HAART治疗儿童的HIV-1基因型耐药变异情况

目的研究我国某地区HAART治疗的儿童HIV-1基因型耐药变异情况,为临床治疗HIV-1感染儿童提供参考实验室参考数据。方法利用RT-PCR和套式PCR从20例HAART治疗失败的HIV-1感染儿童的血浆中提取的病毒RNA扩增HIV-1逆转录酶基因（RT）第40-250位氨基酸,直接将PCR产物进行序列测定分析,利用斯坦福大学网站提供的HIVdb数据库分析该两个区域的耐药基因变异情况。结果（1）20例患儿根据RT区基因分型结果显示均为B亚型;（2）分别有20、15、13例患儿对NVP、DLV和EFV产生了高度耐药;分别有7例、5例患儿对AZT产生了高、中度耐药;有5例患儿对3TC产生了从潜在低度一中度耐药突变,而有11例患儿出现了高度耐药突变;针对d4T、ddI的中、高度耐药共占11／20;此外,19例患儿出现了针对从未服用的ABC的不同程度的耐药突变,12例患儿出现了针对TDF的不同程度的耐药突变。结论HIV-1耐药突变株的出现是儿童抗病毒治疗失败的主要原因之一。对于正在抗病毒治疗中的HIV-1患儿,应及时进行耐药变异监测,及早发现耐药变异。及时改变抗病毒治疗药物以达到真正的病毒抑制效果。     

江苏省抗病毒治疗者HIV-1基因耐药性及影响因素的分析

目的:了解江苏省抗病毒治疗患者HIV-1毒株的耐药性及其影响因素?方法:以2010年4月底仍在抗病毒治疗的AIDS患者为研究对象,采用横断面调查法和基因型耐药分析法对调查者进行耐药性分析?结果:共591名研究对象被纳入本研究分析?HIV-1毒株总耐药率为8.46%?治疗时间?病程和近期治疗方案NVP+AZT+3TC是HIV-1 耐药毒株产生的危险因素?结论:江苏省抗病毒治疗患者耐药率处于较低水平,但耐药突变多样化,出现多重耐药现象,应多关注病程和治疗时间较长的患者,增加病毒载量检测和耐药检测的频率,以尽早发现耐药情况,尽快选择适当的治疗方案,可能有利于降低耐药毒株的发生?     

宁夏艾滋病抗病毒治疗患者HIV-1基因耐药性结果分析

目的 了解宁夏HIV抗病毒治疗者HIV-1基因耐药性情况.方法 以2011年6月末仍在进行HIV抗病毒治疗的AIDS患者为研究对象,采用基因型耐药检测方法,分析HIV-1耐药结果.结果 共84例AIDS患者被纳入本研究分析,总耐药率为5.9%.结论 宁夏HIV抗病毒治疗患者耐药处于较低水平,应多关注治疗时间较长的患者,增加病毒载量检测和耐药检测的频率,以尽快选择适当的治疗方案,可能有利于降低耐药毒株的发生.     

深圳地区新近诊断HIV-1感染者的传播耐药性检测

目的:通过对深圳地区人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)新近感染者耐药基因型的研究,了解当地HIV-1耐药株传播水平。方法:收集198例2009年3月～2011年10月新确诊的、年龄>20岁的HIV-1感染者的血浆样本,使用一步法RT-PCR和巢式PCR扩增Pol区蛋白酶基因全长(1～99aa)和逆转录酶区前部分基因(1～300aa),并进行耐药基因变异分析。结果:PCR扩增阳性且测序成功163例,总的耐药比例为17.2%(28/163,95%CI 11.4%～22.9%),其中3.7%(6/163,95%CI 1.1%～6.5%)对蛋白酶抑制剂(PIs)耐药,10.4%(17/163,95%CI 5.7%～15.1%)对核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)耐药,11.7%(19/163,95%CI 6.8%～16.6%)对非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)耐药。结论:深圳地区HIV-1新近感染者中耐药率高达17.2%,对新近HIV-1感染者进行连续耐药性检测是有必要的。     

