全反式维甲酸联合奥沙利铂对人SMMC-7721肝癌细胞株的作用

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)联合奥沙利铂(L-OHP)对人SMMC-7721肝癌细胞增殖及凋亡的影响.方法:选用ATRA(10-5mol/L)及不同浓度的L-OHP(10mg/L、20mg/L、40mg/L),并选用10-5mol/L的ATRA分别联合L-OHP(10mg/L、20mg/L、40mg/L)作用于SMMC-7721肝癌细胞24h、48h、72h;采用MTT比色法观察其对SMMC-7721肝癌细胞的生长抑制作用,倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用流式细胞术分析药物作用48h时SMMC-7721细胞的周期分布和凋亡的情况.结果:ATRA及不同浓度L-OHP单药及联合均可显著抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长,细胞形态改变,凋亡比例增加,并呈剂量-时间依赖性;两药联合较单药相比作用明显增强(P<0.01);ATRA联合20mg/LL-OHP与ATRA联合40mg/LL-OHP相比,作用细胞48h及72h时,对细胞生长抑制作用无统计学差异;两药联合较单药相比,细胞凋亡率明显增加,细胞阻滞S期增强(P<0.01).结论:ATRA可抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长并诱导细胞凋亡,与L-OHP联用后作用增强并可减少奥沙利铂用量,具有协同作用.     

雌激素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探究雌激素对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法采用普通聚合酶链反应(PCR)技术、Western印迹实验检测肝癌细胞株中雌激素受体(ER)α、ERβ的mRNA和蛋白质的表达情况;细胞增殖实验检测雌激素对肝癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测雌激素对肝癌细胞凋亡率的影响;Tunel染色法检测雌激素对肝癌细胞晚期凋亡率的影响;雌激素处理肝癌细胞株后,基因芯片技术检测表达增加的凋亡基因。结果 ERα和ERβ在肝癌细胞株SMMC7721、HepG2、Bel-7404、huh7、MHCC-97L、MHCC-97H、PLC、LM3、SK-HEP-1及Bel-7402中均有表达;不同浓度的雌激素处理肝癌细胞不同时间后,可显著抑制肝癌细胞增殖,且抑制效果存在时间和剂量依赖性;与0.00μmol/L组相比,不同浓度的雌激素(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00、80.00和160.00μmol/L)处理HepG2、SMMC-7721细胞24 h、48 h后,HepG2和SMMC-7721细胞的细胞凋亡率增加,存在剂量和时间的依赖性;Tunel结果显示,与0.00μmol/L组相比,10.00μmol/L雌激素处理HepG2、SMMC-7721细胞48 h后,细胞晚期凋亡率均显著增加;20.00μmol/L雌激素处理SMMC-7721细胞48 h后,凋亡基因BAK1、GADD45A、HRK、LTA、TNFRSF-10A均表达增加。结论雌激素对人肝癌细胞具有抑制生长、诱导凋亡的作用。     

来那度胺对人肝癌SMMC-7721细胞生长的影响

目的探讨来那度胺对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法利用MTS法检测来那度胺对SMMC-7721细胞增殖的影响;实时定量PCR、Western印迹检测来那度胺作用于SMMC-7721细胞后血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 50μmol/L的来那度胺对肝癌细胞SMMC-7721增殖有抑制作用;实时定量PCR和Western印迹结果显示,以25、50、100μmol/L来那度胺处理SMMC-7721细胞12 h后,VEGF mRNA表达水平显著减低(P<0.05);Western印迹结果表明,25、50、100μmol/L来那度胺处理SMMC-7721细胞24 h后,VEGF蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论来那度胺可能通过抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤血管生成发挥双重抗肿瘤作用。     

抗人DR5单克隆抗体诱导肝癌细胞株SMMC-7721凋亡实验研究

目的探讨抗人DR5单克隆抗体对肝癌细胞株SMMC-7721致凋亡作用。方法常规培养肝癌细胞SMMC-7721,通过MTT法检测细胞抑制作用,流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果抗人DR5单抗能够诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,在抗人DR5单抗浓度2μg/ml作用48h,对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤率可达50.10%,增加抗人DR5单抗浓度细胞凋亡作用无明显增加。结论抗人DR5单抗能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,以死亡受体为靶点的抗体制剂为肝癌治疗提供新途径。     

NS-398增强奥沙利铂诱导结肠癌细胞凋亡的作用

目的体外观察环氧化酶-2选择性抑制剂NS-398对奥沙利铂(L-OHP)抑制结肠癌HCT-8细胞增殖和诱导凋亡的协同作用。方法采用CCK-8法检测不同浓度L-OHP(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μmol/L)单用及联合(20.00、80.00μmol/L)NS-398作用于人结肠癌HCT-8细胞24 h后的细胞增殖抑制率;采用流式细胞仪检测细胞周期。琼脂糖凝胶电泳技术检测L-OHP(2.50、5.00、10.00、20.00 mg/L)单用及联合NS-398(10.00、100.00μmol/L)对HCT-8细胞作用48 h的凋亡情况。结果 NS-398、L-OHP单用及二者联合对HCT-8细胞均有抑制增殖作用,可阻止细胞周期进程,诱导细胞凋亡;L-OHP联合NS-398对HCT-8细胞的作用明显强于L-OHP单用,二者具有协同作用,且随着NS-398剂量的增高而增强(P<0.01)。结论 NS-398能够协同L-OHP增强其对结肠癌细胞生长抑制和凋亡效应。     

