细胞外信号调节蛋白激酶在新生鼠坏死性小肠结肠炎模型中的表达及意义

目的观察新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizingenterocolitis,NEC)中细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,ERK)的激化及胞内分布规律,探讨其在NEC发病机制中的作用。方法新生鼠随机分为不接受处理的正常对照组和NEC模型组(实验组),每组8只。于母鼠身边喂养3d,第4d处死。并取近回盲部肠组织1～2cm固定、包埋、切片、HE染色拍照,观察组织学变化及免疫组化观察ERK的表达,其它肠组织制备组织匀浆,取上清液检测肿瘤坏死因子(tumornecrosisfacror-α,TNF-α)和一氧化氮(nitricoxide,NO)的含量。结果实验组肠组织中ERK均发生活化并伴核转位(P<0.01),TNF-α、NO的含量明显升高(P<0.05)。结论ERK信号通路可能参与了NEC发病过程,并起着信号转导作用。     

Elk-1通路对肠三叶因子治疗坏死性小肠结肠炎的影响

目的探讨Elk-1通路对肠三叶因子（ITF）治疗坏死性小肠结肠炎（NEC）的影响。方法30只新生Wistar大鼠随机分为3组（正常组对照组,NEC模型组,NEC给予ITF组）,每组10只,造NEC模型后,第4d处死并取回盲部组织1-2cm固定、包埋、切片、HE染色,观察组织学变化及免疫组化Elk-1的表达。结果NEC新生大鼠中损伤肠组织Elk-1表达增强,ITF治疗组肠组织Elk-1表达较NEC组明显增强。结论Elk-1信号通路可能参与了NEC发病过程,并起着信号转导作用;ITF通过激活Elk-1信号通路,减轻肠组织损伤,起到保护肠黏膜的作用。     

肠三叶因子对坏死性小肠结肠炎新生鼠肠组织中P-ATK及P-BAD的影响及意义

目的观察肠三叶因子（ITF）对新生鼠坏死性小肠结肠炎（NEC）模型磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）及磷酸化BAD（p-BAD）蛋白水平的影响,探讨ITF对NEC的保护作用。方法新生鼠50只,随机分为5组,每组10只。建立NEC模型,A组腹腔注射生理盐水0.2 ml;B组腹腔注射ITF 0.2 mg;C组腹腔内注射渥漫青霉素0.1 mg/kg;D组腹腔内注射ITF 0.2 mg＋渥漫青霉素0.1 mg/kg;E组为正常对照组。实验第4天断头处死大鼠,取近回盲部肠道组织做病理学检查,分别采用免疫组化方法及免疫印迹法检测肠组织中p-AKT及p-BAD蛋白表达水平。结果 5组肠组织中p-AKT及p-BAD蛋白表达水平比较,差异有统计学意义（P均〈0.05）,B组p-AKT、p-BAD蛋白表达水平高于其他4组（P均〈0.05）,A组高于E组（P均〈0.05）,C组p-AKT最低（P〈0.05）。各组大鼠肠损伤病理评分比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,A、C、D组肠损伤病理评分高于B组（P〈0.05）。结论 ITF可减轻新生鼠NEC的肠道炎症反应,其机制可能是使AKT活化为p-AKT,其作用于下游靶点p-BAD,抑制BAD的促凋亡作用。     

