iNOS基因转染人CD3AK细胞的实验研究

目的　构建一氧化氮供体CD3AK/iNOS细胞。方法　用PCR技术从 pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长cDNA ,与逆转录病毒pLNCX构建重组质粒 pLNCX/iNOS ;通过脂质体介导把重组质粒转染入包装细胞PA3 17中 ,经G418筛选出抗性克隆。通过NIH3T3细胞测定病毒滴度。用病毒上清感染人CD3AK细胞。测定CD3AK/iNOS细胞培养上清中NO含量及iNOS活性。结果　经过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定重组质粒的正确性。G418筛选出 16个抗性克隆 ,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒。NIH3T3细胞测定病毒滴度为 2 .1× 10 4CFU /ml。经重组逆转录病毒上清转染后CD3AK /iNOS细胞合成并分泌的NO含量及iNOS活性比CD3AK细胞明显增高。结论　逆转录病毒载体 pLNCX可有效地介导iNOS的转染。成功构建CD3AK/iNOS细胞 ,有效提高iNOS活性及NO含量。     

淫羊藿苷、黄芩苷联合多柔比星抑制肝癌细胞APRIL表达和逆转肿瘤免疫逃逸

目的:探讨中药单体淫羊藿苷(icarrin,ICA)、黄芩苷(baicali,BAI)联合化疗药多柔比星(doxorubicin,又称ADM)抑制肝癌HepG2细胞增殖诱导配体(proliferation-inducing ligand,APRIL)的表达,进而抑制肿瘤细胞的增殖和逆转肿瘤细胞免疫逃逸的作用和机制。方法:MTT法检测25μg/ml ICA、200μg/ml BAI、2μg/ml ADM以及12.5μg/ml ICA 1μg/ml ADM、100μg/ml BAI 1μg/ml ADM等5个用药处理组与未用药对照组HepG2细胞的增殖活性;RT-PCR检测APRIL及其受体HSPG、凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平;MTT法检测CD3AK(anti-CD3 antibody induced activated killer cells)对用药处理组和未用药对照组HepG2细胞的杀伤活性。结果:ICA、BAI以及ADM对HepG2细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈时间依赖效应;ICA、ADM、ICA ADM、BAI ADM组作用96 h抑制率最高,分别为(29.30±6.62)%、(63.60±1.35)%、(99.03±0.10)%、(98.89±0.18)%(均P<0.01)。HepG2细胞高表达APRIL及其受体HSPGmRNA。ICA、BAI以及ADM下调HepG2细胞APRILmRNA以及凋亡相关蛋白bcl-2 mRNA的表达水平。ICA、BAI、ADM以及ICA ADM、BAI ADM能增加HepG2细胞对CD3AK细胞杀伤的敏感性,杀伤率由对照组的(30.00±4.50)%分别增加到(97.23±5.11)%、(93.12±9.88)%、(60.45±5.71)%、(43.87±8.2)%、(47.25±2.68)%(均P<0.01);且经CD3AK作用后,HepG2细胞bcl-2 mRNA的表达进一步下调。结论:ICA、BAI联合ADM抑制HepG2细胞APRIL、bcl-2 mRNA的表达,进而抑制肿瘤细胞增殖;同时增强其对CD3AK细胞的杀伤敏感性,逆转肿瘤细胞的免疫逃逸。     

CD_3单克隆抗体激活细胞的体外抗肿瘤作用

目的:观察CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞(CD3AK)的体外杀伤肿瘤作用。方法:采用MTT法测定不同时期CD3AK细胞的杀伤活性。结果:培养到第4天的CD3AK细胞已有明显的杀伤活性,第10天达高峰;CD3AK对K562、H7402和MNK45肿瘤细胞的杀伤活性显著高于LAK和NK细胞(P<0.05),对Hela-3肿瘤细胞的杀伤活性略低于LAK细胞。结论:CD3AK是一种广谱、高效的肿瘤杀伤细胞,但它对不同种类的肿瘤细胞的杀伤效应又存在着较大的差异。     

