血红素氧合酶1通过影响脓毒症大鼠血栓调节蛋白表达发挥肾脏保护作用

目的:探讨血红素氧合酶1(HO-1)对脓毒症大鼠肾脏的保护作用及其机制,观察肾脏血栓调节蛋白(TM)表达的变化以及HO-1对TM的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制作脓毒症大鼠模型。将72只脓毒症大鼠随机分为对照组、CLP组、CLP+HO-1诱导剂组和CLP+HO-1抑制剂组,每组18只;按分组处理后分时相处死大鼠,留取血浆和肾脏组织,分析各组之间血清肌酐(Cr)、胱抑素C(Cys-C)、碳氧血红蛋白(COHb)、凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的差别,ELISA法检测血浆TM、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平变化,肾脏组织经马休黄/猩红/天青石蓝染色(MSB)法对比各组之间病理变化,并应用Western blot分析肾脏组织TM表达水平。结果:与对照组相比,脓毒症组中大鼠肾脏微血栓形成明显,凝血功能障碍,炎症反应明显,肾脏功能受损;在HO-1诱导剂组中大鼠肾脏微血栓及炎症反应较脓毒症组显著减轻(P0.05),肾脏功能得到改善,TM表达较脓毒症组上调(P0.05);而HO-1抑制剂起到了相反的作用。结论:HO-1能够增加脓毒症大鼠肾脏TM的表达,发挥抗凝血及抗炎作用,从而改善脓毒症大鼠的肾脏功能。     

内源性雌激素调控脓毒症小鼠心肌L型钙离子通道α1C亚基的表达

目的　探讨内源性雌激素对脓毒症小鼠心肌钙离子通道α1C亚基（CACNA1C）的影响。 方法　雌性昆明小鼠行双侧卵巢摘除术，术后30 d利用盲肠结扎穿刺术（CLP）建立脓毒症小鼠模型，分为5组：脓毒症组（S组），去卵巢+脓毒症组（QS组），假手术组（C组），去卵巢+假手术组（QC组），去卵巢+苯甲酸雌二醇（QE组）。荧光定量PCR和Western blot检测造模后3 h，6 h，12 h，24 h左心室CACNA1C表达水平，免疫组化检测造模后12 h左心室CACNA1C表达及分布情况。 结果　（1）QC组CACNA1C的表达水平显著高于C组，QE组CACNA1C的表达水平显著低于QC组。（2）CLP后3 h，S组CACNA1C表达显著高于对照组和其它时间点。（3）CLP后3 h、6 h、12 h和24 h，QS组CACNA1C表达均显著低于对照组，且各时间点之间无差异。 结论　（1）双侧卵巢摘除后CACNA1C表达显著升高，双侧卵巢摘除后补给苯甲酸雌二醇可以逆转CACNA1C的升高。（2）正常小鼠CLP后3 h CACNA1C的表达出现短暂的升高，而双侧卵巢摘除的小鼠CLP后各时间点CACNA1C的表达均显著低于对照组。     

过表达SIRT1通过增强自噬水平调控巨噬细胞M2型极化减轻脓毒症诱导的急性肺损伤

目的：探究过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对脓毒症诱导的急性肺损伤（ALI）巨噬细胞表型转化的影响及调控机制。方法：体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,LPS+IFN-γ与IL-4定向诱导其M1与M2型极化，Western blot检测细胞SIRT1和M1型标志物iNOS、CD86与M2型标志物Arg1、Mcr1蛋白表达。转染过表达SIRT1的质粒，RT-PCR检测转染效率，LPS诱导脓毒症ALI体外细胞模型，并分为4组：LPS组、LPS+pcDNA3.1-SIRT1组、LPS+pcDNA3.1-NC组和Control组，Western blot检测各组细胞iNOS、CD86与Arg1、Mcr1和自噬标志物LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1与p62及SIRT1/FOXO1信号通路SIRT1、FOXO1蛋白表达。免疫荧光检测各组细胞LC3B荧光表达。采用盲肠结扎穿孔（CLP）术构建脓毒症ALI小鼠模型，通过慢病毒在小鼠体内过表达SIRT1，并分为4组：假手术（Sham）组、CLP组、CLP+LV-NC组、CLP+LV-SIRT1组，RT-PCR、HE染色、ELISA检测各组小鼠肺...     

