色氨酸-犬尿氨酸代谢通路与神经退行性疾病及中医药干预作用的研究进展

色氨酸代谢是一个可高度调控的生理过程，犬尿氨酸通路是色氨酸代谢的主要途径，色氨酸-犬尿氨酸代谢通路涉及一系列酶促反应，代谢生成的多种生物活性物质统称为“犬尿氨酸能物质”。越来越多的研究表明，这些犬尿氨酸能物质与很多神经系统疾病的发生、发展有着密切关联，异常的色氨酸-犬尿酸代谢与诸如帕金森氏病、亨廷顿病和阿尔茨海默症等神经退行性疾病认知功能低下有关。文章就色氨酸-犬尿氨酸通路的代谢、生成的神经生物学活性物质、相关的神经系统疾病以及以此为靶点的中医药干预作用进行综述，为研究和治疗相应神经系统疾病提供一定策略与参考。     

犬尿氨酸通路在神经退行性疾病中的研究进展

犬尿氨酸通路是色氨酸代谢的主要途径,与亨廷顿病、阿尔茨海默病、帕金森氏症等神经退行性疾病的发生、发展有着密切联系。本文主要综述了犬尿氨酸通路代谢产物的神经生物学活性及其与相关神经退行性疾病的关系,为研究和治疗神经退行性疾病提供新的思路和方法。     

吲哚胺2,3二加氧酶与自身免疫性疾病

色氨酸通过犬尿氨酸通路被分解代谢,而遍布全身的吲哚胺2,3二加氧酶(IDO)则是犬尿氨酸通路的首要的限速酶。IDO通过把左旋色氨酸转化为甲酰犬尿氨酸,甲酰犬尿氨酸能快速地转化为更为稳定的犬尿氨酸分子。犬尿氨酸通路可有许多中间产物,大多都有活性调节的功能。现如今公认IDO为机体内重要的内源性免疫抑制剂,在维持机体免疫稳态,移植耐受、肿瘤局部免疫抑制微环境的形成和维持,以及在介导肿瘤的免疫逃逸中发挥重要作用。IDO的存在对自身免疫性疾病的防治研究有重要的影响,具有广阔的发展前景。     

吲哚胺2,3二氧化酶与肿瘤免疫耐受

肿瘤免疫耐受是一个获得性免疫应答的过程,许多机制参与调节。吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)是体内肝外色氨酸沿犬尿氨酸代谢的限速酶。其通过诱导"色氨酸删除"环境、色氨酸代谢产物的细胞毒性作用和调节Tregs等抑制T淋巴细胞增殖、活化,共同诱导肿瘤免疫耐受。抑制IDO可为今后肿瘤临床治疗提供新思路和方法。     

吲哚胺2,3-双加氧化酶1及其抑制剂的研究

 吲哚胺2,3-双加氧化酶1( indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)是肝脏以外催化色氨酸沿着犬尿氨酸途径(kynurenine pathway,KP)分解代谢的限速酶。IDO1过度活化而引起KP的神经毒性产物喹啉酸(quinolinic acid,QUIN)的蓄积,是导致神经紊乱和神经退行性疾病的重要原因。IDO1同时又是免疫耐受酶,在诱导母胎免疫耐受和肿瘤免疫逃逸中均发挥重要作用,被视为新的免疫检查点。IDO1与阿尔茨海默病、老年性白内障、癌症等多种疾病发病机制的相关性已被证实,因此IDO1抑制剂作为极具潜能的药物受到日益广泛的关注。本文就IDO1的生物活性及其抑制剂的研究作一综述。     