Survivin反义寡核苷酸逆转K562/A02细胞的耐药研究

目的:探讨Survivin反义寡核苷酸(an-tisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)对K562/A02细胞耐药的作用和机制。方法:以脂质体转染SurvivinASODN,以MTT法检测多柔比星(adriamycin,ADM)和SurvivinASODN ADM对K562/A02细胞的IC50,以RT-PCR、蛋白印迹、荧光分光光度计和流式细胞术分别检测SurvivinmRNA、蛋白表达及半胱氨蛋白水解酶-3(Caspase-3)的活性和细胞凋亡的变化。结果:ADM和ASODN ADM对K562/A02细胞的IC50分别为45·56和19·01mg/L,SurvivinmRNA和蛋白水平表达分别降低36·2%和71·5%,Caspase-3活性增加67·5%,凋亡率较对照组增加[(14·5±5·6)%vs(2·4±1·0%),P<0·05]。结论:SurvivinASODN通过抑制Survivin表达激活Caspase-3,诱导凋亡,逆转耐药。     

抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅴ CD3AK介导的MHC非限制性溶瘤作用的机制分析

MHC(Maior histocompatibility complex, MHC)Ⅰ类抗原缺失是一些肿瘤细胞逃逸抗原特异性CTL攻击的重要机制。CTL能否通过MHC非限制性、MHC Ⅰ类非依赖性机制杀伤肿瘤细胞是值得深入探讨的。我们用抗CD3单抗和rIL-2共刺激法诱导的CD3AK作为效应细胞,研究了CD3AK对两株MHCⅠ类阴性肿瘤细胞株K562和Daudi杀伤作用,初步分析了其机制:(1)CD3AK对K562和Daudi都有细胞毒作用,分别为49.4±5.8和33.5±2.5％;同血源NK细胞对K562细胞的细胞毒活性为8.2±3.2％,Daudi对NK的杀伤作用不敏感。(2)CD3AK可与K562细胞结合,EDTA抑制这一过程。(3)CD3AK通过诱导靶细胞K562坏死     

可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白诱导非特异性抗肿瘤免疫

目的:观察可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白对体外非特异性抗肿瘤免疫的影响。方法:以含sCD80-Lin- ker-sCD40L、sCD80、sCD40L编码基因的重组腺病毒载体或对照病毒载体转染人卵巢癌细胞SKOV3,ELISA检测上清中可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白及sCD80、sCD40L蛋白的表达。由卵巢癌患者外周血单个核细胞培养树突状细胞(dendritic cells,DCs),将DCs和自体T细胞共同培养并加入不同上清诱导48h;用异基因混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)检测诱导的DCs刺激淋巴细胞增殖能力;以诱导的T细胞为效应细胞,SKOV3细胞或K562细胞为非特异性靶细胞,通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogemse,LDH)释放实验检测杀伤活性。结果:ELISA检测证实病毒转染SKOV3细胞上清中sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白、sCD80蛋白和sCD40L蛋白表达量分别为2.791 ng/ml、1.956 ng/ml和1.407 ng/ml。MLR证实,与对照相比,融合蛋白上清诱导的DCs[刺激-反应细胞比例1:100,(0.382±0.053)vs(0.167±0.028),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:50,(0.636±0.164)vs(0.311±0.067),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:10,(1.245±0.271)vs(0.423±0.156),P<0.01]和sCD40L上清诱导的DCs[刺激-反应细胞比例1:100,(0.341±0.062)vs(0.167±0.028),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:50,(0.567±0.106)vs(0.311±0.067),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:10,(1.098±0.263)vs(0.423±0.156),P<0.01]刺激同种异基因混合淋巴细胞增殖能力明显增强。LDH释放实验提示,sCD40L上清诱导的T淋巴细胞对靶细胞非特异性杀伤活性显著强于对照SKOV3组[(42.28±6.27)vs(22.49±3.56),P<0.01]和K562组(47.94±6.72)vs (26.33±2.89),P<0.01],而融合蛋白上清诱导的T淋巴细胞对靶细胞非特异性杀伤活性显著强于sCD40L上清诱导的T淋巴细胞[sKOV3组为(58.97±8.92)vs(42.28±6.27),P<0.05;K562组为(66.55±9.43)vs(47.94±6.72),P<0.05]。结论:可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白能有效诱导体外非特异性抗肿瘤免疫,对肿瘤免疫治疗具有潜在应用价值。     

