101例非缺失型α-地中海贫血基因分析

目的了解非缺失型α-地中海贫血的基因突变类型及构成比,以及其在临床检测的必要性。方法应用PCR-RBD技术和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对受检对象进行非缺失型α-地贫基因分析。结果 374例非缺失型α-地贫待排的受检者中有101例检测到携带该基因,其中ααQS/αα71例、ααWS/αα15例、ααCS/αα12例、ααQS/--SEA1例、ααCS/--SEA1例、ααQS/-α3.71例,大约27%受检者能确诊为非缺失型α-地贫携带。结论初步阐明非缺失型α-地贫的基因突变类型和构成比,提高了α-地贫检出率,为非缺失型a地贫基因检测必要性提供了理论依据。     

佛山地区非缺失型α地中海贫血基因突变分析

目的了解广东佛山地区非缺失型α-地中海贫血的基因突变类型及构成比,以及其在临床检测的必要性。方法受检对象应用反向点杂交法检测三种非缺失型α-地贫基因突变。结果 3225例标本中有113例检测到携带突变基因,其中ααQS/αα29例、ααWS/αα45例、ααCS/αα25例、ααQS/--SEA1例、ααCS/--SEA7例、ααw S/--SEA6例,大约3.5%受检者能确诊为非缺失型α-地贫携带。结论初步阐明佛山地区非缺失型α-地贫的基因突变类型和构成比,提高了α-地贫检出率,为非缺失型α地贫基因检测必要性提供了理论依据。     

珠海市户籍人群中α-地中海贫血的分子流行病学调查

目的 调查珠海市这一新兴“移民”城市人群中的α地中海贫血（简称α地贫）的携带率、基因突变类型及其分布特征。方法 抽取珠海市户籍人口的脐带血随机大样本，用血红蛋白电泳法测定Hb Bart's作为诊断α地贫的阳性参考指标。对所有Hb Bart's阳性样品用PCR的分析法进行α地贫基因分型，并在所有被检样品中进行两种常见静止型α地贫基因（－α^3.7和－α^4.2）的分子筛查。结果 在1548例脐带血样本中，检出Hb Bart's阳性样品190例；经基因分析，130例被确定了α地贫基因型（含131个突变等位基因），其中－－^SEA/αα68例、－α^3.7/αα41例、－α^4.2/αα15例、α^CSα/αα4例、α^QSα/αα1例及－－^SEA/α^QSα1例。值得注意的是，有39例－α^3.7/αα和－α^4.2/αα基因携带者检出自Hb Bart's阴性样品中。此外，尚有7例Hb Bart's阳性（含量为4.62%－7.03%）样品经系统基因分析未发现α地贫基因突变。因此，珠海市户籍人品中的α地贫基因携带率为8.91%（138／1548）；5种已知α地贫基因的基因频率依次为2.23%（－－^SEA）、1.32%(-α^3.7）、0.48%(-α^4.2)、0.13%(α^CSα)和0.065%(α^QSα)。另有92例低水平Hb Bart's阳性（含量为≤1.6%）的样品经基因分析排除了α地贫诊断。结论 阐明了珠海市户籍人口中的α地贫的携带率、基因突变类型及其分布特征，该研究进行遗传咨询和制定该地区基于人群筛查的α地贫预防计划提供了有价值的基础资料。Hb Bart's不宜作为诊断静止型α地贫的脐血筛查指标。     

浙北地区小细胞低色素性贫血儿童地中海贫血的基因诊断分析

目的 了解浙北地区小细胞低色素性贫血患儿中地中海贫血患儿的基因类型和分布情况。方法 首先对小细胞低色素性贫血的患儿进行血红蛋白电泳,对地贫表型阳性的患儿,再进行相应的中国常见地贫基因检测。结果 本次研究中,共对959例小细胞低色素性贫血患儿进行血红蛋白电泳,筛查出地贫表型阳性的527例儿童进行了地贫基因检测,最后检出223例患儿携带地贫常见的突变基因类型。在小细胞低色素性贫血患儿中,地贫基因携带者占23.2%,其中α-地贫携带率5.6%(54/959),β-地贫携带率为17.4%(167/959),αβ地贫复合型携带率0.2%(2/959)。其中α-地贫检测出αα/-α^3.7、αα/-α^4.2、-α^3.7/α^QS、--^SEA/αα、--^SEA/-α^3.7、-α^3.7/α^cs共6种基因型,以--^SEA/αα为主,占79.5%(43/54);β-地贫检测出IVS-Ⅱ-654...     