重庆市新确证HIV-1感染者传播性耐药突变研究

目的 通过对重庆市新确证人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者耐药基因型的研究,了解我市耐药病毒株的传播水平.方法 采集2014年5月至2017年6月我院新确证未治疗的HIV-1感染者的外周血175例,分离血浆后,使用一步法RT-PCR和巢式PCR扩增HIV-1 pol区的基因,PCR产物经纯化后测序,将获得的基因序列与美国雅培公司的耐药数据库对比,得出患者对药物的耐药性解释.结果 PCR扩增阳性且测序成功168例,发现16例患者存在耐药突变,传播性耐药突变检出率达9.5％ (16/168),其中2014-2017年的耐药比例分别为7.0％、8.0％、9.1％、12.5％,属中度流行.非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)、核苷类反转录酶抑制剂(NRTIs)和蛋白酶抑制剂(PIs)耐药突变率分别为9.5％、2.4％和0％.V179D/E(7.1％)和M184V(2.4％)分别是出现最多的NNRTI和NRTI耐药突变位点.168例感染者中,CRF07_BC亚型是主要流行亚型(42.8％),其次为CRF01_AE (38.7％)和CRF08_BC亚型(10.1％).结论 重庆市新确证未治疗HIV-1感染者耐药比例有逐年上升的趋势,应加强监测,预防原发性耐药和耐药毒株的传播.     

江苏省HIV耐药警戒线的调查

目的:了解江苏省开展艾滋病抗病毒治疗以来,耐药毒株的传播情况和亚型分布?方法:通过横断面调查,采集17~25岁HIV-1感染者的全血样品,测定HIV-1pol区编码蛋白酶和逆转录酶基因的序列,提交到斯坦福大学HIV在线耐药数据库中鉴定耐药位点?用MEGA4.0软件构建进化树,分析亚型?结果:47份样品中,没有发现HIV-1的耐药株?共有CRF01_AE?B?CRF07_BC和CRF08_BC 4种亚型流行,CRF01_AE是主要流行的亚型,占59.6%,其次为B亚型,占25.5%?结论:江苏省还未发现耐药株的传播,个体治疗前尚不需要进行耐药性检测?在江苏省流行的HIV-1亚型与2006年相比,已经发生了显著变化,为掌握目前江苏省HIV-1的亚型分布,应对近2年发现的HIV感染者进行分子流行病学研究?     

南宁市静脉注射吸毒人群HIV-1基因亚型及耐药性分析

目的 了解南宁市静脉注射吸毒人群（IDUs）中HIV-1流行基因亚型及其耐药性,为辖区艾滋病防治策略制定提供科学依据。方法 收集2017年南宁市静脉注射吸毒人员HIV感染者血浆样本总共68份,提取病毒核糖核酸(RNA),通过巢式PCR对HIV pol基因片段进行扩增测序,构建系统进化树进行基因分型,并将序列提交至美国斯坦福大学HIV耐药数据库分析,利用pol基因测序结果分析HIV-1亚型和耐药性情况。结果 68份血浆样本中巢式PCR成功扩增基因片段62份,系统进化分析显示检出3种HIV-1重组基因亚型, CRF_01-AE亚型占72.6% (45/62)、CRF_07-BC亚型占12.9% (8/62)、CRF_08-BC亚型占14.5% (9/62) ,CRF01_AE 型为主要流行亚型。χ²检验分析显示在性别、年龄、民族、婚姻4个人口学特征中62份样本HIV-1亚型组成差异无统计学意义（P>0.05）。62份样本中3例CRF_08-BC亚型发现T69S耐药突变,1例CRF_01-AE亚型发现L210W突变,1例CRF_07-BC亚型发现A71V突变。结论 南宁市IDUs人群HIV-1感染者中至少存在3种HIV-1基因亚型流行,CRF_01-AE重组型为优势流行株,研究中出现的耐药突变位点为低度耐药突变位点,应密切监视其流行趋势。     