肠三叶因子对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型TNF-α、IL-8及MDA的影响及意义

目的 :研究肠三叶因子 (ITF)对坏死性小肠结肠炎 (NEC)新生大鼠的肠粘膜中肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 8(IL 8)及丙二醛 (MDA)含量的影响 ,探讨ITF对NEC是否有保护作用。方法 :建立NEC模型 ,新生 1日龄Wistar大鼠予 10 0 %二氧化碳 5min后再予 10 0 %氧气 5min后 ,放回母鼠身边喂养 ,第 4日处死大鼠取肠道组织待检。新生鼠 32只随机分为 4组 ,A组为NEC模型后腹腔注射ITF 0 .5mg ;B组为NEC模型后皮下注射ITF 0 .2mg ;C组为NEC模型组 ;D组为正常对照组。取肠道组织制备组织匀浆取上清液用ELISA双抗夹心法检测TNF α ,用放射性免疫法检测IL 8及用生化法检测MDA的含量。结果 :A、B组TNF α、MDA的含量均较C组低 (P <0 .0 1) ,而与D组无显著差别 (P >0 .0 5 ) ,A、B组IL 8的含量较C组低 (P <0 .0 5 ) ,较D组偏高 ,但差别无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :ITF通过腹腔和皮下注射可以减轻肠道的炎症反应 ,为NEC提供新的防治方法。     

JNK通路在新生鼠坏死性小肠结肠炎模型中的表达及其意义

目的观察新生大鼠坏死性小肠结肠炎（necrotizing enteroeolitis,NEC）中c—Jun氨基末端激酶（c-JunN—terminalKinase,JNK）的激化及胞内分布规律,探讨其在NEC发病机制中的作用。方法新生鼠随机分为正常对照组和NEC动物模型组,每组10只,于母鼠喂养3d,第4d处死。取回盲部肠组织1～2cm,用10％的甲醛立即固定,常规石蜡包埋,分别作组织形态学检查和免疫组织化学检测JNK的表达。结果新生大鼠NEC模型中JNK在肠道细胞的胞浆中黄棕色染色颗粒表达并伴有向核转移,其阳性表达明显高于正常对照组。结论JNK信号通路可能参与了NEC发病过程,并起着信号传导作用。     

新生儿坏死性小肠结肠炎后肠狭窄的诊治

目的 探讨新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)后肠狭窄的诊断要点和治疗体会.方法 回顾性分析泰安市妇幼保健院2015年2月—2020年9月收治的21例NEC后肠狭窄病例资料,并随访患儿生长发育情况.21例患儿按照Bell分期,Ⅰ期5例,Ⅱ期14例,Ⅲ期2例.所有患儿术前均行X线腹部立位片检查,19例同时行高频超声检查.确诊...     

天然蒙脱石对新生鼠坏死性小肠结肠炎肠损伤及肠组织sPLA2的影响

目的：探讨添加天然蒙脱石对新生鼠坏死性小肠结肠炎（N EC ）模型肠损伤保护作用及对肠组织中分泌型磷脂酶A2（sPLA2）含量变化的影响,为预防性应用天然蒙脱石防治 NEC提供依据。方法新生SD大鼠出生后48 h开始给予鼠配方奶喂养,100％氮气缺氧90 s ,4℃冷刺激10 min ,每天2次,连续3 d ,建立新生鼠NEC模型。按析因设计,32只新生SD大鼠分成4组,A1 B1组为NEC模型组,在出生48 h起每日给予天然蒙脱石灌胃,剂量为0．6 g · kg -1· d-1,每日3次;A1 B2组为N EC模型组,未添加天然蒙脱石;A2 B1组为对照组,给予天然蒙脱石灌胃,每日3次,0．6 g · kg -1· d-1;A2 B2组为对照组,未添加天然蒙脱石。每组动物各8只。在最后一次缺氧、冷刺激后24 h空腹断头处死大鼠,留取十二指肠下端至直肠上端肠管进行肠组织损伤评分和肠组织中sPL A2含量检测。肠损伤组织学评分≥2确定为 NEC ;新生鼠肠组织中 PLA2含量采用 ELISA 双抗体夹心法检测。应用Kruskal-Wallis H检验和析因设计的方差分析进行统计学分析,α＝0．05为显著性检验标准。结果 A1B1组、A1 B2组新生SD大鼠出现腹泻、腹胀、萎靡、活动减少、生长减慢,A1 B1组程度较轻。A1 B2组肠组织损伤评分和肠组织中PLA2含量显著高于A2B2组、A2B1组;与A1B2组相比,A1B1组肠损伤组织评分明显降低,肠组织中 PLA2含量亦明显减少,但仍高于A2 B1组、A2 B2组;在控制造模因素后,添加天然蒙脱石组和没有添加天然蒙脱石组肠损伤组织评分的边缘估计均值及95％ CI为：0．79（0．62,0．96）,1．83（1．67,2．00）,PLA2含量边缘估计均值及95％ CI分别为：0．785（0．581,0．990）,1．159（0．954,1．364）,差别均有统计学意义。结论添加天然蒙脱石可降低N EC新生大鼠肠损伤程度,降低其肠组织中PL A2含量。     

