细胞因子对小鼠α2（Ⅰ）型前胶原基因启动子活性影响的研究

目的;探讨细胞因子对小鼠α２（Ⅰ）型前胶原基因上游启动子活性的影响。方法：以小鼠α２（Ⅰ）型前胶原基因启动子（－２ｋｂ～＋５４ｂｐ）为靶序列,将它与氯霉素乙酰基转移（ＣＡＴ）报告基因组成的重组体ｐＡＺ１００９用脂质体法转染至胶原产生细胞ＮＩＨ／３Ｔ３细胞,讨论ＩＦＮα、ＩＦＮγ、ＩＦＮα对小鼠α２（Ｉ）型前胶原基因上游启动子活性的影响。结果：ＴＮＦα分别与ＩＦＮγ、ＩＦＮα联合应用能加强抑制作用,     

抗纤复方及TGF-β对胶原基因启动子活性的影响

目的：研究ＴＧＦ－β及中药抗纤复方对小鼠前胶原α２（Ｉ）基因上游启动子活性的影响。方法：以含小鼠胶原α２（Ｉ）上游０．４、０．８、２．０ｋｂ启动片段为研究靶序列,以氯毒素乙酰枯转移酶（ＣＡＴ）作报告基因,应用基因技术研究小鼠胶原启动子活性。结果：ＴＧＦ－β可促进小鼠前胶原α２（Ｉ）基因妄动序列的启动活性,而中药抗纤复方可抑制其启动活性。结论：ＴＧＦ－β和中药抗纤复方都可作用于胶原α２（Ｉ）基因调控     

改良型TNF—α和IFN—γ诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO和细胞毒作 …

应用改良型ＴＮＦ－α（Ｉ－ＴＮＦ－α）和ＩＦＮ－γ刺激小鼠腹腔巨噬细胞（ＭХ）诱生一氧化氮（ＮＯ）,并观察对细胞毒作用的影响。结果：ＩＦＮ－γ可激活小鼠腹腔ＭХ产生小量ＮＯ,并伴随产生低度细胞毒活性,尤其是对经ＩＦＮ－γ处理的靶细胞（γ－Ｌ１２１０细胞）为显著。单用Ｉ－ＴＮＦ－α刺激的ＭΦ,诱生ＮＯ不显著或微量,对靶细胞也无明显细胞毒作用。但Ｉ－ＴＮＦ－α（１００ｎｇ／ｍｌ）和ＩＦＮ－γ（５０Ｕ／     

干扰素和肿瘤坏死因子和调节甲状腺细胞分泌甲状腺球蛋白

采用甲状腺细胞培养方法,研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对甲状腺细胞生成甲状腺球蛋白的调节作用。结果显示：在１０＾－３－１０＾３ｕ／ｍｌ的浓度范围内,ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α均可显著抑制甲状腺细胞基础状态下Ｔｇ的分泌;ＩＦＮ－α不影响ＴＳＨ的刺激效应,但ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α对ＴＳＨ诱导的Ｔｇ释放具有双重调节作用,氏深度时（１０＾－３－１     

干扰素和肿瘤坏死因子调节甲状腺细胞分泌甲状腺球蛋白

采用甲状腺细胞培养方法，研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＩＮＦ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对甲状腺细胞生成甲状腺球蛋白（Ｔｇ）的调节作用。结果显示：在１０＾－３～１０＾３ｕ／ｍｌ的浓度范围内，ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α均可显著抑制甲状腺细胞基础状态下Ｔｇ的分泌；ＩＦＮ－α不影响ＴＳＨ的刺激效应，但ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α对ＴＳＨ诱导的Ｔｇ释放具有双重调节作用，低浓度时（１０＾     

再生障碍性贫血患者正负造血细胞生长因子浓度变化及临床意义

目的：研究再生障碍性贫血（ＡＡ）患者外周及骨髓血ＩＬ－２、ｓＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＣＳＦ和ＩＦＮ－γ含量变化与骨髓造血功能的改变及临床转归的关系。方法：采用夹心酶联免疫吸附法检测ＡＡ外周及骨髓血中细胞因子含量的动态变化。结果：１．治疗前患者血浆及骨髓中ＩＬ－２、ｓＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－γ浓度及正常对照组均有不同程度的升高,以Ｉ     

