噬菌体生物扩增法快速鉴定结核分枝杆菌的临床价值

目的探讨噬菌体生物扩增法(Phab)快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值.方法应用Phab、罗氏法及涂片法共同检测236例痰标本.结果痰标本3种方法检测结果比较236份临床确诊的活动性肺结核患者痰标本,涂片、罗氏培养和Phab法检查结果分别有64份(27.1%)、78份(33.1%)和114份(48.3%)阳性;比较Phab与涂片和培养的阳性检测率,Phab检出率远高于涂片法,差异有统计学意义(X2=77.706,P＜0.01),Phab检出率高于罗氏法检出率,差异有统计学意义(X2=95.678,P＜0.01).结论FASTPlaque TB方法能快速、简便地检测结核分枝杆菌,且检出率较高,可作为结核病诊断的重要方法.     

噬菌体法快速鉴定结核分枝杆菌利福平耐药性

目的探讨噬菌体法用于检测结核分枝杆菌利福平耐药性的应用价值。方法选取148株结核分枝杆菌临床分离株．用噬菌体法和改良L-J培养基绝对浓度法同时进行利福平耐药性检测。结果绝对浓度法结果表明,148株中有98株为利福平耐药,50株敏感。耐药的98株中,噬菌体法检出了96株,50株敏感株中噬菌体法的结果全为阴性。噬菌体法与常规的L-J培养基绝对浓度法取得了较禹的符合率,噬菌体法的敏感性为98％,特异性为100％。结论噬菌体法检测结核分枝杆菌利福平耐药性,操作简便,快速,敏感,特异,在48～72h内可得出结果,具有良好的临床应用前景。     

噬菌体生物扩增法快速检测痰标本中结核分枝杆菌的临床应用

目的探讨噬菌体生物扩增法(Phab)快速检测痰标本中结核分支杆菌(MTB)的临床应用价值.方法应用Phab、改良罗氏培养法及厚涂片法共同检测419例痰标本.结果419例痰标本,噬菌体法检测132例阳性,阳性率31.50%(132/419);厚涂片法检测64例阳性,阳性率15.27%(64/419);改良罗氏培养法126例阳性,阳性率30.07%(126/419),P<0.01,三种方法的检出率有差异,且噬菌体法检测率最高.64例痰涂片阳性改良罗氏培养阳性标本噬菌体法检测60例阳性,阳性率93.75%;62例痰涂片阴性罗氏培养阳性标本噬菌体法检测46例阳性,阳性率74.19%;293例痰涂片阴性罗氏培养阴性标本中噬菌体法检测26例阳性,阳性率8.87%.结论 Phab法检测测痰标本MTB具有较高的检出率,简便快速,不需要特殊仪器设备,费用低廉,可作为MTB检测快速筛选方法.     

噬菌体生物扩增法测定痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性

目的建立快速测定痰标本中结核分枝杆菌利福平（RFP）耐药性的噬菌体生物扩增法,探讨其在临床应用的可行性。方法噬菌体生物扩增法测定362份涂阳痰标本结核分枝杆菌对RFP的耐药性,并与罗氏绝对浓度法结果进行比较,对不符合的样本,用基因芯片的方法分析rpoB基因的突变情况。结果362份涂阳痰标本,培养阳性360份,菌种初步鉴定有17份样本为非结核分枝杆菌,噬菌体生物扩增法RFP耐药为123份,敏感的196份,两法结果一致的为88．6％,如以绝对浓度法药敏结果为标准,则噬菌体生物扩增法测定利福平耐药的敏感性为93-3％,特异性为87．9％,阴性预测值为96．4％,阳性预测值为78．9％,准确性为89．7％,涂阳等级（1＋～3＋）与实验的有效性相关。结论噬菌体生物扩增法测定痰标本利福平的耐药性只需2d,可作为快速筛诜方法府用千临床．     