广东河源客家人群α-地中海贫血基因变异类型分析

目的分析广东河源地区客家人群α-地中海贫血(简称地贫)基因变异类型及其特点。方法采用缺口PCR(Gap-PCR)技术和PCR-反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)技术分别对α-地贫基因缺失变异和点变异进行检测,采用巢式PCR法对香港型α-地贫基因进行检测,并就α-地贫基因变异类型与广东省内19个地级市进行比较。结果18276例被检样本中确诊6913例α-地贫患者(37.83%),共检出23种基因变异类型,其中前5位的基因型依次为--SEA/αα(69.15%)、-α3.7/αα(16.11%)、-α4.2/αα(6.25%)、--SEA/-α3.7(2.17%)、αCSα/αα(2.00%),其中香港型检出4例(0.06%)。广东全省均以--SEA/αα和-α3.7/αα变异最为常见,但是各地级市变异频率有所差异。本地区检出变异类型最多,珠海检出变异类型最少。结论河源地区客家人群α-地贫发病率高于广东省大部分地级市,23种检出基因类型中以--SEA/αα和-α3.7/αα变异最为常见。     

HbQ-H病的遗传基础

α—链变种HbQ(α74天冬→组),也称作HbG Taichung和Hb Mahidol,已在东南亚的某些人中发现。在发现这种变种的地方,α—地贫的发病率亦高,并且有一些在HbQ与α—地贫间相互作用的报道。在亚洲人中发现的至少某些类型的α—地贫的分子基础,现在已经清楚。正常人第16号染色体上有两个连锁的α—链基因,其基因型可写作αα/αα。两种普通的α—地贫,α—地贫_1(αα/--)和α—地贫_2     

α地中海贫血HKαα／--SEA基因型家系分析

目的：研究巢式 PCR 结合家系分析的方法对罕见α地中海贫血（α地贫）的诊断价值。方法对先证者及12名家系成员,采用血常规分析、红细胞脆性及血红蛋白电泳进行地贫筛查;采用 PCR-反向斑点杂交（ PCR-reverse dot blot , RDB ）技术诊断非缺失α地贫点突变和17种β地贫基因点突变;采用跨越断裂点聚合酶链反应（ Gap-PCR ）进行缺失型α地贫基因型分析;采用巢式 PCR 检测 HKαα基因型;绘制α地贫基因遗传图谱。结果12例家系成员中,4例 MCV、MCH、红细胞脆性低于正常参考值,8例血液学指标均无异常;12例血红蛋白电泳均正常;12例家系成员中--SEA／αα和αα／αα基因型各2例, HKαα／αα基因型6例, HKαα／--SEA基因型2例;均无17种常见β地贫和3种常见非缺失α地贫。结论巢式PCR 结合家系分析方法是发现罕见地贫基因型并减少HKαα地贫的漏诊误诊的重要方法。     

