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1.
背景:高压氧治疗可以改善脊髓损伤区微环境,联合许旺细胞移植有望提高大鼠脊髓损伤疗效。目的:观察高压氧联合许旺细胞移植对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响。方法:80只雌性SD大鼠建立脊髓损伤模型后随机分成4组,每组20只,空白对照组和细胞移植组分别在建模6 h后尾静脉注射L-DMEM培养液和许旺细胞(3×106个)悬液,高压氧组建模1 h后开始高压氧治疗,联合组进行高压氧和许旺细胞移植联合治疗。于移植后1,3 d以及1,2,3,4周进行斜板试验、改良Tarlov 评分,BBB评分评定大鼠后肢运动功能恢复情况;移植第4周PCR检测各组脊髓组织中SRY基因表达;移植第8周行辣根过氧化物酶示踪及神经电生理检测。结果与结论:联合组下肢运动功能优于细胞移植组和高压氧组,细胞移植组和高压氧组优于空白对照组。细胞移植组和联合组有SRY基因表达,对照组和高压氧组未检测到SRY基因。辣根过氧化物酶阳性神经纤维数:联合组>细胞移植组和高压氧组>空白对照组,差异有显著性意义(P < 0.01)。联合组大鼠体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期、波幅明显优于其他3组(P < 0.05或P < 0.01)。结果提示高压氧与许旺细胞移植联合应用可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,改善肢体运动功能和电生理功能,其治疗效果优于单独应用高压氧或许旺细胞。中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接:  相似文献   

2.
背景:C5a通过增强脊髓损伤后早期炎症反应参与了脊髓损伤后的继发性损伤,C5a受体拮抗剂能有效阻断这一过程。 目的:观察许旺细胞移植联合C5a受体拮抗剂对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响。 方法:Wistar大鼠80只建立脊髓损伤动物模型后随机分成4组。①空白对照组尾静脉注射培养液组+腹腔注射生理盐水。②细胞移植组尾静脉注射许旺细胞。③C5a受体拮抗剂组腹腔注入C5a受体拮抗剂。④联合组尾静脉注射许旺细胞,同时腹腔注入C5a受体拮抗剂。 结果与结论:下肢运动功能评价联合移植组优于细胞移植组和C5a受体拮抗剂组,细胞移植组和C5a受体拮抗剂组优于对照组。细胞移植组和联合组有SRY基因表达。HRP阳性神经纤维数:联合组>胞移植组与C5a受体拮抗剂组>空白对照组,且各组之间差异有显著性意义(P < 0.01)。联合组大鼠体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期、波幅明显优于其他3组(P < 0.05或P < 0.01)。提示许旺细胞移植和C5a受体拮抗剂联合应用可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,改善其肢体运动功能和电生理功能。  相似文献   

3.
目的:探讨微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对脊髓半横断损伤大鼠的脊髓修复作用.方法:免疫组织化学方法结合图像分析检测微囊化兔坐骨神经组织细胞移植后,脊髓半横断损伤大鼠脊髓后角内 P 物质(SP)的阳性神经元数和平均光密度.结果:脊髓半横断损伤后第1、2周脊髓后角内 SP 阳性神经元数和平均光密度均降低,至第4、8周时逐渐同升,微囊组 SP 的表达明显高于同时间点的细胞悬液组、单损组.细胞悬液组与单损组比较,除移植后第1周 SP 的含量差异有显著性外,其余各时间点的比较差别无统计学意义.结论:微囊化兔坐骨神经组织细胞移植能使脊髓半横断大鼠脊髓后角内 SP 的表达上调,对脊髓半横断损伤后的感觉神经元有保护作用.  相似文献   