噬菌体裂解法鉴定结核分枝杆菌的分析

目的 通过对噬菌体裂解法与罗氏培养法检测结核分枝杆菌的情况进行比较，探索简便、快速、灵敏的结核分枝杆菌检测方法。方法 对2004年9-12月在奉贤区疾病预防控制中心结核病门诊就诊的297位患者的痰标本用涂片法进行筛选，对筛选出的加份阳性标本分别用噬菌体裂解法和罗氏培养法进行检测。结果 罗氏培养法检测到阳性标本32份，噬菌体裂解法检测到阳性标本31份，二者检出的阳性率比较。无显著性差异（X^2=0．0747，P=0．785）。噬菌体裂解法的灵敏度为84．4％，特异度为50．0％。结论 噬菌体裂解法可以快速、简便地检测结核分枝杆菌，并且具有较高的敏感性和一定的特异性。     

噬菌体生物扩增法早期诊断女性生殖器结核的临床研究

目的 探讨应用噬菌体生物扩增法(噬菌体法)检测白带中的结核分枝杆菌在早期诊断女性生殖器结核的临床价值.方法 选择2005年1月～2007年9月间我院收治的86例病理确诊为女性生殖器结核的病人.所有病例在治疗前应用噬菌体法检测白带中的分枝杆菌,同时白带分别送检荧光定量PCR、涂片和培养检测分枝杆菌,对照检查结果.结果 86例患者中噬菌体法45例阳性,阳性率52.3%,特异性为100%,PCR的阳性率为23.3%,假阳性率为20%:培养法5例阳性,阳性率5.8%;涂片法全部阴性.噬菌体法明显高于涂片和培养法(P<0.01).结论 噬菌体生物扩增法在诊断女性生殖器结核中具有较高的敏感性和特异性,为早期诊断女性生殖器结核提供重要的临床价值.     

噬菌体生物扩增技术在结核分枝杆菌药敏检测中的应用

目的探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良罗氏培养法(LJ)做对照,比较两种方法的检测结果。结果PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97.4%、96.6%、95.3%、96.9%。同时检出耐多药菌株26株,占11.1%。结论PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法LJ符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法。     

噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌丁胺卡那耐药性研究

目的建立快速测定结核分枝杆菌丁胺卡那霉素耐药性的噬菌体生物扩增法,并探讨其在结核分枝杆菌丁胺卡那霉素耐药性测定中的应用价值。探讨噬菌体检测技术（PhaB）快速检测丁胺卡那霉素抗结核药物耐药性的可能性,分析其临床应用价值。方法应用PhaB测定103株结核分枝杆菌（MTB）临床分离株对丁胺卡那霉素的耐药性,并与绝对浓度法药敏结果比较,对两法检测结果不符的菌株进行比例法测定。结果以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则PhaB检测丁胺卡那霉素的敏感度、特异度及准确性分别为85.7%、89.2%和87.4%;共有13株菌株PhaB法药敏结果与绝对浓度法检测结果不符,其中9株PhaB法药敏结果与比例法相符合。结论 PhaB检测丁胺卡那霉素药敏结果与绝对浓度法有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速筛选方法。     

噬菌体生物扩增法检测脓肿型颈部淋巴结结核患者脓液中结核分枝杆菌

目的探讨噬菌体生物扩增法在检测脓肿型颈部淋巴结结核患者脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值,寻找一快速检测方法。方法采用噬菌体生物扩增技术对21例脓肿型颈部淋巴结结核患者的脓液标本进行检测,同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果噬菌体生物扩增法阳性率为47.6%（10/21）,涂片抗酸染色阳性率为28.6%（6/21）,罗氏培养阳性率为42.8%（9/21）。检验所需时间：传统的罗氏培养法需8周,而噬菌体生物扩增法仅需2d。结论噬菌体生物扩增法检测颈淋巴结脓液中结核分枝杆菌阳性率高于传统方法,且耗时明显缩短。 关键词：颈部淋巴结结核;结核分枝杆菌;噬菌体生物扩增法     