吲哚胺2,3-双加氧酶1抑制剂的研究进展

吲哚胺2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)是介导色氨酸沿犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶。IDO1在肿瘤细胞和抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC)中存在过度表达现象,通过色氨酸的消耗及其代谢产物的聚积抑制局部免疫应答,使肿瘤细胞逃避免疫系统的监测,这与多数肿瘤治疗的不良预后有关。因此,IDO1是肿瘤免疫疗法的重要靶点。目前有多种骨架的IDO1抑制剂正在研究当中,其中3个已经进入了临床研究阶段。本文介绍了IDO1在肿瘤免疫耐受中的作用,并按结构分类,综述了IDO1抑制剂的研究进展。     

液相色谱-电喷雾串联质谱法分析大肠癌患者尿液色氨酸及其代谢产物

目的：通过液相色谱-电喷雾串联质谱（LC-ESI-MS/MS）测定尿液色氨酸及其代谢产物浓度,探讨大肠癌患者体内色氨酸代谢变化及其与机体免疫之间的关系。方法通过 LC-ESI-MS/MS法测定大肠癌患者和健康者（对照组）尿液色氨酸代谢物浓度,并通过犬尿氨酸/色氨酸比值来评估代谢过程中的酶活性。结果大肠癌患者尿液犬尿氨酸、3-羟基犬尿氨酸（HK）、羟基氨茴酰酸（HAA）、吲哚-3-乳酸（ILA）、吲哚-3-丙酸（IPA）、邻氨基苯甲酸（AA）浓度显著升高（P＜0．05,P＜0．01）;而大肠癌患者尿液犬尿烯酸浓度较对照组显著下降（P＜0．05）;大肠癌患者犬尿氨酸/色氨酸比值较对照组显著提高（P＜0．01）。结论大肠癌患者尿液色氨酸代谢发生紊乱,色氨酸代谢物检测或可为大肠癌发病机制、预测和防治研究奠定基础。     

人胎盘犬尿氨酸途径酶mRNA和代谢物的鉴定:经由炎性刺激和临床感染上调

本研究旨在确定是否为胎盘源性犬尿氨酸(源于色氨酸的刺激神经组织代谢物)导致感染介导的胎儿脑损伤。研究所用的胎盘和脐带血是从足月分娩者(n=16)和伴或不伴宫内细菌感染的早产患者(每组中n=8)中获取的,检测其是否表达犬尿氨酸代谢物酶的m R NA,体内感染是否通过胎盘影响这些酶的表达,体外细菌内毒素脂多糖是否影响酶的表达和胎盘排出犬尿氨酸代谢物,以及脐带血中犬尿氨酸代谢物的水平。胎盘表达色氨酸降解酶mR N A并合成几种复合物。在暴露于感染和(或)脂多糖的胎盘内,这几种酶的表达显著升高,脂多糖也明显促使胎盘犬尿氨酸和奎宁酸排…     

HPLC法测定血液中色氨酸及其部分代谢产物

色氨酸（TRP）为人体重要的必需氨基酸之一，其主要代谢途径之一是在肝脏中通过色氨酸毗哈酶的催化，剖开其毗咯坏而生成甲酸犬尿酸原，后者又顺序变为犬尿酸原（KN）和3一羟犬尿酸原（3－HKN），两者再分别代谢为犬尿氨酸（KA）和黄尿酸（XA）等。已知许多疾病如Har－tflllp综合征、抑郁症、类癌等都存在Tgn代谢异常。近年来研究表明KN、3－HKN等具有神经毒性【‘，刘，而KA则有抬抗喷淋酸的神经毒性作用［3］。关于Tgn及其代谢产物的测定方法已有报道，但由于3－HKN保留时间短，在生物样品中分离和测定困难。本研究应用简单酸三…     

