姜黄素对脓毒症急性肺损伤的炎性反应及Notch2/Hes-1通路的影响

目的探讨姜黄素对脓毒症急性肺损伤的炎症反应及对Notch2/Hes-1通路的影响。方法36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组及姜黄素干预组。HE染色观察各组大鼠肺组织病理学改变;测量各组大鼠肺组织湿/干重(W/D)比。酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平;采用免疫组织化学方法与Western blot方法检测各组大鼠肺组织Notch2与Hes-1蛋白的表达。结果LPS诱导的急性肺损伤大鼠肺组织严重出血且有明显的炎性细胞浸润,血清TNF-α与ICAM-1水平显著升高;而给予姜黄素干预后,急性肺损伤大鼠肺组织炎性明显减轻,血清TNF-α与ICAM-1水平显著降低(P<0.01)。免疫组织化学结果与Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Notch2与Hes-1蛋白表达的平均光密度值显著升高(P<0.01);而给予姜黄素干预后,急性肺损伤大鼠肺组织Notch2与Hes-1蛋白表达的平均光密度值显著降低(P<0.01)。结论姜黄素能够减轻脓毒症急性肺损伤大鼠的炎性反应,其机制可能与Notch2/Hes-1通路相关。     

三七总皂苷通过Notch3/Hes-1/p27Kip1信号通路抑制低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构

目的：探讨Notch3/Hes-1/p27^Kip1信号通路与低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构的关系及三七总皂苷(PNS)的干预作用。方法：将SPF级雄性SD大鼠采用随机编号分为3组：正常组(C组),低氧组(H组)和PNS组(P组),检测肺动脉压,称量右心室重量,HE染色和Masson染色观察肺血管重构情况,RT-qPCR检测大鼠肺组织中Notch3、Hes-1和p27^Kip1的mRNA表达水平,Western blot检测大鼠肺组织中Notch3、Hes-1、p27^Kip1,增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的蛋白水平。结果：与C组相比,H组大鼠的肺动脉压和右心室肥厚指数明显增加;肺血管重构现象明显;Notch3、Hes-1和PCNA的蛋白水平增加,p27^Kip1和caspase-3的蛋白水平降低;Notch3和Hes-1的mRNA表达增加,p27^Kip1的mRNA表达降低(P<0.05)。经PNS干预后,与H组相比,P组大鼠的肺动脉压和右心室肥厚指数降低;肺血...     

葛花总黄酮通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨葛花总黄酮(total flavonoids of Pueraria lobate,TFF)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的影响及机制.方法 雄性SD大鼠60只,利用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型.糖尿病大鼠随机分成三组:糖尿病组(DM)、TFF组(200 mg/kg)及二甲双胍组(Met,75 mg/kg,阳性对照)灌胃治疗,另取15只正常大鼠作为对照组(CON).12周后,检测各组大鼠血糖、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;HE染色检测大鼠RGC数量,免疫组织化学染色及Western blot检测大鼠视网膜ECH相关蛋白1(ECH-associated protein 1,Keap1)、核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor-2,Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达.结果 与CON组相比,DM组血糖、MDA含量、Keap1及Nrf2表达明显增加,SOD活性及HO-1表达明显下降.而经过12周治疗后上述表现均有明显改善.结论 TFF通过降低血糖,增强大鼠视网膜的抗氧化能力,保护糖尿病状态下的RGC损伤,与调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路有关.     

NgR/NR2B信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响

目的:探讨Nogo受体(NgR)在糖尿病视网膜病变中的作用及下游分子机制。方法:雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,糖尿病大鼠玻璃体腔内注射病毒包装的NgR反义核苷酸序列(siNgR组)、阴性核苷酸序列(scRNA对照组)或空白病毒液(糖尿病组),玻璃体腔内注射空白病毒液的正常SD大鼠为正常对照组。3个月视网膜HE染色,观察视网膜神经层厚度及节细胞密度的变化,免疫荧光组化检测NgR及其下游分子N-甲基-D-天门冬氨酸2B受体(NR2B)在视网膜神经节细胞内的共存情况,Western Blot检测NgR及NR2B在视网膜内的表达。结果:与正常对照组相比糖尿病组及scRNA对照组视网膜明显变薄、神经节细胞密度降低,siNgR组无明显变化。NgR与NR2B均表达于视网膜节细胞层,二者在视网膜神经节细胞内大量共存。与正常对照组相比,糖尿病组、scRNA对照组视网膜NgR及NR2B表达均明显增加(P0.01),而siNgR组NgR及NR2B表达均无明显变化。结论:NgR/NR2B信号通路激活可能是糖尿病大鼠RGC数量减少的重要原因之一。     

