重组人血小板型磷脂酶A2杀菌作用的研究

目的探讨利用基因工程制备重组人血小板型磷脂酶A2 (phospholipase A2,PLA2)对不同细菌在体外的杀菌作用,为临床用于治疗细菌感染提供依据. 方法将不同浓度的重组PLA2或抗生素与不同的菌株在37℃共同孵育2 h,然后铺琼脂板,次日记录每一琼脂板上的菌落生成数(CFU),计算出PLA2作用后细菌生存率和杀灭95%细菌(LD95)的PLA2浓度. 结果重组人血小板型PLA2对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌等革兰阳性(G )菌有较强杀菌作用,PLA2的LD95的范围在6～400ng/ml之间,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)也有较强的作用,LD95为400ng/ml. 结论重组人血小板型PLA2对革兰阳菌有较强的杀菌作用,具有发展成为新型抗菌药物的巨大潜力.     

重组人血小板型磷脂酶A2在杀菌过程中与抗菌药的相互作用

目的 研究重组人血小板型磷脂酶A2(PLA2)在杀菌过程中与常用抗菌药间相互作用关系，为临床用药提供依据，并探讨其杀菌机制。方法 将重组人血小板型PLA2和抗菌药分别单独以及联合作用于金黄色葡萄球菌，通过测定细菌菌落数来评价杀菌效果。结果 青霉素、头孢拉定、磷霉素、万古霉素增强血小板型PLA2杀菌活性；红霉素减弱血小板型PLA2杀菌活性；氧氟沙星对血小板型PLA2杀菌作用无影响。结论 血小板型PLA2与破坏细胞壁的杀菌类药物有协同作用，与抑菌类药物合用受到拮抗；细菌细胞壁的结构及其生长状态是影响血小板型PLA2杀菌活性发挥的重要因素。     

重组人血小板型磷脂酶A_2在杀菌过程中与抗菌药的相互作用

目的　研究重组人血小板型磷脂酶 A2 (PL A2 )在杀菌过程中与常用抗菌药间相互作用关系 ,为临床用药提供依据 ,并探讨其杀菌机制。方法　将重组人血小板型 PL A2 和抗菌药分别单独以及联合作用于金黄色葡萄球菌 ,通过测定细菌菌落数来评价杀菌效果。结果　青霉素、头孢拉定、磷霉素、万古霉素增强血小板型 PL A2 杀菌活性 ;红霉素减弱血小板型 PL A2 杀菌活性 ;氧氟沙星对血小板型 PL A2 杀菌作用无影响。结论　血小板型 PL A2与破坏细胞壁的杀菌类药物有协同作用 ,与抑菌类药物合用受到拮抗 ;细菌细胞壁的结构及其生长状态是影响血小板型 PL A2 杀菌活性发挥的重要因素     

血小板型磷脂酶A2 mRNA在大鼠体内的分布

目的全面探讨血小板型磷脂酶A2(PLA2) mRNA在正常大鼠体内的分布情况,增加对血小板型PLA2的了解. 方法从大鼠不同器官和组织的匀浆中提取总RNA,合成第1链cDNA,利用PCR扩增大鼠血小板型PLA2 DNA. 结果在我们研究的30种器官和组织中,除唾液腺和胰腺之外,都能检测到血小板型PLA2 mRNA,其中,在肺、腹主动脉、腹静脉、血液、大肠、胸腺、骨髓、膀胱和子宫中尤其丰富. 结论血小板型PLA2 mRNA广泛分布在大鼠的各个器官和组织中,在防御细菌感染的过程中,除参与先天性免疫之外,在适应性免疫中也可能扮演重要角色.     

大鼠细菌感染模型血中磷脂酶A2变化的研究

目的 探讨血小板型磷脂酶A2在宿主防御细菌感染中的作用，使我们对PLA2分子有新的认识。方法 大鼠静脉注射活金黄色葡萄球菌造成细菌感染模型，分别抽取不同时间段的静脉血，进行血浆杀菌实验、PLA2酶活性及全血PLA2mRNA含量测定。结果 经过活菌刺激后，3h大鼠血浆中PLA2的活性升高了27倍，此时血浆对革兰阳性细菌具有较强杀灭作用；全血中PLA2mRNA含量也有所增加，1h达最高值。结论 血小板型PLA2在宿主防御G^ 细菌感染中起着非常重要的作用。     

