肝纤维化大鼠血清有机磷酸酯酶的变化

目的评价血清有机磷酸酯酶（ＰＥ）与肝纤维化的联系。方法用４０％ＣＣｌ４１ｍｌ／ｋｇ体重皮下注射，２次／周，共１４周诱发ＳＤ大鼠肝纤维化，分别于１，２，３，５，７，１０和１４周处死动物，测定血清和肝组织中ＰＥ、磷酸二酯酶Ⅰ（ＰＤＥⅠ）、单胺氧化酶（ＭＡＯ）、结合甘胆酸（ＣＧ）、β２＿微球蛋白（β２＿ＭＧ）、透明质酸（ＨＡ）和Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）等。结果血清ＰＥ、ＰＤＥⅠ和ＣＧ于染毒后逐渐升高并与肝组织纤维化程度相关，ＡＫＰ和ＧＰＴ也升高，但呈不规则变化。ＭＡＯ，β２－ＭＧ，ＨＡ和ＰＣⅢ无变化。肝组织中羟脯氨酸含量增加，其它指标无变化。结论血清ＰＥ活性与肝纤维化程度密切相关，可用作诊断肝硬变     

川芎嗪对急性出血坏死性胰腺炎大鼠治疗作用及其机制的研究

观察川芎嗪对牛磺胆酸钠诱发的大鼠急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）的治疗作用及其对血浆血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）、前列环素（ＰＧＩ２）、血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）、血清弹力蛋白酶抑制力（ＥＩＣ）的影响。结果表明，ＡＨＮＰ大鼠模型制备后，血浆ＴＸＡ２／ＰＧＩ２比值增高、血清ＬＰＯ值增加、ＥＩＣ降低；腹腔注射川芎嗪后，血清脂肪酶下降，腹水积聚减少，ＴＸＡ２／ＰＧＩ２比值稳定于正常水平，ＬＰＯ值降低，ＥＩＣ增高，胰腺出血坏死程度及腺泡细胞超微结构破坏减轻，大鼠存活率提高。提示川芎嗪对ＡＨＮＰ大鼠有一定治疗作用，此与其稳定ＴＸＡ２／ＰＧＩ２平衡、清除氧自由基及抑制胰弹性蛋白酶有关。     

急性肝坏死大鼠NO水平的动态变化和作用

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）在急性肝坏死大鼠模型中的浓度动态变化及其可能的作用机制．方法通过用化学药物促进或抑制急性肝坏死大鼠ＮＯ的合成，检测其外周血ＮＯ及ＡＬＴ，ＡＳＴ的浓度变化，并观察肝脏的病理变化．结果①急性肝坏死大鼠血清ＮＯ浓度６，１２，２４，４８ｈ显著高于正常对照（μｍｏｌ／Ｌ，９０±１３，１３７±３１，６６±１６，４４±１０ｖｓ１６±６，分别为Ｐ＜００１，Ｐ＜００１，Ｐ＜００１，Ｐ＜００５）；ＡＬＴ，ＡＳＴ也显著升高（ＡＬＴ，Ｕ／Ｌ，６９８±１０８，２０５６±６６８，８５８±２０８，１９６±３４ｖｓ３５±１３，Ｐ＜００１；ＡＳＴ，Ｕ／Ｌ，８０１±９４，３５７５±７１４，１２７２±２４２，１７５±１２７ｖｓ６５±２２，Ｐ＜００１）；②用ＮＡＭＥ抑制ＮＯ合成，降低了急性肝坏死大鼠外周血ＮＯ浓度，却显著升高了ＡＬＴ，ＡＳＴ浓度．③急性肝坏死大鼠应用ＮＯ合成底物后，与阳性对照组相比，未见ＮＯ显著升高，ＡＬＴ，ＡＳＴ也无显著变化．结论ＮＯ对ＤＧａｌｎ／ＬＰＳ诱导的急性肝坏死大鼠肝组织具有保护作用．     