小檗碱与育亨宾对脓毒症小鼠脾细胞凋亡的影响及其机制研究

 目的:探讨小檗碱与育亨宾对脓毒症小鼠脾细胞凋亡的影响及其作用机制。方法: 采用盲肠结扎穿孔（CLP）构建小鼠脓毒症模型,分为假手术（sham）组、CLP组、CLP+小檗碱组、CLP+育亨宾组、CLP+小檗碱与育亨宾合剂组。CLP术后2 h灌胃给予相应药物,20 h后取脾脏,用TUNEL和流式细胞术检测小鼠脾细胞凋亡,酶荧光法检测caspase-3、caspase-8和caspase-9的活性变化,Western blotting检测凋亡相关蛋白Fas、Bim、Bcl-2和Bax的表达。结果: (1) CLP组脾脏TUNEL阳性细胞百分率显著高于sham组（P＜0.05）,CLP+育亨宾与小檗碱合剂组、CLP+育亨宾组凋亡细胞百分率显著低于CLP组（P＜0.05）。(2) 流式细胞仪检测显示CLP组凋亡的脾细胞及T淋巴细胞明显多于sham组(P＜0.05),CLP+育亨宾与小檗碱合剂组、CLP+育亨宾组凋亡的脾细胞及T淋巴细胞明显少于CLP组 (P＜0.05) 。(3) CLP+育亨宾与小檗碱合剂组、CLP+育亨宾组脾细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性均低于CLP组(P＜0.05);而CLP+小檗碱组脾细胞caspase-9活性也低于CLP组 (P＜0.05)。(4) CLP+育亨宾与小檗碱合剂组胞浆Fas、Bim、Bax表达均低于CLP组,CLP+育亨宾组胞浆Fas表达低于CLP组,CLP+小檗碱治疗组胞浆Bim、线粒体Bax表达均低于CLP组。结论: (1) 小檗碱与育亨宾合用可通过阻断内、外源性凋亡途径抑制脓毒症小鼠脾细胞凋亡,特别是T淋巴细胞凋亡。(2) 育亨宾主要通过抑制Fas的表达、进而阻断内、外源性凋亡途径减少脓毒症诱导的脾细胞凋亡。(3) 小檗碱可抑制脓毒症小鼠脾细胞线粒体凋亡途径,但对脓毒症小鼠脾细胞凋亡的抑制作用并不明显。     

电针足三里对脓毒症大鼠组织肿瘤坏死因子和多脏器功能损害的影响

目的： 研究电针足三里(ST36)对脓毒症大鼠促炎症因子所致多脏器功能损害的影响。方法: 雄性Wistar大鼠64只,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型,随机分为CLP+电针（EA）足三里组 (CLP/EA组)、CLP+假电针（sham EA）组(CLP/SEA组)、迷走神经切断（VA）+CLP+SEA组（VA/CLP/SEA组）和VA+CLP+EA组(VA/CLP/EA组),每组16只。CLP/EA组持续针刺双侧足三里穴30 min,强度为2 mA,2-100 Hz。CLP/SEA组采用相同频率和强度刺激非经非穴（足三里外侧旁开0.5 cm）30 min。VA组于CLP前切断双侧迷走神经干。各组大鼠于CLP术后12 h取血检测血浆谷丙转氨酶（ALT）和肌苷（Cr）;然后处死动物,取肝、 肾和空肠组织检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量、髓过氧化物酶（MPO）和二胺氧化酶（DAO）活性以及脏器组织含水率。结果: 与CLP/SEA组比较, CLP/EA组TNF-α、MPO、ALT、 Cr水平和脏器组织含水率显著降低,肠组织DAO活性显著增加 (均P<0.05);VA/CLP组和VA/CLP/EA组TNF-α、MPO、ALT、 Cr水平和脏器组织含水率显著增加,DAO活性显著降低 (均P<0.05);VA/CLP/EA组与VA/CLP组比较,上述指标的变化无显著差异(P＞0.05)。结论: 电针足三里显著抑制CLP大鼠肝、肾和空肠组织TNF-α水平,减轻脏器水肿和功能损害;切断迷走神经能显著减轻或消除EA的作用,上调组织TNF-α水平、加重脏器损害。电针足三里的抗炎和减轻脏器损伤的机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关。     