羊水栓塞患者凝血功能 血小板活化因子及血清分泌型磷脂酶A2水平变化情况分析

目的 分析羊水栓塞患者凝血功能、血小板活化因子(PAF)及血清分泌型磷脂酶A2(sPLA2)水平变化情况,旨在早期做出预警反应、评定羊水栓塞病情严重程度及预后状况,为早期防控、降低羊水栓塞发生率、减轻栓塞相关事件对产妇机体损伤提供参考。方法 采用整体随机抽样法回顾性选取2018年3月—2020年5月天津市宁河区医院收治的羊水栓塞患者64例为研究对象。统计并比较羊水栓塞患者母婴结局,且收集和观察患者栓塞前(T0)、栓塞60 min(T1)及栓塞120 min(T2)时凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)及纤维蛋白原(FIB)]、PAF及sPLA2水平变化情况。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),比较凝血功能、PAF、sPLA2及三者联合检测的曲线下面积(AUC),计算灵敏度和特异度。结果 产妇存活率(79.69%,51/64)高于死亡率(20.31%,13/64),差异有统计学意义(χ²=6.954,P<0.05)。新生儿活产率为79.69%(51/64)、窒息率为35.29%(18/51)、存活率为90.20%(46/51)。随着羊水栓塞进展,患者PT值、APTT值、TT值、PAF水平及sPLA2水平随之升高,FIB值随之下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。死亡和存活的羊水栓塞患者PT值、APTT值、TT值、FIB值、PAF水平及sPLA2水平在时间、组间及交互作用方面差异均有统计学意义(均P<0.05);且随着栓塞时间进展,死亡和存活的羊水栓塞患者PT值、APTT值、TT值、PAF水平及sPLA2水平随之升高,FIB值随之下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。T0、T1及T2时刻,死亡的羊水栓塞患者PT值、APTT值、TT值、PAF水平及sPLA2水平均高于存活的羊水栓塞患者,FIB值均低于存活的羊水栓塞患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。凝血功能值、PAF、sPLA2水平及三者联合检测的AUC分别为0.762、0.735、0.583及0.819,灵敏度分别为74.42%、66.28%、52.33%及81.40%,特异度分别为74.44%、66.67%、57.78%及94.44%。结论 加强产妇凝血功能检测,同时联合PAF、sPLA2水平同步检测,有助于提高羊水栓塞早期诊断率、评定患者病情严重程度及预后,继而为临床救治提供更加全面客观的数据支撑,降低羊水栓塞致死率,改善预后。     

胞浆型磷脂酶A2家族基因多态性与精神分裂症的关联性研究

目的 探讨中国北方汉族人群胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)家族基因多态性与精神分裂症的遗传关联性.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和连接酶检测反应(LDR)方法,在201个精神分裂症患者核心家系中检测cPLA2家族基因上的10个单核苷酸多态性(SNPs),对结果进行单倍型相对风险分析(HRR)、传递不平衡分析(TDT)、单倍型分析和多位点联合分析.结果 各位点在精神分裂症病例组和对照组中基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡.HRR和TDT分析表明,检测的10个SNPs位点与精神分裂症无关联性(P＞0.05).单倍型分析结果显示,由同一染色体上各位点组成的单倍型与精神分裂症均无关联性(P＞0.05).多位点联合作用分析显示,rs2162886与rsl668589,rs891014与rsl668589,rs2307279与rs7542180位点的联合作用与精神分裂症相关联(χ2=6.913,P=0.032;χ2=8.393,P=0.015;χ2=8.447,P=0.038).结论 cPLA2家族基因中存在多个与精神分裂症关联的易感位点.     

胞浆型磷脂酶A2家族基因多态性与精神分裂症的关联性研究

目的 探讨中国北方汉族人群胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)家族基因多态性与精神分裂症的遗传关联性.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和连接酶检测反应(LDR)方法,在201个精神分裂症患者核心家系中检测cPLA2家族基因上的10个单核苷酸多态性(SNPs),对结果进行单倍型相对风险分析(HRR)、传递不平衡分析(TDT)、单倍型分析和多位点联合分析.结果 各位点在精神分裂症病例组和对照组中基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡.HRR和TDT分析表明,检测的10个SNPs位点与精神分裂症无关联性(P＞0.05).单倍型分析结果显示,由同一染色体上各位点组成的单倍型与精神分裂症均无关联性(P＞0.05).多位点联合作用分析显示,rs2162886与rsl668589,rs891014与rsl668589,rs2307279与rs7542180位点的联合作用与精神分裂症相关联(χ²=6.913,P=0.032;χ²=8.393,P=0.015;χ²=8.447,P=0.038).结论 cPLA2家族基因中存在多个与精神分裂症关联的易感位点.     