Notch/JNK信号在低氧致大鼠皮层神经元损伤中的作用研究

目的:探讨Notch1/JNK信号通路在缺氧引起的神经元损伤中的作用。方法:原代培养新生SD大鼠皮层神经元,利用低氧条件培养建立缺氧模型。利用CCK-8实验检测在低氧诱导的不同时间,神经元的活性及siRNA干扰后神经元的活性;利用RT-q PCR与Western Blot检测对照组与低氧组神经元中NICD,p-JNK,Caspase-3mRNA与蛋白的表达情况;利用siRNA转染技术转染Notch1 siRNA或JNK siRNA至神经元中后,利用Western Blot检测低氧组与转染组神经元中NICD,p-JNK,Caspase-3蛋白的表达情况。结果:缺氧情况下神经元活性较低,具有时间依赖性;缺氧情况下,神经元的NICD,p-JNK,Caspase-3 mRNA及蛋白的表达均显著升高。抑制神经元中Notch1的活性,可进一步抑制JNK,Caspase-3的表达,改善神经元活性。结论:缺氧导致神经元Notch1信号被激活,Notch信号调节JNK的磷酸化,磷酸化的JNK进一步促进Caspase-3的激活,从而降低神经细胞的活性或促进神经细胞的死亡。     

原花青素对妊娠糖尿病大鼠胰腺组织MAPK/ERK信号通路的影响

目的 探究原花青素（PAC）对妊娠糖尿病（GDM）大鼠胰腺组织丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响。方法 将雌、雄性SD大鼠合笼交配（1∶2）,待成功妊娠后,随机将妊娠SD大鼠分为Ctrl组、GDM组、低、高剂量PAC组（L-PAC组、H-PAC组）、格列本脲（GLY）组,采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）溶液法建立GDM模型（Ctrl组除外）,检测各组糖代谢指标水平;观察各组胰腺组织病理学、胎鼠情况;检测各组胰腺组织氧化应激因子、炎性因子水平及MAPK/ERK信号通路蛋白表达情况。结果 与Ctrl组比较,GDM组空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）水平及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胎鼠体质量增加（P<0.05）;胰腺组织可见明显病理学改变且发生氧化应激反应及炎性反应;同时胰腺组织Raf1、MEK1/2、ERK1/2蛋白磷酸化水平增加（P<0.05）;经L-PAC、H-PAC、GLY干预后,上述情况均改善,且H-PAC、GLY改善效果更明显。结论 PAC能够改善GDM大鼠血糖水平及胰岛素抵抗,以及减轻胰腺组织氧化应激、炎症损伤...     

勿动蛋白受体对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响

目的探讨勿动蛋白受体(nogo receptor,NgR)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)SD大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用及可能机制。方法链脲佐菌素诱导SD大鼠DM模型,实验分4组:对照组,DM组,siNgR组(玻璃体内给予NgR反义核苷酸序列),siRNA空白组(玻璃体内给予阴性核苷酸序列)。1个月后TUNEL染色检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)凋亡,试剂盒检测视网膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测视网膜NgR及caspase-3含量。结果对照组、DM组、siRNA空白组及siNgR组MDA含量分别为3.69±0.51、7.18±0.87、6.52±1.27及3.08±0.48 nmol/mg prot。与对照组相比,DM组及siRNA空白组视网膜RGC凋亡增加,NgR及caspase-3表达上调,MDA含量升高(p0.05),而siNgR组视网膜RGC数量、NgR及caspase-3表达、MDA含量较对照组均无明显变化(p0.05)。结论 NgR过表达是糖尿病视网膜RGC凋亡的原因之一,其机制可能与NgR诱导视网膜氧化应激、上调caspase-3表达相关。     

原花青素对微波诱导视网膜神经节细胞凋亡的拮抗作用

目的： 探讨不同剂量的原花青素(procyanidin，PC)对微波致视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）损伤的拮抗作用。方法: 体外培养RGCs，将细胞随机分为6组，即不同PC剂量(0 μg/L 、2 μg/L、20 μg/L和40 μg/L)4个实验组及维生素C 40 μg/L组和对照组，分别给予频率为2 450 MHz、功率密度为30 mW/cm2的微波连续辐照1 h，对照组不给予辐照。光镜下观察辐照前后细胞形态学的改变，台盼蓝染色检测细胞存活率，应用流式细胞仪和DNA末端标记法(TdT-mediated-dUTP nick end labeling，TUNEL)定量检测细胞早期凋亡。结果: 微波辐照后，细胞即有聚集现象，部分细胞突起消失。辐照后0 h，20 μg/L和40 μg/L PC组较0 μg/L PC组的细胞凋亡率有所降低(P<0.05)；辐照后6 h和12 h，3个PC剂量组较0 μg/L PC组的细胞凋亡率都有降低(P<0.05)；辐照后18 h，只有40 μg/L PC组较0 μg/L PC组的细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论: 微波可诱导RGCs细胞凋亡，PC对此损伤具有一定的拮抗作用。     

傅山风湿外治方对CIA大鼠Notch1/Jagged1通路表达的影响

目的:研究傅山风湿外治方(FS-med)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠Notch1/Jagged1通路表达的影响.方法:本实验建立雌性Wistar大鼠CIA模型,通过FS-med外敷治疗,ELISA检测血清中IFN-γ、IL-4和IL-6的表达,qRT-PCR和Western blot分别检测大鼠关节中Notch1、...     