内源性雌激素调控脓毒症小鼠心肌L型钙离子通道α1C亚基的表达

目的　探讨内源性雌激素对脓毒症小鼠心肌钙离子通道α1C亚基（CACNA1C）的影响。 方法　雌性昆明小鼠行双侧卵巢摘除术,术后30 d利用盲肠结扎穿刺术（CLP）建立脓毒症小鼠模型,分为5组：脓毒症组（S组）,去卵巢+脓毒症组（QS组）,假手术组（C组）,去卵巢+假手术组（QC组）,去卵巢+苯甲酸雌二醇（QE组）。荧光定量PCR和Western blot检测造模后3 h,6 h,12 h,24 h左心室CACNA1C表达水平,免疫组化检测造模后12 h左心室CACNA1C表达及分布情况。 结果　（1）QC组CACNA1C的表达水平显著高于C组,QE组CACNA1C的表达水平显著低于QC组。（2）CLP后3 h,S组CACNA1C表达显著高于对照组和其它时间点。（3）CLP后3 h、6 h、12 h和24 h,QS组CACNA1C表达均显著低于对照组,且各时间点之间无差异。 结论　（1）双侧卵巢摘除后CACNA1C表达显著升高,双侧卵巢摘除后补给苯甲酸雌二醇可以逆转CACNA1C的升高。（2）正常小鼠CLP后3 h CACNA1C的表达出现短暂的升高,而双侧卵巢摘除的小鼠CLP后各时间点CACNA1C的表达均显著低于对照组。     

不同的应激方式对模拟高原环境下肺损伤影响的实验研究

目的探讨心理和生理应激对模拟高原低压低氧环境下大鼠肺损伤的影响。方法雄性SD随机分为对照组（Con组）、低氧组（Hy组）、心理应激（2次／天）组（Ps1组）、心理应激（2次／天×2天）组（Ps2组）、心理应激（2次／天）＋低氧组（Ps1＋Hy组）、心理应激（2次／天×2天）＋低氧组（Ps2＋Hy组）、生理应激（2次／天）组（Ph1组）、生理应激（2次／天×2天）组（Ph2组）、生理应激（2次／天）＋低氧组（Ph1＋Hy组）和生理应激（2次／天×2天）＋低氧组（Ph2＋Hy组）。心理和生理应激都采用旁观电击（CB）的方法。通过测定大鼠右肺湿／干比值、全湿肺／体重比值、右肺含水比值、与细支气管伴行小血管“袖套”面积和血管的“袖套”面积／血管面积的比值来评定肺损伤的程度。结果①与Con和Hy组比较,Ps2＋Hy、Ph1＋Hy和Ph2＋Hy组的右肺湿／干比值均显著增高（P分别〈0．05和0．01）;②与Con和Hy组比较,Ph1＋Hy和Ph2＋Hy组的肺含水比值均显著增高（P均〈0．01）;③与Con和Hy组比较,Ps2＋Hy、Ph1＋Hy和Ph2＋Hy组血管“袖套”面积和血管“袖套”面积／血管面积比值均显著增高（P分别〈0．05和0．01）。结论心理和生理应激均可加重急性低压低氧环境导致的大鼠肺损伤。     

非诺贝特和吡格列酮对压力过负荷大鼠心室重塑的影响及作用机制

目的： 探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPARs）的配体非诺贝特和吡格列酮对压力过负荷大鼠心功能、心室重塑的影响及其作用机制。方法： 取雄性Wistar大鼠腹主动脉缩窄致压力过负荷模型，术后48 h存活的40只随机分成：手术组（CAA组）、非诺贝特干预组（F组）、吡格列酮干预组（P组）及非诺贝特和吡格列酮联合干预组（F＋P组）。另以10只雄性Wistar大鼠为假手术对照。在给药处理12周后检测血流动力学参数、心室重塑指标、血浆和心肌肾素活性、血管紧张素Ⅱ、醛固酮及心肌的1型血管紧张素Ⅱ受体（AT1）mRNA表达变化。最终36 只大鼠获完整资料，上述各组分别为7、8、7、6和8只。 结果： F组、P组及F＋P组的左室湿重/体重、平均动脉压、左室收缩压、左室舒张末期压及心率低于CAA组，而左室压力上升、下降最大速率（±dp/dtmax）高于CAA组；F组、P组、F＋P组及CAA组间血浆和心肌肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮活性无显著差异。P组和F+P组大鼠心肌AT1 mRNA 的表达水平低于F组。 结论： 尽管PPARα配体（非诺贝特）和PPARγ配体（吡格列酮）对血浆和心肌肾素活性、血管紧张素Ⅱ和醛固酮无明显影响，但PPARs信号通路激活能抑制压力过负荷大鼠心室重塑，降低前后负荷，并提高±dp/dtmax。PPARγ途径激活可抑制心肌AT1 mRNA的表达。     

