PI_3K/Akt/mTOR通路与急性早幼粒细胞白血病关系的研究进展

PI3K/Akt/mTOR信号途径作为细胞内重要信号转导通路之一,在维持细胞增殖、存活和凋亡中发挥关键作用。当PI3K/Akt/mTOR通路分子的基因功能失常、上游调控信号异常放大时使该信号通路异常激活,细胞生存与凋亡失衡,正常细胞发生恶性转化。研究表明,PI3K/Akt/mTOR信号通路在急性早幼粒细胞白血病存在异常激活,对肿瘤细胞的生存、增殖、分化、凋亡和耐药性中起重要作用。现就近年来在PI3K/Akt/mTOR信号通路与急性早幼粒细胞白血病关系研究领域的进展予以简要综述。     

RIP3/MLKL通过激活4EBP1-eIF4E通路诱导程序性坏死

目的:程序性坏死是一种由受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)和混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)介导的细胞死亡形式,有研究指出哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路可能参与程序性坏死的调控,真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4Ebinding protein 1,4EBP1)-真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)通路是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白最重要的下游分子通路之一,然而此通路是否参与程序性坏死的发生,目前尚无相关研究。本研究旨在探索4EBP1-eIF4E通路在程序性坏死中是否发生改变。方法:首先向小鼠上皮样成纤维细胞系L929细胞中加入程序性坏死诱导剂TSZ(TNF-α/SM-164/Z-VAD-FMK),在光学显微镜下观察细胞坏死情况;进一步向敲除RIP3和MLKL基因的L929细胞中加入TSZ,采用碘化丙啶(propid...     

雷帕霉素协同去甲氧柔红霉素诱导人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡的作用

目的:探讨去甲氧柔红霉素( idarubicin,IDA)联合雷帕霉素(rapamycin,Rapa)抗人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL) Jurkat细胞株的效应及机制.方法:应用CCK-8法分析两药联用对细胞增殖的影响;Isobologram法分析两药联合作用的性质;电镜形态学观察和Annexin V/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡情况;免疫印迹法检测凋亡相关基因Caspase3、PARP、Caspase8、Caspase9及Akt、p-Akt、P85S6K、p-P85S6K、P70S6K、p-P7OS6K、ERK1/2、p-ERK1/2等蛋白质水平表达.结果:CCK-8法示IDA联合Rapa能明显降低IDA的半数抑制浓度(50% inhibition concentration,IC50)值.Isobologram法示两药联合指数小于1.免疫印迹法示两药联用组较IDA单用组更能激活Caspase3和底物PARP,Caspase8和Caspase9在两药联用组均呈现明显激活.IDA联用Rapa后能使mTOR 信号通路上游的Akt及下游的P85S6K、P70S6K分子磷酸化水平明显降低,并能协同下调ERK的磷酸化水平.结论:Rapa和IDA对Jurkat细胞的生长抑制具有协同作用,两药联用时细胞凋亡增加,且通过线粒体和细胞膜双途径增强凋亡效应.其协同机制可能与Rapa逆转IDA引起的Akt/mTOR信号通路激活,并抑制ERK信号活化有关.     

基于SDF-1/CXCR4信号通路探讨新安鼻渊方流浸膏对急性鼻窦炎大鼠嗅上皮神经元细胞凋亡的影响

目的 基于SDF-1/CXCR4信号通路探讨新安鼻渊方流浸膏对急性鼻窦炎大鼠嗅上皮神经元细胞凋亡的影响.方法 40只SD大鼠分为对照组,模型组,治疗组和抑制剂组,每组10只.除对照组外,其余各组大鼠采用金黄色葡萄球菌悬液注射法构建急性鼻窦炎模型,对照组予以无菌生理盐水代替.造模后第7天开始采用灌胃方式连续给药1周,每天...     

虎杖苷通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对脓毒症急性肺损伤的保护作用

[目的]观察虎杖苷(polydatin,PD)对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用,并探究其作用机制.[方法]将50只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PD高、中、低剂量组,每组10只.模型组和PD高、中、低剂量组大鼠采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症急性肺损...     

自噬相关蛋白4EBP1与eIF4E在几种常见脑瘤组织中的表达

目的：探讨自噬相关蛋白4EBP1与eIF4E在星形细胞瘤、脑膜瘤、少突胶质细胞瘤、胆脂瘤和正常脑组织中的表达及其差异。方法应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测4种脑瘤中4EBP1和eIF4E mRNA的表达情况,采用免疫组化SABC法和Western blotting检测4EBP1和eIF4E在4种脑瘤组织中的表达情况,并应用SPSS 17．0统计软件,分析4EBP1和eIF4E在4种脑瘤以及正常脑组织中的表达差异。结果4种脑瘤细胞均转录4EBP1和eIF4E mRNA,表达4EBP1、eIF4E蛋白,同时伴随着自噬标志蛋白LC-3的表达和LAMP-2A的高表达。免疫组化结果显示,与正常组织相比,4EBP1和eIF4E在4种肿瘤中的表达量明显升高,方差分析结果表明4EBP1和eIF4E在4种肿瘤组织与正常脑组织中的表达差异有统计学意义（P＜0．01）。结论自噬相关蛋白4EBP1和eIF4E在4种脑肿瘤组织中的表达明显上调,说明4EBP1和eIF4E及其自噬信号通路在肿瘤发生、发展中可能发挥重要作用,可作为脑瘤治疗的潜在靶标以及为临床诊断提供一种新的依据。     