4.
目的探讨微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对脊髓半横断损伤后大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的表达影响。方法成年SD大鼠80只随机分为4组,微囊组(n=25)、细胞组(n=25)、单损组(n=25)、正常组(n=5)。术前制备兔坐骨神经细胞混悬液以及将其微囊化,微囊组、细胞组和单损组大鼠在脊髓半横断伤后,立即在损伤处分别植入10μl微囊化坐骨神经组织细胞1、0μl坐骨神经组织细胞以及10μl生理盐水。于术后2 d7、d1、4 d、21 d2、8 d(每个时相取5只大鼠)取出损伤部位脊髓组织,正常组(每个时相取1只大鼠)则取相应节段脊髓。组织石蜡包埋后切片,行免疫组织化学染色观察GDNF的表达变化。结果 GDNF阳性染色主要见于神经元细胞及胶质细胞的胞浆内。大鼠脊髓损伤后上述细胞2 d后表达开始上升2,1 d达到最高。微囊组与单损组、细胞组比较差异有显著性(P〈0.05)。结论微囊化兔坐骨神经组织细胞移植于大鼠损伤脊髓后,可以抑制炎症反应,促进GDNF的表达,有利于大鼠运动功能恢复。  相似文献   

5.
嗅鞘细胞移植对脊髓半横断损伤大鼠后肢运动功能的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的观察嗅鞘细胞移植物对脊髓半横断损伤大鼠后肢运动功能的影响。方法30只雌性成年SD大鼠制成脊髓半横断损伤模型,并随机分成5组立即进行移植,A组移植纯化的嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)悬液,B组移植纯化的OECs培养上清液,C组移植未纯化的OECs,D组移植未纯化的OECs培养上清液,E组移植DMEM/F12培养液,术后6 w内进行BBB评分和IP实验,用单因素方差分析进行统计学分析。结果A组的BBB评分在3w后较其它组高,差异有统计学意义(P<0.05),A组的IP实验结果在4 w后较其它组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论纯化培养嗅鞘细胞移植能促进脊髓半横断损伤大鼠后肢运动功能恢复。  相似文献   

6.
微囊化兔坐骨神经组织移植对大鼠脊髓损伤神经元的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:观察大鼠脊髓半横断损伤后植入微囊化兔坐骨神经组织对一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法:尼氏染色和NADPH-d组织化学染色。利用图像分析系统检测染色标记细胞数和阳性细胞平均面积、平均光密度。结果:脊髓损伤后神经元数量减少,尼氏体脱失、溶解。术后3d,微囊组NOS阳性细胞数、阳性细胞平均面积及平均光密度均明显高于单损组;术后7d微囊组NOS阳性细胞数和阳性细胞平均面积较细胞组高;术后14d,细胞组NOS阳性细胞数急剧增高超过微囊组,但微囊组仍平稳上升。结论:微囊化兔坐骨神经组织移植能诱导早期NOS表达增加及抑制后期NO过量产生,减轻脊髓继发性损伤,有利于损伤脊髓的修复和再生。  相似文献   

7.
目的:观察大鼠脊髓损伤后及进行微囊化兔雪旺细胞移植后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化.方法: 130只成年SD大鼠随机分为微囊组、细胞悬液组、损伤对照组和正常对照组4组,术后3、 7、 14及28d,冰冻切片行免疫组织化学显色观察GFAP表达的变化.结果:大鼠脊髓损伤后3~14d, GFAP阳性细胞数及平均光密度均增加;至第28天时则减少,但仍高于正常组.其中阳性细胞数和平均光密度在第7天开始,微囊组与细胞悬液组、损伤组比较均有明显降低.结论: 微囊化异种雪旺细胞移植能抑制损伤脊髓GFAP的表达,减轻由反应性胶质化所形成的胶质瘢痕.  相似文献   

