甲状腺肿瘤组织中p14^ARF基因纯合性缺失及其产物表达状况的研究

目的：检测甲状腺肿瘤组织中p14^ARF基因变异及其产物的表达,探讨此基因与甲状腺肿瘤发生发展的关系.方法：应用双重PCR和免疫组化SP法分别检测20例甲状腺腺瘤和28例甲状腺癌组织中p14^ARF基因纯合性缺失及其蛋白表达状况.28例甲状腺癌包括11例甲状腺滤泡癌,12例乳头状癌,4例髓样癌以及1例未分化癌.结果：1）p14^ARF基因在甲状腺腺瘤及癌中的纯合性缺失率分别为5.0%（1/20）和42.9%（12/28）,两者差异有统计学意义,P=0.0036.2）p14^ARF蛋白在甲状腺腺瘤及甲状腺癌中的阳性率分别为90.0%（18/20）和35.7%（10/28）,两者差异有统计学意义,P=0.0002.结论：甲状腺肿瘤中p14^ARF基因的纯合性缺失是其蛋白表达失活的重要机制之一,与甲状腺肿瘤的发生发展密切相关.p14^ARF可能是甲状腺肿瘤的分子标志物之一,可作为鉴别甲状腺腺瘤与滤泡癌的辅助指标.     

p14ARF和MDM2在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的 研究甲状腺肿瘤组织中p14ARF和MDM2蛋白的表达及临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测78例甲状腺乳头状癌(thyroid papillary carcinoma,PTC)、34例甲状腺乳头状微小癌(thyroid papillary microcarcinoma,PTMC)和45例甲状腺腺瘤中p14ARFRF和MDM2蛋白的表达.结果 p14ARF和MDM2蛋白在三组中表达差异有统计学意义(P<0.01).p14ARF蛋白在PTC组的阳性率显著低于腺瘤组(P=0.002)及PTMC组(P=0.008).MDM2在PTC组的阳性率显著高于腺瘤组(P=0.000)及PT-MC组(P=0.009).PTC组与PTMC组中p14ARF蛋白和MDM2蛋白表达显著负相关.p14ARF蛋白表达与PTC组的淋巴结转移显著负相关.结论 p14ARF和MDM2可能参与了PTC与PTMC的发生和发展,p14ARF可作为临床判定PTC生物学行为的辅助指标.     

胃癌组织中PTEN和VEGF的表达及其相关性

目的：研究胃癌组织中PTEN（phosphatase and tensin homologne derived from chromosome ten）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor）的表达、相关性及其临床意义.方法：应用SABC免疫组织化学方法检测108例胃癌和64例胃良性病变中PTEN和VEGF的表达状况.结果：PTEN在胃癌和胃良性病变中的阳性表达率分别为45.4%（49/108）和87.5%（56/64）（χ^2=29.99;P＜0.001）,VEGF在胃癌和胃良性病变中的阳性率分别为77.8%（84/108）和7.8%（5/64）（χ^2=78.78;P＜0.001）;PTEN阴性胃癌中VEGF阳性表达率为59.2%（29/49）,明显低于PTEN（-）VEGF阴性胃癌93.2%（55/59）（χ^2 =17.94;P＜0.001）.PTEN阳性表达与胃癌Lanren分型、浸润深度、淋巴结转移及PTNM分期有关,P＜0.01;VEGF与胃癌浸润深度、淋巴结转移及PTNM分期有关,P＜0.01.结论：胃癌中存在PTEN下调和VEGF上调,且两者具有负相关;二者的表达水平可作为判定胃癌病理生物学行为的客观指标.     