脐血CD3AK细胞治疗恶性肿瘤的临床应用研究

目的:研究用脐血单个核细胞制备CD3AK细胞的抗肿瘤作用,探讨肿瘤生物治疗近期疗效的免疫指标.方法:分离脐血单个核细胞,分别用IL-2和IL-2 CD3Ab诱导LAK和CD3AK细胞,并测其扩增数量和对K562细胞的杀伤活性;测定肿瘤患者用CD3AK细胞治疗前后外周血T淋巴细胞亚群绝对计数的变化情况和外周血单核细胞(PBMC)的NK杀伤活性.结果:脐血LAK细胞和脐血CD3AK细胞均于培养后11天时扩增倍数最高,分别是培养前的18倍、24倍,对K562的杀伤活性分别是培养前的2.6倍和3.2倍;肿瘤患者输注CD3AK细胞一疗程后,其外周血T淋巴细胞亚群绝对计数有明显升高:总T升高66.0%,Th升高68.0%,Ts升高58.0%;其PBMC的NK杀伤活性由63.0%升高到81.0%,平均升高28.0%.结论:1)脐血单个核细胞是LAK细胞和CD3AK细胞良好的前体细胞.2)LAK和CD3AK细胞的数量和杀伤能力在培养的11天时达高峰,而且CD3AK细胞数量和杀伤活性明显优于LAK细胞.3)CD3AK细胞输注能明显提高肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群绝对计数和PBMC的NK活性.4)肿瘤患者的外周血T淋巴细胞计数和PBMC的NK活性测定可望成为肿瘤生物治疗的一个近期疗效参数.     

PHA-CD3AK细胞的体外诱导及其生物学特性初步研究

目的:研究PHA-CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较.方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),采用植物血凝素(PHA)、单克隆抗体(anti-CD3McAb)和基因重组人白细胞介素2(rhIL-2)、共同诱导制备PHA-CD3AK细胞;应用流式法分析PHA-CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法(LDH)检测PHA-CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型.结果:微量anti-CD3McAb(0.05μg/ml)辅以少量rhIL-2(300U/ml)和PHA(100μg/ml)共同培养,即能诱导和大量扩增PHA-CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80:1时,PHA-CD3AK细胞对体外肿瘤细胞(K562)杀伤的百分率为56.5%;免疫表型检测PHA-CDB AK细胞中CD3+、CD4+、CD8+细胞的比率分别为(86.5±5.89)%、(38.20±5.27)%、(42.63±3.50)%;核型为正常二倍体,染色体数目为46条.结论:PHA-CD3AK细胞是以CD3+、CD4+、CD8+细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA-CD3AK细胞为正常二倍体细胞.PHA-CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞.     

硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤的敏感性及其机制

目的:探讨硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤敏感性的可能机制.方法:流式细胞术和real-time PCR检测硼替佐米处理前后K562/ADM细胞表面MHC Ⅰ类链相关分子A(major histocompatibility complex class Ⅰ chainrelated molecule A,MICA)蛋白和mRNA的表达,LDH释放法检测硼替佐米处理前后K562/ADM细胞对NK细胞的杀伤敏感性.结果:硼替佐米处理后,K562/ADM细胞表面MICA蛋白表达率上升[(17.03 ±4.94)％vs(23.77±5.26)％,P＜0.05];处理后K562/ADM细胞MICA mRNA的表达水平是处理前的(2.03±0.33)倍.效靶比为10∶1、20∶1时,NK细胞对硼替佐米处理后的K562/ADM细胞的杀伤率上升[(23.22±3.03)％、(30.30±0.74)％ vs(33.69±1.28)％、(41.40 ±1.97)％,P＜0.05].结论:硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤的敏感性,其机制可能与硼替佐米上调K562/ADM细胞MICA表达有关.     

