LC-MS/MS法测定人血浆中石杉碱甲浓度的不确定度分析

目的:探讨高效液相色谱串联质谱电喷雾(LC-MS/MS)法测定人血浆中石杉碱甲浓度的不确定度评定方法。方法:用LC-MS/MS法测定人血浆中石杉碱甲浓度,通过对测试方法流程进行分析,确定不确定度来源,计算合成不确定度和扩展不确定度。结果:血浆中石杉碱甲浓度测定的扩展不确定度为9.16%。结论:本评定方法适用于LC-MS/MS法测定人血浆中药物浓度的不确定度评定测量,不确定度的评定方法确立对于血药浓度的测定具有重要意义。     

LC-MS/MS法测定人血清中石杉碱甲的浓度

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法的方法测定人血清中石杉碱甲浓度。方法:以可乐定为内标,待测血清样品经乙酸乙酯液-液萃取,有机相吹干,流动相复溶后进样,色谱柱为Phenomenex Luna CN柱,流动相为甲醇∶0.08%甲酸水溶液(含0.2%乙酸铵)=46∶54。ESI离子源正离子方式检测,选择反应监测(SRM),用于定量的离子分别为石杉碱甲m/z:母离子243.2,子离子210.9,碰撞能30V;内标可乐定m/z:母离子229.9,子离子212.9,碰撞能32V;扫描时间为0.5s。结果:血清中内源性物质不干扰石杉碱甲的检测,石杉碱甲血药浓度在0.08～8ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9930～0.9960);日内、日间RSD均<15%,低、中、高浓度的平均提取回收率分别为69.9%、63.7%、63.7%。结论:该法操作快速、灵敏、简单、准确,介质用量少,符合生物样品检测要求,可用于临床药动学研究中大批量血样的处理。     

HPLC法测定人血浆中来曲唑浓度及人体相对生物利用度

目的建立测定人血浆中来曲唑浓度的高效液相色谱法,并研究来曲唑分散片在正常人体中的生物利用度。方法血浆样品经乙醚萃取浓缩后,用DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm,5μm)分离,咪唑斯汀为内标,在239nm处波长处检测。采用两周期随机交叉给药方案,18名受试者分别单剂量口服2.5mg来曲唑分散片(受试制剂,T)或来曲唑片(参比制剂,R),不同时间点取血、测定血浆样品中来曲唑浓度,比较二者生物利用度。结果来曲唑和内标色谱峰完全分离,血浆内源性杂质不干扰测定。来曲唑浓度在2.48～99.2μg/L范围内与峰面积比线性关系良好,其定量下限为2.48μg/L。方法回收率在87.88%～104.02%(n=20),批内和批间相对标准偏差(RSD)均<10%。单剂量口服受试制剂和参比制剂后,受试制剂的相对生物利用度为(101.20±19.33)%。受试制剂Cmax、AUC0-144和AUC0-∞比值的90%置信区间分别为95.1%～103.3%、90.5%～108.4%、84.7%～112.1%,符合制剂生物等效标准。Tmax经非参数法检验亦没有显著性差异(P>0.05)。结论所建立HPLC法快速、准确、简便、敏感度高,能够满足来曲唑体内分析的要求。来曲唑分散片和来曲唑片为生物等效性制剂。     

阿莫西林片的人体相对生物利用度研究

以高效液相色谱法测定了人血清中阿莫西林,以进口阿莫西林片为参比制剂,研究了国产阿莫西林片的相对生物利用度。结果表明,国产和进口片的药－时曲线均符合一级吸收的二房室模型,两药的药代动力学参数间均无显著性差异,国产片的相对生物利用度为９９．１％。     

洛伐他汀胶囊的人体相对生物利用度

健康受试者8名,随机分为2组,自身交叉单剂量po 100mg国产洛伐他汀胶囊与美国产洛伐他汀片后,用反相高效液相色谱法测定洛伐他汀血药浓度变化,进行相对生物利用度的研究.经3p87药物动力学程序处理,AUC分别是:194.75±42.29ng·ml~(-1)·h~(-1)与187.54±25.67ng·ml~(-1)·h~(-1),T_(max)分别为:2.625±0.354h与2.44±0.32h,C_(max)分别是:30.40±5.16ng/ml与30.99±5.98ng/ml.配对c检验结果表明:两者药-时曲线下面积、达峰时间及峰浓度均无显著性差异(P>0.05).双单侧t检验同样表明两者为生物等效制剂.洛伐他汀胶囊的相对生物利用度为(104.6±21.9)%.     