内质网应激诱导的自噬对新生大鼠坏死性小肠结肠炎的影响

目的 探讨抑制内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)诱导的自噬对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)的影响。方法 首先建立新生大鼠NEC模型,然后从中分离提取出肠上皮细胞,分为对照组、抑制组、诱导组。对照组正常培养,抑制组加4-苯基丁酸,诱导组加衣霉素处理24h。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组细胞炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、肠脂酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)的表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组细胞ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、氧调节蛋白150(oxygen-regulated protein 150,ORP150)的mRNA表达水平;Western blot法检测各组细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达水平。结果 与对照组比较,抑制组p62表达明显增高,TNF-α、I-FABP、GRP78、ORP150、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低,而诱导组p62表达明显降低,TNF-α、I-FABP、GRP78、ORP150、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著增高,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 抑制ERS诱导的自噬激活可减轻NEC新生大鼠肠黏膜损伤和炎性反应,改善肠道屏障功能。     

清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎模型新生大鼠Toll样受体4、核因子-κB表达及细菌易位的影响

【目的】探讨清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎(NEC)模型新生大鼠回肠组织Toll样受体4(TLR4)mRNA、核因子-κB(NF-κB)mRNA表达及细菌易位的影响。【方法】选用3日龄SD新生大鼠随机分为3组:正常对照组、NEC模型组及治疗组。采用鼠代乳品人工喂养及缺氧冷刺激的方法,复制新生大鼠NEC模型。治疗组采用鼠乳代用品+清热活血调气方(15 g.kg-1.次-1,3次/d)人工喂养,同时予以缺氧冷刺激;正常对照组鼠乳喂养,不进行任何干预。第4天心脏穿刺采血后处死大鼠取近回盲部末端回肠2 cm,采用实时荧光定量PCR法检测回肠组织TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达水平及血标本中细菌16S rRNA进而得出细菌易位发生率。【结果】与模型组比较,治疗组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达水平显著下降(P<0.01),细菌易位发生率显著降低(P<0.05)。【结论】清热活血调气方可下调NEC模型新生大鼠回肠组织TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达,减少细菌易位的发生。     

清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎模型新生大鼠肠损伤的影响

[目的]探讨清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎( necrotizing enterocolitis,NEC)模型新生大鼠肠损伤的保护作用.[方法]选用SPF级3日龄Sprague-Dawley新生大鼠36只,随机分为正常对照组、NEC模型组及治疗组,每组12只.NEC模型组采用鼠代乳品人工喂养、体积分数100％氮气缺氧...     

cAMP/PKA/CREB信号通路及相关调控蛋白PDE-4和ERK对学习记忆的影响

近年来在动物身上进行了大量的学习记忆实验,均提示cAMP/PKA/CREB信号通路中的各蛋白均与学习记忆过程有关。环磷酸腺苷(cAMP)激活蛋白激酶A磷酸化并激活cAMP反应单元结合蛋白(CREB),后者是一种重要的核蛋白,其调节启动子中具有cAMP反应单元(CRE)的基因转录,这种核转录因子具有调节包括学习记忆在内的广泛的生物学功能。已有研究证实,PDE4和ERK为cAMP/PKA/CREB信号通路的调节蛋白。现对cAMP/PKA/CREB信号通路中的各蛋白及其调控蛋白PDE-4和ERK进行研究,阐述着三者之间的关系,并探讨其对学习记忆的影响。