三氧化二砷联合丁硫氨酸亚砜胺诱导人白血病K562/ADM细胞凋亡

目的 观察三氧化二砷(As2O3)联合丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对肿瘤多药耐药细胞K562/ADM的诱导凋亡效应,探讨谷胱甘肽(GSH)的含量变化对As2O3作用效果的影响.方法 以0.5、2.0、5.0 μmol/L As2O3单独及联合100 μmol/L BSO作用于K562/ADM细胞,应用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖活性,Annexin V/PI标记法观察细胞的凋亡效应,分光光度法检测细胞内GSH含量的变化.结果 K562/ADM细胞内GSH含量为(81.13±3.91)mg/g prot,明显高于K562细胞(P＜0.01).BSO单独或联合As2O3作用下,随作用时间的延长,K562/ADM细胞内GSH含量逐渐降低.临床剂量(0.5、2.0 μmol/L)As2O3联合BSO作用下,抑制作用逐步增强,72 h两组的细胞增殖抑制率分别为(90.63±5.95)%和(86.12±6.11)%,均分别高于单用相应剂量As2O3组(P＜0.01);凋亡效应逐步增强,72 h两组的细胞凋亡率分别为(82.15±9.28)%和(92.72±9.41)%,均分别高于单用相应剂量As2O3组(P＜0.01).结论 GSH的含量变化与As2O3的作用效果密切相关,As2O3联合BSO可有效诱导K562/ADM细胞发生凋亡.     

CD3AK细胞对耐药白血病细胞的体外净化作用

目的 :观察CD3 AK细胞对耐药的白血病细胞系及慢性髓细胞白血病 (chronicmyelogenousleukemia ,CML)急变患者原代肿瘤细胞的体外净化作用。方法 :采用固化的抗CD3单克隆抗体联合小剂量IL 2诱导CD3 AK细胞 ;MTT法观察CD3 AK细胞对K5 6 2、HL6 0及其耐药株的细胞毒活性 ;肿瘤细胞集落培养 (tumorcolonyassay ,TCA)观察CD3 AK细胞对K5 6 2、HL6 0及其耐药株集落形成的抑制作用 ;流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)检测耐药的CML急变患者原代细胞经CD3 AK细胞净化后Pgp阳性细胞的比例变化。结果 :MT法显示CD3 AK细胞在体外对K5 6 2细胞、HL6 0细胞及其耐药株有相似的杀伤作用 ;集落培养观察CD3 AK细胞对HL6 0细胞株及其耐药株的集落形成均有较强的抑制作用 ;FCM结果显示耐药CML原代细胞经CD3 AK细胞净化后Pgp阳性细胞比例下降 2 3 2 0 %。结论 :CD3 AK细胞在体外对耐药白血病细胞株及耐药白血病原代细胞均有较强的净化作用。     

Biological features of human T-activated killer cells

Cancerbiotherapyneedstogeneratetumor-killingeffectorsinvitro,butdifferenttumoricidalactivitiesareinducedfromperipheralsubpopulationoflymphocytesdependingonthedifferentstimuliusedtoactivatethecells.Previousreports'-#havefoundthatNKcellsareprimarilyresponsibleforthelyticfunctionininterleukin-2(IL-2)-inducedLAK(lymphokine-activatedkiller)cells,whileT-cells,ifpresent,exhibitlittleifanycytotoxicity.Theadditionofanti-CD,monoclonalantibody(CD,McAb)or/andlowconcentrationofIL-2(<100U/ml)generates…     