8.
背景:目前细胞移植是修复脊髓损伤的研究热点之一,许旺细胞能够分泌多种神经营养因子,改善损伤局部微环境,大量相关文献证实了其能够促进脊髓损伤后功能的恢复。针对治疗脊髓损伤的细胞移植方法很多,其中静脉移植具有操作方便、能够避免传统移植方法造成的附加损伤等优点。目的:探讨许旺细胞尾静脉移植修复大鼠脊髓损伤的疗效。方法:体外分离Wistar大鼠双侧坐骨神经,植块法培养,S-100染色鉴定,Hoechst33342标记许旺细胞。Impactor model-Ⅱ打击仪制作Wistar大鼠T10脊髓损伤模型60只,随机分为3组,空白对照组术后未作处理,DMEM对照组、许旺细胞移植组术后1周分别尾静脉注射1mLDMEM或1mL许旺细胞。术前1d,术后1,3d,1周及以后每周进行BBB评分。移植后1,2,4周取材行冰冻切片观察移植许旺细胞的迁移。移植后8周取材行苏木精-伊红染色及免疫荧光染色观察损伤段胶质原纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。结果与结论:经纯化鉴定获得纯度为95%的许旺细胞。移植后1,2,4周损伤段及邻近节段脊髓内可观察到Hoechst33342阳性细胞。术后4周,许旺细胞移植组与空白对照组、DMEM对照组BBB评分差异开始有显著性意义(P0.05),且许旺细胞移植组高于空白对照组、DMEM对照组。苏木精-伊红染色示各组均有脊髓空洞形成,许旺细胞移植组空洞小于空白对照组、DMEM对照组。免疫组织化学染色示空白对照组、DMEM对照组胶质原纤维酸性蛋白反应较强,许旺细胞移植组胶质原纤维酸性蛋白阳性面积小于其他组(P0.05);许旺细胞移植组神经元特异性烯醇化酶的阳性面积明显大于其他组(P0.05)。提示静脉移植许旺细胞修复大鼠脊髓损伤是可行的,操作简便,且有较好的疗效。  相似文献   

9.
背景:乌司他丁能减轻炎性反应、清除氧自由基,对中枢神经系统损伤具有保护作用,能有效地提高脊髓损伤后移植细胞的存活率。 目的:观察乌司他丁联合脐带间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢功能的影响。 方法:Wistar大鼠建立脊髓损伤动物模型后随机分成4组:空白对照组尾静脉注射培养液+腹腔注射生理盐水,细胞移植组尾静脉注射脐带间充质干细胞,乌司他丁组腹腔注入乌司他丁,联合组尾静脉注射脐带间充质干细胞,同时腹腔注入乌司他丁。 结果与结论:移植4周后联合组下肢运动功能优于细胞移植组和乌司他丁组(P < 0.05),细胞移植组和乌司他丁组优于空白对照组(P < 0.05)。移植后4周,PKH26标记的阳性细胞数联合移植组多于细胞移植组,细胞移植组多于乌司他丁组和空白对照组(P < 0.01)。移植后8周,联合组大鼠体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期、波幅明显优于其他3组(P < 0.05或P < 0.01)。提示乌司他丁联合应用脐带间充质干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,改善其肢体运动功能和电生理功能,其效果优于单独应用乌司他丁或脐带间充质干细胞。  相似文献   

10.
微囊化施万细胞异种移植对大鼠脊髓损伤修复的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
在无菌条件下取日本大耳兔坐骨神经,经胰酶消化、低速离心后制成细胞悬液,置RPW I 1640培养基中培养,差速贴壁法分离纯化。倒置显微镜下观察,免疫组织化学检测S—100、NGF,证实为施万细胞。与海藻酸钠混合,经双腔喷头喷入氯化钡溶液制作微囊化施万细胞。实验分为微囊组、空囊组、细胞组和对照组。将SD大鼠左侧T10脊髓节段横切后,  相似文献   

