MMP-9 -1562C/T基因多态性与2型糖尿病肾病的关系研究

摘要 目的：探讨2型糖尿病（T2DM）患者基质金属蛋白酶-9基因-1562C/T（MMP-9 -1562C/T）多态性与糖尿病肾病（DN）的关系以及与DN不同病期的相关性。方法：将150例T2DM患者按DN诊断标准分为DN组与非肾病（NDN）组,DN组分为微量白蛋白尿期、临床白蛋白尿期和肾功能不全期。另择52例健康人作为正常对照（NC）组。应用限制性片段长度多态性分析各组基因型。结果：DN组的HbA1c、SBP、Cr、BUN、UAER值高于NDN、NC组（P<0.01）。DN组分别和NDN组、NC组之间基因型分布差别均有统计学意义（P<0.01）。T2DM中CC、CT、TT各基因型DN发病率递减,分别为59.7%、56.7%、34.9%。C和T等位基因DN发病率分别为59.2%、40.5%,携T等位基因者发生DN的风险是携C等位基因者的0.47倍（P<0.01,95%CI 0.29～0.75）;DN组内3期TT基因型与T等位基因频率随肾功能降低而递减;结论：MMP-9 -1562C/T基因多态性与DN发生有关,T等位基因是DN患者的保护基因。     

MMP-9基因-1562 C>T多态性与2型糖尿病足溃疡的关联研究

目的：探讨基质金属蛋白9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)基因启动子单核苷酸多态性(-1562 C>T)与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)引起糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcers, DFUs)的相关性。方法选择2010年7月—2012年12月就诊的无并发症的T2DM患者249例作为无并发症T2DM组,DFUs患者110例作为DFUs组,以及同期来医院进行健康体检的人员267例为对照组。应用聚合酶链反应( polymerase chain reaction, PCR)技术对MMP-9基因-1562C>T多态性突变区域进行扩增,并通过PCR-RFLP法检测MMP-9基因-1562C>T的CT、TT、CC基因型的分布,探讨与T2DM引起DFUs的相关性。所有的数据均采用IBM SPSS Statistics 20软件进行分析。结果3组MMP-9基因-1562 C>T基因位点发现C、T等位基因和CT、TT、CC及CT+TT 基因型,不同基因型出现频率在DFUs组、无并发症T2DM组以及对照组间的分布差异有统计学意义(χ2=21.69,P<0．05)。以CC型作为对照,CT/TT型在无并发症T2DM组与对照组间比较,差异有统计学意义(OR=1.82,P=0．002,95%CI：1.26,2.65);DFUs组与健康对照组相比,差异也有统计学意义(OR=1.98,P=0．005,95%CI：1.24,3.16)。无并发症T2DM组、DFUs组和健康对照组MMP-9基因-1562 C>T的T等位基因出现频率比较,差异有统计学意义( OR=1.87,P<0．001,95%CI：1.38,2.53;OR=2.00,P=0．001,95%CI：1.35,2.98)。结论 MMP-9的异常表达对DFUs的形成以及慢性蔓延有重要作用,是足部溃疡难以愈合的主要原因之一。     

2型糖尿病肾病患者血浆MMP-2和MMP-9水平检测的临床意义

目的探讨了2型糖尿病肾病患者血浆MMP-2和MMP-9水平的变化及临床意义。方法采用ELISA法测定了42例糖尿病无肾病和33例糖尿病肾病患者血浆MMP-2和MMP-9水平的变化,并与35例正常健康人作比较。结果2型糖尿病肾病患者血浆MMP-2水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),而MMP-9水平则显著地低于正常人组(P<0.01),2型糖尿病肾病组与无肾病组亦有显著性差异(P<0.05)。结论2型糖尿病肾病的发生与发展与血浆MMP-2和MMP-9的水平变化密切相关,具有重要的临床价值。     

糖尿病肾病患者血清MMP-2、MMP-9水平与血管钙化的关系

目的探讨糖尿病肾病患者血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平与血管钙化的关系。方法收治的糖尿病肾病患者178例,分为糖尿病肾病未钙化组92例、糖尿病肾病钙化组86例,同期选择门诊正常体检者87例为对照组,测定3组血肮酐(Scr)、血磷(P³⁺)、血钙(Ca²⁺)、MMP-2、MMP-9、甲状旁腺激素(PTH)、碱性磷酸酶(ALP)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平。结果糖尿病肾病钙化组MMP-2水平高于糖尿病肾病未钙化组和对照组,糖尿病肾病未钙化组MMP-2水平高于对照组;糖尿病肾病钙化组MMP-9水平低于糖尿病肾病未钙化组和对照组,糖尿病肾病未钙化组MMP-9水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);糖尿病肾病钙化组Scr、P³⁺、Ca²⁺、PTH、ALP、hs-CRP水平高于糖尿病肾病未钙化组和对照组,糖尿病肾病未钙化组Scr、P³⁺、Ca²⁺、PTH、ALP、hs-CRP水平高于对照组,差异有统...     