柚皮素通过调控AMPK/Nrf2/HO-1信号通路减轻糖尿病小鼠心肌损伤

目的:探讨柚皮素(naringenin,NAR)对糖尿病小鼠心肌的保护作用及对腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)信号通路的影响。方法:将50只C57BL/6小鼠随机分为正常组(N组)和模型组。模型组采用连续腹腔注射链脲佐菌素的方法建立1型糖尿病小鼠模型,成模后将其分为糖尿病组(D组)、低剂量NAR干预组(D+L-NAR组)、中等剂量NAR干预组(D+M-NAR组)和高剂量NAR干预组(D+H-NAR组),对干预组小鼠分别给予低、中、高剂量NAR灌胃,N组和D组给予与D+M-NAR组等体积的生理盐水灌胃。6周后处死小鼠,观察NAR对小鼠体重及血糖的影响;HE和Masson染色观察心脏形态学改变,测量心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);免疫组化观察心脏组织中白细胞介素6(interleukin...     

布托啡诺调节JAG1/Notch信号通路对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 研究布托啡诺对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响以及潜在机制。方法 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,CCK-8法检测不同浓度布托啡诺对MDA-MB-231细胞存活率影响；根据实验要求分为对照组、布托啡诺组、布托啡诺+pcDNA3.1组、布托啡诺+pcDNA3.1-JAG1组；EDU法检测细胞增殖能力；Transwell检测细胞迁移与侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡；平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力；RT-qPCR检测JAG1、Notch1 mRNA水平；Western blot检测JAG1、Notch1、Ki67、MMP2、cleaved-Caspase3蛋白水平。结果 选取10μmol/L布托啡诺处理细胞进行后续实验；与对照组相比，布托啡诺组MDA-MB-231细胞EDU阳性细胞率、迁移数量、侵袭数量、克隆集落数、JAG1、Notch1mRNA水平、JAG1、Notch1、Ki67、MMP2蛋白水平显著性降低，凋亡率、cleaved-Caspase3蛋白水平显著性升高（P<0.05）。与布托啡诺+pcDNA3.1组相比，布托啡诺+pcDNA3.1-JAG1组MD...     

豨莶草调控sirt1/FOXO1通路对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的:探讨豨莶草调控sirt1/FOXO1通路对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响。方法:SD大鼠随机分组为对照组、模型组、豨莶草(2 g/kg)组、尼克酰胺(NA,sirt1抑制剂,剂量:100 mg/kg)组、豨莶草+尼克酰胺组(豨莶草为2 g/kg,NA为100 mg/kg)。除对照组外,其余各组以改良伸直位固定法建立膝骨关节炎大鼠模型,按组别分别以药物处理后,测量各组大鼠膝关节宽度、被动活动度;检测各组大鼠压痛阈值、热痛阈值;以苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠膝关节软骨病理损伤情况,进行Mankin′s评分;以酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测各组大鼠血清中IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF-α)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平;以蛋白免疫印迹法检测各组大鼠膝关节软骨组织sirt1、FOXO1、acely-FOXO1蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠膝关节宽度、Mankin′s评分、血清中IL-1β、TNF-α及COMP水平、膝关节软骨组织中acely-FOXO1升高(P<0.05),膝关节被动活动度、压痛阈值、热痛阈值、膝关节软骨组织中sirt1蛋白表达降低(P&...     