11.
目的:探讨微囊化兔嗅球组织细胞移植对脊髓损伤大鼠胶质原纤维酸性蛋n(GFAP)及神经丝蛋白200(NF200)表达的影响.方法:SD大鼠分为正常组、损伤对照组、细胞悬液组、微囊化移植组.用免疫组织化学染色方法观察损伤脊髓内GFAP及NF200表达,变化.结果:脊髓损伤后NF200及GFAP表达均呈进行性增高,二者有显著的相关性;微囊组术后7、14、21 d胶质原纤维酸性蛋白的表达显著低于损伤对照组;但微囊组脊髓内NF200表达显著升高.结论:微囊化兔嗅球细胞悬液移植可促进损伤脊髓内的NF200表达并抑制GFAP表达,有可能有助于脊髓功能的恢复.  相似文献   

12.
目的:旨在探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在异种嗅鞘细胞移植联合中药干预下脊髓损伤中的作用。方法:将188只SD大鼠随机分为正常对照组、单纯损伤组、异种嗅鞘细胞移植组、异种嗅鞘细胞移植联合中药治疗组,损伤组又设1、3、7、14、28 d 5个时相点,免疫组织化学技术检测MMP-9的表达,同时电镜观察血脊髓屏障的变化。结果:脊髓损伤后血脊髓屏障的超微结构不同程度损害、MMP-9表达上调,经干预治疗后出现一定程度的恢复,MMP-9表达下调。结论:脊髓损伤后MMP-9表达水平增加与伤后血脊髓屏障损害的发生、发展密切相关,MMP-9在脊髓损伤后血脊髓屏障损害的病理生理过程中起重要作用。异种嗅鞘细胞移植联合中药对脊髓损伤有较好的修复作用。  相似文献   

13.
为获取碱性成纤维细胞生长因子基因将之用于对帕金森病的实验治疗,本研究克隆了大鼠的碱性成纤维细胞生长因子的cDNA。实验用6 周龄SD 大鼠卵巢提取的总RNA,采用特异引物逆转录PCR 获取目的cDNA 片段并将其连入克隆载体pGEM 3zf(+ )中,经ABIPRISM 377 测序仪双链测序后显示,目的片段长458 bp,与文献报道的碱性成纤维细胞生长因子序列相比存在一处碱基序列差异,无内含子。所克隆目的片段应为大鼠碱性成纤维细胞生长因子基因。  相似文献   

14.
BACKGROUND: Studies have shown that neural stem cell transplantation combined with exercise training can promote the recovery of hindlimb motor function from spinal cord injury in rats, but its mechanism of action has not been fully elucidated. OBJECTIVE: To investigate the effects of early exercise training combined with neural stem cell transplantation on the recovery of hindlimb motor function in rats with spinal cord injury. METHODS: Sixty Sprague-Dawley rats with spinal cord injury were randomly divided into three groups: control group (n=20, given conventional treatment after injury), cell transplantation group (n=20, given neural stem cell transplantation after injury), experimental group, (n=20, given neural stem cell transplantation combined with early exercise training after injury). Recovery of the hindlimb motor function was assessed by Basso, Beattie and Bresnahan scale and inclined plane test before and at 1, 7, 14, 21 days after injury. Western blot assay was used to detect caspase-3 and myeloperoxidase expression. Hematoxylin-eosin staining was done at 21 days after injury to observe the structure changes of the injured spinal cord. RESULTS AND CONCLUSION: (1) Scores of Basso, Beattie and Bresnahan scale and inclined plane test were significantly better in the experimental group than the cell transplantation group followed by the control group (P < 0.05). (2) In the control group, the expression of caspase-3 and myeloperoxidase was significantly increased at 14 days after injury. In the cell transplantation, the expression of caspase-3 and myeloperoxidase was significantly higher than the experimental group (P < 0.05). (3) Pathological inflammation was reduced most in the experimental group followed by the cell transplantation group. In the experimental group, the structure of injured spinal cord was improved and became relatively clear and intact. These findings indicate that neural stem cell transplantation combined with early exercise training can effectively promote the recovery of hindlimb motor function from spinal cord injury in rats, by reducing the expression of caspase-3 and myeloperoxidase and alleviating secondary lesion of the spinal cord.   相似文献   