雷公藤红素逆转K562/A02细胞多药耐药的实验研究

目的探讨雷公藤红素逆转人慢性粒细胞白血病红白血病急变细胞株K562/A02多药耐药的效果。方法采用CCK-8法测定细胞的药敏性及耐药逆转性,应用流式细胞术检测细胞内ADM浓度、P-gp蛋白表达。结果雷公藤红素对K562/A02、K562的半数抑制率浓度（IC50）分别为（295.58±23.288）μmol/L、（411.59±26.551）μmol/L。K562/A02细胞对ADM的耐药性是K562细胞的79.78倍。细胞毒剂量的雷公藤红素作用后,ADM对K562/A02细胞的IC50显著下降（P〈0.05）,逆转倍数为117.860倍。细胞毒剂量（IC50）和非细胞毒剂量（IC10）的雷公藤红素处理后的K562/A02细胞内的ADM浓度显著增加（P〈0.05）,增加倍数分别为1.537倍和1.102倍。雷公藤红素能明显下调K562/A02细胞的P-gp表达。结论雷公藤红素对逆转K562/A02细胞的耐药性有一定的作用,其机制可能与下调P-gp表达有关。     

顺氨氯铂,阿霉素增强人抗CD3单克隆抗体活化杀伤细胞的杀瘤效应

应用抗CD3单克隆抗体和基因重组人IL-2共同诱导人外周血单个核细胞，制备抗CD3单克隆抗体活化的杀伤细胞（CD3AK）。利用LDH释放法，观察顺氨氯铂（CDDP）和阿霉素（ADM）预处理人肝癌细胞系H－7402，对CD3AK杀伤该靶细胞的调节作用。ABC－ELISA法检测CDDP和ADM对H-7402细胞表达细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、HLA－ABC、HLA－DR抗原的影响。结果表明：经CDDP（2．0μg／ml）、ADM（O．1μg／ml）预处理12h的H－7402细胞对CD3AK的杀伤敏感性显著提高（P＜0.05）；CDDP能够明显促进H－7402细胞表达ICAM-1、HLA－ABC分子（P＜0.05）；ADM预处理的肿瘤细胞表面三种分子的表达均未发生明显的变化。CDDP促进人肝癌细胞对CD3AK的杀伤敏感性可能与其上调了肿瘤细胞表面的ICAM-1分子有关。     

PHA—CD3AK细胞的体外诱导及其生物学特性初步研究

目的：研究PHA—CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较。方法：分离人外周血单个核细胞（PBMC）,采用植物血凝素（PHA）、单克隆抗体（anti—CD3McAb）和基因重组人白细胞介素2（rhIL-2）、共同诱导制备PHA—CD3AK细胞;应用流式法分析PHA—CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法（LDH）检测PHA—CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型。结果：微量anti—CD3McAb（0．05μg／m1）辅以少量rhIL～2（300U／ml）和PHA（100μg／m1）共同培养,即能诱导和大量扩增PHA—CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80：1时,PHA—CD3 AK细胞对体外肿瘤细胞（K562）杀伤的百分率为56．5％;免疫表型检测PHA—CD3 AK细胞中CD3^＋、CD4^＋、Cd8^＋细胞的比率分别为（86．5±5．89）％、（38．20±5．27）％、（42．63±3．50）％;核型为正常二倍体,染色体数目为46条。结论：PHA—CD3 AK细胞是以CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA—CD3AK细胞为正常二倍体细胞。PHA—CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞。     

Preparation and Bioactivity Assay of CD3AK Cell from Lmbilical Cord Blood：—Clinic Report of 10 Tumor Cases