改变检测波长HPLC-UV法测定人血浆中的罗红霉素浓度及生物利用度研究

目的建立人血浆中罗红霉素的高效液相色谱测定法,并研究罗红霉素分散片在人体的相对生物利用度。方法以克拉霉素为内标,血浆样品用二氯甲烷(含5%的异丙醇)液-液萃取后经HypersiL BDS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-0.5%醋酸铵(46∶54,v/v,氨水调pH值至8.0),流速为1 mL.min-1,检测波长:0~6.2 min为300 nm,6.2~8.0 min为207 nm。18名健康志愿者采用三周期随机交叉方式单剂量口服罗红霉素分散片试验制剂T1、T2或参比制剂R后不同时间点采血,研究三者的生物等效性。结果罗红霉素与内标分离良好,内源性物质不干扰测定。在0.25~32.0 g.mL-1罗红霉素浓度与罗红霉素和内标峰面积比线性关系良好(r=0.999 2)。方法回收率为96.9%~107.6%(n=5),日内RSD<6.4%(n=15)、日间RSD<4.3%(n=15)。单次服用0.3 g罗红霉素分散片T1、T2和R的主要药物动力学参数分别为:Cmax为(12.4±10.6)、(13.4±4.8)和(13.7±3.9)μg.mL-1;Tmax为(1.7±0.3)、(1.8±0.4)和(2.3±0.5)h;AUC0~48为(158.1±42.6)、(157.9±54.2)和(160.1±42.5)μg.h.mL-1。与R相比,T1的相对生物利用度为100.6%±19.7%;T2的相对生物利用度为98.9%±20.2%。结论该方法简单快速、准确度高、灵敏度与重现性好,可用于罗红霉素在人体内过程研究。T1、T2与R为生物等效制剂。     

高效液相色谱法测定蛇足石杉中石杉碱甲的含量

目的建立了蛇足石杉中石杉碱甲含量的测定方法并比较植物不同药用部位石杉碱甲的含量。方法采用DiamonsilTmC18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇∶0.08mol·L-1醋酸铵缓冲液(40∶60,pH=6.0),检测波长为308nm,流速为1.0ml·min-1,柱温为室温。结果石杉碱甲在5～100mg·L-1浓度范围线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为98.10%,RSD为2.44%(n=5),对蛇足石杉不同药用部位的进行了石杉碱甲含量测定,结果表明,叶中石杉碱甲含量最高,茎次之,根最低。结论本法简便、准确、重复性好。石杉碱甲集中分布在植物的地上部分中。     

盐酸二甲双胍肠溶片的人体相对生物利用度

目的 :研究盐酸二甲双胍肠溶片在健康男性志愿者体内的相对生物利用度。方法 :2 0名健康志愿者交叉口服盐酸二甲双胍肠溶片和盐酸二甲双胍肠溶胶囊 ,采用HPLC法测定人血清中盐酸二甲双胍的浓度 ,使用NDST程序对各药动学参数进行方差分析和双单侧t检验。结果 :口服 10 0 0mg盐酸二甲双胍肠溶片和盐酸二甲双胍肠溶胶囊的cmax分别为 :(2 .6 1±0 .85 ) ,(2 .4 1± 0 .84 )mg L-1;tmax分别为 :(3.13± 0 .78) ,(3.4 8± 0 .95 )h ;T1/2 分别为 :(3.80± 0 .99) ,(3.2 9± 0 .5 4 )h ;AUC0→ 16分别为 :(13.95± 3.97) ,(12 .76± 4 .0 2 )mg·h·L-1;AUC0→∞ 分别为 :(14 .78± 3.97) ,(13.4 2± 4 .18)mg·h·L-1。统计学处理结果 ,两剂型的药动学参数间均无显著性差异 ,受试制剂的相对生物利用度为 (113.8± 2 5 9) %。结论 :2种制剂具有生物等效性     