TNF-α的合成分泌机制不同于一般的分泌型蛋白

目的 拟借助微粒体膜和体外转录翻译系统来研究分泌型ＴＮＦα（Ｓ－ＴＮＦ－α）的产生机制及Ｓ－ＴＮＦ－α和跨模型ＴＮＦα（ＴＭ－ＴＮＦ－α）的关系。方法 首先将分子量为１７×１０＾３Ｓ－ＴＮＦ（不含编码ＴＮＦ信号肽的基因）、２６×１０＾３ＴＭ－ＴＮＦ（含信号肽基因）和１７×１０＾３Ｓ－ＴＮＦ突变体（Ｓ－ＴＮＦｍ,用ＩＬ－２信号肽密子转换ＴＮＦ信号肽序列）的全长ｃＤＮＡ片段分别亚克隆于含Ｔ７启动子的ｐ     

细胞因子调节人肝癌细胞ICAM—1分子的表达及其对CD3AK杀伤功能…

应用基因重组人干扰素α（ＩＦＮ－α）、干扰素γ（ＩＦＮ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）体外处理人肝癌细胞系Ｈ－７４０２，ＡＢＣ－ＣＥＬＩＳＡ法检测各处理组和对照组细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达水平，用ＬＤＨ释放法观察ＣＤ３单克隆缺本活化的杀伤细胞对各处理条件下Ｈ－７４０２细胞的杀伤活性。     

新型人肿瘤坏死因子基因在血管内皮细胞中的靶向表达

目的 探索一条肿瘤特异性基因治疗的新途径。方法 将新型人ＴＮＦ－αＤ１１ａ基因和ＫＤＲ特异性启动子插入到３’ＬＴＲ缺失２９９ｂｐ的逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ中,构建成ｐＬＸＳＮ－Ｄ２９９－ＫＤＲｐ－ＴＮＦ－α－Ｄ１１ａ重组逆转录病毒载体,使目的基因转录受ＫＤＲ启动子驱动。通过脂质体介导将该重组载体转染ＰＡ３１７包装细胞,并用病毒上清感染血管内皮细胞和ＮＩＨ３Ｔ３细胞。分别经ＥＬＩＳＡ和ＭＴＴ法测定ＴＮＦ－αＤ１１ａ在血管内皮细胞中的表达及其生物学活性。结果 成功构建了携带ＴＮＦ－αＤ１１ａ和ＫＤＲ启动子的逆转录病毒载体,ＴＮＦ－αＤ１１ａ在血管内皮细胞中的表达水平及细胞增殖抑制作用均高于ＮＩＨ３Ｔ３细胞。结论 ＫＤＲ启动子可使外源ＴＮＦ－αＤ１１ａ在血管内皮细胞中特异性表达。     

单纯分泌型TNF—α真核表达质粒的构建及表达细胞株的建立

膜结合的ＴＮＦ－α前体与分泌型ＴＮＦ－α生物学活性的不同。方法在克隆出ｍＴ－ＮＦ－α基因的基础上，我们采用ＩＬ－２信号肽编码序列置换ｍ－ＴＮＦ－α前导肽编码序列，构建出只产生分泌型ＴＮＦ－α的真核表达持 粒ｐＢＫ－ｓＴＮＦｍ，要至ＮＩＨ３Ｔ３细胞中。     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。     

干扰素对人胃癌细胞IAP—2表达的调节

应用基因重组干扰素－α和－γ体外诱导三侏人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，ＭＧＣ８０３和ＭＫＮ４５，ＡＢＣ－ＣＥＬＩＳＡ法测定诱导组和对照细胞表面免疫抑制酸性蛋白Ⅱ型的表达量。在基础培养条件下，三株细胞表达ＩＡＰ－２均呈低水平。低浓度（＜１０００ｕ／ｍｌ）ＩＦＮ－α或－γ反使其ＩＡＰ－２表达量显著减少。这些结果提示：（１）ＩＦＮ－α和－γ可能对胃癌细胞ＩＡＰ－２表达呈双向调节作用；（２）癌细胞ＩＡＰ－２     

抗纤复方及TGF-β对胶原基因启动子活性的影响①

目的研究TGF-β及中药抗纤复方对小鼠前胶原α2(Ⅰ)基因上游启动子活性的影响。方法以含小鼠胶原α2(Ⅰ)基因上游0.4、0.8、2.0 kb启动片段为研究靶序列，以氯霉素乙酰基转移酶（CAT)作报告基因，应用基因转染技术研究小鼠胶原启动子活性。结果TGF-β可促进小鼠前胶原α2(Ⅰ)基因启动序列的启动活性，而中药抗纤复方可明显抑制其启动活性。结论TGF-β和中药抗纤复方都可作用于胶原α2(Ⅰ)基因调控片段，进而促进或抑制胶原合成。     

