中海贫血突变基因携带者的筛查 ,有针对性地指导婚育 ,开展产前诊断工作 ,从而杜绝重症患儿的出生。本文利用聚合酶链…     

阳江市地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果分析

目的调查阳江市地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查检出阳性率及探讨对新生儿进行筛查的必要性。方法采用海伦娜全自动电泳仪对2863份新生儿脐血标本进行Hb电泳,对Hb区带进行扫描定量分析。结果2863份新生儿脐血进行Hb电泳定量分析中有Hb异常者293份。α-珠蛋白生成障碍性贫血检出HbBart’s(≥1.0%)284份,检出阳性率为9.91%,其中静止型85份,标准型194份,HbH病5份,阳性率为2.96%、6.77%、0.17%;疑为β-珠蛋白生成障碍性贫血1份,阳性率为0.03%;其他异常Hb病8份,阳性率为0.28%。脐血电泳β-珠蛋白生成障碍性贫血阳性率(0.03%)与婚检、产检标本阳性率(4.4%)有显著性差异(p<0.05)。结论阳江市地区是珠蛋白生成障碍性贫血高发地区,应用新生儿脐血Hb电泳筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血方便、快捷、经济、可靠,值得推广。欠缺之处是β-珠蛋白生成障碍性贫血检出率低,客观存在有难以判断的误差,脐血电泳筛查阴性者临床医生必须根据临床症状和其父母筛查情况建议1周岁后复查或做基因分析确诊,避免初筛漏诊和医疗纠纷。     

毛细管电泳技术在微生物检测中的应用

作为一种重要的分离分析技术,毛细管电泳具有高效、快速、自动化程度高等特点,可用于核酸、蛋白、细胞等分析检测,在生命科学领域得以广泛应用。本文就毛细管电泳技术在微生物检测中的应用作一综述。     

静止型珠蛋白生成障碍性贫血平均红细胞体积与脆性

目的评价外周血平均红细胞体积(MCV)以及红细胞渗透脆性试验(RBC脆性试验)在诊断静止型珠蛋白生成障碍性贫血中的临床价值。方法53例经过基因分析确诊为静止型珠蛋白生成障碍性贫血患者行外周血MCV、RBC脆性试验,评价二者在筛查静止型珠蛋白生成障碍性贫血的价值。结果53例静止型珠蛋白生成障碍性贫血患者中,MCV值小于80fl占84.9%(45/53),大于80fl占15.1%(8/53);MCV筛查的漏诊率15.1%(8/53);RBC脆性全部大于70%。结论MCV试验是筛查静止型珠蛋白生成障碍性贫血的一个重要手段,而RBC脆性试验筛查不到静止型珠蛋白生成障碍性贫血,应逐步被淘汰。     

毛细管电泳技术在病毒学研究中的应用进展

毛细管电泳技术作为一种快速高效的分离分析技术,具有样本用量少、重现性好,自动化程度高等特点,在生命科学领域得以广泛应用。本文就毛细管电泳技术在病毒学研究中的应用作一综述。     

高分辨率熔解曲线分析技术在非缺失型α-地中海贫血新生儿筛查中的前瞻性应用

目的:验证高分辨率熔解曲线分析技术(HRM技术)用于筛查非缺失型α-地中海贫血的可行性。方法:应用全自动毛细管电泳技术对6 525例新生儿脐血进行血红蛋白定量分析,将Hb Bart's含量在0.1%～2.5%的样本挑出,排除3种常见缺失型α-地贫基因(--SEA、-α3.7、-α4.2)后剩下的样本,用HRM技术分别对α-基因的3个外显子进行扫描后对这些样本进行基因确诊。结果:所有28例非缺失型α-地中海贫血全部被检出。结论:HRM技术可作为非缺失型α-地中海贫血的一种筛查方法,且具有准确、高效、低成本的优点。     

毛细管血红蛋白电泳在新生儿β-地中海贫血筛查中的应用价值

目的评价毛细管电泳技术用于筛查新生儿β-地中海贫血(β-地贫)的可行性,探讨使用血红蛋白A (Hb A)筛查新生儿期(足月儿、早产儿)β-地贫的最适截断值。方法采用毛细管电泳仪对2016年1月-2017年12月在广东省人民医院出生的487例新生儿脐血样本进行Hb成分检测,应用地中海贫血液相芯片技术进行地贫基因检测。以基因结果为金标准,通过受试者工作曲线(ROC)确定毛细管电泳技术用于筛查新生儿(足月儿、早产儿)β-地贫的灵敏度和特异度,选取Hb A的最适截断值。结果在487例新生儿脐血中检出β-地贫54例,携带率为11. 09%,均为轻型β-地贫。入选的314例新生儿中,足月儿Hb A受试者的ROC曲线下面积为0. 917,选取Hb A的截断值为11. 0%时,其筛查新生儿β-地贫的灵敏度为92. 1%,特异度为79. 5%。早产儿Hb A受试者的ROC曲线下面积为0. 814。结论毛细管电泳技术用于足月新生儿β-地贫筛查具有很好的应用价值。Hb A的截断值≤11. 0%时筛查β-地贫具有较高的准确性。而对于早产儿的β-地贫筛查应综合孕周选取相应的截断值。     