早发型与晚发型重度子痫前期患者胎盘绒毛组织代谢足迹差异的研究

目的探讨6%氧浓度下体外培养早发型及晚发型重度子痫前期患者胎盘绒毛组织培养液中代谢足迹的差异。方法选择早发型重度子痫前期组(13例)及晚发型重度子痫前期组(14例)的胎盘,胎盘母体面取绒毛组织,在6%氧浓度下培养96 h,采用高效液相质谱色谱仪检测培养液中代谢产物并使用标准品建立色氨酸及犬尿氨酸的色谱图库,观察两组绒毛组织代谢足迹及培养液中代谢物色氨酸及犬尿氨酸浓度的差异。结果 6%氧浓度下培养的早发型及晚发型重度子痫前期组胎盘绒毛组织代谢足迹比较,发现36种代谢物有显著性差异(P<0.05);与晚发型重度子痫前期组相比,早发型重度子痫前期组胎盘绒毛组织培养液中犬尿氨酸的浓度显著升高(P<0.05)。结论早发型与晚发型重度子痫前期的发病机制可能不同,代谢组学技术对其中的代谢产物进行定量分析,为预测重度子痫前期的发病时机提供一个新的途径。     

天丝饮的抗抑郁作用及其对IDO的调节

目的 研究天丝饮的抗抑郁作用及其对色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)途径关键代谢酶吲哚胺2,3过氧化酶(IDO)的影响.方法 使用脂多糖(LPS)腹腔注射1 mg/kg造成小鼠抑郁模型,采用Noldus EthoVision XT9系统采集分析小鼠强迫游泳不动时间,采用HPLC-MS/MS技术检测脑组织色氨酸、犬尿氨酸含量,实时荧光定量PCR检测脑组织中IDO、NF-κB的mRNA表达水平.结果 LPS注射4h后可以引起模型组小鼠不动时间延长(P＜0.05),脑组织IDO活性增高,IDO和NF-κB mRNA表达增多(P＜0.01).天丝饮能缩短小鼠不动时间(P＜0.05),抑制IDO活性及IDO、NF-KB mRNA表达数量(P＜0.01).结论 天丝饮具有抗抑郁药物样作用,这一作用与抑制炎症因子诱导的IDO激活有关,天丝饮通过抑制NF-κB对IDO的直接和间接诱导作用而调节了IDO的活性和表达.     

帕金森病患者血浆和红细胞中的犬尿氨酸代谢

有确凿证据显示,刺激神经的犬尿氨酸(K Y N)代谢在人类大脑的正常生理过程中具有一定作用,并且与神经退行性疾病如帕金森病(PD)的病理有关。犬尿酸(K YNA)是一种代谢过程中的副产物,由KY N在KY N转氨酶(K AT I和KAT II)的作用下经不可逆的转氨作用合成,是一种兴奋性氨基酸受体拮抗剂。在本研究中,测量19例PD患者和17例年龄相匹配对照者血浆和红细胞(RBC)中的K YNA水平以及KA T I和KA T II生物合成酶同工酶的活性。PD患者血浆中的K AT I和KA T II活性明显降低,伴随血浆K Y NA水平有降低趋势,PD患者R BC中的KY N A…     

运用同一波长HPLC法测定大鼠血清色氨酸及其代谢产物

目的:运用高效液相色谱-紫外检测法建立一种简单、快速同时测定大鼠血清中的色氨酸(Trp)及主要代谢产物5-羟色胺(5-HT)和犬尿氨酸(Kyn)的检测方法。方法:以20%高氯酸为血清蛋白质沉淀剂,采用C18(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05mol/l磷酸二氢钾-甲醇(80∶20,v/v),于波长225nm处对大鼠血清进行检测。结果:15min内可以完成本实验分析过程,大鼠血清中Trp、5-HT、Kyn平均回收率分别为90.69%、103.21%、101.15%,RSD分别为1.78%、0.81%、1.12%(n=9);分别在0μg~27.0336μg、0μg~1.47456μg、0μg~1.51552μg的范围内成较好的线性关系,相关系数r均为0.9995。结论:通过对实验中多个环节的考察,建立了大鼠血清中色氨酸及其代谢产物5-羟色胺与犬尿氨酸含量测定的方法,该方法准确性较好,能快速简单地完成检测过程。     