985例血液学筛查指标阴性个体的地中海贫血基因分析

目的初步了解长沙地区血液学筛查指标阴性群体中地中海贫血(简称地贫)的基因携带情况,为补充地贫干预筛查方案提供依据。方法以平均红细胞容积(MCV)≥80f L,平均红细胞血红蛋白含量(MCH)≥27pg为血液学筛查阴性指征,对985例筛查阴性或在阴性指标上下浮动者用Gap-PCR及反向斑点膜条杂交技术(Reverse Dot Blot Hybridization,RDB)法进行α、β地中海贫血基因诊断。结果 985例血液学筛查指标阴性人群中,共检出地贫基因携带者120例,检出率为12.18%,其中(-α~(3.7)/αα)基因型85例、(-α~(4.2)/αα)基因型18例、(-α~(ws)/αα)基因型1例、(-α~(cs)/αα)基因型8例、(-α~(QS)/αα)基因型1例、(--~(SEA)/αα)基因型7例、未检出血红蛋白H病及常见β地贫。结论在血液学筛查指标阴性人群中具有较高的地贫基因检出率,在实施地贫筛查方案中要严防Hb H病患儿出生。     

广西柳州地区αβ复合型地中海贫血基因突变类型及检出率分析

目的研究广西柳州地区αβ复合型地中海贫血（地贫）基因突变类型及检出率。方法采用膜反向杂交技术检测β地贫基因。用gap-PCR法检测三种常见α地贫缺失基因型：东南亚型缺失（--SEA）、右侧缺失（-α^3.7）、左侧缺失（-α^4.2）。结果153例β地贫中检测出30名α地贫,检出率为19.61%。均为轻型β地贫复合α地贫,其中β地贫杂合子复合--SEA/αα占90.00%,β地贫杂合子复合-α^3.7/αα占3.33%,β地贫杂合子复合-α^4.2/αα占6.67%。结论广西柳州地区αβ复合型地贫检出率高。--SEA/αα是本地区β地贫杂合子检出的主要复合α地贫基因型。准确诊断β地贫合并α地贫双重杂合子对正确进行遗传咨询,搞好优生优育十分重要。     

黔东南地区孕妇与儿童地中海贫血基因类型分析

目的了解黔东南州孕妇与儿童地中海贫血基因类型及分布。方法 2017年1月～2019年4月对疑似地中海贫血的孕妇和儿童采用PCR结合导流杂交方法进行α、β地中海贫血基因检测。结果 426例孕妇中检出地贫343例(80.52%),其中β-地贫173例(50.44%),α-地贫152例(44.31%),α复合β-地贫18例(5.25%)。检出6种α-地贫基因、7种β-地贫基因共24种基因类型,主要为--~(SEA)/αα,其次为β~(CP41-42)/β~N和β~(CP17)/β~N,共占76.68%。314例儿童中检出地贫163例(51.91%),其中β-地贫95例(58.28%),包括纯合子或双重杂合子12例(12.63%),α-地贫68例(41.72%),包括中间型14例(20.59%);检出5种α-地贫基因、8种β-地贫基因,共22种基因类型,主要为β~(CP41-42)/β~N,其次为--~(SEA)/αα和β~(CP17)/β~N,共占70.56%。结论黔东南州孕妇与儿童均以β-地贫为主,孕妇中主要基因类型为--~(SEA)/αα,α复合β-地贫检出率较高,儿童中主要基因类型为β~(CD41-42)/β~N,儿童中重型β-地贫检出率较高。     

湖南地区α地中海贫血基因突变研究

目的调查湖南地区育龄人群中α地中海贫血(α地贫)基因的突变类型及其构成比。方法采集血液学筛查阳性个体及其配偶样本,应用裂口-PCR以及PCR结合反向斑点杂交法进行缺失型和非缺失型α地贫基因分析。结果在1550例检测对象中,314例检测到携带α地贫基因,共计325条突变单体,各突变单体频率为--SEA 54.46%,-α3.7 23.69%,αα~(CS) 8.62%,-α4.2 6.46%,αα~(QS) 4.00%,ααWS 2.15%。结论湖南地区α地贫基因突变构成比具有区域性特征,需在地贫的预防干预中应给予足够重视。     

