槲皮素对胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响

目的探讨黄酮类化合物槲皮素对人胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将U87细胞分成Q0、
Q50、Q100和Q150 4个组,Q0组加适量二甲亚砜（槲皮素溶剂）处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100、150 μmol/L。分别
通过transwell体外侵袭实验、transwell体外迁移实验、Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移能力,增殖
能力及其细胞周期的影响。结果槲皮素处理36 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为：52.08%、24.63%
和13.13%,P均<0.05。槲皮素处理12 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为：49.46%、26.78%和14.56%,P
均<0.05。槲皮素处理24 h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为25.21%、18.38%、16.74%和15.24%。G0/Gl期C6细
胞所占比例分别为71.14%、72.71%、69.29%、66.47%,S 期分别为25.32%、22.48%、21.96%、23.32%,G2/M 期分别为3.53%、
4.80%、8.75%、10.25%;Q100、Q150组的G2/M期细胞比例与Q0组比较,P均<0.05。结论槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移
能力;并可通过阻断U87细胞的细胞周期进程来抑制其增殖。
     

siRNA干扰PDLIM1表达抑制胶质瘤细胞U87迁移与侵袭

目的 研究人PDZ和LIM域蛋白1(PDLIM1)特异性siRNA对人胶质母细胞瘤U87细胞系迁移、侵袭能力的影响,并对其相关机制进行初步探讨.方法 用小RNA干扰技术下调U87细胞PDLIM1,用荧光实时定量Real-time PCR技术验证siRNA干扰效率;采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力;用Western blot法检测细胞上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达情况,并探讨相关机制.结果 经PD-LIM1-siRNA干扰后,胶质瘤U87细胞中PDLIM1在mRNA水平显著下调(P<0.001);与对照组相比,迁移和侵袭能力被显著抑制(P<0.001);PDLIM1基因表达下调后,U87细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、β-catenin、Slug下调.结论 PDLIM1通过EMT相关转录因子Slug调节N-cadherin、β-catenin蛋白表达,是其调节胶质瘤U87细胞迁移及侵袭能力的可能机制之一.     

细胞外ATP对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的作用

目的观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响;以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100μmol/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响;用时间显微镜动态观察100μmol/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况。结果高浓度(5 000μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000μmol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为(163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P<0.01);迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81)μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27)μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 100μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用。     

白藜芦醇对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的抑制作用

目的：探讨白藜芦醇（Res）对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化（EMT）、迁移和侵袭能力的调控作用,阐明Res对胶质瘤细胞EMT的抑制作用。方法：将胶质瘤U87细胞分为对照组（不做处理）、EMT组（TGF-β1诱导EMT）和Res处理组（Res处理EMT）。应用Western blotting法检测各组细胞中间质标志物（N-钙黏蛋白、β-连环蛋白和波形蛋白）、诱导EMT的转录因子（Snail、Slug和Twist1）以及基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的蛋白表达水平。划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果：与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞的间质标志物（N-钙黏蛋白、β-连环蛋白和波形蛋白）、诱导EMT的转录因子（Snail、Slug和Twist1）和MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）;与EMT组比较,Res处理组上述蛋白表达水平明显下调（P<0.05和P<0.01）;40 μmol·L^-1 Res处理组效果较20 μmol·L^-1 Res处理组更明显（P<0.05）。EMT组细胞迁移率和侵袭率明显高于对照组（P<0.01）,而Res处理组胶质瘤细胞迁移率和侵袭率明显低于EMT组（P<0.01）。结论：Res能抑制胶质瘤U87细胞EMT,降低细胞的迁移和侵袭能力。     