ZBP-89通过HIF-1α/Notch1通路对肝癌干细胞干性的调控作用

目的 探究ZBP-89(Zinc-binding protein-89)通过HIF-1α/Notch1通路对肝癌干细胞干性的调控作用.方法 构建ZBP-89过表达慢病毒载体(Len-ZBP-89)并进行慢病毒包装,微球体培养法富集肝癌干细胞,流式细胞术检测细胞中EpCAM、CD133的表达,CoCl2(HIF-1α激活剂)处理肝癌干细胞,RT-PCR检测细胞中ZBP-89、HIF-1α和Notch1mRNA表达,Western blot检测细胞中ZBP-89、HIF-1α、Notch1、CD44、CD133和EpCAM蛋白表达,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,光学显微镜观察特征性肿瘤球体的形成.结果 Len-ZBP-89慢病毒包装成功,病毒滴度为1.32×109 TU/mL;肝癌细胞PLC/PRF/5中ZBP-89 mRNA和蛋白表达水平下调,HIF-1α和Notch1 mRNA和蛋白表达水平上调;PLC/PRF/5细胞成功富集肝癌干细胞PLC/PRF/5.C,PLC/PRF/5.C中EpCAM、CD133的表达水平均上调;Len-ZBP-89可下调PLC/PRF/5.C细胞中HIF-1α、Notch1、CD133、CD44和EpCAM的蛋白表达,下调细胞迁移、侵袭能力和特征性肿瘤球体克隆数量;CoCl2(HIF-1α激活剂)可上调PLC/PRF/5.C细胞中HIF-1α、Notch1、CD133、CD44和EpCAM的蛋白表达,上调细胞迁移、侵袭能力和特征性肿瘤球体克隆数量(P＜0.05);CoCl2处理可逆转Len-ZBP-89对PLC/PRF/5.C干性的抑制作用.结论 过表达ZBP-89通过抑制HIF-1α/Notch1通路抑制肝癌干细胞干性.     

淋巴瘤发病机制中Notch1的作用及研究进展

Notch信号通路是唯一一个通过两个相邻细胞间受体与配体相互作用进行信号传递的信号通路,该通路对哺乳动物体内一些重要发育过程及稳态维持具有重要意义,如细胞生长增殖、上皮细胞分化、血管生成以及免疫系统调节等。研究发现当Notch信号通路发生异常改变,尤其是Notch1受体蛋白表达异常时,可引起一些细胞或器官的肿瘤性改变。该文就Notch1在淋巴造血系统肿瘤中的研究进展作一综述,并展望Notch1可能作为相关疾病的治疗靶点。     

小檗碱对NAFLD大鼠肝组织氧化损伤及SIRT1/p53通路的影响

目的:研究小檗碱对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织氧化损伤及沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)/p53通路的影响,探讨小檗碱抗NAFLD的作用机制。方法:选用SPF级雄性SD大鼠24只,按随机数字表均分为正常组、模型组与小檗碱组,正常组给予基础饲料喂养,模型组及小檗碱组给予高脂饲料喂养,造模同时小檗碱组给予小檗碱(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌服。16周后处死大鼠并采集肝脏,检测肝组织中总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC);HE、油红O染色与透射电镜观察肝脏组织学的改变;Western blot检测大鼠肝组织SIRT1、p53及乙酰化p53(Ac-p53)蛋白水平。结果:与模型组相比,小檗碱组大鼠肝组织TC、TG和MDA含量水平显著降低(P0.05或P0.01),而SOD活力和T-AOC显著升高(P0.01);组织学结果也观察到小檗碱组大鼠肝脏脂质蓄积状态明显减轻;小檗碱组肝组织SIRT1蛋白表达水平较模型组显著上调(P0.05),Ac-p53蛋白表达水平下调(P0.05)。结论:小檗碱能减轻高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪变性和氧化应激损伤,其作用机制可能是通过上调SIRT1蛋白的表达,从而抑制p53的乙酰化。     

Notch1信号通路参与自身免疫性疾病发病机制的研究进展

自身免疫性疾病是一类免疫应答紊乱致使免疫系统对自身抗原产生攻击的疾病。一般分为器官特异性自身免疫性疾病和系统性自身免疫性疾病,前者主要引起机体某特定器官的自身免疫反应,而后者则常引起多系统、多器官损害,如RA、SLE、银屑病等自身免疫性疾病。近年来越来越多的研究证明,Notch1信号通路通过调节细胞发育、增殖、分化等在RA、SLE、银屑病、EAE、强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)等自身免疫性疾病中发挥重要作用。文章重点对Notch1信号通路与自身免疫性疾病的研究进展进行综述。     

持续高眼压对大鼠视网膜神经节细胞的损伤

目的 观察持续高眼压对大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）的损害。方法 烙闭大鼠上巩膜静脉,制作大鼠持续性高眼压模型,分时点摘取眼球,光镜及TUNEL法观察大鼠视网膜各层厚度变化和RGCs凋亡率,电镜观察RGCs超微结构变化。结果 随着高眼压时间持续,视网膜神经节细胞及纤维层逐渐变薄,节细胞及轴突的超微结构呈进行性损害,神经节细胞的细胞凋亡率增加。结论 持续高眼压导致大鼠RGCs的病理改变过程及其结果符合青光眼视神经损伤的病理特点。     

白皮杉醇通过激活Nrf2/HO-1通路减轻糖尿病大鼠视网膜氧化应激反应

目的 探讨白皮杉醇对糖尿病大鼠视网膜的影响及机制.方法 雄性SD大鼠30只,按60 mg/kg腹腔一次性注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病模型.模型诱导成功后,糖尿病大鼠随机分成三组:糖尿病组、白皮杉醇组(200 mg/kg)及二甲双胍组(75 mg/kg,阳性对照)灌胃治疗,另取10只正...