血清有机膦酸酯酶活性在慢性肝病中的变化及其与肝纤维化的相关性研究

为探讨血清有机膦酸醋酶（ＰＥ）活性与肝纤维化的关系，用荧光分光法测定了７７例慢性肝病患者及实验诱发的肝纤维化大鼠血清ＰＥ活性变化。发现慢性肝病时血清ＰＥ活性明显升高，其升高程度依次为肝硬化＞原发性肝癌＞慢性活动性肝炎＞慢性迁延性肝炎。与血清Ⅲ型前胶原氨基末端肽（ＰⅢＰ）水平变化呈正比。肝纤维化大鼠血清ＰＥ活性也随肝纤维化程度加重而逐渐升高，与肝纤维化积分及血清Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）、透明质酸（ＨＡ）变化呈显著正相关，相关系数分别为０．９６４，０．９９８与０．９６７，均Ｐ＜０．０１。说明血清ＰＥ活性与肝纤维化程度间有明显关系，可作为肝纤维化的血清学诊断指标之一。     

高脂蛋白血症与冠心病患者血清载脂蛋白CⅡ含量的变化

目的观察血清载脂蛋白ＣⅡ（ａｐｏＣⅡ）在高脂蛋白血症及冠心病中的变化特点。方法应用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）测定新生儿至老年人群及１１８例高脂蛋白血症患者、４６例冠心病（ＣＨＤ）、５４例急性心肌梗死（ＡＭＩ）与２５例陈旧性心肌梗死（ＯＭＩ）患者血清ａｐｏＣⅡ含量，并分析与甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ）的关系。结果脐带血ａｐｏＣⅡ含量最低，随着年龄增长，ａｐｏＣⅡ含量逐渐增加。高脂蛋白血症组ａｐｏＣⅡ显著高于老年健康组（Ｐ＜０．００１），ａｐｏＣⅡ与ＴＧ含量呈正相关（ｒ＝０．５２，Ｐ＜０．００１），但有１０例患者ＴＧ很高，而ａｐｏＣⅡ较低。ＣＨＤ、ＡＭＩ和ＯＭＩ组的ａｐｏＣⅡ水平随着ＨＤＬ－Ｃ下降而显著低于老年健康组。结论血清ａｐｏＣⅡ的测定有助于阐明高脂蛋白血症的发病机理及ＣＨＤ、ＡＭＩ和ＯＭＩ患者的血脂紊乱、ａｐｏＣⅡ水平下降可能是某些病例ＴＧ升高的原因之一。     

蚤莲合成剂对DEN所致大鼠肝癌前病变的影响

目的：观察蚤莲合剂对诱发大鼠原发性肝癌的抗促癌作用及其机理。方法：以含１００ｐｐｍ的二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）饮水造模，采用蚤莲合剂灌胃给药，观察其对大鼠肝细胞病理学、免疫组化、血清和肝组织生物化学指标的影响。结果：蚤莲合剂对大鼠肝组织癌前病变有抑制作用。大鼠肝癌形成率相对减少，血清ＡＬＴ、ＡＬｂ、ＡＬＰ、ＴＮＦ水平及肝匀浆γ－ＧＴ活性明显低于模型组（Ｐ〈０．０１），其免疫组化ＡＦＰ阳性细胞数也较模型     

肿瘤坏死因子及磷脂酶A2与实验性急性肝衰竭

目的：为探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）在急性肝衰竭（ＡＨＦ）时的作用及关系。方法：用Ｄ－氨基半乳糖及内毒素复制急性肝衰竭动物模型，检测其血清中ＴＮＦ含量及肝组织匀浆中ＰＬＡ、活性。结果：ＡＨＦ组鼠血清中ＴＮＦ含量及肝组织匀浆中ＰＬＡ＿２活性明显高于正常对照组（Ｐ值＜０．０５，Ｐ值＜０．０１），ＰＬＡ＿２活性与ＴＮＦ含量呈正相关关系。结论：ＴＮＦ可能激活ＰＬＡ＿２，后者与ＴＮＦ所致的肝损伤有关。     

CCl4急性肝损伤肝SOD,MDA的动态变化及扶正化瘀方对其影响

目的：观察急性肝损伤时肝ＳＯＤ、ＭＤＡ的动态变化及扶正化瘀方（３１９方）抗肝损伤作用。方法：四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤，检测各组损伤后２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ的肝组织ＳＯＤ活性、ＭＤＡ含量及血肖ＡＬＴ、ＡＳＴ活性。结果：（１）损伤后ＳＯＤ活性下降，以４８ｈ为最低点，与ＡＬＴ呈负相关；（２）ＭＤＡ含量呈先低后高的变化；（３）扶正化瘀方可提高ＳＯＤ活性，降低ＭＤＡ含量。结论：生肝损伤时肝ＳＯＤ、ＭＤＡ水     