野黄芩苷对人脑胶质瘤U87细胞的增殖抑制作用及其机制

目的：探讨野黄芩苷（SCU）对人脑胶质瘤U87细胞的增殖抑制作用,并初步阐明其作用机制。方法：培养U87细胞,采用不同浓度（20、40和80 mg·L^-1） SCU处理U87细胞（野黄芩苷组）,同时设空白对照组。MTT法检测各组U87细胞存活率,倒置显微镜观察U87细胞的形态表现,Annexin Ⅴ/PI双染检测各组U87细胞凋亡率,Western blotting法检测各组U87细胞中bax和bcl-2蛋白表达水平。结果：MTT法,与空白对照组比较,20、40和80 mg·L^-1SCU组细胞存活率均明显降低（P<0.01）。倒置显微镜观察,与空白对照组比较,80 mg·L^-1SCU组细胞数明显减少,细胞体积变小,细胞间距变大;细胞出现皱缩、脱落,贴壁细胞轮廓模糊。Annexin Ⅴ/PI双染,与空白对照组比较,80 mg·L^-1SCU组细胞晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高（P<0.01）。Western blotting法,与空白对照组比较,20、40和80 mg·L^-1 SCU组U87细胞中bcl-2蛋白水平降低,80 mg·L^-1SCU组差异有统计学意义（P<0.01）;与空白对照组比较,80 mg·L^-1 SCU组U87细胞中bax/bcl-2比值升高（P<0.01）。结论：SCU通过上调U87细胞中bax/bcl-2比值诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤细胞的生长。     

穿心莲内酯对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：观察穿心莲内酯（Andro）对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用,阐明其作用机制。方法：取对数生长期U87细胞,分为二甲基亚砜(DMSO)对照组、4H-穿心莲内酯(4H-Andro)对照组和Andro组, MTT法检测不同浓度(0、5、10、15、20和25 μmol•L^-1) DMSO 、4H-Andro 及Andro对U87细胞活力的影响,计算U87细胞半数抑制浓度（IC50）;Western blotting法检测各组U87细胞NF-κB蛋白表达强度。结果：通过浓度筛选,Andro平均IC50为8 μmol•L^-1。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol•L^-1 Andro处理24 h后U87细胞增殖活性降低（P<0.01）,增殖抑制率达到50%;Andro处理96 h时,U87细胞增殖活性进一步降低（P<0.01）,增殖抑制率达到65%。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol?L-1 Andro处理48 h后, U87细胞中NF-κB（即磷酸化p65）蛋白表达强度下降（P<0.01）。结论：Andro作为临床上常用的天然抗炎药物,具有抑制胶质瘤细胞增殖的功能,并且可通过靶向抑制NF-κB蛋白表达强度发挥作用。     

瑞舒伐他汀对晚期内皮祖细胞增生、迁移及凋亡的影响

目的观察不同浓度及不同时间的瑞舒伐他汀(rosuvastatin)对晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增生(proliferation)、迁移(migration)和凋亡(apoptosis)的影响。方法采用密度梯度法从大鼠骨髓获取单个核细胞,培养28 d,通过FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色鉴定为正分化晚期EPCs。以不同浓度的瑞舒伐他汀(0.001、0.01、0.1、1.0、10、100μmol/L)和晚期EPCs共培养24 h,分别采用MTT比色法、Transwell小室及Tunel法检测其增生、迁移及凋亡功能;以浓度为0.1μmol/L的瑞舒伐他汀与晚期EPCs分别共培养1、3、6、12、24、48 h,应用同样方法检测其增生、迁移及凋亡功能。结果体外培养7 d时,细胞呈典型长梭形;28 d时,呈铺路石样,并可摄取FITC-UEA-I和DiI-acLDL。不同浓度的瑞舒伐他汀组与对照组相比均可明显地改善晚期EPCs的增生(P<0.05)、迁移(P<0.05)及凋亡(P<0.05)功能,且浓度为0.1μmol/L的瑞舒伐他汀改善细胞功能最强(P<0.05)。当瑞舒伐他汀浓度为0.1μmol/L、共培养不同时间后,与对照组相比可增强晚期EPCs的增生(P<0.05)、迁移(P<0.05)及抗凋亡(P<0.05)功能。结论瑞舒伐他汀能够提高晚期内皮祖细胞的增生、迁移功能,减少细胞的凋亡,且呈浓度及时间依赖性。     

瑞舒伐他汀与阿托伐他汀的比较

目前冠心病的发病率大概在0.77%,治疗冠心病的主要一个方面是降脂,而降脂的主要目标就是降低LDL-C水平。在临床上使用较为多的调脂类药物主要是他汀类药物。汀类药物在高脂血症和高胆固醇血症以及冠心病等等一些心脑血管疾病当中起着极其重要的作用。瑞舒伐他汀与阿托伐他汀是目前临床医学上使用相对较多的两种调脂的汀类药物。本文将会着重的将瑞舒伐他汀与阿托伐他汀进行比较,并且通过120例冠心病患者,做平行对照实验,对这两种药关于冠心病患者血脂达标的效果进行研究,分析这两种汀类药的有效程度和安全程度。     