p14ARF和p53在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的研究子宫内膜癌组织中p14ARF和p53的表达及意义.方法采用免疫组化LSAB法,检测118例子宫内膜癌及30例正常宫内膜组织中p14ARF及p53的表达.结果p14ARF阴性、弱阳性、中度阳性和强阳性表达率在子宫内膜癌中分别为25.4%(30/118)、38.1%(45/118)、14.4%(17/118)和22.0%(26/118),与正常内膜0(0/30)、56.7%(17/30)、33.3%(10/30)和10.0%(3/30)相比差异有统计学意义,P<0.001,子宫内膜癌中p14ARF表达缺失的比例高于正常宫内膜;p14ARF表达水平与手术病理分期、宫颈间质受累和淋巴结转移相关;与病理分级、组织学类型和肌层侵犯深度无关;不同p14ARF表达水平患者生存率差异无统计学意义,P=0.578 1.p53阴性、弱阳性、中度阳性和强阳性表达率在子宫内膜癌中分别为13.6%(16/118)、40.1%(48/118)、28.0%(33/118)和17.8%(21/118);与正常内膜相比分别为36.7%(11/30)、36.7%(11/30)、16.2%(5/30)和10.0%(3/30)差异有统计学意义,P=0.01,子宫内膜癌中p53阳性表达的比例高于正常宫内膜;p53表达与肿瘤分期、盆腔淋巴结转移和肌层侵犯深度相关,与病理分级、组织学类型和宫颈间质受累无关;不同p53表达水平患者生存率差异无统计学意义,P=0.416 6;在子宫内膜癌组织中p14ARF与p53表达呈负相关,r＝-0.243,P＝0.008.结论p14ARF和p53异常表达与子宫内膜癌发生密切相关,但对其预后的影响有待进一步的研究.     

乳腺癌组织中PTEN和Survivin及p53的表达及相关性研究

目的：研究抑癌基因PTEN、凋亡抑制基因Survivin、p53蛋白在乳腺癌及乳腺增生症中的表达情况,并探讨其相关性及临床意义。方法：该实验采用SP法,对65例乳腺癌和20例良性增生症患者石蜡包埋切片中的PTEN、Survivin及p53蛋白进行检测。结果：PTEN阳性表达率在乳腺癌组为41．54％,在乳腺增生症组为90．00％,X^2=14．42,P〈0.05;在乳癌中有腋淋巴结转移组为25．71％,无腋淋巴结转移组为60．00％,X^2=7．28,P〈O．05。Survivin阳性表达率在乳腺癌组为75．38％,在乳腺增生症组为15．00％,X^2=23．48,P〈0.05。p53阳性表达率在乳腺癌组为58．46％,在乳腺增生症组为10．00％,X^2=14．42,P〈0．05;在乳癌中有腋淋巴结转移组为71.43％,无腋淋巴结转移组为43．33％,X^2=5．25,P〈0.05。在乳腺癌组织中PTEN与Survivin的表达成负相关,PTEN与p53的表达无明显相关,Survivin与p53的表达成正相关。结论：PTEN在乳腺癌中的阳性表达率明显低于乳腺增生症,Survivin和p53在乳腺癌中的阳性表达率明显高于乳腺增生症,PTEN和p53的表达与腋淋巴结转移有一定的相关性。在乳腺癌组织中PTEN、p53和Survivin的表达之间存在相关性。     

外生殖器鳞癌中PTEN与Fas基因蛋白的表达及意义

目的探讨PTEN与Fas蛋白在外生殖器鳞癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组化S-P染色法检测外生殖器鳞癌组织中PTEN与Fas蛋白的表达。结果外生殖器鳞癌组织中PTEN与Fas蛋白表达的阳性率分别为47.5%和45.0%,明显低于正常皮肤黏膜（93.3%,100%,P〈0.05）;淋巴结转移者中PTEN阳性表达率为18.2%,明显低于无淋巴结转移者（58.6%,P〈0.05）;淋巴结转移者中Fas的阳性表达率为45.5%,与无淋巴结转移者比较（44.8%）表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论PTEN和Fas异常低表达与外生殖器鳞癌的发生、发展有关;PTEN的低表达与淋巴结转移有关;Fas的表达与淋巴结转移无关,开展PTEN、Fas基因蛋白的检测对指导临床治疗将有重要意义。     

乳腺肿瘤组织AQP1表达及其临床意义

目的:探讨水通道蛋白1(AQP1)在乳腺癌组织及乳腺良性肿瘤中的表达特点,以及其在乳腺癌发生、发展中的意义.方法:收集乳腺癌136例、乳腺良性肿瘤68例,应用免疫组织化学方法测定 AQP1在乳腺癌和乳腺良性肿瘤组织中表达水平及分布特点.结果:AQP1在乳腺良性肿瘤细胞及其周围的血管内皮细胞中呈低表达或不表达,但是在乳腺癌腺上皮细胞及乳腺癌组织中的血管内皮细胞呈高表达.两组AQP1阳性细胞的表达率分别为35.66±7.32和277.39±19.35,两者差异有统计学意义,P<0.001.同时乳腺癌组织中AQP1表达及分布存在异质性.结论:AQP1在乳腺良、恶性肿瘤组织中表达存在显著差异,AQP1在乳腺癌组织中呈过高表达,这可能与乳腺癌的恶性生物学行为有关.     