重组人血小板生成素的药理作用

重组人血小板生成素是高特异性的血小板刺激因子，直接作用于骨髓造血干细胞，调控血小板生成的各个阶段，特异性升。高血小板。适用于实体瘤化疗后所致的血小板减少症，适用对象为血小板低于50&#215;10^9&#183;L^-1且有必要升高血小板的患者。现对其药理作用、药动学等作具体论述。     

磷脂酶A2与环氧合酶-2在早产的临床意义

目的:探讨磷脂酶A2(PLA2)和环氧合酶-2(COX-2)在早产发病机制中的作用。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例早产临产孕妇(早产临产组)、20例足月临产孕妇(足月临产组)、20例未足月未临产孕妇(未足月对照组)及20例足月未临产孕妇(足月对照组)血清中PLA2和COX-2的含量。结果:①PLA2和COX-2测定值在足月对照组明显高于未足月对照组,二组差异有统计学意义(P0.05);②PLA2和COX-2测定值早产临产组明显高于未足月对照组,二组差异有统计学意义(P0.05);③PLA2和COX-2在足月对照组与足月临产组测定值差异无统计学意义(P0.05);④PLA2和COX-2在早产临产组与足月临产组测定值差异无统计学意义(P0.05)。结论:PLA2和COX-2可能参与早产分娩的发动,在早产发病机制中起一定作用。     

重组防御素5对6株肠道常驻细菌的杀菌效果观察

目的观察重组防御素5(rHD-5)对6株肠道常驻细菌的杀菌效果. 方法通过冷冻干燥获得含有rHD-5的细胞培养上清(Ⅰ液)、5倍浓缩液(Ⅱ液)和10倍浓缩液(Ⅲ液),以不含rHD-5的培养上清(O液)为对照,观察了它们对大肠埃希菌(ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853),表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌野生株的抑菌环直径大小. 结果随着rHD-5浓度的逐渐增加,O、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ液对大肠埃希菌的抑菌环直径分别为0 mm、(15.78±0.67) mm、(31.11±0.89)mm、(36.94±0.77) mm;对金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)的抑菌环直径分别为0 mm、 (18.67±0.35) mm、(27.11±0.55) mm、(30.72±0.44) mm;仅Ⅲ液对铜绿假单胞菌(ATCC 27853)产生了抑菌环(16.67±0.79 mm);O、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ液对表皮葡萄球菌野生株的抑菌环直径分别为0 mm、0 mm、(15.67±0.50) mm、(30.56±0.58) mm;而仅有Ⅲ液对鲍氏不动杆菌野生株产生了抑菌环(14.44±0.77) mm,对铜绿假单胞菌野生株均没有抑菌环产生. 结论 rHD-5对6种肠道常驻细菌具有不同程度的杀菌活性,提示其在防治肠源性感染中具有潜在的临床应用价值.     

细菌的耐药性

因为对感染性疾病的过度恐惧 ,人们针对微生物采取了“过度的”杀灭措施 ,而微生物也通过各种机制来抵抗这种作用 ,导致了此涨彼消的恶性循环。因而有必要对细菌耐药性进行深入研究 ,以使人类能处于主动地位。1　概　述1 .1　 有关概念　不只细菌会产生耐药性 ,真菌、支原体等微生物也存在耐药性问题。这里主要讲细菌。抗生素是抗感染药物最重要的一类 ,其含义较狭窄。这里使用“抗生素”代表“抗菌药物”、“抗微生物药物”、“抗感染药物”等概念。消毒剂也属于药物 ,但一般只用于环境和物品的药剂 ;而抗生素用于人体 ,通过血液吸收和运输…     

临床细菌耐药分析及耐药酶的检测

目的监测本地区2000-2006年临床细菌的构成分布及耐药性,并检测其是否产耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRS)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。方法MicroSCANAUTOSCAN4半自动鉴定药敏仪对送检标本进行菌种鉴定和药敏试验,琼脂筛选法检测MRS、MRCNS,K-B纸片扩散法检测ESBLs,比较产酶株与非产酶株对抗菌药物的活性。结果8448份临床标本检出各种细菌2436株,检出率为28.84%,种类以革兰阴性杆菌为主,占45.26%,最常检出的细菌依次为大肠埃希菌、CNS(-)葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肠球菌属、金黄色葡萄球菌,MRS、MRCNS、ESBLs检出率高,耐药性强,耐药谱广。结论临床分离菌以条件致病菌为主,耐药株分离高,建议临床医生根据药敏试验合理用药,以减少耐药菌株产生。     