EGFR信号通路调控人胶质瘤U87细胞侵袭转移的分子机制

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)信号通路与人胶质瘤细胞(U87细胞)增殖和侵袭转移的关系及调控分子机制。方法表皮生长因子(EGF,100ng/mL)、EGFR抑制剂———AG1478(10μmol/L)单独和联合处理U87细胞,采用MTT法和Transwell小室体外侵袭实验检测U87细胞增殖和体外侵袭能力;明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9的表达水平;Western blot法检测磷酸化EGFR(P-EGFR)、磷酸化AKT(P-AKT)蛋白表达。结果 EGF(100ng/mL)增加P-EGFR和P-AKT蛋白表达,使加药后24h和48h的细胞生长率分别提高了19.25%、22.32%(P<0.05),使12h过膜细胞数由(27±4)个上升到(126±3)个(P<0.05),促进U87细胞的MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05);AG1478(10μmol/L)可以阻断EGF增加P-EGFR和P-AKT蛋白表达的作用(P<0.05),并具有时间依赖性(P<0.05),减弱U87细胞体外侵袭能力(P<0.05),抑制MMP-2、MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。结论 EGFR-PI3K/AKT信号通路参与调节U87细胞增殖和侵袭转移过程,其机制可能是EGFR-PI3K/AKT信号通路活化后,导致MMP-2和MMP-9蛋白的表达增加,对细胞外基质的破坏增强。     

瑞舒伐他汀、阿托伐他汀联合规律运动对冠心病的治疗价值

目的:探讨瑞舒伐他汀、阿托伐他汀联合规律运动对冠心病的治疗价值。方法:选取冠心病患者180例,随机数字表法分为瑞舒伐他汀组和阿托伐他汀组,各90例,两组均联合规律运动,比较两组患者治疗总有效率、治疗前后血脂血压水平、ba PWV水平及不良反应发生率情况。结果:瑞舒伐他汀组治疗总有效率为96.7%,阿托伐他汀组为87.8%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05);两组治疗前血脂水平变化比较无明显差异,瑞舒伐他汀组治疗后TC、TG、LDL-C明显低于阿托伐他汀组,HDL-C明显高于阿托伐他汀组,两组比较差异具有统计学意义(P0.01);两组治疗前ba PWV水平比较无明显差异,两组治疗后ba PWV水平较基线值均有显著下降,且瑞舒伐他汀组治疗后ba PWV水平明显低于阿托伐他汀组,两组比较差异具有统计学意义(P0.01);瑞舒伐他汀组治疗后不良反应发生率为17.8%,阿托伐他汀组为31.1%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:瑞舒伐他汀联合规律运动治疗冠心病疗效显著,能明显减少心血管事件的发生,改善患者动脉僵硬度。     

蜈蚣藻多糖对人神经胶质瘤U87细胞及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:研究蜈蚣藻多糖对人神经胶质瘤U87细胞及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法:体外培养U87细胞,MTT法观察蜈蚣藻多糖其生长抑制作用.构建入神经胶质瘤U87细胞裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分成5组,蜈蚣藻多糖3个剂量隔天尾静脉注射,观察相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率、抑瘤率,以此评价蜈蚣藻多糖的抗肿瘤作用.结果:蜈蚣藻...     

