毒热平注射液对病毒感染巨噬细胞IRAK4表达的影响

目的 研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1 表达IRAK4(IL-1 receptor associated kinase 4, IRAK4)的影响.方法 用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10 μg/ml浓度含药维持液继续培养,于12 h弃细胞上清液并收集细胞,提取细胞RNA和核蛋白,进行实时定量PCR反应(RT-PCR)和Western-blot实验,分别测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞IRAK4 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平的影响.结果 毒热平注射液可下调病毒感染巨噬细胞IRAK4 mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平.结论 毒热平注射液的抗病毒作用可能与下调依赖MyD88的信号传导通路中IRAK4的表达有关.     

毒热平注射液对巨噬细胞TIR信号通路的影响

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞TIR(Toll/IL-1 receptors)信号传导通路的影响。方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10,1 mg.L-1含药维持液继续培养,分别于12,24 h弃细胞上清液并收集细胞,提取巨噬细胞RNA,进行实时定量PCR反应(RT-PCR),动态测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞TIR信号传导通路中各信号蛋白:Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(MyD88),IL-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子相关激酶6(TRAF6)和核因子κB(NF-κB)mRNA表达水平的影响。结果:毒热平注射液可剂量依赖性地下调病毒感染巨噬细胞TLR7,MyD88,IRAK4,TRAF6,NF-κB mRNA的表达水平。结论:毒热平注射液能通过调节TIR信号传导通路各信号蛋白的活性发挥抗病毒感染作用。     

毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织MMP-9及TIMP-1含量的影响

目的 观察毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响.方法 66只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、毒热平低剂量组(0.435 mg/d)、中剂量组(0.870 mg/d)、高剂量组(1.740 mg/d)和利巴韦林对照组(对照组,2.500 mg/d),每组11只.以经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠流感病毒性肺炎模型.感染后当日开始腹腔注射给药,0.3 mL/次,1次/天.5天后处死小鼠,计算肺指数;制作切片,光镜观察肺组织病理形态变化;采用ELISA双抗体夹心法测定肺组织匀浆液中MMP-9及TIMP-1含量.结果 与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现明显炎性病变,其肺指数、肺组织MMP-9及MMP-9/TIMP-1显著升高(P＜0.01),而TIMP-1含量变化不明显(P＞0.05);与模型组比较,毒热平低、中剂量组和对照组MMP-9降低(P＜0.01),各剂量组和对照组TIMP-1升高(P＜0.01),MMP-9/TIMP-1降低(P＜0.01).结论 毒热平注射液可通过降低流感病毒性肺炎小鼠肺组织中MMP-9含量,提高TIMP-1含量,调节两者比值,从而减轻肺组织炎性损伤.     

毒热平注射液对流感病毒FMl感染小鼠免疫功能的影响

目的 研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4(IL-4),干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平,CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制.方法 以ICR小鼠(SPF级)作为研究对象.实验分为7组:毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组.流感病毒FM1感染小鼠造模连续7 d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT-PCR法测定肺组织中INF-γ mRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Western blot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平.结果 FM1感染模型组的肺指数明显高于正常组(P<0.001),利巴韦林组,双黄连组及毒热平注射液大、中,小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低(P<0.001或P<0.01),其中以毒热平中剂量组最好.毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4 mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4 mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组(P<0.001);毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γ mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义(P>0.05).毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达(P<0.001),抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组(P<0.05).结论 毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γ mRNA基因转录,抑制IL-4 mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达.     

痰热清注射液抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察痰热清注射液的体外抗甲型流感病毒作用.方法:以MDCK细胞为病毒宿主,测定痰热清注射液对甲型流感病毒引起MDCK细胞的病变程度的抑制作用,并设病毒唑对照组.结果:在甲型A/粤防/243/72(H3N2)中痰热清注射液和对照组病毒唑的TD50、TD0、IC50、SI分别是1∶19.3、1∶36.4、1∶90.8、4.07.在甲型A/京防/262/95(H1N1)中痰热清注射液和对照组病毒唑的TD50、TD0、IC50、SI分别是1∶20.1、1∶38.9、1∶74.1、3.69.结论:痰热清注射液对甲型流感病毒所致的细胞病变有较好的抑制作用,效果与对照组病毒唑相近.     

毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响

目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠（SPF级）作为研究对象。实验分为7组：毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组。流感病毒FM1感染小鼠造模连续7d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT—PCR法测定肺组织中INF—γmRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Western blot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平。结果FM1感染模型组的肺指教明显高于正常组（P〈0．001）,利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低（P〈0．001或P〈0．01）,其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录（P〈0．001）,且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组（P〈0．001）;毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γmRNA基因转录（P〈0．001）,且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义（P〉0．05）。毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达（P〈0．001）,抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组（P〈0．05）。结论毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γmRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。     

黄芩苷体内抗流感病毒作用

目的：研究黄芩苷体内抗流感病毒(influenza virus,IV)作用。方法：采用体内实验方法,对小鼠先预防给药(2 d)后感染流感病毒(A/FM/1/47)或先感染流感病毒(1 d)后治疗给药的方法观察黄芩苷的抗流感病毒作用。结果：黄芩苷可明显延长流感病毒感染小鼠的存活时间(P<0.01)；对小鼠肺内的流感病毒有一定的清除作用,能降低肺内流感病毒的血凝滴度和感染力；减轻小鼠肺内的炎性病变。结论：黄芩苷具有明显的抗流感病毒作用。     

连翘体外、体内抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察连翘体外、体内抗甲型流感病毒的作用。方法:采用血凝实验方法,将不同浓度流感病毒接种鸡胚尿囊腔制造甲型流感病毒感染鸡胚模型,观察不同浓度连翘提取物对造模后鸡胚的预防和治疗作用。采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄昆明种小鼠肺炎,将不同浓度连翘提取物以灌胃给药途径治疗小鼠流感病毒性肺炎,观察各组小鼠一般状态、肺指数、肺组织形态学及对IV RNA表达的影响。结果:中药连翘可预防流感病毒在鸡胚内增殖,其预防作用随药物浓度降低而减弱,但各浓度之间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘对感染IV鸡胚具有治疗作用,其治疗作用随浓度降低而减弱,但各浓度间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘可改善流感病毒肺炎小鼠一般状态,可减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病变,并抑制流感病毒在小鼠肺组织中复制。结论:中药连翘提取物具有体外抗流感病毒作用及对流感病毒肺炎小鼠的治疗作用。     

毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤FM1感染靶细胞功能的影响

目的观察毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染靶细胞的影响。方法用MTT法及双抗体夹心ELISA法检测毒热平注射液低、中、高(2.1、8.5、17.0μg/mL)剂量对正常小鼠、感染流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的脾细胞数目、产生干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、及T细胞杀伤FM1感染巨噬细胞Ana-1功能的影响。结果毒热平注射液体外能抑制刀豆蛋白A(Con A)诱导的正常小鼠脾细胞的增殖,抑制Th2型细胞因子IL-10的产生,促进Th1型细胞因子IFN-γ的产生;能保护FM1感染的小鼠脾细胞,并抑制其产生Th2型细胞因子IL-10,而使Th1型细胞因子IFN-γ水平保持在一定的范围内;还能直接增强T细胞对FM1感染的靶细胞(Ana-1)的杀伤能力(P0.05,P0.01)。结论毒热平注射液体外作用于小鼠T细胞,可增强有利于抗FM1感染的免疫应答。     

银黄注射液体内外抗流感病毒的实验研究

目的观察银黄注射液体内外抗流感病毒作用。方法用流感病毒鼠肺适应株(FM1)鼻腔滴入感染BALB/C小鼠复制动物模型,记录小鼠存活时间,测定肺指数;用FM1感染的MDCK细胞为实验系统,观察细胞病变程度,从而了解银黄注射液抗FM1的药效。结果体外实验表明,先用药后感染病毒,银黄注射液0.11 mg.m-l1以上可抑制FM1对MDCK细胞的病理损伤,先感染FM1后用药,0.22 mg.m-l1以上可抑制FM1对MDCK细胞的病理损伤;动物实验表明,银黄注射液肌注,小剂量仅使肺指数值降低(P<0.05),大中剂量明显降低肺指数(P<0.01)及延长存活天数(P<0.05),静脉滴注小剂量仅使肺指数值降低(P<0.05),大中剂量明显降低肺指数、延长存活天数(P<0.01)。结论体外实验,银黄注射液阻断MDCK细胞感染FM1作用强于对已感染该病毒的MDCK细胞的保护作用;对FM1感染小鼠的保护作用,静脉滴注比肌注效果好,作用与病毒唑相当。     

银花平感颗粒体内抗甲型H1N1流感病毒作用

为探讨银花平感颗粒(YHPG)体内抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)作用及其对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,采用滴鼻感染ICR小鼠建立流感病毒肺炎模型,感染后第3天和第7天测定各组动物肺指数并观察肺组织病理变化;采用实时荧光定量RT-PCR和流式细胞技术,观察各组肺组织病毒载量以及外周血T细胞亚群(CD4⁺,CD8⁺,CD4⁺/CD8⁺)的变化。结果表明,YHPG(15,30 g·kg^-1)剂量组在感染后第3天和第7天均能显著降低流感病毒感染小鼠肺指数和肺组织病毒载量,减轻肺组织病理变化,同时还可显著提高外周血CD4⁺ T细胞水平和CD4⁺/CD8⁺比值,降低CD8⁺ T细胞水平。说明YHPG可抑制流感病毒复制、减轻流感病毒感染小鼠肺部损伤以及调节流感病毒小鼠免疫功能下降,对甲型H1N1流感病毒感染小鼠有一定的治疗作用。     