桂林地区育龄妇女地中海贫血的流行病调查研究

目的调查桂林地区育龄妇女地中海贫血(地贫)的基因携带率、基因突变类型及其分布特征。方法连续采集1843名在桂林医学院附属医院来进行孕前检查及早孕检查并知情选择的育龄妇女外周静脉血。记录地贫筛查结果统计分析育龄妇女人群中α和β地贫的基因频率,突变类型及其分布的流行病学资料。结果 1843例外周血中检出220例α地贫携带者,α-地贫基因携带率为11.9%,常见α-地贫基因的基因构成比依次为64.78%(--SEA)、26.52%(-α3.7/αα)、8.70%(-α4.2/αα);共检出β-地贫携带者为133例,基因携带率为7.22%,所有样品均确定了基因型,共检出9种突变类型。结论桂林是地中海贫血病的高发地区,为了减少重症地贫的发生,提高人口素质,我们要采取合理的地贫筛查方案。     

2005年至2011年间产前诊断重型及中间型α-地中海贫血的相关分析

目的分析2005-2011年间在我院产前诊断为重型α-地中海贫血、中间型α-地贫血红蛋白H病胎儿检出情况。方法对夫妇双方经地贫基因检测诊断为α-地贫基因携带的妊娠妇女,且双方为可能生育重型α-地贫和/或血红蛋白H病患儿的基因组合进行产前地贫基因诊断。主要检测三种缺失:--SEA、-α3.7、-α4.2以及罕见的--THAI缺失;三种点突变:ααCS、ααQS和ααWS点突变类型。结果双亲可能生育重型α-地贫患儿风险的组合有86例次,检出重型α-地贫24例,理论上子代发生频率为25%的实际检出率为27.9%。双亲可能生育血红蛋白H病患儿风险的组合78例次,检出中间型α-地贫血红蛋白H病30例,理论上子代发生频率为25%的组合实际检出率为32.8%;理论上子代发生频率为50%的基因组合实际检出率64.3%。结论根据双亲基因组合,子代重型α-地贫和血红蛋白H病实际检出率均略高于理论发生频率的检出率,但统计学无显著性差异(P>0.05),符合常染色体隐性遗传病的遗传模式。     

广州地区孕前人群地中海贫血基因型分布状况及干预模式探讨

目的了解近年来广州市孕前人群地中海贫血基因型分布情况,并对孕前人群地中海贫血干预模式效果进行探讨。方法利用聚合酶链反应(PCR)和膜杂交法对2014年7月1日到2015年9月30日送检到我中心的1909对(共3818例)单方或双方地贫初筛阳性夫妇标本进行血红蛋白分析及α-与β-地中海贫血的基因型分析,双方均为高风险者追踪随访督导怀孕后接受产前诊断。结果 1在通过基因检测确诊的1657例地中海贫血患者中,α,β,αβ复合型地中海贫血分别为1110、492和55例。检出常见α-地贫基因型频率依次为68.11%(--SEA/αα)、15.59%(-α3.7/αα)、5.59%(-α4.2/αα)、3.96%(αQSα/αα)、2.07%(αWSα/αα)、1.53%(αCSα/αα),并发现2例--SEA/HKαα;检出常见β-地贫基因型频率分别为β41-42(-TCTT)(33.33%)、βIVS-2-654(C→T)(25.20%)、β-28(A→T)(22.96%)、βCD17(A→T)(9.35%)、βCD71-72(+A)(3.46%)等;2高风险家庭91个,其中已孕26个,除2例外均愿意作产前诊断,已做产前诊断17例,1例为中间型,7例为地贫携带者,9例为正常。结论广州市是地贫高发城市,建立孕前人群地贫防控干预模式可有效降及重型地中海贫血患儿的出生。     