食管癌患者五项细胞免疫学指标的测定及其意义

对３５例食管癌（ＥＣ）患者和３０例正常人（ＮＣ）的外周血自然杀伤（ＮＫ）细胞活性、Ｔ细胞亚群、血浆可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）以及外周血诱生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的水平进行了检测。结果显示，ＥＣ患者ＮＫ细胞活性明显降低（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ８＋细胞增多（Ｐ＜０．０６），ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞比值降低（Ｐ＜０．０５）；ｓＩＬ－２Ｒ明显增高（Ｐ＜０．０１）；外周血诱生ＩＦＮ－γ降低（Ｐ＜０．０５）；血浆ＴＮＦ－α升高。表明，上述指标对判断、分析ＥＣ患者细胞免疫功能状况及病变程度有较大的意义。     

银屑病患者血清一氧化氮,肿瘤坏死因子,超氧化物歧化酶 …

目的：探讨银屑病患者自由基水平的变化及其与病情的关系。方法：对静止期和进行期银屑病患者血清自由基水平进行检测,并与病情严重程度做相关分析。结果：（１）与对照组比较,银屑病患者血清一氧化氮（ＮＯ２／ＮＯ３）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）及丙二醛＊ＭＤＡ）均显著高,而超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著降低;（２）进行期患者较静止期患者血清ＮＯ２／ＮＯ３、ＴＮＦ－α、ＭＤＡ均明显增高,ＳＯＤ活性则显著降低,     

TNFα、IL-6、IL-4、IL-2对IFNγ抗弓形虫感染作用的影响

目的 探讨ＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－４、ＩＬ－２对ＩＦＮγ衣导的小鼠腹腔巨噬细胞（ｍｏｕｓｅ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｍａｒｅｒｏｐｈａｇｅ,ＭＰＭ）抗弓形虫（ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ,ＴＧ）效应的机制。方法 应用＾Ｈ－Ｕ标记的ＴＧＨ在ＭＰＭ内的增殖实验及＾１２６Ｉ－ＵｄＲ标记的细胞毒实验。结果和结论（１）高浓度Ｔα只能诱导ＭＰＭ轻微的抗ＴＧ效应,而与亚刺激量ＩＮＦγ结合几科可以安全抑制Ｔ     

037 IFN—γ及TNF调节单核吞噬细胞超氧阴离子及在抗感染中的作用

本文综述了ＩＦＮ－γ／－α增强机体体抗感染的作用机理。ＩＦＮ－γ／ＴＮＦ－α抗感染并非其分子本身直接所为，而是通过激活单核巨噬细胞的ＮＡＤＰＨ氧化酶，进而将分子氧还原为超氧阴离子（Ｏ２），Ｏ２及其衍生物所具有的氧化作用，直接损伤了生物大分子（如膜性结构）的完整性，这在系统阐述ＩＦＮ－γ／ＴＮＦ－α在机体内发挥抗感染作用及抗肿瘤作用的机理方面，均反映了反应能力十分活泼的Ｏ２这种重要的化学介质的介导及     

丝羽乌骨鸡IFN基因克隆和序列分析

目的：为了开展禽类重组ＩＦＮ－α类生物治疗制剂的研究。方法：根据原始红鸡ＩＦＮ－Ａ类基因设计了引物对,采用ＰＣＲ法克隆了我国地方标准品种丝羽乌骨鸡的ＩＦＮ－α基因,并进行了序列分析,构建了鸡ＩＦＮ－α基因系统进化树。结果：丝羽乌骨鸡的ＩＦＮ－α基因（ＴＳＩＦＮＡ５）与红色原鸡类鸡的ＩＦＮ－α基因相比,ＯＲＦ长度都为５８２个核苷酸、编码１９３个氨基酸,相互间同源性在９７．４％￣９９．０％。结论：基因     

球孢菌素对超抗原SEB致小鼠肝损伤的保护作用

用超抗原葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）、Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ）混合腹腔注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠及预先注射环孢菌素（ＣＳＡ）的小鼠，动态观察小鼠肝细胞变化和血清ＴＮＦ，ＩＦＮ－γ水平及及小鼠死亡率。结果发现ＳＥＢ＋Ｄ－ＧａｌＮ注射后２ｈ、６ｈ时出现肝细胞凋亡，１２ｈ后出现肝坏死，小鼠２４小时死亡率达５０％。小鼠血清ＴＮＦ２ｈ升到最高，ＩＦＮ－γ在６－１２ｈ较高。而预注ＣＳＡ的小鼠上述指标正常。推测Ｓ