15.
背景:许旺细胞能够分泌多种神经营养因子,促进脊髓损伤功能的恢复。但异体许旺细胞移植可引发自身免疫反应,且在移植方式上,局部移植无法避免二次损伤,静脉移植虽可以透过血脊髓屏障到达损伤局部,但不能达到有效的治疗浓度。目的:探讨经蛛网膜下腔移植自体激活许旺细胞对脊髓损伤大鼠功能恢复的影响。方法:66只大鼠均建立脊髓损伤模型,造模后随机分为3组,自体激活许旺细胞组通过结扎单侧隐神经从而激活许旺细胞,自体未激活许旺细胞组、模型对照组仅在相同部位手术但不结扎神经。切除各组手术远端1cm神经,采用组织块法进行许旺细胞的体外分离培养及纯化。1周后,自体激活许旺细胞组、自体未激活许旺细胞组分别通过蛛网膜下腔注入经Hoechst33342标记的对应许旺细胞悬液,模型对照组仅注入等量DMEM。对脊髓损伤后肢体功能的恢复进行BBB运动功能评分及脚印分析,通过苏木精-伊红染色和GFAP染色从组织学角度评价脊髓损伤恢复情况。结果与结论:从术后第4周开始,自体激活许旺细胞组BBB后肢功能评分明显优于另两组(P0.05)。移植后2周,可见迁移至大鼠脊髓损伤局部的许旺细胞。与自体未激活许旺细胞组比较,移植后5周自体激活许旺细胞组的前后足中心距离、后肢第3足趾外旋角度均显著减小(P0.05),移植后13周损伤区胶质瘢痕面积明显减小(P0.05),损伤区空洞面积明显减小(P0.05)。证实经蛛网膜下腔移植自体激活许旺细胞可以促进脊髓损伤的恢复。  相似文献   

16.
目的 观察被动运动促进脊髓损伤(Spinal cord injury, SCI)大鼠后肢运动功能恢复和改善骨骼肌萎缩的影响;探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对被动运动促进功能恢复和延缓肌萎缩的作用。 方法 将36只健康成年雌性SD大鼠随机分假手术组、对照组(未行运动),被动运动组(损伤1周后开始被动运动,共4 周)。采用改良的Allen’s法制备SCI模型。术后1 d和1、2、3、4 周通过大鼠Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)行为学评分检测各组大鼠的运动功能;术后5周,采用HE染色比较各组大鼠脊髓组织病理变化,观察大鼠后肢腓肠肌的横断面积、直径和形态变化。测量腓肠肌湿重、体重和肌湿重/体重,评价肌萎缩情况;采用Western blots检测腓肠肌中BDNF的表达变化。 结果 被动运动组运动功能明显高于对照组(P<0.05)。损伤5周后,对照组和被动运动组的脊髓组织失去正常形态,神经元数量减少,损伤区大量空洞形成,而被动运动组的变化较对照组轻。对照组腓肠肌湿重、肌湿重/体重、横断面积和直径下降,被动运动组改善上述肌萎缩情况(P<0.05)。与假手术组相比,对照组和被动运动组BDNF表达量增加(P<0.05),其中被动运动组高于对照组(P<0.05)。 结论 被动运动可能是通过增加SCI后BDNF表达促进损伤后运动功能的恢复,并能有效改善失神经性肌萎缩。  相似文献   