人类疱疹病毒6A亚型DR7基因对神经胶质瘤细胞U87增殖､迁移､侵袭能力的影响

目的:构建含人类疱疹病毒6A亚型DR7基因的慢病毒,研究DR7基因表达对神经胶质瘤细胞U87增殖?迁移?侵袭能力的影响?方法:PCR扩增DR7基因,克隆至慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-EGFP,构建pLenti6.3-DR7-IRES2-EGFP重组慢病毒载体,经293T细胞包装重组病毒转染至神经胶质瘤细胞U87,经blasticidin筛选建立稳定表达株,通过细胞增殖实验?细胞周期实验?细胞划痕及Transwell实验研究稳定表达DR7基因对U87细胞的增殖?迁移及侵袭能力的影响?结果:成功构建了pLenti6.3-DR7-6 × His-IRES2-EGFP慢病毒表达载体,筛选了稳定表达DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞株,CCK-8细胞增殖实验显示,稳定表达DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞与阴性对照细胞U87-NC-EGFP?U87细胞相比,细胞增殖活性明显增高,差异具有统计学意义(P < 0.001)?细胞周期检测发现U87-DR7-EGFP细胞S?G2/M期细胞所占比例多于U87-NC-EGFP?U87细胞:S期的比例分别为(34.73 ± 1.12)%?(24.89 ± 0.93)%?(25.39 ± 0.96)%,差异具有统计学意义(P < 0.001);G2/M期分别为(17.35 ± 1.61)%?(11.36 ± 1.50)%?(13.17 ± 1.95)%,差异具有统计学意义(P < 0.05)?细胞划痕实验表明,U87-DR7-EGFP细胞愈合能力明显强于U87-NC-EGFP?U87细胞,划痕6 h愈合率分别为:(33.55 ± 2.83)%?(23.50 ± 3.18)%?(22.03 ± 1.47)%,差异具有统计学意义(P < 0.01);划痕12 h愈合率分别为(70.50 ± 5.39)%?(53.60 ± 4.67)%?(55.09 ± 2.83)%,差异具有统计学意义(P < 0.001)?Transwell实验表明,U87-DR7-EGFP细胞的穿膜数量明显多于U87-NC-EGFP?U87细胞,分别为:(543.00 ± 22.94)?(387.00 ± 15.63)?(412.00 ± 20.30)个,差异具有统计学意义(P < 0.001)?结论:人类疱疹病毒6A亚型DR7基因表达能在体外促进人神经胶质瘤细胞U87增殖?迁移及侵袭,提示其在神经胶质瘤的发生和发展中可能起一定作用?     

白藜芦醇对人脑胶质瘤U87细胞自噬的影响

目的 研究白藜芦醇对脑胶质瘤U87细胞自噬的诱导作用及其可能的作用机制.方法 分别用不同浓度的白藜芦醇处理脑胶质瘤U87细胞12、24、48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测白藜芦醇对U87细胞生长的抑制作用;电子显微镜观察药物处理后U87细胞自噬空泡的出现;逆转录PCR及Western blot分别检测白藜芦醇作用后自噬相关基因微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC-3)、抗Bax交互作用因子(Bif-1) mRNA及蛋白表达的变化.结果 随着药物浓度的增加及作用时间的延长,白藜芦醇对U87细胞的生长抑制作用逐渐增大.电镜检测发现未使用白藜芦醇处理的细胞未出现自噬空泡,而白藜芦醇处理过的细胞出现明显的自噬空泡.白藜芦醇能剂量依赖性地增强自噬相关基因LC-3、Bif-1 mRNA及蛋白水平的表达.结论 白藜芦醇可以通过诱导细胞自噬来抑制U87细胞增殖,LC-3、Bib1基因表达上调是其诱导自噬的可能机制.     

顺铂联合吡柔比星对脑胶质瘤U87细胞株增殖的抑制作用

目的 观察顺铂（CDDP）联合吡柔比星（THP）对脑胶质瘤U87细胞株增殖的抑制作用.方法 采用MTT法检测不同浓度CDDP、THP以及两者联合应用时对U87细胞增殖作用的影响.结果 随药物浓度增加,CDDP组、THP组和联合组对U87细胞增殖抑制作用逐渐增强（均P＜0.01）.联合组对U87细胞增殖抑制率较同浓度CDDP组、THP组明显增加（P＜0.05或P＜0.01）.当CDDP和THP浓度为≤0.625μg/mL时,联合组Q值分别为1.72、1.31,两药联合应用具有协同作用,当CDDP和THP浓度≥1.25 μg/mL时,联合组Q值分别为0.94、0.88、0.86、0.89,两药联合应用具有相加作用.结论 CDDP联合THP较单纯的CDDP或THP抑制U87细胞增殖作用更强,具有浓度依赖性.在较低剂量下就能达到明显肿瘤抑制效应,对杀伤U87细胞具有确切协同效应.     