Objective To study the anti-tumor effect of CD3AK cell prepared from umbilical blood,to explore the short-term curative effect on tumor cases and seek better immune index for biotherapy.Methods IL-2 and IL-2 CD3Ab were used to induce LAK cells and CD3AK cells isolated from umbilical blood mononuclear cells(UBMC).The expanding number and bioactivity of LAK cells and CD3AK cells were examined at different time points after culture,the NK activity of peripheral blood mononuclear cells(PBMC)of 10 cases of malignant tumor were determined before and after CD3AK cell adopting immune therapy as well.Results The number and bioactivity(NK killing K562 cell)of LAK and CD3AK cells reached their peaks on 11 th day.The number of LAK and CD3AK cells were 18 folds and 24 folds of that before culture;The NK activities of LAK and CD3AK against K562 were 2.6 folds and 3.2 folds of those before culture respectively.The nK activity for killing K562 cells of malignant tumor patient‘s PBMC was increased from 63%-81% by CD3AK cell transfusing,rising mean 28%.Conclusion (1)The UBMC is a potential and better source of predecessor for LAK and CD3AK;(2)The NK activity of LAK and CD3AK cells from UBMC reached their peaks at 11 th day after culture,and the NK aftivity of CD3AK cells in much greater than that of LAK cells;(3)The NK activity of malignant tumor patient‘s PBMC can be obviously elevated by transfusing CD3AK cell(4)The test of NK activity of PBMC of malignant tumor patient may become an objective immune index for tumor biotherapy.     

PLK1基因沉默增强K562/A02细胞对阿霉素敏感性的实验研究

背景与目的:Polo样激酶1(polo-likekinase1,PLK1)是一种重要的细胞周期调节分子,在多种肿瘤细胞中高表达且与肿瘤发病、治疗和预后密切相关。本研究探讨PLK1基因沉默增强K562/A02细胞对阿霉素敏感性的作用。方法:构建针对PLK1mRNA的siRNA真核质粒,将其导入经阿霉素诱导的K562/A02细胞中,通过RT-PCR和Westernblot分析PLK1基因在转染前后的表达差异;MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度;流式细胞术检测细胞内阿霉素积累量和阿霉素诱导后的细胞凋亡。结果:与对照组相比,转染pEGFP-PLK1质粒的K562/A02细胞PLK1mRNA和蛋白水平分别下降(61.9±2.5)%和(65.3±2.4)%,对阿霉素敏感性的相对逆转率为67.8%。经阿霉素诱导96h后,空白对照组的细胞凋亡率为11.33%,转染pEGFP-PLK1质粒组凋亡率达到54.39%。结论:PLK1基因沉默能明显增加K562/A02细胞内阿霉素的累积量,增强细胞对阿霉素的敏感性并诱导凋亡,从而逆转K562/A02细胞对阿霉素的耐药性。     

胡椒碱诱导人红白血病细胞株K562的分化

背景与目的:白血病是一种血液系统的恶性肿瘤,诱导分化是治疗白血病非常有效的方法之一。胡椒碱(piperine)是一种从胡椒属植物中提取的生物碱,具有镇静、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性。本研究旨在探讨胡椒碱对K562细胞的增殖抑制和诱导分化作用。方法:采用台盼蓝染色计数法绘制生长曲线和流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,观察胡椒碱对K562细胞增殖的影响;通过观察细胞形态学变化、检测硝基蓝四氮唑(nitroblue tetrazolium,NBT)还原能力、流式细胞术检测细胞表面标志CD33和CD14的变化,探讨胡椒碱对K562细胞的诱导分化作用。结果:20μmol/L和40μmol/L胡椒碱可诱导K562细胞向巨噬细胞和单核系细胞分化。40μmol/L胡椒碱作用3d,K562细胞的NBT还原阳性率由(8.5±1.9)%上升到(76.7±5.3)%;20μmol/L胡椒碱作用3d,流式细胞术结果显示细胞表面分化抗原CD33的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)下降42.05%(P<0.01),而CD14的MFI则升高了1倍(P<0.01);20μmol/L以上浓度的胡椒碱对K562细胞的增殖具有抑制作用,其抑制作用随时间的延长或剂量的增加有增强的趋势。结论:胡椒碱可诱导K562细胞向巨噬和单核系细胞分化。