17.
BACKGROUND:So far steroid pulse therapy and surgical decompression are the main accepted therapies for spinal cord injury, but these methods make no effects on injured neurons. Nerve growth factors and endogenous neural stem cells play a role in the neuronal regeneration and remyelination, which provides a new idea for spinal cord injury treatment. OBJECTIVE:To explore the effect of the basic fibroblast growth factor on proliferation of endogenous neural stem cells after spinal cord injury and to analyze its relationship with the increased fluoro-gold labeled neurons. METHODS:Totally 48 Kunming mice were randomly divided into four groups including normal, spinal cord injury, treatment and sham operation groups. Acute spinal cord injury models were established in the spinal cord injury and treatment groups, and the normal group was subjected to operation that did not damage the spinal cord. At 2 hours after regaining consciousness, the treatment group was given daily injection of MTPBS containing 25 μg/kg basic fibroblast growth factors and 1% album. And at 7 days, laminectomy was carried out again at the L1 segment in the former three groups and a small piece of sterile gelfoam soaked with fluoro-gold was inserted into the incision. The sham operation group was given no processing. Afterwards, mouse motor behavior was assessed using Rotarod and Platform Hang tests; neurons in the corticospinal and rubrospinal tracts were labeled with fluoro-gold; the number of endogenous neural stem cells positive for nestin was detected by immunohistochemistry method. Besides, the correlation between the number of fluoro-gold labeled neurons and the number of endogenous neural stem cells was assessed. RESULTS AND CONCLUSION:The basic fibroblast growth factor could significantly improve the mouse motor behavior after spinal cord injury. And the number of endogenous neural stem cells was significantly increased after the basic fibroblast growth factor injection, which was related to the increased fluoro-gold labeled neurons. In conclusion, basic fibroblast growth factors play an important role in the proliferation of endogenous neural stem cells after spinal cord injury. Furthermore, endogenous neural stem cells improve locomotive behaviors by encouraging the neuronal proliferation.  相似文献   

18.
探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对脊髓损伤修复的可能作用及其对bFGF表达的影响,为BMSCs修复脊髓损伤提供实验依据。采用改良的Allen的WD法建立脊髓(T12节段)损伤模型,将66只SD大鼠随机分为正常组(A组)、损伤后未移植的对照组(B组)和BMSCs移植治疗组(C组)。通过BBB行为学评分记录两组动物后肢恢复功能,免疫组织化学方法检测bFGF的表达。结果显示:BMSCs移植组BBB评分高于对照组;bFGF在各组大鼠脊髓中均呈阳性表达,损伤后对照组与BMSCs移植组各个时点的表达量仍高于正常组(P<0.05),7d最高,后渐下降,但21d表达仍高于正常。其中BMSCs移植组与对照组各个时点的bFGF表达量均有显著差异(P<0.05)。结果提示:BMSCs移植治疗大鼠脊髓损伤模型有助于其功能的恢复。  相似文献   

19.
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在膀胱移行细胞癌 (BTCC)中的表达及其意义。方法 SP法 ,对 5 5例BTCC及 10例正常膀胱组织中bFGF进行检测。结果 在正常移行细胞呈阴性表达 ,在BTCC中呈不同程度的阳性表达 ,且过表达率在不同病理分级、临床分期组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,复发组的阳性表达率明显高于初发组 (P <0 .0 5 )。结论 bFGF在BTCC侵润转移过程中起重要作用 ,BFGF表达可成为判断肿瘤预后的一项指标  相似文献   

20.
目的探讨微囊化异体坐骨神经组织细胞移植对大鼠脊髓损伤后c-fos表达的影响。方法95只SD大鼠随机分为4组,A组为微囊化坐骨神经细胞移植组(30只);B组为坐骨神经细胞移植组(30只);C组为单纯损伤对照组(30只),仅用明胶海绵填塞SCI腔隙;D组为正常对照组(5只),仅打开椎管,暴露脊髓不作移植。用免疫组织化学的方法观察移植术后6h-14d脊髓中c-fos基因的表达情况。结果脊髓半横断损伤后对照组脊髓中6h、12h内表达c-fos阳性的神经元数增多,平均光密度值升高,至24h又明显增强。而A组脊髓后角内的c-fos表达明显低于同时间点的B组和C组(P〈0.05)。结论微囊化坐骨细胞移植可能降低c-fos的表达,并在一定程度上减轻脊髓的继发性损伤。  相似文献   

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