非小细胞肺癌组织中p15基因纯合性缺失和血管内皮生长因子过表达的研究

目的:探讨p15基因纯合性缺失和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)过表达的相关性及两者与非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)生物学特征之间的关系。方法:提取DNA,采用PCR技术,分别对97例NSCLC组织和20例癌旁正常组织进行p15基因纯合缺失检测;提取组织RNA,采用RT-PCR技术分析VEGF基因表达水平。结果:NSCLC组织中p15基因纯合缺失率和VEGF表达率分别为44.3%(43/97)和66.0%(64/97),显著高于癌旁正常组织的5%(1/20)和10%(2/20),P<0·05。p15基因纯合缺失与TNM分期(P=0·001)和淋巴结转移相关(P=0·018),而与组织学类型无相关性,P=5·731;VEGF过表达与TNM分期和淋巴结转移相关,P值均<0·01;而与组织学类型无相关性,P=2·113。p15基因纯合缺失与VEGF表达呈正相关。结论:p15基因纯合缺失和VEGF基因过表达可能在NSCLC的发生及恶性进展中发挥一定的作用。     

甲状腺肿瘤中p16基因甲基化及p16蛋白的表达

目的探讨甲状腺肿瘤细胞中p16基因异常甲基化及p16蛋白的表达。方法采用甲基化敏感的限制性内切酶SmaI消化DNA，PCR扩增p16基因外显子1，分析60例甲状腺肿瘤中p16基因外显子15′CpG岛异常甲基化，采用免疫组化Envision法检测60例甲状腺肿瘤标本细胞中p16蛋白的表达。结果60例甲状腺肿瘤中p16基因外显子。5′CpG岛异常甲基化率为15．0％（9／60）。30例甲状腺癌中为30．0％（9／30）；30例腺瘤中无异常甲基化，组间比较差异有显著性（P〈0．001）。60例甲状腺肿瘤中p16蛋白阳性表达率为46．7％／60）。30例腺瘤中p16蛋白阳性表达率为60．0％（18／30）；30例甲状腺癌中为33．3％（10／30），组间较差异有显著性（P〈0．05）。结论p16基因外显子t5′CpG岛异常甲基化与甲状腺癌的发生、发展有关，其主要机制可能与甲状腺恶性肿瘤中p16基因失活导致P16蛋白表达缺失有关。     

前列腺癌组织中p57kip2和雄激素受体的表达及其意义

目的研究p57kip2蛋白和雄激素受体在前列腺癌组织中的表达状况,探讨其与前列腺癌的发生和分化程度的关系。方法应用免疫组织化学技术(SP法)检测36例前列腺癌和10例良性前列腺增生组织中p57kip2蛋白和雄激素受体的表达状况。结果p57kip2蛋白在前列腺癌组织中的阳性表达率为52.78%,良性前列腺增生组织中为90%,两者差异有统计学意义,χ2=4.552,P<0.05。高分化癌组织中的阳性表达率为77.78%,低分化癌为28.57%,两者的差异有统计学意义,χ2=5.315,P<0.025。雄激素受体在前列腺癌组织中的阳性表达率为47.22%,良性前列腺增生组织中为90%,两者差异有统计学意义,χ2=5.828,P<0.025。不同分化程度癌组织中的雄激素受体阳性表达率差异无统计学意义,χ2值均<2.0,P值均>0.25。结论p57kip2蛋白和雄激素受体的低表达与前列腺癌的发生和分化程度降低有关。     