二胺氧化酶在急性坏死性胰腺炎肠道损伤中的作用

目的探讨急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）时血浆二胺氧化酶（ＤＡＯ）水平变化及其与肠道损伤的关系．方法通过向主胰管内注入牛磺胆酸钠和胰蛋白酶复制犬ＡＮＰ模型（ｎ＝８）;检测血清淀粉酶水平;测定血浆、肠组织ＤＡＯ活性;测量回肠粘膜绒毛形态学改变．结果ＡＮＰ发病后ｄ１（ｍｏｌ／ｓ,００２５±０００６ｖｓ００１１±０００２）,ｄ２（ｍｏｌ／ｓ,００１９±０００５ｖｓ００１２±０００３）血浆ＤＡＯ活性增加,ｄ４（ｍｏｌ／ｓ,０００６±０００１ｖｓ００１４±０００２）以后明显下降,肠组织ＤＡＯ活性亦显著下降;回肠粘膜绒毛萎缩、脱落,高度、宽度降低,面积减少;血清淀粉酶水平升高３～１０倍;肝、胰、脾、肺、肾及肠系膜淋巴结出现细菌移位．结论ＡＮＰ时血中ＤＡＯ活性变化可反映肠粘膜上皮损伤,细菌移位则是肠屏障损伤的结果     

扶正化瘀方对DMN诱导肝纤维化大鼠肝脏MMP-2活性的影响

探讨扶正化瘀方对二甲基亚硝胺 (ＤＭＮ)诱发的肝纤维化大鼠肝脏Ⅳ型胶原含量、Ⅳ型胶原酶 (ＭＭＰ 2 )活性及基质金属蛋白酶抑制物 2 (ＴＩＭＰ 2 )含量表达的影响。采用ＤＭＮ诱导的大鼠肝纤维化模型 ,设正常组、模型组和扶正化瘀方治疗组 ,分别用生化方法测定其肝组织Ｈｙｐ含量、血清ＡＬＴ活性和Ａｌｂ含量 ;Ｅｎｖｉｓｉｏｎ两步法 (免疫组化 )测定肝组织Ⅳ型胶原含量和ＴＩＭＰ 2含量 ;酶图法测定肝组织ＭＭＰ 2活性。结果表明 :①扶正化瘀方能显著降低模型大鼠肝组织Ｈｙｐ及血清ＡＬＴ ,显著升高血清Ａｌｂ ;②扶正化瘀方能够明显降低ＤＭＮ诱发的肝纤维化鼠肝脏的Ⅳ型胶原和ＴＩＭＰ 2 ,显著升高其ＭＭＰ 2活性。扶正化瘀方能够明显改善ＤＭＮ诱发的肝纤维化鼠的病理改变和生化指标 ;能够明显升高ＤＭＮ诱发的肝纤维化大鼠肝脏ＭＭＰ 2活性 ,并显著降低其ＴＩＭＰ 2的表达 ,促进过多的Ⅳ型胶原的分解 ,加速肝窦毛细血管化的恢复。扶正化瘀方对DMN诱导肝纤维化大鼠肝脏MMP-2活性的影响@徐光福!200032$上海中医药大学肝病研究所 @陆雄!200032$上海中医药大学肝病研究所 @刘成海!20003...     

磷酸酶与张力蛋白同源物基因过度表达抑制乳鼠心脏成纤维细胞增殖

目的将携带有张力蛋白同源物基因(PTEN)的重组腺病毒载体转染乳鼠心脏成纤维细胞,观察心脏成纤维细胞过度表达野生型PTEN对其增殖的影响。方法分离培养心脏成纤维细胞,以携带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-PTEN转染上述细胞,荧光倒置显微镜下观察GFP表达情况,确定最佳感染倍数(MOI)。原代心脏成纤维细胞接种至96孔板,转染Ad-PTEN[Ad-PTEN转染组(MOI根据生长曲线确定)],并设正常对照组(加入等体积培养基),以MTT的方法检测其吸光度(A),以反映细胞增殖情况,将转染效率达到90%以上成纤维细胞及正常对数生长期成纤维细胞消化,制成单细胞悬液,流式细胞仪分别检测细胞周期,以吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)法分别检测Ad-PTEN转染组和正常对照组细胞凋亡情况;结果MTT测定的结果:48 h后Ad-PTEN转染组的A显著低于该时间点正常对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果发现Ad-PTEN转染的成纤维细胞出现G1期阻滞;AO/EB法检测发现Ad-PTEN转染的成纤维细胞其细胞凋亡率与正常对照组细胞无显著差异;结论PTEN基因过度表达将引起乳鼠心脏成纤维细胞增殖受抑制,该现象与细胞周期G1期阻滞有关。     