感染HIV-1儿童经抗病毒治疗后乳酸浓度检测及其相关因素研究

目的研究中国感染艾滋病毒(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)儿童经抗病毒治疗后血浆乳酸浓度及相关影响因素。方法选择31例抗病毒治疗的感染HIV-1儿童与30例正常对照儿童,检测血浆乳酸浓度,结合儿童的基本信息、治疗方案及实验室检测结果进行综合分析。结果感染HIV-1患儿血浆乳酸浓度(2.32±0.60)mmol/L显著高于对照组儿童(1.60±0.88)mmol/L(P<0.01);d4T治疗组和AZT治疗组间血浆乳酸浓度、基线CD4+T淋巴细胞计数、基线病毒载量、性别、年龄以及HIV-1传播途径差异均无统计学意义(P>0.05)。结论外周血乳酸浓度可反映感染HIV-1儿童经抗病毒治疗后的线粒体毒性,有望成为线粒体毒性检测指标。     

江苏省连续3年HIV-1耐药警戒线及流行亚型的调查研究

目的:了解江苏省艾滋病新近感染者在开展艾滋病抗病毒治疗以来HIV-1耐药株的传播水平及亚型分布情况?方法:采用WHO的截断序贯抽样法,连续3年在江苏省部分地区采集16~25岁HIV-1新近感染者的血样本各65?66和49例,提取病毒RNA,采用RT-PCR和巢式PCR扩增HIV-1pol区片段并测定pol区编码蛋白酶和逆转录酶基因的序列,提交到斯坦福大学HIV在线耐药数据库中鉴定耐药位点?用MEGA4.0软件构建进化树,分析亚型?结果:根据采样时间对样本排序,2009—2010年前47例未检出耐药样本数,2011年第28个序列出现1例耐药传播相关的耐药突变,后续一直到第44例均未有耐药样本出现,按传播水平判别表,属HIV耐药株的低度传播水平,采集的样本按pol区分型,2009?2010?2011年调查对象成功获得序列的前47例(2011年为44例)的亚型结果看,亚型以CRF01_AE为主,分别占40.40%?46.80%和56.80%,其次为CRF07_BC,分别为29.80%?25.50%?27.30%,其余还有CRF08_BC?C?B?URFA/B?结论:2009—2011年江苏省HIV-1新近感染者中HIV-1耐药株传播水平属低度,主要亚型流行情况与2006年本省调查结果类似,但与2003年前调查的HIV-1流行亚型比还是发生了显著变化?     

河南省艾滋病流行区HIV共感染HBV和HCV状况分析

目的:了解河南省艾滋病流行区艾滋病病毒(HIV)共感染乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)状况.方法:首先用Combas Amplicor HIV-1病毒载量检测法对从我省HIV某高发县采集的由输血感染HIV-1的130份血样进行定量测定.挑选出HIV-1病毒载量4.28×102拷贝/mL以上的血浆样本81份,同时收集30份HIV-1阴性健康体检者血浆作为对照,再用巢式PCR法对以上样本进行HBV和HCV测定.结果:81份HIV-1阳性样本中HBV阳性32份(39.5%),HCV阳性72份(88.9%);同时感染HBV和HCV的样本为7份(8.6%).30份HIV-1阴性对照组中,HBV阳性7份(23.3%),与HIV-1阳性组间比较差异无统计学意义(x2=2.51,P>0.05);HCV阳性4份(13.3%),与HIV-1阳性组间比较差异有统计学意义(x2=57.88,P<0.05);HIV-1阴性对照组中未检测出HBV和HCV共感染样本,与HIV-1阳性组相比差异无统计学意义(x2=2.77,P>0.05).结论:经输血感染HIV的患者具有共感染HCV的倾向;对以上途径感染HIV的患者,在进行HIV治疗时应同时进行HBV和HCV检测,阳性者应在治疗HIV-1的同时给予抗HBV和HCV治疗.     