基质金属蛋白酶-9基因多态性与2型糖尿病大血管并发症的相关性研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因启动子区C-1562-T基因多态性与2型糖尿病大血管并发症的相关性.方法 利用PCR-RFLP方法 对288例2型糖尿病患者及120名健康对照者MMP-9基因启动子区C-1562-T位点等位基因和基因型进行测定.结果 实验组和正常对照组间C、T两种等位基因和CC、CT、TT三种基因型分布无差异:实验组中,2型糖尿病无大血管病变组与合并大血管病变组比较CC基因型与C等位基因显著增加.结论 2型糖尿病患者与正常人群中MMP-9基因启动子区C-1562-T基因位点CT和,TT基因型与C、T等位基因频率分布相同;在2型糖尿病人群中,CC基因型与C等位基因在糖尿病无大血管病变者中显著升高,提示其可能是糖尿病大血管病变的保护型基因.     

趋化因子CXCL5启动子区-156G/C基因多态性与2型糖尿病的关系

目的:探讨趋化因子CXCL5基因启动子-156位点G/C单核苷酸多态性与2型糖尿病的关系。方法:随机选择我院2型糖尿病患者(T2DM组)210例,对照组171例。采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测趋化因子CXCL5基因启动子-156位点G/C多态性。结果:趋化因子CXCL5启动子-156G/C多态性(各基因型频率、C等位基因频率)在T2DM组与对照组的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CXCL5基因多态性可能不是糖尿病发病的危险因素。     

MMP-9基因多态性与糖尿病性白内障易感性的相关性研究

目的探讨MMP-9基因（-1562C/T）位点基因多态性与我国河南省汉族人群糖尿病性白内障易感性的关系。方法对58例糖尿病性白内障患者（病例组）和56例健康人群（对照组）采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法进行基因型分析。结果 MMP-9（1562C/T）基因多态性在河南省汉族人群中的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。MMP-9（1562C/T）位点变异等位基因T在病例组及对照组的频率分别为17.2%和13.4%,差异无统计学意义（P〉0.05）。C/C、C/T、T/T基因型频率在病例组和对照组中的频率分别是69.0%、27.6%、3.4%和75.0%、23.2%、1.8%。与C/C基因型相比C/T、T/T基因型个体携带者并未增加患糖尿病性白内障的发病风险。结论 MMP-9（1562C/T）位点基因多态性与我国河南省汉族人群糖尿病性白内障的发病风险无相关性。     

Gs蛋白α-亚基基因T393C多态性与原发性高血压病的关系

目的：分析Gs蛋白α-亚基（guaninenucleotide-bindingprotein，α-stimulatingactivity polypeptide 1，GNASl）基因T3 93C多态性与中国天津地区原发性高血压病的关系。方法：按年龄配对的原发性高血压患者（高血压组）和非原发性高血压患者（对照组）各151例人选本研究。PCR-限制性片段长度多态性法分析GNAS1基因T393C多态性的频率分布。结果：研究样本的基因型频率和等位基因频率符合哈迪-温伯格平衡（Hardy-Weinberg equilibrium）。T393C多态性等位基因频率和基因型频率在高血压组和对照组间差异无统计学意义（χ^2分别为2．576和2．664，P〉0．05）。结论：GNAS1基因T393C多态性与中国天津地区原发性高血压病无关。     

Exendin-4对2型糖尿病大鼠肾组织MMP-9与TIMP-1表达的影响

目的观察Exendin-4对2型糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达的影响。方法建立2型糖尿病大鼠模型后,分为糖尿病组,exendin-4低、中、高剂量组。给药6周后,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肾组织中MMP-9、TIMP-1的蛋白表达。结果糖尿病组MMP-9、TIMP-1的表达较正常对照组明显增强(P<0.01);exendin-4各组较糖尿病组MMP-9、TIMP-1表达减弱(P均<0.01)。结论 Exendin-4对2型糖尿病大鼠有一定的肾脏保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾组织MMP-9和TIMP-1的表达来实现的。     