Tailored catalysts for plant cell-wall degradation: redesigning the exo/endo preference of Cellvibrio japonicus arabinanase 43A

Enzymes acting on polymeric substrates are frequently classified as exo or endo, reflecting their preference for, or ignorance of, polymer chain ends. Most biotechnological applications, especially in the field of polysaccharide degradation, require either endo- or exo-acting hydrolases, or they harness the essential synergy between these two modes of action. Here, we have used genomic data in tandem with structure to modify, radically, the chain-end specificity of the Cellvibrio japonicus exo-arabinanase CjArb43A. The structure of Bacillus subtilis endo-arabinanase 43A (BsArb43A) in harness with chain-end recognition kinetics of CjArb43A directed a rational design approach that led to the conversion of the Cellvibrio enzyme from an exo to an endo mode of action. One of the exo-acting mutants, D35L/Q316A, displays similar activity to WT CjArb43A and the removal of the steric block mediated by the side chains of Gln-316 and Asp-53 at the -3 subsite confers its capacity to attack internal glycoside bonds. This study provides a template for the production of tailored industrial catalysts. The introduction of subtle changes informed by comparative 3D structural and genomic data can lead to fundamental changes in the mode of action of these enzymes.     

胃病患者血浆内皮素水平的变化

目的研究消化性溃疡、慢性胃炎（急性活动期）、胃癌患者血浆内皮素－１水平的变化意义．方法采用放射免疫分析法测定了胃溃疡１４例，十二指肠溃疡９例治疗前后及胃炎１５例（急性活动期），胃癌１５例空腹血浆内皮素－１水平，并与１６例健康人作对照．结果胃溃疡（６２９６±２００１ｎｇ／Ｌ），十二指肠溃疡（４５５８±１６５７ｎｇ／Ｌ），慢性胃炎（４５７６±１８７４ｎｇ／Ｌ）及胃癌（４９８２±１３６８ｎｇ／Ｌ）患者血浆内皮素－１水平较对照组（２９７０±９２７ｎｇ／Ｌ）显著升高（Ｐ＜００１）．胃溃疡组（活动期）血浆内皮素＿１水平又明显高于十二指肠溃疡（活动期）胃炎组（Ｐ＜００５）．治疗后胃溃疡组血浆内皮素＿１水平显著下降（Ｐ＜００５）．结论血浆内皮素＿１可能参于胃病的病理生理过程     

肝气郁结证患者血浆抗利尿激素的变化

目的研究肝气郁结证的病理生理基础，检验血浆抗利尿激素含量变化与肝气郁结证的相关性．方法用ＲＩＡ法测定辨证属于肝气郁结的神经衰弱、乳痛症、慢性胃炎和慢性胆囊炎患者血浆抗利尿激素含量．第一批测定３０例，第二批测定２８例，设健康对照组进行比较．结果两批患者血浆抗利尿激素含量分别为５２８ｎｇ／Ｌ±１９１ｎｇ／Ｌ和４８５ｎｇ／Ｌ±１６２ｎｇ／Ｌ显著高于健康人对照组的２９９ｎｇ／Ｌ±１０４ｎｇ／Ｌ和２８３ｎｇ／Ｌ±９８ｎｇ／Ｌ（ｔ＝５７９和４９４，Ｐ＜００１）．异病同证比较无显著性差异（Ｐ＞００５）．结论血浆抗利尿激素水平升高是肝气郁结证相关性较强的指标之一．肝气郁结证与中枢神经对精神情绪调节功能异常密切相关．     

慢性肝病患者血清层粘蛋白及透明质酸的变化

目的研究血清层粘蛋白（ＬＮ）和透明质酸（ＨＡ）对慢性肝病的诊断意义。方法检测急慢性肝炎及肝硬变患者血清ＬＮ和ＨＡ浓度，与肝功能及食管静脉曲张程度和肝脏病理进行比较。结果慢性肝炎血清ＬＮ明显高于健康者和急性肝炎，肝硬变患者血清ＬＮ升高幅度较大，是慢性肝炎（ＣＨ）患者的１．８倍（Ｐ＜０．０１）。ＨＡ以４００μｇ／Ｌ为界，ＬＮ以１５０μｇ／Ｌ为界，肝硬变同时升高者占８５．２％。ＣＨ则为９．７％，两组比较差异非常明显（Ｐ＜０．０１）。慢性丙型肝炎患者早期血清ＬＮ就显著升高，电镜观察发现丙型肝炎患者贮脂细胞及成纤维细胞增多，此种病理现象较ＣＨ患者明显。结论联合检测血清ＬＮ和ＨＡ对区分肝纤维化与肝硬变有意义     