赤峰市健康人群血浆凝血酶原片段和D-二聚体检测结果

凝血酶原片段1＋2（F1＋2）是Xa因子介导裂解凝血酶原产生的，Xa因子作用于凝血酶原分子的精氨酸273-苏氨酸274（Arg273-Thr274）部位，导致F1＋2从凝血酶原分子的NHz释放。D-dimer系交联纤维蛋白的特异性降解产物，其血浆水平增高反映继发性纤溶活性增强，可作为体内高凝状态和纤溶亢进的特异性分子标志物。本文检测赤峰市55例正常人不同年龄组血浆F1＋2、D-dimer的浓度，并探讨相关因素与血浆F1＋2、D-dimer浓度间的关系。     

Ghrelin对脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞及肺组织iNOS表达的影响

 目的： 观察ghrelin对脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞及肺组织诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）表达的影响。方法： SD雄性大鼠分为假手术组、脓毒症组及ghrelin治疗组,前2组各设术后6 h、12 h和20 h亚组。通过盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture, CLP）建立脓毒症模型,ghrelin治疗组于术后3 h及15 h腹腔注射ghrelin,术后20 h取材。各组按术后既定时间行支气管肺泡灌洗收集肺泡巨噬细胞,RT-PCR检测肺泡巨噬细胞中iNOS mRNA的表达水平。另一部分大鼠则在术后20 h采集右肺,行肺病理学检查及Western blotting检测肺组织iNOS蛋白表达。结果： 脓毒症组在CLP术后6 h、12 h和20 h肺泡巨噬细胞iNOS mRNA的表达水平分别为1.33±0.05、1.44±0.08和1.57±0.11,均高于假手术组（P＜0.05）,并不随时间延长而升高;但在术后20 h却低于ghrelin治疗组（2.27±0.37;P＜0.05）。Ghrelin治疗组CLP术后20 h肺组织iNOS蛋白表达水平（0.87± 0.03）低于脓毒症组（P＜0.05）。Ghrelin治疗组肺组织病理学评分（5.83±0.477）较脓毒症组（7.83±0.75）低,2组均高于假手术组（P＜0.05）。结论： CLP术后6～20 h,大鼠肺泡巨噬细胞iNOS mRNA的表达水平升高,但无时间依赖性。Ghrelin对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞iNOS mRNA表达起上调作用,而对肺组织iNOS蛋白表达起抑制作用,减轻肺损伤程度。     

脓毒症患者外周血红细胞膜磷脂酰丝氨酸的外露

目的研究脓毒症患者外周血红细胞的形态改变及红细胞膜表面磷脂酰丝氨酸（PS）的外露情况。方法采用配对设计随机分组方法,分别对正常对照组（n=30）和脓毒症患者组（n=30）进行静脉采血,行瑞氏染色血涂片观察和测定红细胞聚集指数,并采用对Ps有高度亲和力的磷脂结合蛋白AnnexinV检测技术,利用流式细胞仪对红细胞进行荧光测定。结果显微镜下观察脓毒症患者外周血红细胞形态发生明显异常改变,呈棘形、泪滴形、球形、缗线形等变化,细胞明显聚集;同时红细胞聚集指数测定结果显示脓毒症组较正常对照组也明显升高,其差异有统计学意义（P〈0．05）。脓毒症组Ps外露的红细胞比例明显高于正常对照组,其差异有统计学意义（P〈0．001）。结论脓毒症患者外周血红细胞表面Ps的外露表达明显增加,同时红细胞形态发生明显异常变化。     