HPLC法测定人血浆中美索巴莫及其相对生物利用度

目的:建立正常人血浆中美索巴莫的 HPLC 测定法,并研究美索巴莫的分散片、干混悬剂与普通片在正常人体的相对生物利用度。方法:血浆样品用18%高氯酸沉淀后离心,上清液直接进样,以甲醇-25 mmol·L~(-1)磷酸二氢钠溶液(32:68,v/v)为流动相,在 Hypersil BDS_2柱(4.6 mm×200 mm,5 μm)上分离,流速为1.2 mL·min~(-1),检测波长为272 nm。18名健康志愿者以3周期随机交叉试验设计,分别单剂量口服美索巴莫分散片(T_1)、美索巴莫干混悬剂(T_2)或美索巴莫片(R)后不同时间点采血,测定血药浓度,计算药物动力学参数并进行生物等效性判定。结果:美索巴莫在0.081～20.8μg·mL~(-1)范围内浓度与峰面积的线性关系良好,同归方程为4=5.337×10~3C-191.9,r=0.9999。最小可定量浓度为0.081μg·mL~(-1),方法回收率为99.0%～106.2%(n=5),日内 RSD 为1.4%～6.8%(n=5);日间 RSD 为2.9%～6.8%(n=15)。单次服用 T_1、T_2或 R0.5 g 后,与 R 相比,T_1的相对生物利用度为(105.2±15.1)%;T_2的相对生物利用度为(105.6±14.3)%。药动学参数经多因数方差分析显示周期间与制剂间差异均无显著意义(P>0.05),双单侧 t 检验表明接受 T_1、T_2与 R 生物等效的假设,经计算90%置信区间均在规定值内。结论:该方法简单、快速,准确度、灵敏度高,重现性好,可用于美索巴莫在人体内过程研究;T_1、T_2与 R 为生物等效制剂。     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中曲司氯铵的浓度及相对生物利用度

目的：建立人血浆中曲司氯铵浓度的测定方法，研究国产曲司氯铵片／胶囊的人体相对生物利用度。方法：以曲马多为内标，血浆样品经碱化后用氯仿-异丙醇混合液（40：2）萃取，经Xetrra C18柱分离后用质谱检测器检测。18名健康男性志愿者采用二重3×3交叉试验设计，3周期内分别单剂量口服试验制剂（曲司氯铵片或胶囊）和参比制剂40mg，不同时间点采血，血浆样品中曲司氯铵浓度用HPLC-MS／MS方法测定，研究比较两试验制剂与参比制剂的生物利用度。结果：曲司氯铵与内标分离良好，内源性杂质不干扰测定，回归方程为Y=0．1065X－0．0588，r=0．9998。在0．2～50μg·L^-1范围内曲司氯铵质量浓度与峰面积比线性关系良好，定量下限为0．2μg·L^-1，低、中、高质量浓度的曲司氯铵和内标的萃取回收率分别为（75．5±4．1）％（n=5），（78．9±0．8）％（n=5），（73．9±6．2）％（n=5），（79．2±0．8）％（内标，n=15），方法回收率为104．4％～110．8％之间（n=5），日内RSD为10．4％～14．4％之间（n=5），日间RSD在8．4％～13．3％之间（n=5）。试验制剂I（曲司氯铵片）、试验制剂Ⅱ（曲司氯铵胶囊）和参比制剂（曲司氯铵片）中曲司氯铵的主要药动学参数分别为：Cmax为（9．8±4．1），（9．0±4．1），（9．6±4．2）μg·L^-1,tmax为（3．4±0．6），（3．2±0.5），（3．3±0．6）h；AUC（0→24）为（72.5±39．6），（69．0±32．2），（71．1±35．4）μg·L^-1·h。与参比制剂相比，试验制剂Ⅰ的相对生物利用度为（101．8±14．9）％；试验制剂Ⅱ的相对生物利用度为（98．0±6．0）％。方差分析结果表明两种试验制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异，双单侧t检验结果表明两种试验制剂与参比制剂为生物等效制剂。结论：该方法简单，准确度高，灵敏度好，可用于曲司氯铵体内过程研究。2种试验制剂与参比制剂互为生物等效制剂。     