维生素D受体基因BsmI多态性与2型糖尿病关系研究

目的探讨维生素D受体（VDR）基因BsmI位点多态性与2型糖尿病（DM2）的关系。方法运用聚合酶链式反应．限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测66例2型糖尿病（DM2）患者,80例健康人的维生素D受体（VDR）基因BsmI位点基因型．分析比较两组间等位基因及基因型频率分布差异。结果DM2组患者BB＋Bb基因型及B等位基因频率显著高于正常对照组（P=0．001,OR=5．625;P=0．000。OR=6．541）。结论VDR．BsmI基因与DM2患者发病相关,“B”等位基因是DM2发病的易感因素。     

HLA-A等位基因与2型糖尿病糖尿病肾病的相关性

目的：探讨2型糖尿病糖尿病肾病的发生与HLA-A等位基因间的关系。方法：利用基因芯片技术。根据HLA不同基因亚型的独特序列设计特异性的寡核苷酸分型探针。制成DNA分型芯片。用带荧光标记的PCR产物与芯片上的探针杂交，再应用特定计算机软件对杂交信号进行分析对比。以此确定样品的基因亚型。结果：天津地区2型糖尿病患者HLA-A2，A11，A24等位基因频率明显高于正常对照组，A33等位基因频率明显低于对照组；2型糖尿病并发肾病患者HLA-A11等位基因频率明显高于无肾病患者，HLA-A34等位基因频率明显低于无肾病患者。结论：HLA-A2，A11，A24可能是2型糖尿病的易感基因，HLA-A33等位基因则可能是2型糖尿病的保护基因：HLA-A11有可能是糖尿病肾病的易感基因，HLA-A34则可能是其保护基因。     

内皮细胞固有型一氧化氮合成酶基因G894T变异与糖尿病肾病的关系

目的：观察内皮细胞固有型一氧化氮合成酶（ecNOS）基因外显子7的Glu298Asp基因多态性与2型糖尿病肾病（DN）的关系。方法：利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测了天津地区299例2型糖尿病患者和100例正常对照者的ecNOS基因外显子7的基因型，比较各组间的等位基因频率与基因型频率。结果：（1）2型糖尿病合并持续性微量白蛋白尿组（DN1组）的GT基因型和T等位基因频率高于糖尿病非肾病组（DM组）和正常对照组（C组），差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）在2型糖尿病患者中GT基因型者较GG基因型者的DN患病率高（X^2=5．252，P=0.022）。（3）高血压、血纤维蛋白原（FIB）、ecNOS外显子7的GT基因型是2型糖尿病合并DN的独立危险因素。（4）2型糖尿病合并高血压组（DMEH组）、糖尿病非高血压组（DM1组）和C组间ecNOS基因外显子7的基因型分布和等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：ecNOS基因外显子7的基因G894T（Glu298Asp）的变异可能是天津地区2型糖尿病患者DN易感性的基因标志之一，可能参与DN的启动；该基因多态性不是通过促进高血压的发生而增加DN的易感性。     

醛糖还原酶基因5''''端两种基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性

目的：研究AR基因5＇-端（AC）n多态标记及启动子区C（-106）T多态标记与2型糖尿病肾病易感性之间的关系。方法：研究对象为421例中国北方汉族人，包括320例2型糖尿病（DM）患者，其中162例合并糖尿病肾病（DN），另101例为非糖尿病对照组（CON）。用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶-银染的方法检测AR基因5＇-端（AC）n串联重复序列多态标记，同时设计引物，PCR扩增含AR基因调控区多态标记的C（-106）T的目的片断，以限制性内切酶XspI行酶切RFLP分析。比较各组间等位基因频率和基因型频率。结果：在2型糖尿病和对照组中共发现AR基因（AC）n序列的10种等位基因，28种基因型（Z-10～Z＋8），C（-106）T多态标记的CC、CT和TT3种基因型及C、T两种等位基因；上述各种等位基因和基因型频率在DM组和CON组之间无显著性差异；2型糖尿病合并肾病者Z-2等位基因、含Z-2等位基因的基因型、T等位基因及CT＋TT基因型频率明显高于无肾病患者。结论：AR基因5’端（AC）n多态标记Z-2等位基因及C（-106）T多态标记T等位基因与2型糖尿病肾病易感性密切相关。     