人参皂苷Rg1对脓毒症所致心肌损伤大鼠NF-κB磷酸化水平及炎症相关通路的影响北大核心CSCD

目的：探究人参皂苷Rg1对脓毒症所致心肌损伤大鼠核因子-κB(NF-κB)磷酸化水平及炎症相关通路的影响。方法：盲肠结扎穿孔法（CLP）构建大鼠脓毒症心肌损伤模型,60只大鼠随机分为假手术（sham）组、CLP组、人参皂苷Rg1低剂量（CLP+Rg1L）组、人参皂苷Rg1中剂量（CLP+Rg1M）组、人参皂苷Rg1高剂量（CLP+Rg1H）组、瑞沙托维（CLP+TAK-242）组,每组10只。LPS构建体外脓毒症心肌细胞模型,H9C2细胞分为对照（control）组、LPS组、LPS+Rg1L组、LPS+Rg1M组、LPS+Rg1H组、LPS+TAK-242组。右颈总动脉插管法检测各组大鼠平均动脉压（MABP）、心率×左心室发展压（LVDP×HR）、左心室压力最大上升/下降速率（±dp/dtmax）水平;HE染色观察心肌组织病理学改变;Annexin V-FITC/PI双染法检测心肌组织和H9C2细胞凋亡;ELISA检测大鼠血清和H9C2细胞肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-1β含量;CCK-8及EdU染色检测H9C2细胞增殖能力;RT-qPCR检测心肌组织Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK） mRNA表达;Western blot检测心肌组织TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、p38MAPK、p-p38MAPK、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达。结果：人参皂苷Rg1能够提高MABP、LVDP×HR、±dp/dtmax水平,降低CK、LDH、AST活力,降低cTnⅠ、TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4、NF-κB p65、p38MAPK mRNA与TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38MAPK/p38MAPK、NLRP3蛋白水平（P<0.05）,促进心肌细胞增殖,抑制细胞凋亡与炎症水平,改善心肌损伤。结论：人参皂苷Rg1能够抑制心肌组织细胞凋亡及炎症水平,提高心功能,从而减轻脓毒症所致心肌损伤,其机制可能与TLR4/NF-κB、p38MAPK信号通路有关。     

葛根素葡萄糖注射液对缺血-再灌注损伤兔肝脏的保护作用

目的：探讨葛根素葡萄糖注射液（嘲）对兔缺血-再灌注损伤肝脏的保护作用及其机制。方法：30只日本大耳白兔，随机分为假手术对照组（A组）、肝缺血-再灌注组（B组）和肝缺血-再灌注加PGI治疗组（C组），分别在心肌缺血前、缺血44min、再灌注45min不同时相点，检测血浆及肝组织丙二醛（MDA）浓度、超氧化物歧化酶（SOD）活性、一氧化氮（NO）浓度、内皮素（ET）含量、肿瘤坏死因子-α （TNFα）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）含量、总腺苷酸量（TAN）、能荷（EC）、血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）含量、TXB2／6-keto-PGF1α比值、血小板黏附聚集功能及肝细胞形态学的变化。     

高原肺水肿患者凝血纤溶系统的变化

目的：探讨高原肺水肿（HAPE）患者治疗前后血液凝血与纤溶系统的变化。方法：对54例急进HAPE的患者治疗前后血浆中组织纤溶酶原激活剂（t-PA）、纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）活性、纤维蛋白原（FG）、纤溶降解产物（FDP）和D-二聚体（DD）含量进行测定，并与20例高原健康人作对照比较。结果：HAPE患者治疗前血浆中t-PA活性高于正常对照组（P<0.05）；FG、FDP和DD含量及PAI-1活性高于正常对照组及临床治疗后水平（P<0.01或0.05），临床治疗后HAPE患者血浆中FG、DD含量及PAI-1活性与正常对照组无显著差异（P>0.05），但FDP含量仍高于正常对照组（P<0.05）。结论：HAPE患者存在纤溶抑制功能的亢进及凝血与纤溶系统的紊乱。     