HPLC-MS-MS测定人血浆中的甘草次酸及生物利用度

目的建立人血浆中的甘草次酸的HPLC-MS-MS测定法,研究复方甘草甜素制剂的相对生物利用度。方法以雷尼替丁为内标,血浆样品液液萃取后,经BDS Hypersil C18柱分离,采用质谱检测器检测。18名健康男性志愿者采用随机交叉方式分别单次口服复方甘草甜素制剂A、B或C各7 5 mg,在不同时间点取血,样品以新建立的HPLC-MS-MS法测定,研究比较3种制剂的药动学及相对生物利用度。结果甘草次酸在浓度2.0~200.0μg.L-1与峰面积比线性良好,最低定量浓度为2.0μg.L-1。方法回收率为97.2%~108.0%,日内精密度(RSD)<4.2%,日间精密度(RSD)<8.9%。单剂量口服复方甘草甜素片A、B或胶囊C 75 mg后3种制剂的Cmax分别为(130.4±40.3)、(132.1±43.6)、(128.6±44.7)μg.L-1;tmax分别为(3.5±0.5)、(3.3±0.5)、(3.4±0.5)h;AUC0~48分别为(2 097.6±744.8)、(2 037.0±894.9)、(2 075.0±734.0)μg.h.L-1;t1/2分别为(6.0±2.1)、(5.9±1.5)、(5.7±2.1)h。结论该方法选择性好,灵敏度高,可用于甘草次酸的体内过程研究。药动学参数经方差分析表明A、B和C中甘草次酸的主要药动学参数之间均无显著差异,双单侧t检验结果表明3制剂为生物等效制剂。     

阿普洛韦片在人体内的相对生物利用度和生物等效性

目的;比较两种阿昔洛韦片剂的相对生物利用度及生物等效性.方法:8例男性健康受试者自身交叉对照、草剂量Po阿昔洛韦受试片或参比片各400mg.采用HPLC法测定血浆阿昔洛韦浓度、单室模型拟合药物动力学参数,数据经对数转换后进行双单侧检验评价生物等效性.结果:阿昔洛韦受试片和参比片的t_max、c_max、AUC相比较,P均>0.05,阿昔洛韦受试片的相对生物利用度为(104.49土18.06)%.结论:阿昔洛韦受试片和参比片生物等效.     

国产和进口盐酸格拉司琼片人体药物动力学和相对生物利用度

目的比较国产和进口盐酸格拉司琼片(Gra)的药物动力学和生物利用度.方法按照随机交叉试验方法研究了国产及进口Gra片在9名男性自愿者中的药物动力学和相对生物利用度.po单剂量2mg上述两种制剂,采用HPLC-荧光检测法测定给药后不同时间的血药浓度.结果国产片和进口片的tmax分别为(1.45±0.98)和(1.29±0.52)h;cmax分别为(7.23±1.94)和(6.78±2.86)ng/ml;T1/2分别为(5.33±2.65)和(5.43±2.32)h;Vd分别为(236.3±79.25)和(308.8±154.9)L;CL分别为(30.7±5.2)和(39.4±5.7)L/h;MRT分别为(6.41±2.10)和(6.73±1.75)h;AUC0→∞分别为(70.55±50.19)和(68.09±42.68)ng*h/ml.经配对t检验上述参数差异均无显著意义(P＞0.05).国产片相对于进口片的生物利用度为(102.45±16.91)%.结论2种制剂具有生物等效性.     

吲哒帕胺片在健康人体内的药物动力学及相对生物利用度

目的研究吲哒帕胺片在健康人体内的药物动力学及相对生物利用度。方法双周期交叉实验设计，采用液相色谱-串联质谱法测定了18名健康男性受试者口服吲哒帕胺片受试制剂和参比制剂后不同时间全血中吲哒帕胺的浓度，绘制了血药浓度-时间曲线并计算主要药动学参数。结果全血中吲哒帕胺的tmax分别为（2．9±1．3）和（3．1±1．1）h，Gmax分别为（386．9±104．6）和（365．5±104．7）μg·L^-1，t1/2分别为（16．2±3．4）和（15．2±2．3）h。用梯形法计算，AUC0～t分别为（7960．9±2278．2）和（7592．6±2222．2）μg·h·L^-1，AUC0～∞分别为（8689．5±2542．5）和（8185．8±2482．3）μg·h·L^-1以AUC0～t计算，吲哒帕胺片的相对生物利用度为106．2％±13．1％。结论吲哒帕胺两制剂具有生物等效性。     

吉非罗齐片和胶囊在健康人体内药物动力学和相对生物利用度比较

目的:测定吉非罗齐的体内过程,作出相对生物利用度评价,为临床合理用药提供依据.方法:8名健康受试者交叉口服单剂量古非罗齐片和胶囊后,用HPLC法测定不同时间的血药浓度,经MCPKP软件拟合处理,并计算药物动力学参数.结果:吉非罗齐片和胶囊均符合开放一室模型,T_(max),C_(max),AUC_(0～∞)分别为(1.61±0.49)和(1.66±0.47)h,(37.28±9.71)和(29.97±5.58)μg/ml;(128.48±24.36)和(119.55±19.48)μg/(h·ml).结论:吉非罗齐片剂对胶囊剂的相对生物利用度为107.26%.     