Obligatory role in GTP hydrolysis for the amide carbonyl oxygen of the Mg2+-coordinating Thr of regulatory GTPases

When G-protein α subunits binds GTP and Mg²⁺, they transition from their inactive to their active conformation. This transition is accompanied by completion of the coordination shell of Mg²⁺ with electrons from six oxygens: two water molecules, the ß and γ phosphoryls of GTP, a helix-α1 Ser, and a switch I domain (SWI) Thr, and the repositioning of SWI and SWII domains. SWII binds and regulates effector enzymes and facilitates GTP hydrolysis by repositioning the γ-carbonyl of a Gln. Mutating the Ser generates regulatory GTPases that cannot lock Mg²⁺ into its place and are locked in their inactive state with dominant negative properties. Curiously, mutating the Thr appears to reduce GTP hydrolysis. The reason for this difference is not known because it is also not known why removal of the Thr should affect the overall GTPase cycle differently than removal of the Ser. Working with recombinant Gsα, we report that mutating its SWI-Thr to either Ala, Glu, Gln, or Asp results not only in diminished GTPase activity but also in spontaneous activation of the SWII domain. Upon close examination of existing α subunit crystals, we noted the oxygen of the backbone carbonyl of SWI-Thr and of the γ-carbonyl of SWII Gln to be roughly equidistant from the oxygen of the hydrolytic H₂O. Our observations indicate that the Gln and Thr carbonyls play equihierarchical roles in the GTPase process and provide the mechanism that explains why mutating the Thr mimics mutating the Gln and not that of the Ser.     

血清胃泌素诊断结直肠肿瘤的价值

目的研究结直肠肿瘤患者血清胃泌素水平与病情的相关性．方法经纤维结肠镜下活组织病理检查和／或术后病理确诊的结直肠腺瘤２８例和结直肠癌患者４６例，在排除有可能影响血清胃泌素水平的其它情况后，用ＲＩＡ法检测空腹血清胃泌素及ＣＥＡ含量．结果以胃泌素≥１００ｎｇ／Ｌ作为结直肠腺瘤的诊断指标，其敏感性、特异性和诊断效率分别为７５％，８１％和７８９％，以胃泌素≥１３０ｎｇ／Ｌ作为结直肠癌的诊断指标，其敏感性、特异性和诊断效率分别为７００％，９１９％和７９３％；而ＣＥＡ≥１５μｇ／Ｌ，则分别为３２０％，９４４％和４８５％．以胃泌素≥１３０ｎｇ／Ｌ作为癌肿与腺瘤的鉴别诊断指标，其敏感性、特异性和诊断效率都是７００％；而ＣＥＡ≥１５μｇ／Ｌ，则分别为３００％，９００％和４８６％．在早期结直肠癌患者，胃泌素≥１００ｎｇ／Ｌ者占７７８％，明显高于便血率（４５５％）．结论血清胃泌素对结直肠肿瘤的诊断和鉴别诊断优于ＣＥＡ，可作为结直肠癌的普查手段．     

上消化道出血患者血中胃泌素胰高血糖素生长抑素的变化

目的上消化道出血患者血中胃泌素，胰高血糖素及生长抑素的变化规律．方法上消化道出血患者８８例，消化性溃疡（ＰＵ）无出血患者１５例，非ＰＵ非上消化道出血患者１３例，健康人３０例，用放免方法同期进行血中胃泌素，胰高糖素，生长抑素多项激素水平测定．结果各种上消化道出血患者及ＰＵ无出血患者血中生长抑素水平均明显高于正常对照组和非ＰＵ无出血组（Ｐ＜００１）。ＰＵ出血患者血中胃泌素和胰高血糖素明显高于健康对照组和ＰＵ无出血组（Ｐ＜００５；Ｐ＜００１）．结论血中胃泌素，胰高血糖素及生长抑素水平与上消化道出血有关，联合检测多种胃肠激素为防治上消化道出血可能提供重要参考．