血红素氧合酶-1影响脓毒症大鼠内皮细胞蛋白C受体表达发挥肾脏保护作用

目的研究血红素氧化酶-1 (heme oxygenase-1,HO-1)对脓毒症大鼠肾脏的保护作用机制,观察肾脏内皮细胞蛋白C受体(endothelial cell protein C receptor,EPCR)表达的变化以及血红素氧合酶-1对其影响。方法盲肠结扎-穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)法制作脓毒症大鼠模型,72只脓毒症大鼠随机分为对照组、CLP组、HO-1促进剂(CLP+hemin)组、HO-1抑制剂(CLP+ZnPP)组,每组18只,后3组大鼠分别于腹腔内注射磷酸盐缓冲液、hemin和ZnPP,12 h后在大鼠腹白线做正中切口约1.5cm,分离盲肠,在盲肠的近端和末端各穿一个孔,挤出少许粪便于腹腔内,回纳盲肠,分层缝合腹腔,造成腹腔感染脓毒症模型。分时相处死大鼠,留取血浆、肾脏组织,分析各组之间肌酐(Cr)、胱抑素C(Cys-C)、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的差别,ELISA法检测血浆EPCR、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平变化,肾脏组织经马休黄/猩红/天青石蓝染色法(MSB)对比各组之间病理变化,并应用Western Blot分析肾脏组织EPCR表达水平。结果与对照组相比在脓毒症组中大鼠肾脏微血栓形成明显,凝血功能障碍,炎症反应明显,肾脏功能受损;在HO-1促进剂组中大鼠肾脏微血栓及炎症反应较脓毒症组显著减轻(P<0. 05),肾脏功能得到改善,EPCR表达较脓毒症组上调,差异具有统计学意义(P<0.05);而HO-1抑制剂起到了相反的作用。结论血红素氧合酶-1能够增加脓毒症大鼠肾脏内皮细胞蛋白C受体的表达,发挥抗凝血及抗炎作用,从而改善脓毒症大鼠的肾脏功能。     

基于MMP7/mTORC1信号通路探讨小鼠脓毒症急性肾损伤的分子机制

目的：探讨基质金属蛋白酶7(MMP7)在小鼠脓毒症相关急性肾损伤模型中的表达及作用。方法：通过盲肠结扎穿孔（CLP）手术在具有C57BL/6J遗传背景的MMP7敲除（MMP7-KO）小鼠和野生型（WT）C57BL/6J小鼠中诱导脓毒症。采用外源性MMP7重组蛋白对MMP7-KO小鼠进行预处理。通过脂多糖（LPS）刺激正常人近端肾小管上皮细胞系HKC-8建立体外模型。采用Western blot检测MMP7和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)表达。HE和TUNEL染色评估小鼠的肾损伤。Hoechst 33342染色评估细胞凋亡。结果：与假手术组相比,CLP组在CLP后6 h肾脏组织中MMP7蛋白表达降低,这种降低趋势持续到48 h。MMP7-KO的CLP组小鼠肾小管损伤病理评分和TUNEL阳性肾小管细胞显著高于WT的CLP组（P<0.01）。MMP7重组蛋白孵育可很大程度上降低LPS诱导的HKC-8细胞凋亡。LPS诱导了HKC-8细胞的mTORC1表达,而MMP7可以抑制mTORC1表达。MMP7能够明显促进mTORC1降解,产生分子量为18 kD的较小片段。此外,MM...     

细胞因子信号转导抑制因子1和3在脓毒症小鼠脾脏中表达量的变化

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-1和3（SOCS1和SOCS3）的含量在脓毒症小鼠脾脏中的变化情况以及可能的作用机制。方法采用盲肠结扎并穿刺术（CLP）制作脓毒症模型,提取脾脏组织的RNA及蛋白质,采用RT-PCR测定组织中SOCS1和SOCS3 mRNA的相对含量,用免疫印迹方法测定组织中SOCS1和SOCS3相对蛋白含量,用SPSS统计软件测定上述指标之间的变化关系。结果脓毒症手术后SOCS1在脾脏中仅检测到基因表达,随时间逐渐上升,并一直保持高位;SOCS3在脾脏内的基因表达和蛋白表达在术后2h迅速升高,至12h达峰值（P〈0.05）;统计分析发现SOCS1和SOCS3的基因表达呈明显正相关性（P〈0.05）。结论 CLP导致的脓毒症可以诱导SOCS1和SOCS3在脾脏中表达增多,提示SOCS1和SOCS3在脓毒症出现后的免疫变化中有重要作用,可能可利用它们对脓毒症进行干预,以改善脓毒症的预后。     