Reduced expression and homozygous deletion of annexin A10 in gastric carcinoma

Annexins (ANXs) are a family of calcium and phospholipid binding proteins that have been implicated in diverse important biological and physiological process. ANX A10 (ANXA10) is a member of this family, though little is known about its functions. In the present study, array based comparative genomic hybridization (CGH) was used to screen DNA copy number change in gastric cancer cell lines and the results obtained were compared with oligonucleotide microarray data. DNA loss of the ANXA10 locus in chromosome 4q33 was found in several gastric cancer cell lines by array based CGH and these cell lines showed decreased ANXA10 expression by oligonucleotide microarray analysis. Functional analysis using siRNA and full‐length cDNA transfection in gastric cancer cell lines demonstrated that ANXA10 regulates gastric cancer cell proliferation. Of the 585 primary gastric carcinoma tissues examined, ANXA10 expression at the protein level was found to be reduced in 289 (49.4%) cases. Quantitative real‐time PCR analysis validated loss of DNA at the ANXA10 locus in gastric carcinomas with reduced ANXA10 expression. By univariate survival analysis, lack of ANXA10 expression was associated with poor survival (p = 0.016). These results suggest that ANXA10 inactivation by chromosomal deletion may play a role during gastric cancer progression. © 2009 UICC     

甲状腺癌中MCM7和p27的表达及临床意义

目的探讨MCM7和p27蛋白的表达与甲状腺癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例甲状腺癌、30例甲状腺腺瘤、30例结节性甲状腺肿及20例正常甲状腺组织中MCM7和p27蛋白的表达。结果甲状腺癌组织中MCM7蛋白的阳性表达率为100.0%（50/50）,均显著高于甲状腺腺瘤20.0%（6/30）、结节性甲状腺肿23.3%（7/30）及正常甲状腺组织20.0%（4/20）（P〈0.01,P〈0.01,P〈0.01）。甲状腺癌组织中p27蛋白的阳性表达率为22.0%（11/50）,均显著低于甲状腺腺瘤100.0%（30/30）、结节性甲状腺肿100.0%（30/30）及正常甲状腺组织100.0%（20/20）（P〈0.01,P〈0.01,P〈0.01）。甲状腺癌中MCM7与p27蛋白的表达呈负相关关系（r=-0.326,P〈0.05）。结论 MCM7蛋白的高表达和p27蛋白的低表达可能涉及了甲状腺癌的发生过程。二者联合检测,可能可作为临床早期诊断和判断甲状腺肿瘤细胞增殖活性的生物学指标。     

HYPERMETHYLATION OF p14^ARF PROMOTER REGION AND EXPRESION OF p14^ARF GENE PRODUCT IN NON-SMALL CELL LUNG CANCER

Objective： This study was designed to investigate promoter methylation status and protein expression of p14^ARF gene in non-small cell lung cancer, and value the role of p14^ARF promoter methylation in carcinogenesis of non-small cell lung cancer. Methods： Promoter methylation status and protein expression of p14^ARF gene in 40 cases of non-small cell lung cancer were analyzed by methylation specific polymerase china reaction （MSP）, restriction enzyme-related polymerase chain reaction （RE-PCR） and immunohistochemistry （IHC）. Results： The positive rates of p14^ARF promoter methylation in tumor tissues and normal tissues adjacent to cancer were 17.5% （7/40） and 2.5% （1/40） respectively. There were statistically significant differences between them, P〈0.05. The results of RE-PCR were consistent with that of MSP. The expression rate of p14^ARF protein in tumor tissues was significantly lower than that in normal tissues adjacent to cancer, p〈0.01. Promoter methylation status and protein expression of p14^ARF gene in non-small cell lung cancer showed significantly an inverse correlation （r=-0.56, P〈0.01）, and both of them did not relate statistically with the clinicopathologic characteristics of patients such as histological classification, clinical stage, differentiation grade and lymph node involvement. Conclusion： Promoter methylation is a crucial mechanism of inactivation of p14^ARF gene. Promoter methylation of p14^ARF gene might he involved in carcinogenesis of non-small cell lung cancer, and is an early event in development process of non-small cell lung cancer. It might be used as a new target in gene treatments in the future.     