江西省HIV-1流行现状、治疗与耐药的研究进展

江西省是低HIV-1流行地区，自1994年报道首例艾滋病例以来，HIV-1感染人数增长较为缓慢。2006年后，HIV-1感染人数逐年增长，现江西省已全面推行免费的抗逆转录病毒治疗，但HIV-1疫情仍在蔓延，防控形势日益严峻。本文从HIV-1流行现状、传播途径、感染人群、治疗与耐药和流行亚型等方面综述其动态变化特征和发展趋势，以期为江西省HIV-1的基础研究和预防控制提供一定的理论指导。     

江苏省艾滋病患者HIV-1耐药株的流行及影响因素研究

目的:了解江苏省艾滋病患者的耐药性,并探讨其影响因素?方法:以正在接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究对象,整群抽取了1 022人,对其进行问卷调查和血液采集,采用基因型耐药分析法对其进行耐药性检测?结果:共877名研究对象被纳入分析,人类免疫缺陷病毒(HIV-1)毒株总耐药率为6.50%?CD4水平低?独居?收入水平低?感染时间长?抗病毒治疗时间长和最近1个月出现HIV相关临床症状等因素是HIV-1耐药毒株产生的危险因素?结论:江苏省抗病毒治疗人群目前耐药率处于较低水平,但耐药个体核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)和非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)双重耐药突出;应多关注病程较长?抗病毒治疗时间较长?身体免疫状况较差?收入水平较低?居住状况不稳定的患者,增加CD4检测和耐药检测的频率,以尽早发现耐药情况,降低耐药毒株的发生和传播,提高抗病毒治疗的疗效,进而减少艾滋病患者的死亡?     

分娩期使用奈韦拉平及母体对奈韦拉平抗病毒治疗的反应

背景:分娩期给予单剂量奈韦拉平阻断HIV母婴传播可引起选择性耐药突变。奈韦拉平对孕妇的治疗是否具有重要的临床意义仍不清楚。方法:随机选择1844例妊娠晚期接受齐多夫定治疗的泰国孕妇接受奈韦拉平或安慰剂治疗。产后269例血CD4+T细胞计数低于250个/ml的妇女接受奈韦拉平抗病毒治疗。产后10d采集血浆样本以分析耐药性突变。分别于治疗前和治疗后的3个月、6个月检测血浆HIV-1RNA。结果:治疗后6个月,49%分娩时接受奈韦拉平治疗的妇女每毫升血中HIV-1RNA少于50个拷贝,而未接受分娩时奈韦拉平治疗的妇女中有68%出现类似情况(P=0.03)。…     

HIV基因分型以及耐药性的研究进展

人类免疫缺陷症病毒（ HIV）是艾滋病的主要致病因子,无论是无症状HIV感染者还是有症状的艾滋病患者,都有持续的HIV复制[1]。体内的HIV病毒每天进行着107~108次病毒复制,约产生1010新的病毒颗粒。 HIV基因组由将近1万个核苷组成,由于HIV酶缺乏纠错能力,每天至少有104~105子代HIV出现单位点突变。检测结果证实,在尚未开始抗病毒治疗的感染者体内已存在耐药变异。美国和西欧最新研究报道,10.7%~27.6%的新感染者为HIV-1耐药株感染,耐药变异是导致临床抗病毒治疗失败的主要原因[2]。全国流行病学调查结果显示,中国是HIV-1基因亚型最多的国家之一[3]。 HIV-1基因亚型分析在HIV-1的分子流行病学调查、诊断、临床和药物治疗及其疫苗研制等方向均有重要作用[4]。     

HIV-1侵入抑制剂的研究进展

靶向于人类免疫缺陷病毒-1型（HIV-1）粘附、辅助受体衔接和融合等过程的抗病毒剂,均可作为侵入抑制剂,是新出现的颇具前景的治疗HIV-1感染的治疗药物。病毒的进化和耐药株的出现,在任何HIV-1新疗法的研发过程中仍将是需要重点考虑的问题。侵入抑制剂的研发面临的唯一挑战就是HIV-1包膜蛋白（Env）较高的变异性和柔性。本文主要介绍了处于临床前研究、临床试验或临床应用早期阶段的各种侵入抑制剂及其临床应用情况,以及影响其抗HIV-1效能的可能性因素。     