同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞MMP-2表达、细胞迁移的影响及瑞舒伐他汀的逆转作用

目的 观察瑞舒伐他汀对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达以及对血管平滑肌细胞迁移的影响,探讨Hcy致动脉粥样硬化以及他汀药物逆转的可能机制.方法 体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,加入不同浓度的Hcy分别作用 24、48和72h;在1 000μmol/L Hcy浓度下分别加入不同浓度的瑞舒伐他汀干预,采用免疫印迹法和明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2的表达及酶的活性.在Transwell小室外室中加入1 000μmol/L浓度的Hcy,内室加入定量的大鼠平滑肌细胞悬液,培养48h,观察Hcy对平滑肌细胞迁移侵袭力的影响;同时加入不同浓度瑞舒伐他汀溶液,48h,观察瑞舒伐他汀对Hcy诱导平滑肌细胞迁移侵袭力的影响.结果 Hcy浓度在50～5 000μmol/L时促进血管平滑肌细胞MMP-2蛋白的表达（P＜0.05）;Hcy浓度在50～1 000μmol/L时增强血管平滑肌细胞MMP-2的酶活性（P＜0.05）,浓度在5 000μmol/L时抑制血管平滑肌细胞MMP-2的活性（P＜0.05）.瑞舒伐他汀浓度在10-9～10-5mol/L时,能抑制Hcy对血管平滑肌MMP-2表达和酶活性的增强作用（P＜0.05）.Hcy在50～1 000μmol/L浓度下能刺激血管平滑肌细胞迁移（P＜0.05）;瑞舒伐他汀可以抑制Hcy对血管平滑肌细胞迁移的刺激作用（P＜0.05）.结论 Hcy能影响血管平滑肌细胞MMP-2蛋白的表达,瑞舒伐他汀能抑制Hcy对血管平滑肌细胞MMP-2的表达和酶的活性增强作用,并能抑制Hcy对血管平滑肌细胞迁移的刺激作用,这可能是瑞舒伐他汀抗动脉粥样硬化的作用之一.     

瑞舒伐他汀的临床应用

瑞舒伐他汀（rosuvastatin）是新一代的HMG-COA还原酶抑制剂,能显著降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三脂（TG）及升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）,优于其他他汀类药物,并能抗动脉粥样硬化并逆转斑块,同时可抑制胆固醇酯在巨噬细胞的堆积压,抑制平滑肌细胞的增殖、迁移,抑制血栓形成,是一种很重要、有效且耐受性良好的治疗药物。现对其药效学、临床研究及不良反应做一个综述。     

瑞舒伐他汀对兔动脉粥样硬化的影响

目的 观察瑞舒伐他汀对兔动脉粥样硬化的影响.方法 新西兰大白兔30只,随机分为对照组、模型组与治疗组,每组10只.对照组以标准基础饲料喂养.模型组和治疗组以高脂饲料喂养4周后,行颈动脉内膜球囊损伤术,分别继续给予高脂饲料及高脂饲料加瑞舒伐他汀喂养6周.于4、10周末取血测定血脂及脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的...     

探讨阿托伐他汀与瑞舒伐他汀对冠心病的治疗效果

目的 对比阿托伐他汀与瑞舒伐他汀对冠心病的治疗效果.方法 方便选取该院2014年1月—2016年1月诊治的冠心病患者200例,分为阿托伐他汀组(A组)以及瑞舒伐他汀组(B组),A组服用阿托伐他汀进行诊治,B组服用瑞舒伐他汀进行诊治.在诊治前/诊治后半年以及诊治后1年在早上空腹时抽取静脉血,之后检测其血脂/三酰甘油等指标.结果 A组血清总胆固醇治疗前为(5.94±0.55)mmol/L,6个月后为(4.66±0.44)mmol/L,12个月为(4.00±0.48)mmol/L;B组血清总胆固醇治疗前为(6.09±0.49)mmol/L,6个月后为(5.15±0.48)mmol/L,12个月后为(4.76±0.42)mmol/L;B组三酰甘油/同型半胱氨酸指标优于A组,差异有统计学意义,P<0.05.结论 瑞舒伐他汀比阿托伐他汀在治疗冠心病的效果上来看结果 更加显著.