维生素K2调控Wnt/β-catenin信号对肝癌细胞侵袭、凋亡的影响及机制研究

目的探讨维生素K2调控Wnt/β-catenin信号对肝癌细胞侵袭、凋亡的影响及机制。方法 5、10、20、40、80μmol/L的维生素K2处理人肝癌SMMC-7721细胞24、48、72 h后,CCK8实验检测细胞的增殖情况;22μmol/L的维生素K2处理细胞48 h后,Transwell小室检测细胞的侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting检测MMP-2、MMP-9、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达。结果 10、20、40、80μmol/L的维生素K2处理肝癌细胞不同时间均可显著抑制癌细胞的增殖,具有浓度依赖性和时间依赖性(P0.01)。根据IC50值选择22μmol/L的维生素K2为研究对象,维生素K2组细胞的凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达均显著高于对照组,细胞侵袭数及MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达均显著低于对照组(P0.01)。结论维生素K2可通过下调Wnt/β-catenin信号抑制肝癌细胞的增殖及侵袭能力,诱导细胞凋亡。     

刺五加皂甙对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响

目的研究刺五加皂甙(ASS)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法体外培养人肝癌SMMC-7721细胞，用浓度0.25、0．5、1．0mg／ml的刺五加皂甙作用细胞，于12、24、48h后，用苏木素-伊红(HE)染色法及电镜技术观察凋亡细胞的形态，用琼脂糖电泳显示DNA凋亡梯带。结果ASS不促进肝癌细胞的调亡，且随着剂量和时间的增加诱发凋亡程度增高。结论ASS抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，诱导细胞凋亡，对指导临床药物治疗肝癌具有重要的意义。     

NRF2/PI3K通路介导肝癌细胞SMMC-7721出现索拉非尼耐药的机制研究

目的探讨NRF2PI3K通路介导肝癌细胞SMMC-7721出现索拉非尼耐药的机制研究。方法建立肝癌细胞系SMMC-7721耐药细胞株SMMC-7721-SR,构建NRF2-siRNA转染肝癌细胞,并给与10μmol/L索拉非尼处理48 h。采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测NRF2、Keap1、ARE、p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平。Real-Time PCR检测NRF2、Keap1、ARE、p-PI3K和p-Akt基因表达水平。结果索拉非尼明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的存活率,促进肝癌细胞SMMC-7721凋亡发生(P0.05)。索拉非尼对SMMC-7721细胞促凋亡作用明显强于SMMC-7721-SR细胞(P0.05)。SMMC-7721-SR细胞中NRF2蛋白水平及mRNA表达明显高于SMMC-7721细胞,Keap1、ARE、PI3K和Akt蛋白水平及mRNA表达明显增加(P0.05)。索拉非尼明显上调SMMC-7721细胞中NRF2蛋白水平及mRNA表达(P0.05)。抑制NRF2 mRNA表达并给予索拉非尼处理后,SMMC-7721-SR细胞存活率明显降低,凋亡率显著升高,Keap1、ARE、p-PI3K和p-Akt蛋白水平及mRNA表达明显降低(P0.05)。结论索拉非尼激活NRF2后诱导肝癌细胞SMMC-7721出现耐药;抑制NRF2可逆转肝癌细胞SMMC-7721对索拉非尼的耐药情况。     

花姜酮对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭及CXCR4表达的影响

目的研究花姜酮对人肝癌SMMC-7721细胞生长侵袭能力的影响及对CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响,探讨花姜酮抗肝癌侵袭可能的作用机制。方法分别应用花姜酮10μmol/L、20μmol/L处理人肝癌细胞,采用Transwell小室检测肝癌细胞的侵袭能力,RT-PCR、Western blotting实验检测CXCR4 mRNA及蛋白表达的变化。结果花姜酮处理人肝癌细胞48 h后,对照组细胞透膜数为(56.8±7.8)个/视野,10μmol/L组透膜数为(41.4±4.8)个/视野,20μmol/L组透膜数为(23.2±5.6)个/视野,随花姜酮浓度增加,细胞侵袭人工基底膜的能力显著降低(P<0.05),RT-PCR及Western blotting结果显示CXCR4 mRNA及蛋白表达随花姜酮浓度的增加而降低(P<0.05)。结论花姜酮可能通过降低CXCR4的表达抑制人肝癌SMMC-7721细胞的生长和侵袭能力。     

丹参酮ⅡA对肝癌SMMC-7721细胞COX-2表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对肝癌SMMC-7721细胞生长和凋亡的影响及其作用机制．方法:体外培养肝癌SMMC-7721细胞株,经丹参酮ⅡA(终浓度0．5 mg／L)作用后,采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,透射电镜观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学SABC法检测COX-2蛋白表达,放射免疫法检测前列腺素E2(PGE2)含量．结果:丹参酮ⅡA对肝癌细胞的生长有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性．以0．5 mg／L作用终浓度抑制作用最明显,其48 h的抑制率为 69．3％,与对照组相比差异有显著性(P<0．01)．电镜下观察,丹参酮ⅡA作用后肝癌细胞表现为细胞皱缩、核染色质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态改变．5 mg/ L丹参酮ⅡA作用后,随时间的延长,凋亡率逐渐升高,48 h达到高峰,随后逐渐下降(24,48, 72 h凋亡率分别为7．45％±0．33％、6．59％± 0．45％、4．78％±1．05％),与对照组比较,各处理组都有显著性差异(均P<0．01),丹参酮作用组肝癌细胞COX-2表达明显减少,其培养液中 PGE2的产生量下降,与对照组相比差异均有显著性(P<0．01)．结论:丹参酮ⅡA可能是通过下调COX-2 mRNA的表达水平发挥其对肝癌细胞生长抑制及促进凋亡作用．     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.