噬菌体裂解法和抗酸染色法快速检测结核分枝杆菌的比较

目的比较分析噬菌体裂解法和抗酸染色法对结核病的诊断价值。方法采用噬菌体裂解法和抗酸染色法,同时检测150份临床确诊结核病患者的痰液标本。结果噬菌体法阳性率为63.3%(95/150),涂片法为40%(60/150),两法比较有显著性差异(P<0.01)。结论噬菌体裂解法检测结核病患者的痰液标本中的结核杆菌具有敏感性高和特异性强的特点,同时还能区分标本中是否有活菌的存在,对结核病诊断和治疗可提供有价值的依据,具有较高的应用和推广价值。     

噬菌体生物扩增法在关节结核诊治中的临床应用研究

目的 探讨噬菌体生物扩增法(phage amplified biologically assay,PhaB)快速检测关节结核脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值.方法 采用PhaB技术对关节结核患者36例,非结核性关节炎患者20例关节液中的结核分枝杆菌进行检测,同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 36例关节结核积液,PhaB阳性率为47.2%(17/36)、涂片抗酸染色阳性率为2.7%(1/36)、罗氏培养阳性率为5.5%(2/36).20 例非结核性关节炎患者PhaB、涂片抗酸染色、罗氏培养特异性均为100.0%.结论 PhaB法检测关节积液中结核分枝杆菌只需2d,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断关节结核的一种好方法.     

噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌在诊断肺结核中的价值

目的:研究应用噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌在肺结核诊断中的价值。方法:应用噬菌体生物扩增法对416例肺结核和168例非结核性肺部疾病患者的痰标本进行检测,评价其对肺结核的诊断价值及同细菌学检查方法是否存在差异。结果:噬菌体生物扩增法诊断菌阳肺结核的敏感度为98.5%,诊断菌阴肺结核的敏感度为63.3%,诊断肺结核的总敏感度为75.0%;诊断肺结核的特异度为95.2%;噬菌体生物扩增法阳性检出率为75.0%,高于细菌学检查方法33.2%(P<0.005)。结论:噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌在诊断肺结核中有较好的灵敏度和特异度,是辅助诊断和鉴别诊断肺结核的有效手段。     

噬菌体变色法检测结核分枝杆菌

目的建立一种结核分枝杆菌快速检测方法。方法痰标本常规处理,离心集菌,取100μl于试管中,另一支加入标准株H37Rv结核分枝杆菌作阳性对照。两支试管分别加入噬菌体D29,37℃培养,用硫酸亚铁铵杀死结核分枝杆菌菌体外的噬菌体,柠檬酸三钠和氯化钙混和液中和硫酸亚铁铵。加入耻垢分枝杆菌和硝酸钾,37℃培养过夜,加入显色剂显色。同时用罗氏培养方法对照检测。结果临床标本的噬菌体变色法和罗氏培养法表明两方法结果具有一致性(P0.05)。结论噬菌体变色法可作为结核分枝杆菌的快速检测方法之一。     

噬菌体扩增技术在结核分枝杆菌检测中的应用体会

作为对人类最具威胁性的传染病之一,近年来结核病流行正逐步加剧.目前对结核病诊断主要依靠与实验室检查、临床症状、体征及胸片等其他辅助检查相结合.     

应用分枝杆菌噬菌体试剂盒检测结核杆菌

目的:评价分枝杆菌噬菌体试剂盒(fastplaqueTBTM)对结核病的诊断价值。方法:应用fastplaqueTB法及涂片法分别检测结核病患者的临床标本。结果:45份结核标本中fastplaqueTB法阳性25份(55.6%),涂片法阳性13例(28.9%)。结论:FastplaqueTB法能快速简便、高效地检测结核分枝杆菌,可作为结核病诊断的重要方法。     

噬菌体生物扩增法检测48例临床结核患者痰标本的结果分析

目的提高结核病人痰标本的阳性检出率,为临床诊断和治疗提供科学依据。方法对同一结核病人的痰标本,分别采用直接厚涂片法、结核分枝杆菌培养法和噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌。结果经X光片诊断疑似为肺结核的48例患者中:直接厚涂片法查出痰菌阳性15例,阳性率为31.3%;痰菌培养阳性18例,阳性率为37.5%;噬菌体试验阳性37例,阳性率为77.1%。经统计学处理,噬菌体试验的阳性检出率明显高于直接痰厚涂片镜检法和痰菌培养法,P<0.05。结论噬菌体生物扩增法对疑似病例、复杂难治病例,特别是菌阴结核病患者的诊断,无论在检出率及检测时间上均优于痰涂片和培养法,适宜于在基层实验室推广应用。     