临床感染患者分离的肠球菌属耐药性及耐药基因的研究

目的研究分析临床感染患者分离的肠球菌属细菌耐药性及耐药基因。方法对临床分离出的72株肠球菌属进行菌株鉴定、药敏试验和氨基糖苷类[aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（6）-I]、大环内酯类（ermB）、四环素类（tetM）、糖肽类耐药相关基因（vanA、vanB）和I类整合子（IntI）检测。结果72株肠球菌属对抗菌药物耐药率分别为青霉素（41．67％）、高浓度庆大霉素（86．11％）、高浓度链霉素（88．88％）、红霉素（83．33％）、四环素（52．78％）、呋喃妥因（16．67％）、左氧氟沙星（27．78％）、万古霉素（O）；72株肠球菌属共检出aac（6’）／aph（2”）基因60株，aph（3’）-Ⅲ基因44株，ant（6）-I基因56株，ermB基因52株，tetM基因38株，Int I基因32株，未检出vanA和vanB基因。结论肠球菌属对临床常用的抗菌药物皆不同程度存在耐药，尚未发现耐万古霉素肠球菌，临床医生应重视肠球菌属所致感染的诊断与治疗，合理应用抗菌药物，避免耐药菌株造成的医院感染暴发流行。     

某医院细菌耐药性分析

目的对首都医科大学附属复兴医院2005年分离出的2422株细菌中前13位的构成及耐药性进行监测分析；了解细菌耐药动态，为药物选择提供新信息。方法对临床分离细菌分布构成及耐药性进行回顾性分析。结果分离细菌排位依次为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌等。分离出革兰阳性菌株共627株，占分离菌侏的25．9％。金黄色葡萄球菌占首位，治疗MRS感染，可选用糖肽类抗生素，万古霉素耐药率O％，仍为首选药；耐万古霉素的屎肠球菌（VRE）5％，粪肠球菌为1％。革兰阴性菌1784株，占74．1％。铜绿假胞菌535株，占首位，常有多重耐药现象；可选一种酶抑制剂母一内酰胺复合药（如头孢哌酮／舒巴坦耐药率19％）与一种氨基糖苷类（丁胺卡那12％）或一种喹诺酮类（环丙氟哌酸40％）联合治疗严重感染；大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs^＋）细菌产酶菌株对所有青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类抗生素临床耐药，即使体外部份敏感，临床也耐药，均不宜使用；可选用敏感的头霉素类（头孢西丁耐药率25％），加酶抑制剂的内酰胺类（头孢哌酮／舒巴坦耐药率11％）等。结论细菌的耐药性分析能为临床合理用药提供参考。     

非发酵菌感染的临床分布和耐药谱分析

目的调查我院2000年1月～2003年12月4年间,非发酵菌医院感染的菌株分布及耐药趋势,为临床治疗非发酵菌提供参考依据.方法用VITEK-AMS全自动微生物鉴定仪GNI 卡鉴定到种,药敏试验采用其配套的GNS-KI或GNS-121卡(法国生物梅里埃产品);部分K-B法药敏纸片用Oxoid公司产品.结果 2 044株非发酵菌中铜绿假单胞菌占48.5%、鲍氏不动杆菌占26.5%、嗜麦芽寡养单胞菌占17.0%、黄杆菌属占4.5%、荧光假单胞菌占1.6%、洋葱伯克霍尔德菌占1.1%、木糖氧化产碱菌0.8%;非发酵菌分布部位以呼吸道分离率最多,痰液1 359株(66.5%)、咽拭子152株(7.4%);其次为尿液241株(11.8%);伤口103株(5.0%);耳拭子53株(2.6%);胆汁41株(2.0%);血液36株(1.8%);其他59株(2.9%);分离菌株对抗菌药物呈多重耐药.结论非发酵菌为医院感染的主要致病菌,且对抗菌药物呈多重耐药,其他非发酵菌对亚胺培南耐药率也呈逐年增高趋势;含酶抑制剂复方型抗菌药物、左氧氟沙星和头孢他啶为治疗非发酵菌感染的首选药物.