血清素代谢产物——5-羟吲(口朶)醋酸的測定

血清素(Serotonin)是近年来新发现的激素。它是体内极为重要的神经内分泌传递因子,具有異常广泛的生理作用,是维持机体特别是脑组织正常活动的重要物质。在临床上血清素参与多种疾病的发病机制,并可利用它的代谢拮抗物以治疗某些疾病,因而越来越被生理、药理及临床学家所重视。血清素的前身是色氨酸,其最终代谢产物5—羟吲(口朶)醋酸(简称5HIAA)由尿液排泄。尿中5HIAA排量的测定对于了解与血清素有关的生理和病理状态具有重要的意义。关于尿中5HIAA的测定,国内尚未见有专门论述,本文按Udenfrien(?)等的方法,结合我们的实验结果报导干下,以供参考。     

慢性乙型肝炎患者色氨酸和犬尿氨酸的检测及意义

目的探讨血浆中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)的定量检测在乙型肝炎(乙肝)中的临床意义。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定60例慢性乙肝患者(乙肝患者组)和41例正常人(正常对照组)血浆中色氨酸和犬尿氨酸含量,并对两组数据进行比较。结果正常对照组Trp含量为(76.99±10.88)μmol/L,Kyn含量为(2.16±0.32)μmol/L,Kyn/Trp为0.028±0.003;乙肝患者组Trp含量为(68.04±8.52)μmol/L,Kyn含量为(2.18±0.26)μmol/L,Kyn/Trp为0.032±0.004。乙肝患者组血浆Trp含量明显低于正常对照组(P<0.01),Kyn/Trp明显高于正常对照组(P<0.01),两组Kyn含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性乙肝患者色氨酸代谢发生异常,检测患者血浆中Trp和Kyn有重要的临床意义。     

培元解郁方对糖皮质激素诱导大鼠抑郁模型TRP-KYN代谢的影响及神经元可塑性调节机制

目的研究培元解郁方对糖皮质激素诱导大鼠抑郁模型的抗抑郁作用,对色氨酸-犬尿氨酸(TRP-KYN)代谢的影响以及对海马和皮层神经元可塑性的影响。方法将70只雄性大鼠随机分为7组,每组10只,分别为空白组、模型组、氟西汀组、天丝饮组、四逆散组和培元解郁方中、高剂量组,糖皮质激素注射28 d建立大鼠抑郁模型,造模结束后进行敞箱测试和糖水消耗测试;采用HPLC-MS/MS技术检测血清色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)、犬尿烯酸(KA)、喹啉酸(Q)含量,RT-PCR检测海马和皮层神经元内N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平。结果糖皮质激素注射28 d后,与空白组比较模型组大鼠糖水消耗量、敞箱活动的总得分显著降低(P0.05),KYN/TRP、KYN/KA比值显著升高(P0.05),海马BDNF mRNA表达显著降低(P0.05),皮层NR mRNA表达显著升高(P0.05)。培元解郁方可显著提高大鼠糖水消耗量(P0.05),敞箱活动总得分(P0.05),降低KYN/TRP、KYN/KA比值(P0.05),升高KYN/Q比值(P0.05),升高海马BDNF mRNA表达水平(P0.05),降低皮层NR mRNA表达(P0.05)。结论培元解郁方可以通过下调TRP-KYN代谢,抑制神经毒性,提高神经保护;通过促进皮层和海马尤其是皮层的神经元可塑性发挥抗抑郁作用。     