我国艾滋病流行近况分析

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)及其病原体——人类免疫缺陷病毒(HIV),在不同的国家、地区有不同的流行特征。了解HIV-l基因亚型的流行特点及其地域分布,对HIV-1的传播及其流行模式、病毒耐药研究和疫苗研发均具有重要意义。本文综述了近年来HIV/AIDS及HIV-1各亚型在我国的流行状况,为进一步研究HIV-1分子流行病学及HIV/AIDS的防治提供依据。     

抗病毒治疗失败的艾滋病患者HIV-1基因型耐药变异的研究

目的 了解高效抗逆转录病毒治疗(HAART)失败的艾滋病患者HIV-1基因型耐药变异的情况,为临床治疗提供实验室参考数据.方法 收集2008年1月至2009年12月在深圳市第三人民医院接受HAART治疗失败的41例艾滋病患者的血浆,采用RT-PCR和套式PCR从血浆中提取病毒RNA,扩增目的基因片段,并对其进行序列测定和分析.结果 共获得38例抗病毒治疗失败者的基因序列,其中有3条序列显示无变异位点,在其他出现耐药变异的序列中K103N、G190A、Y181C、K101P、M184V、D67N、K70R、T215Y及K219R为最常见的变异位点;100%(35/35)治疗失败患者出现了对非核苷类逆转录酶抑制剂NVP或EFV的高中度耐药,超过50%的患者出现了对临床上目前常用的核苷类逆转录酶抑制剂AZT、3TC、IMT及DDI的高中度耐药,仅发现极少数治疗失败患者对蛋白酶抑制剂的高中度耐药;D4T+DDI+NVP治疗方案是最常见出现耐药的治疗组合;病毒耐药变异往往发生在抗病毒治疗后的2～3年.结论 HIV耐药变异株的出现是艾滋病患者临床上抗病毒治疗失败的主要原因,目前引起耐药突变主要是针对NNRTIs或NRTIs药物耐药,而对Pis的耐药在临床上尚比较少见,建议更换治疗组合时多考虑选用含有增强作用的Pis,从而达到更好地病毒抑制效果.     

获得性免疫缺陷综合征患者抗病毒治疗后耐药基因变异分析

3例人类免疫缺陷病毒（HIV）-1阳性患者。采集血浆，设计针对HIV-1全长蛋白酶基因和部分逆转录酶基因（40-250aa）引物，RT—PCR法扩增模板RNA，PCR产物序列测定后，用HIVdb软件进行HIV-1耐药突变相关位点的分析；流式细胞术检测患者外周血CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞数，核酸序列扩增实验（NASBA）进行外周血病毒负荷的测定。     

HIV-1基因PR区和RT区基因耐药突变检测之PCR-测序法的建立与评价

目的应用巢式PCR和Sanger测序技术,建立一种人类免疫缺陷病毒(HIV)-1 pol基因蛋白酶(PR)区及逆转录酶(RT)区耐药突变检测的方法。方法根据HIV-1 pol基因保守区域设计特异性的2对扩增引物和6条测序引物,使用巢式PCR特异性扩增HIV-1 PR区以及RT区耐药突变基因序列,进而对靶标基因区域进行双向Sanger测序检测,实现了HIV-1基因PR区和RT区基因耐药突变检测的高灵敏性、特异性、准确性。结果本研究所建立的针对HIV-1 pol基因PR区和RT区耐药突变的检测方法,巢式PCR结果经琼脂糖凝胶电泳鉴定有清晰、单一条带,符合扩增产物大小,其Sanger测序检测的HIV-1 PR区以及RT区耐药突变基因序列分析结果与HIV-1耐药性分析国家参考品一致。灵敏度:1×103copies/mL浓度的标准品重复测20次,检出率为100%;突变率检测:20%突变率的样本20个重复检测均100%为突变型;特异性验证:检测HBV、HCV、EBV血清样本,均为阴性。结论本研究建立的以巢式PCR和Sanger测序相结合的检测方法,具有灵敏度高、准确性高、结果可靠等优点,适用于HIV-1pol基因PR区以及RT区耐药突变的体外检测。