噬菌体扩增技术快速检测结核分枝杆菌的临床应用

结核病细菌学检查主要靠痰涂片和培养的方法,阳性率只有30％左右。结核菌培养则需1-2mo。结核抗体检测假阳性率、假阴性率都很高。FAST-plaqueTB噬菌体扩增技术检测结核杆菌,具有特异性和灵敏度高的优点,而且快速、简便。     

SEPTIC技术快速检测结核分枝杆菌

目的评价SEPTIC(sensing of phage-triggered ion cascade)技术在结核分枝杆菌快速检测中的应用价值。方法制备纳米阱微芯片,用于检测噬菌体感染细菌时导致细胞内离子释放发生的微范围内的电位变化。调整大肠杆菌、结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌及其相应噬菌体的浓度。将细菌和噬菌体等体积混合,37℃孵育1 min,取5μl混合液滴于探针上,30 s后开始采集数据,每2 min采集一个数据文件,共采集10 min,计算机分析采集结果。结果当结核分枝杆菌与分枝杆菌噬菌体D29混合反应时,在0~8 min内显示了非常明确的1/f功率谱特征,而且功率谱强度明显高于阴性反应的功率谱,并出现了明确的电压超出±4σ范围的波形,持续约0.2 s的时间,可认为发生了一次细菌被噬菌体感染的事件,表明探针明确地捕获了细菌被噬菌体感染的事件。结论SEPTIC技术能在较短时间内检测、鉴定出活菌的存在,有可能为结核分枝杆菌的检测提供一种简便、快捷的方法。     

结核分枝杆菌噬菌体试剂盒的研制与初步评价

目的:研制能快速检测标本中结核分枝杆菌的噬菌体试剂盒,并对之在临床上的应用做出初步评价.方法:采用不同方法对噬菌体的生产和保存工艺进行探讨,并且观察该方法中所用试剂的稳定性.建立噬菌体快速检测结核分枝杆菌的方法,分别用噬菌体法与传统培养法检测34份临床标本中的结核分枝杆菌,以培养法作为金标准观察噬菌体法的敏感度、特异度和符合率.结果:①在37℃环境中采用琼脂双层法进行噬菌体扩增生产,48 h后采用孵育-过滤法收集,可以获得较为理想的产量且简单易行.②噬菌体以液体形式4℃保存或以噬菌体宿主菌的无细胞菌苗作为保护剂进行真空冻干后4℃保存,28周后效价下降不足10的一个数量级.③噬菌体法中的重要试剂:辅助细菌和杀病毒剂,4℃保存40周均具有良好的稳定性.④34份痰标本培养4周,其中 2份污染,29份阳性,3份阴性;噬菌体法检测标本中结核分枝杆菌的敏感度、特异度和符合率分别为86.2%(25/29)、66.7%(2/3)、84.4%(27/32).结论:噬菌体法在48 h内可以快速检测标本中的结核分枝杆菌活菌,并且具有以试剂盒形式进行商业化生产的可行性,将有助于临床结核病的快速诊断.     

噬菌体法检测住院肺结核患者中的结核分枝杆菌的临床应用研究

目的:评价噬菌体法检测结核分枝杆菌在住院肺结核患者中临床应用研究,评价结核病患者临床治疗疗效。方法:采用噬菌体法和涂片法对269例住院治疗的肺结核患者每份痰标本同时检测结核杆菌。结果:269例结核住院患者采用噬菌体法检测结核分枝杆菌阳性57例,阴性212例;涂片法阳性60例,阴性209例。结论:噬菌体法可检测活的结核分枝杆菌,可评价临床治疗疗效,能弥补涂片法不能区分死菌活菌的不足,具有很好的临床应用价值。