妊高征患者血浆ET水平与红细胞膜ATP酶活性的改变与发生肾病的关系

目的：探讨了妊高征肾病患者血浆内皮素（ET）水平和红细胞膜ATP酶活性的改变参与妊高征肾病的可能机制。方法：应用放射免疫分析和Reilni制膜法制定了32例妊高征肾病患者血浆ET水平和红细胞膜上Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性的变化,并与70名妊高征无肾病组和35名正常孕妇作比较。结果：妊高征肾病组和无肾病组血浆ET水平非常显著地高于正常孕妇组（P〈0．01）,而红细胞膜上Na^＋K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活性均显著地低于正常孕妇组（P〈0．01）,妊征肾病组与无肾病组有显著性差异（P〈0．05）。结论：妊高征肾病的发生与发展与血浆ET和红细胞膜上Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活性有密切的关系。     

高容量血液滤过对脓毒症犬肾组织线粒体功能的影响及其可能机制

探讨高容量血液滤过对脓毒症犬肾组织线粒体功能的影响。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型：将健康雄性犬30只随机分为假手术组（A组）;脓毒症模型组（B组）和脓毒症＋高容量血液滤过治疗组（C组）。各组分别于00、.5、1、2、3、4 h等不同时点测定心率、血压、血肌酐（Scr）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。于4 h点处死动物,观察肾组织病理改变及肾小管损伤程度;采用生物发光测量法检测肾组织线粒体丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、活性氧（ROS）、三磷酸腺苷酶（ATP酶）、ATP生成量（P/O比值）变化。结果B组动物与A组相比较,出现心率增快、血压降低;血Scr、TNF-α水平于造模后0.5 h升高,肾组织出现明显的病理损害、肾小管坏死评分值明显增高,肾组织中三磷酸腺苷（ATP）含量明显下降,氧自由基（ROS）含量升高;其中SOD酶活性的下降与TNF-α含量的增高呈现良好的相关性（r=0.65,P〈0.01）。经HVHF治疗后,C组犬肾组织损伤轻于B组,相应指标亦好于B组。氧化应激反应能力的相对不足和氧化损伤在脓毒症急性肾损伤发病过程中起了重要作用;HVHF通过清除异常增高的炎症物质水平,减轻肾组织的氧化损伤,改善肾小管上皮细胞线粒体的能量代谢状态。     

脓毒症糖尿病大鼠肺组织DDAH2表达变化及意义

目的：观察二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2,DDAH2）在糖尿病脓毒症机体中的表达变化,探讨血管内皮功能损害的发生机制。方法：64只Wistar大鼠随机分为正常对照组、单纯脓毒症组、糖尿病组、糖尿病脓毒症组,每组16只。免疫组织化学方法观察肺组织结构变化及DDAH2表达的分布变化。Griess法测定血清及肺组织一氧化氮（nitrite oxide,NO）含量,real-time PCR测定肺组织DDAH2 mRNA水平。结果：免疫组织化学显示糖尿病组大鼠肺组织平均光密度值（average optical density value,AOV）无明显变化,RT-PCR显示DDAH2 mRNA表达水平低于正常对照组（P〈0.05）;脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）腹腔注射后,单独脓毒症组和糖尿病脓毒症组肺组织DDAH2 AOV值及mRNA表达较正常对照组均明显降低（均P〈0.01）;且糖尿病脓毒症组AOV值低于单纯脓毒症组（P〈0.01）,DDAH2 mRNA表达亦低于单纯脓毒症组（P〈0.05）。糖尿病脓毒症组及单纯脓毒症组血清及肺组织中NO水平均增高,血清测定前者低于后者（P〈0.05）,但肺组织中前者高于后者近2倍（P〈0.05）。结论：脓毒症肺表现为DDAH2表达下调,糖尿病脓毒症肺组织表现为DDAH2表达更为明显下调,提示存在更为严重的血管内皮细胞损害,因此DDAH2表达下调可能参与脓毒症糖尿病机体肺损伤的发生。