高效毛细管电泳技术在藏药研究中的应用进展

藏药是我国较为完整、较有影响的民族药之一,它不仅广泛吸收了中医药学2000年的优秀医药学经验,并且融合印度医药学和大食医药学等经典理论,通过长期实践形成了独特的藏医药体系。目前,藏药的生产主要是采用传统炮制加工与现代高新技术手段相结合的新制药方法。藏药资源的合理利用和野生藏药资源的保护,主要问题在于藏药制剂工艺不完善,质量控制不够严密、疗效评估和作用机制不明确等原因。在藏医药典籍中仅有经验鉴别不能保证藏药质量,因此现代光谱色谱和毛细管电泳等现代分离分析技术将继续在藏药的研究过程中发挥重要作用。高效毛细管电泳技术已在中药活性成分和质量控制研究中得到广泛应用,其相比传统常用高效液相色谱技术而言,具有诸多优点。本文主要综述了高效毛细管电泳技术在藏药研究中的应用进展。     

分子生物学检测在α-地中海贫血中的应用

α-地中海贫血是一组由于α-珠蛋白基因缺失或功能障碍导致α-珠蛋白链完全缺如或合成不足所引起的遗传性溶血性疾病,是我国长江以南各省发病率最高、影响最大的遗传病之一。目前对α-地中海贫血尚无理想的治疗方法。通过加强人群、婚前、产前筛查及基因诊断,防止重型地贫儿出生,是最有效的预防措施。因此快速实用、准确有效的基因诊断技术是人群、婚前、产前筛查及诊断的有力保障。本文对α-地中海贫血的分子机制、生物学检测及应用等方面进行综述。     

清远区儿童珠蛋白生成障碍性贫血发生情况及基因检测的结果分析

目的 分析清远区儿童珠蛋白生成障碍性贫血发生情况及基因检测的结果。方法 研究总共纳入3 430例观察对象,均是清远市妇幼保健院2019年7月—2021年6月收治的珠蛋白生成障碍性贫血患儿,所有患儿均进行珠蛋白生成障碍性贫血基因检查。观察并分析珠蛋白生成障碍性贫血发生率以及相应的基因检测结果情况。结果 3430例患儿中,珠蛋白生成障碍性贫血的阳性率为74.29%(2 548/3 430)。α-珠蛋白生成障碍性贫血的占比为78.1%(1990/2548),β-珠蛋白生成障碍性贫血的占比为21.90%(558/2548),其差异有统计学意义（P <0.05）。结论 清远区儿童珠蛋白生成障碍性贫血的发生率较高,α-珠蛋白生成障碍性贫血与β-珠蛋白生成障碍性贫血是主要的贫血类型。基因检测用于儿童珠蛋白生成障碍性贫血的检测效果理想,为珠蛋白生成障碍性贫血的诊断与防治提供了参考依据,临床可进一步推广应用。     

免疫制剂在再生障碍性贫血中的应用

免疫制剂在再生障碍性贫血中的应用胜利石油管理局中心医院（东营２５７０３４）武升传随着免疫学在临床医学的发展，通过某些抗原检测，逐渐认识到再生障碍性贫血（ＡＡ）与免疫因素有关。外周血Ｔ淋巴细胞亚群分布中，Ｔ４、Ｔ８比例失衡、单个核细胞中可溶性ＣＤ８增高...     

毛细管电泳在产前诊断地中海贫血中的应用

目的探讨毛细管电泳技术在产前诊断地中海贫血中的应用价值。方法 2013年1月~2014年6月期间在本院因夫妇双方为同型地中海贫血为产前诊断指征且孕周为24~34周的就诊病例286例。对脐带穿刺后获取的脐血标本进行血红蛋白毛细管电泳和地中海贫血基因诊断。结果 286例标本中,正常83例,巴氏水肿胎21例,Hb H 13例,轻型α-地贫86例,静止型α-地贫11例,重型β-地贫15例,轻型β-地贫51例,α复合β-地贫6例。脐血血红蛋白组成分析显示α-地贫胎儿脐血Hb Bart’s百分含量随受累α-珠蛋白基因个数的增加而增多,β-地贫胎儿脐血Hb A百分含量随受累β-珠蛋白基因个数的增加而减少。结论毛细管电泳能辅助诊断孕晚期胎儿α地中海贫血及β地中海贫血。     

慢病毒介导β-珠蛋白基因添加在β-地中海贫血基因治疗中的应用

目的:构建全长人β-珠蛋白基因慢病毒载体,稳定转染K562细胞使得β-珠蛋白高效表达,为β-珠蛋白基因添加治疗奠定基础。方法:采用PCR扩增人正常β-珠蛋白基因,加上Sph I和Not I两个酶切位点进行T载体克隆,获得重组质粒p UC57-β-globin。用限制性内切酶连接目的基因片段和慢病毒载体,筛选获得慢病毒表达载体LV-β-globin,测序。将慢病毒载体转染293T细胞,包装病毒。用LV-β-globin感染K562细胞。采用流式细胞仪检测荧光效率,运用实时PCR及Western Blotting检测K562细胞中β-珠蛋白mRNA及蛋白表达情况。结果:通过PCR获得长度为2 128 bp的目的基因。连接p UC57载体和慢病毒表达载体,慢病毒表达载体LV-β-globin构建成功,序列正确。LV-β-globin转染K562细胞72 h后,显示大量绿色荧光表达,荧光效率为94.8%。β-珠蛋白mRNA 2-ΔΔCt值为4.080±0.078,高于对照组;β-珠蛋白灰度值为1.063±0.082,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建并包装含人β-珠蛋白基因的慢病毒载体并高效稳定表达。