PTEN及bcl-2和p53蛋白表达与乳腺癌预后的关系

目的 :探讨新的抑癌基因PTEN在人乳腺癌组织中的表达、与bcl 2、p5 3的相关性及其与乳腺癌临床病理学特征和预后的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测62例浸润性乳腺癌 (包括浸润性导管癌、浸润性小叶癌、髓样癌等 )标本中PTEN、bcl 2及p5 3蛋白的表达。结果 :62例乳腺癌标本中PTEN、bcl 2及p5 3阳性表达率分别为 64 5 % ( 4 0 /62 )、5 6 5 % ( 3 5 /62 )及2 7 4% ( 17/62 ) ;PTEN与bcl 2之间不具有相关性 ,P >0 0 5 ;PTEN与p5 3之间显著相关 ,P <0 0 1。乳腺癌PTEN蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤组织学类型、肿瘤大小之间差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;与肿瘤细胞学分级、淋巴结有无转移及预后之间差异有统计学意义 ,P <0 0 5 ;PTEN低表达患者肿瘤细胞学分级高、淋巴结转移阳性率高、5年生存率低。结论 :1)抑癌基因PTEN在乳腺癌中确实存在突变或缺失。其表达水平的高低作为判断乳腺肿瘤细胞增殖活性、侵袭力及转移的重要指标。 2 )PTEN与bcl 2协同表达与预后相关 ,可作为乳腺癌预后评估的有效指标。 3 )PTEN突变或缺失可能与p5 3存在一定的相关性 ,但其作用机制有待进一步研究。     

p14ARF蛋白在人脑胶质瘤中的缺失及其临床意义

目的　研究人脑胶质瘤中p14ARF蛋白的缺失情况及其与临床病理的关系。方法　采用链霉菌素 生物素 (SP)免疫组织化学法对 5 5例脑胶质瘤标本进行分析。结果　在 5 5例人脑胶质瘤标本中p14ARF缺失率为 5 0 .9%。I级 II级病例p14ARF缺失率为 32 % ,III级 IV级病例p14ARF缺失率为 6 6 .7% (P <0 .0 5 )。结论　p14ARF蛋白缺失与脑胶质瘤的发生发展有一定的相关性 ,提示p14ARF基因的失活可能是脑胶质瘤恶性演变的重要因素。     

胆囊癌组织中nm23-H1和p16蛋白表达的意义

目的 :探讨胆囊癌组织中nm2 3 H1和p16基因蛋白表达的意义。方法 :应用免疫组织化学方法检测 4 2例胆囊癌组织中nm2 3 H1和p16蛋白的表达 ,并与良性胆囊组织作对比研究。结果 :4 2例胆囊癌组织中nm2 3 H1和p16蛋白的阳性表达率分别为 4 0 5 %、4 7 6 % ,均明显低于胆囊良性组织 ,且其表达水平与肿瘤的临床病理分期、转移及预后有密切关系。结论 :检测nm2 3 H1和p16蛋白表达水平可以作为判断胆囊癌转移和预后的指标。     

LincRNA-PVT1在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的：研究长链非编码RNA-PVT1（large intergenic non-coding RNA-PVT1,LincRNA-PVT1）在甲状腺癌中的表达及意义。方法选取甲状腺癌组织70例,甲状腺良性结节组织50例,分别选取距离肿瘤（良性结节）边缘＞2 cm的癌旁（结节旁）组织作为对照。SYBR green实时荧光定量PCR法检测LincRNA-PVT1在甲状腺癌、癌旁、良性结节和结节旁4类组织中的相对表达量,分析甲状腺癌中LincRNA-PVT1的相对表达与临床病理特征的关联。结果甲状腺癌、癌旁、良性结节、结节旁组织中LincRNA-PVT1的相对表达量分别为3．27±0．43、2．39±0.99、2．57±0．54、2．45±0．76,甲状腺癌组织中PVT1的相对表达量高于其他三组（均P＜0．05）,其他三组间比较差异均无统计学意义（均P＞0．05）。甲状腺癌中LincRNA-PVT1的相对表达量在TNM分期方面差异具有统计学意义（P＜0．05）,而在年龄、性别、游离三碘甲原氨酸（free triiodothyronine antigen,FT3）水平方面差异均无统计学意义（均P＞0．05）。结论 LincRNA-PVT1在甲状腺癌组织中表达升高,其表达与患者TNM分期有关。     

甲状腺癌中p53蛋白的表达及其与细胞增殖状态和预后的关系

探讨ｐ５３蛋白在甲状腺癌中的表达及其与细胞增殖状态和预后的关系。方法应用免疫组化技术检测８１例ＴＣ中ｐ５３蛋白表达,分析其与肿瘤细胞增殖活性及临床病理特性的关系。