福建省籍各地市人群地中海贫血的分子流行病学研究

目的 了解福建省籍各地市人群地中海贫血(简称地贫)的基因携带率、基因突变类型及其分布特征.方法 采用分层整群方法随机抽取福建省9地市籍贯体检人群的静脉血,测定红细胞参数和用高效液相色谱法分析血红蛋白,表型阳性的标本用单管多重PCR方法检测中国人常见的3种α缺失型突变和PCR-寡核苷酸探针反相斑点杂交法检测非缺失α地贫基因突变及β-地贫基因突变.未知突变采用DNA直接测序法进行分析.结果 11234人中,共检出α和β地贫504例,地贫总携带率为4.41％.其中356例样本为α地贫,--SEA/αα236例、-α3.7/αα 67例、-α4.2 /αα 24例、血红蛋白H病4例(-α3.7/--SEA3例,-α4.2/--SEA1例)、-α3.7/-α3.7 1例、-α3.7/-α4.21例、非缺失型α地贫中,ααQS/αα7例、ααCS/αα 3例、ααWS/αα 2例,最常见的为--SEA/αα占全部基因突变的66.29％;148例为β-地贫,共检出12种基因突变类型,IVS-2-654(C→T)65例、CD41-42(-TCTT)40例、CD17(A→T)12例、-28(A→G)10例、CD27-28 (+C)7例、起始密码子ATG→AGG 5例、CD26(G→ A)2例、CD71-72(+A)1例、IVS-1-1(G→T)1例、CD43(G→T)1例、-29(A→G)2例、Codon 36(-C)2例,其中最常见的是IVS-2-654(C-→T)和CD41-42(-TCTT),占全部基因突变的70.95％,并再次在中国人群中发现了Codon 36(-C)的新的突变类型.α地贫复合β地贫双重杂合子9例.结论 阐明福建省籍各地市人群α和β地贫的基因突变类型和频率,在国内具有较高的地贫发生率和遗传异质性,该研究为在本地区开展遗传咨询和产前诊断提供了参考借鉴资料.     

一种新的α2珠蛋白基因起始密码子变异联合右侧缺失型导致α-地中海贫血

目的对1例临床诊断为小细胞低色素性贫血、排除缺铁性贫血的先证者及其家系成员进行致病基因分析,了解基因型-表型关系。方法应用跨越断点PCR(Gap-PCR)和二代测序(next generation sequencing,NGS)技术检测先证者及家系成员在地中海贫血(简称地贫)缺失和变异型的情况,Sanger测序法对所检测的基因变异进行验证。结果Gap-PCR和NGS测序技术分别检测出α地贫αα/-α3.7缺失型和HBA2基因起始密码子HBA2 c.2T>A(p.Met1Lys)杂合变异,在先证者及父亲中均检出αHBA2:c.2T>A(p.Met1Lys)α/-α3.7,母亲及其他家系成员检出结果分别为-α3.7/-α3.7和αα/-α3.7。结论相较于只携带αα/-α3.7的α地贫静止型无症状家系成员,αHBA2 c.2T>A(p.Met1Lys)α/-α3.7表现出更典型的地贫体貌特征及异常血液学指标。HBA2 c.2T>A(p.Met1Lys)变异为致病性变异,新变异的检出丰富了α-地贫致病基因变异谱,为家系的遗传咨询和产前诊断提供了依据。     

四川地区α地中海贫血产前基因诊断

α地中海贫血（α地贫）可分为α地贫1（αα/--）、α地贫2（αα/α-）,缺失型或非缺失型HbH病和Hb Bart′s胎儿水肿综合征（--/--）四种类型。其中以Hb Bart′s胎儿水肿综合征最为严重,可致胎儿缺氧,引起死胎、死产或新生儿死亡,孕妇常有严重的妊娠中毒症及产后出血。因此,及早进行产前诊断,减少此类患儿出生是避免孕妇及其家庭痛苦的有效措施。 除非缺失型HbH病外,α地贫都是由于α基因缺失而致。这种缺失往往引起α基因内限制性内切酶位点的变化,故缺失型α地贫可采用直接检测胎儿DNA上限制性内切酶图谱的方法进行产前诊断。     