基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

 目的 建立一种同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸浓度的高效液相色谱(HPLC)法,用于评价小鼠给予IDO抑制剂后体内IDO活性。方法 血清用6%高氯酸沉淀蛋白法处理,离心后取上清进样,采用标准加入法定量。选用ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离,流动相为乙腈-醋酸钠(15 mmol/L,冰醋酸调pH至 4.0),流速1.1 mL/min,柱温30 ℃,犬尿氨酸和色氨酸的紫外检测波长分别为360 nm和280 nm。结果 犬尿氨酸保留时间为6.10 min,线性范围为0.25～10 μmol/L,检测限为0.09 μmol/L;色氨酸保留时间10.12 min,线性范围为25～1 000 μmol/L,检测限为0.25 μmol/L。精密度、回收率及稳定性等均符合生物样品定量分析方法验证指导原则的要求,并成功应用于62只小鼠血清犬尿氨酸和色氨酸浓度的测定。结论 建立了一种简单、快速、准确的HPLC分析方法,采用标准加入定量方式,可同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸血药浓度,并成功应用于实际生物样本的测定。     

TDO2基因对鼻咽癌细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响及其机制

目的 探讨色氨酸-2,3-双加氧酶2(tryptophan-2,3-dioxygenase2,TDO2)对鼻咽癌细胞系CNE-2Z和HNE-1细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法 通过TIMER2数据库分析TDO2基因在不同癌症或特定癌症亚型中的表达状态。培养人正常鼻咽黏膜上皮细胞系NP69、鼻咽癌细胞系5-8F、CNE-2Z和HNE-1。实验中对CNE2Z和HNE-1细胞分别转染TDO2干扰序列和阴性对照序列，分别命名为si-TDO2组和NC组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测TDO2的mRNA相对表达水平；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率，细胞集落克隆实验检测集落数量；Transwell法和细胞划痕实验检测细胞迁移能力；蛋白质印迹实验(Western blot)检测鼻咽癌细胞中上皮间充质化(EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Vimentin及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2相对表达量。结果 与正常鼻咽黏膜上皮细胞NP69相比，在CNE-2Z和HNE-1细胞中TDO2的mRNA相对表达量明显上调(P<0.001)。与NC组...     

维持性血液透析患者精神心理状况分析及其与血清色氨酸水平的相关性研究

目的研究维持性血液透析患者精神心理状况及其与血清色氨酸水平的相关性。方法选取我院2015年3月~2016年12月122例进行维持性血液透析的患者及115例健康志愿者为研究对象,将122例进行维持性血液透析的患者纳入研究组,115例健康志愿者纳入对照组。检测两组焦虑和抑郁等心理状况及血清色氨酸水平。结果 (1)研究组患者焦虑阳性发生率和抑郁阳性发生率均高于对照组(P0.05)。(2)抑郁组患者IL-6、犬尿氨酸高于非抑郁组患者,抑郁组患者Trp、HGB低于非抑郁组患者(P0.05)。(3)焦虑组患者Scr、BUN高于非焦虑组患者,焦虑组患者血钙、血磷低于非焦虑组患者(P0.05)。(4)抑郁与IL-6、犬尿氨酸呈显著正相关性(r=0.351,P=0.021;r=0.256,P=0.002),焦虑与Scr、BUN呈显著正相关性(r=0.152,P=0.034;r=0.689,P=0.016)。结论炎性因子诱导使维持性血液透析患者色氨酸代谢成犬尿氨酸,中枢内5-HT水平降低,促使患者出现抑郁和焦虑等负面心理情绪,且抑郁与IL-6、犬尿氨酸水平呈显著正相关性,焦虑与Scr、BUN水平呈显著正相关性。     

犬尿喹啉酸与阿尔茨海默病的研究进展

以阿尔茨海默病(AD)为主的认知障碍疾病给公共和医疗系统带来了沉重的负担,在AD中可观察到犬尿氨酸途径的紊乱。其中代谢物犬尿喹啉酸(KYNA)一般被认为是神经保护性物质,KYNA的水平在AD患者的外周和中枢会随着AD病情的发展而发生变化。KYNA可能是认知损害的一种标志物,其水平的升高可能是一种代偿性的保护机制,也可能是对认知功能的损害,目前对其功能尚无定论,在认知功能疾病中是一个研究热点,文章就KYNA在AD中的作用进行综述。