氯雷他定片的人体相对生物利用度

目的研究氯雷他定片在健康人体内的相对生物利用度.方法18名健康男性志愿者按随机交叉试验设计口服单剂量受试制剂和参比制剂40mg,用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法测定血药浓度,NDSr程序作统计学处理.结果受试制剂和参比制剂在血浆中的cmax分别为(51.05±23.16),(47.55±20.22)μg·L-1;tmax分别为(1.35±0.35),(1.44±0.53)h;T1/2分别为(13.16±5.20),(13.25±4.08)h;AUC0→36h分别为(135.27±62.82),(130.59±55.58)μg·h·L-1.主要药动学参数AUC0→36h,tmax,cmax经方差分析均无显著性差异.以AUC0→36h计算,受试制剂的相对生物利用度为(103.5±24.7)%.结论2种制剂具有生物等效性.     

司帕沙星片在健康人体的药动学和生物等效性研究

目的建立HPLC内标法测定血浆中司帕沙星含量,并研究司帕沙星片的相对生物利用度及生物等效性。方法 20名健康志愿者分2组,随机、交叉口服试验制剂与参比制剂的司帕沙星片0.4 g,测定其血药浓度,计算药物动力学参数及生物等效性评价。结果试验制剂与参比制剂血浆中司帕沙星的tmax为(4.68±0.44)和(4.55±0.51)h;Cmax为(1 560.4±243.9)和(1 584.1±273.9)ng.mL-1;t1/2为(20.92±4.85)和(19.81±3.75)h;用梯形法计算AUC0-t为(43 325±12 174)和(44 139±11 815)ng.h.mL-1;AUC0-∞为(45 452±12 884)和(45 999±12 629)ng.h.mL-1。以AUC0-t计算,试验制剂的平均相对生物利用度为(97.9±5.8)%。结论该法操作简便,快速灵敏,可用于测定血浆中的司帕沙星浓度;司帕沙星的两制剂具有生物等效性。     

盐酸倍他洛尔片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度

目的研究盐酸倍他洛尔（抗高血压药）在健康人体内药代动力学和相对生物利用度。方法18名男性健康受试者单剂量交叉口服盐酸倍他洛尔片进口制剂和被试制剂40mg后，用高效液相色谱-荧光法测定不同时间血药浓度。所得药-时数据经3P97软件处理。结果2制剂药-时曲线均符合-房室开放模型，tmax分别为（4．6±1．4），（4．1±1．1）h；Cmac分别为（51．45±9．21），（53．69±10．58）μg·L^-1；t1／2kc分别为（17．16±2．27），（16．47±2．80）h；AUC0-60h分另0为（1007±165），（1145±218）μg·h·L^-1；AUC0-∞分别为（1165±214），（1281±250）μg·h·L^-1。与进口制剂相比，国产制剂的相对生物利用度F0-t为（89．4±15．0）％，F0-∞为（92．6±18．0）％。结论2种制剂具有生物等效性。     

氟康唑两种分散片与胶囊在健康人体的相对生物利用度

目的研究氟康唑两种分散片与胶囊的人体生物利用度和药动学特征。方法18名健康男性志愿者随机分成六组,每组3人,采用三周期随机交叉试验设计,分别单剂量口服氟康唑分散片(T1:50mg/片,T2:150mg/片)或氟康唑胶囊(50mg/粒,R)后不同时间点采血,血样中氟康唑浓度以HPLC-UV测定。结果T1,T2与R的主要药动学参数分别为:tm ax(1.4±0.5),(1.4±0.4)和(1.6±0.3)h;Cm ax(7.949±1.653),(8.294±2.160)和(7.882±1.816)mg.L-1;AUC0→96(242.5±69.8),(262.8±88.0)和(242.1±67.2)mg.h.L-1;t1/2(28.1±7.9),(28.8±11.1)和(28.5±7.9)h。以胶囊剂为参比制剂,2种分散片的相对生物利用度分别为(101.2±16.4)%(T1)和(108.0±14.2)%(T2)。药动学参数经多因数方差分析显示周期间与制剂间差异均无显著意义(P>0.05),双单侧t检验表明接受T1,T2与R生物等效的假设,经计算90%置信区间均在规定值内。结论:分散片与胶囊剂体内规律无明显差异,T1,T2与R为生物等效制剂。