云南滇南地区不同民族地中海贫血基因遗传差异性研究

目的 了解云南滇南地区有贫血症状的5个民族的常见地中海贫血的基因遗传差异性。方法 收集2017年9月至2019年5月于云南省滇南中心医院精准医疗诊断中心行地贫基因检测的有贫血症状的5个民族的患者189例，其中汉族有93例，彝族52例，壮族18例，傣族5例，哈尼族21例，比较其地贫基因型分布及遗传差异性。结果 不同民族年龄比较差异无统计学意义（P>0.05）。α-地贫发生率（14.28%）高于β-地贫（12.17%）。缺失型α-地贫24例，非缺失型α-地贫3例，缺失型α-地贫发生率在不同民族两两之间比较差异无统计学意义（P1>0.005）；发生率由大到小依次为：傣族、壮族、彝族、汉族、哈尼族，基因型分布：αα/--SEA>αα/-α3.7>αα/-α4.2=--SEA/-α3.7。缺失型β-地贫发生率在不同民族之间差异无统计学意义（P>0.05），发生率由大到小依次为：傣族、壮族、彝族、汉族、哈尼族，基因型以52A>T最常见。非缺失型α-地贫共3例，其中傣族出现1例RNA剪接突变427T>C；汉族出现2例错义突变369C>G。结论 在云南滇...     

β地贫CD41-42突变杂合子复合缺失型α地贫双重杂合子的基因检测与血液学分析

目的了解β地中海贫血(地贫)CD41-42(-TCTT)杂合子(β41-42杂合子)复合缺失型α地贫双重杂合子在本地区β41-42杂合子个体中的检出情况及其临床血液学表现.方法分别采用单管多重PCR与反向点杂交法检测缺失型α地贫与β地贫基因,常规进行血细胞分析及其它地贫筛查试验.结果 144例β41-42杂合子有8例同时复合缺失型α地贫杂合子,其中7例(4.9%)携带有α地贫1基因(αα/--SEA),1例(0.69%)携带有缺失型HbH基因(-α3.7/--SEA).7例复合α地贫1患者的MCV均都高于另外136例单纯的β41-42杂合子的MCV平均值(63.53fl); 而对携带有HbH基因的样本进行pH8.6与6.5的血红蛋白电泳时都无法找到HbH区带.结论诊断β41-42杂合子复合α地贫双重杂合子的患者时,如只依赖其临床表现和常规的实验室检查结果作为筛查诊断的指标,容易会出现有病患的α或β地贫基因漏诊的情况.     

怀化地区1688例地中海贫血基因分型调查分析

目的分析和了解怀化地区汉族、侗族、苗族人群中确诊α和β地中海贫血的基因类型及构成比例,探讨在怀化地区开展地中海贫血的基因诊断及产前诊断的意义。方法通过对汉族、侗族、苗族共1688例筛查阳性病例采用Gap-PCR法检测人群3种α-地中海贫血缺失,PCR结合RDB技术检测3种α-地中海贫血突变及17种β-地中海贫血突变。结果汉族926人中确诊α地贫157例,β地贫216例,α合并β复合地贫16例。侗族551中确诊α地贫107例,β地贫127例,α合并β复合地贫6例。苗族211人中确诊α地贫42例,β地贫42例,α合并β复合地贫2例。α地贫基因主要以缺失型为主,--SEA最多见,其次-α~(3.7)/αα、-α~(4.2)/αα,突变型以QS、WS多见;β地贫基因型主要以CD41-42多见,其次为CD17、IVSⅡ-654。α地贫中汉族与侗族的对比没有显著的统计学意义,汉族与苗族存在显著差异,侗族与苗族存在显著性差异。β地贫三民族两两对比均无统计学意义。结论怀化地区汉族、侗族、苗族三个不同民族地贫基因分布特点均与中国南方地区的基本相符,--SEA及CD41-42分别为α、β地中海贫血的主要基因突变类型,同时怀化地区汉族各类型地中海贫血基因检出率均稍高于侗族、苗族,且侗族各类型地中海贫血基因检出率均稍高于苗族,整个怀化地区的β地贫检出率略高于α地贫检出率,进行地贫筛查和诊断是怀化地区出生缺陷防控的工作重点项目。