SUR1基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）与磺脲类药物受体1（SUR1）基因多态性的关系。方法：随机抽取正常人136例（正常组）及2型DM患者173例（T2DM组）外周血白细胞基因组DNA，PCR扩增SUR1基因31号外显子多态性位点的区域．用限制性酶切片段长度多态性分析其基因型，并用测序证实不同酶切图形基因型的准确性。结果：T2DM组和正常组SUR1基因31号外显子基因型及等位基因分布差别有统计学意义（P〈0．05）。结论：SUR1基因可能是中国天津地区2型糖尿病发生的易感基因。     

2型糖尿病8-异前列腺素F2α与脂联素基因SNP+45（T/G）多态性的相关性

目的:探讨脂联素基因SNP+45(T/G)多态性与2型糖尿病(T2DM)氧化应激指标8-异前列腺素F2α之间的关系。方法:聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测120例T2DM患者(T2DM组)脂联素SNP+45(T/G)多态性,同时选取正常体检者60例为对照组,采用竞争酶免疫测定的方法检测T2DM患者血清8-异前列腺素F2α水平,检测各组空腹血糖、血脂及空腹胰岛素水平,计算HOMA-IR等指标。结果:T2DM患者血清8-异前列腺素F2α水平高于对照组,T2DM患者脂联素SNP+45位点GG基因型频率高于对照组(P<0.05)。T2DM组内GG型的体质量指数(BMI)高于TT及TG型(P<0.05);TT、TG及GG基因型血清8-异前列腺素F2α水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:脂联素SNP+45(T/G)多态性与T2DM氧化应激之间可能无相关关系。     

醛糖还原酶基因多态性同2型糖尿病肾病的相关性

目的：研究醛糖还原酶(AR)基因启动子区C(-12)G多态性同2型糖尿病肾病(DN)发生及发展的相关性。方法：采用PCR-RFLP技术在209例2型糖尿病和84例对照组人群中筛查该位点等位基因及基因型的频率，比较在无肾病组及肾病各组中频率的差异，以推断AR基因是否参与了肾病的发生和进展。结果：G等位基因在肾病组的分布频率是87．2％，高于无肾病组的78．1％和正常对照组的77．4％；GG基因型在肾病组的分布频率是74．4％，高于无肾病组的63．8％和正常对照组的57．1％。结论：AR基因-12位点G等位基因及GG基因型是2型DN发生的独立危险因素。     

糖尿病肾病患者血浆血栓调节蛋白和D-二聚体的变化及意义

目的：观察2型糖尿病患者不同程度肾病血浆血栓调节蛋白（TM）和D-二聚体（D—D）的变化，了解其在糖尿病肾病发病中的意义。方法：用ELISA法测定58例2型糖尿病和21例正常对照者血浆TM和D—D浓度。结果：2型糖尿病患者血浆TM和D—D水平明显高于正常对照组：糖尿病肾病患者血浆TM和D—D水平明显高于糖尿病非肾病患者；慢性肾衰组血浆TM水平高于微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组；临床蛋白尿组血浆TM水平高于微量白蛋白尿组；TM与空腹血糖（FPG）、血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、纤维蛋白原（FIB）、尿微量白蛋白（UMA）、糖尿病视网膜病变（DR）呈正相关：D—D与患者年龄、FPG、BUN、Cr,FIB、UMA、DR呈正相关。结论：血浆TM受肾功能的影响．可以作为糖尿病肾病的早期预测因素。肾功能受损、年老、高血糖均会导致体内高凝状态。     

2型糖尿病患者晨尿微量白蛋白/肌酐与24h尿微量白蛋白相关性分析

目的:研究2型糖尿病(T2DM)患者晨尿微量白蛋白(MALB)/肌酐(Cr)影响因素及用晨尿MALB/Cr评估尿蛋白排泄的可行性。方法:收集179例T2DM患者晨尿和24h尿,测定晨尿MALB、Cr、24h尿MALB及其他各项生化指标,并按肌酐清除率(Ccr)分为25.66~49mL/min、50~79mL/min、≥80mL/min3组,进行各项生化指标与晨尿MALB/Cr的相关性分析。结果:晨尿MALB/Cr与年龄、体质指数(BMI)、DM病程、24h尿MALB、24h尿蛋白(24h尿TP)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、糖尿病视网膜病变(DR)呈正相关。DM病程、SBP、DR是T2DM患者晨尿MALB/Cr的影响因素。Ccr≥25.66mL/min时,各组晨尿MALB/Cr与24h尿MALB呈正相关。结论:晨尿MALB/Cr可代替24h尿MALB,用于观察尿蛋白排泄情况并对2型糖尿病肾病进行检测和评估,此测定适用于尿量Ccr≥25.66mL/min的不同Ccr的T2DM患者。