JQ1通过抑制Akt/mTOR通路协同阿霉素抑制人骨肉瘤细胞的实验研究

目的 探索BRD4抑制剂JQ1协同传统化疗药物阿霉素（adriamycin, ADM）治疗骨肉瘤的有效性。方法 选取人骨肉瘤细胞系143b,在体外进行CCK8细胞增殖实验,了解ADM和JQ1对143b细胞的半数抑制率（IC50）剂量;应用低于IC50剂量的ADM或JQ1或联合应用ADM和JQ1,进行平板克隆实验和细胞凋亡实验;利用裸鼠皮下成瘤实验,观察应用ADM或JQ1或联合应用ADM和JQ1对体内肿瘤生长的抑制,以及诱导体内肿瘤细胞凋亡的作用;通过Western印迹法探索JQ1协同ADM抑制骨肉瘤细胞的可能机制。结果 ADM和JQ1对人骨肉瘤细胞系143b的IC50分别为0.23μmol/L和9.47μmol/L;选取0.2μmol/L ADM和8μmol/L JQ1进行平板克隆和细胞凋亡实验。单独应用ADM或JQ1可以抑制骨肉瘤细胞的克隆形成能力并诱导凋亡,联合ADM和JQ1可显著抑制骨肉瘤细胞的克隆形成能力并诱导凋亡,效果显著优于单药（P<0.05）。单独应用ADM或JQ1可抑制小鼠体内骨肉瘤的生长,联合应用ADM和JQ1对肿瘤生长的抑制要明显优于单独用药,差异具有统计学意义（P<0.05）。Caspase3免疫组化染色提示单独应用ADM或JQ1都可以在体内诱导人骨肉瘤细胞143b的凋亡,联合ADM和JQ1显著增强了对骨肉瘤细胞凋亡的诱导。Western印迹法提示骨肉瘤细胞在单独应用ADM后,磷酸化的Akt（p-Akt）和磷酸化的mTOR（p-mTOR）蛋白表达都上调了,而JQ1能够抑制p-Akt和p-mTOR的表达,JQ1联合ADM处理过的骨肉瘤细胞中p-Akt和p-mTOR的表达显著低于单独应用ADM组。结论 JQ1联合ADM能够显著抑制骨肉瘤细胞在体外和体内的生长,并诱导骨肉瘤细胞的凋亡;JQ1可能是通过抑制Akt/mTOR通路协同ADM发挥抑制人骨肉瘤细胞的作用。     

Effects of Liancao-Xieli capsule on intestinal mucosal inflammatory factors and TLR4/PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in mice with ulcerative colitis

Objective: To observe the effect of Liancao-Xieli capsule on intestinal mucosal inflammatory factors and TLR4/PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in mice with ulcerative colitis (UC); Methods: 40 male C57BL/6 mice were randomly divided into the control group, model group, Liancao-Xieli group and mesalazine group, with 10 mice in each group. In addition to the control group, the remaining three groups of mice were induced by 3％ dextran sulfate sodium (DSS) to induce acute UC model. During the modeling period, mice in each group were given corresponding drugs and normal saline by gavage. At the end of the experiment, HE staining was used to observe the pathological changes of colonic tissue in each group, and ELISA was used to detect the inflammatory factors (TNF-α, IL-6, IL-1β, IL-8, IL-17, and INF-γ) in serum and colonic tissue. The expression levels of TLR4/PI3K/Akt/mTOR signaling pathway related proteins were also detected by Western blot; Results: Compared with the model group, Liancao-Xieli capsule could significantly increase the colon length and decrease the score of colon histopathology in UC mice (P<0.01). In addition, the levels of TNF-α, IL-6, IL-1β, IL-8, IL-17, and INF-γ were significantly reduced in serum and colon tissue, and the expressions of TLR4, PI3K, p-Akt and p-mTOR were significantly down-regulated in Liancao-Xieyi group when compared with the model group (P<0.01).While the expressions of Akt and mTOR were not significantly affected in Liancao-Xieyi group (P>0.05); Conclusion: Liancao-Xieli capsule can reduce the secretion of inflammatory factors, improve the intestinal mucosal damage and inflammatory response in UC by inhibiting the activation of TLR4/PI3K/Akt/mTOR signaling pathway.