龟鳖粉对实验小鼠体内抗流感病毒作用的测试

目的 :测试龟鳖粉体内抗甲型流感病毒的作用。方法 :用甲型流感病毒 PR-8株建立 NIH小鼠呼吸道病毒感染模型 ,用两种不同浓度的( 1 50 mg/ ml和 75mg/ ml)龟鳖粉给感染小鼠灌胃。结果 :口服高浓度龟鳖粉 ( 6g/ kg)和低浓度龟鳖粉 ( 3 g/ kg)试验组小鼠感染甲型流感病毒后的存活率分别为 3 5.7%和 2 8.6% ;口服生理盐水的感染对照组小鼠在感染流感病毒 PR-8株后 7天内均死亡 ,阴性对照组小鼠在观察时间内均未死亡。结论 :提示龟鳖粉具有体内抗甲型病毒感染的作用     

3种解表方法抗流感病毒甲1型作用的实验研究

目的:比较辛温解表、辛凉解表、祛湿解表3种治法在体外、体内抗流感病毒甲1型鼠肺适应FM1株的作用。方法:选择桂枝麻黄各半汤、银翘散、新加香薷饮分别代表辛温解表、辛凉解表、祛湿解表等3种治法,并设病毒唑为阳性对照。观察其体外抗病毒作用及对小鼠流感病毒性肺炎的影响,对小鼠感染流感病毒的死亡保护作用和延长小鼠生命的作用。结果:3种解表法在体外流感病毒FM1株均无明显的抑制作用。3种解表法对小鼠流感病毒性肺炎均有抑制作用,与模型对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。与病毒唑组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。3种解表方法对感染小鼠死亡的保护作用均不明显。结论:3种治法并不一定直接杀灭流感病毒,但可能通过调节机体免疫力等途径达到治疗流感的目的。     

菘蓝有效成分抗流感病毒作用的实验研究

目的研究菘蓝有效成分在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法体外用MTT法检测菘蓝有效成分对传代狗肾细胞(MDCK)的毒性浓度,观察菘蓝有效成分抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用(CPE),MTT法检测菘蓝有效成分对流感病毒的抑制率;建立在体流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过观察小鼠肺病变程度指标,测定肺组织内流感病毒血凝滴度判定菘蓝有效成分对小鼠肺炎的治疗作用。结果菘蓝有效成分在体外主要抑制甲型流感病毒在细胞内的复制,其对病毒的半数抑制率浓度为64μg.mL-1,治疗指数达28.88;口服菘蓝有效成分能明显减轻小鼠肺组织病变程度,对肺组织内病毒的增殖有明显抑制作用。结论菘蓝有效成分具有较好的抗甲型流感病毒的作用,且呈剂量效应关系。     

锦带花体内抗流感病毒有效部位研究

目的:研究锦带花有效部位在体内抗流感病毒的作用。方法:建立在体流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过观察小鼠肺部病变程度及指标,测定肺组织内流感病毒血凝滴度,判定锦带花各有效部位对小鼠肺炎的治疗作用。结果:口服锦带花乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及乙醇提取物能明显减轻小鼠肺组织病变程度,对肺组织内病毒的增殖有明显抑制作用,其中,乙酸乙酯提取物效果最为显著。结论:锦带花乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及乙醇提取物均具有良好的抗甲型流感病毒的作用,其中乙酸乙酯提取物效果最为显著,且呈剂量效应关系。     

升降散散剂抗流感病毒作用的实验研究

目的观察升降散散剂的抗流感病毒作用。方法设计了升降散药血清对流感病毒感染鸡胚的作用实验和升降散散剂对流感病毒感染小鼠作用的实验。结果升降散药血清能抑制流感病毒在鸡胚内增殖,升降散散剂能减轻肺病变。结论升降散散剂具有明显抗病毒作用。     

不同来源黄芩提取物抗流感病毒作用的实验研究

目的比较不同来源黄芩提取物（河北、山西、大连）对流感病毒甲型鼠肺适应株（FM1）感染小鼠的死亡保护及抑制作用。方法以FM1感染小鼠为动物模型,感染1h后给药,以死亡率、平均存活天数、肺指数为评价指标,观察不同来源黄芩提取物在小鼠体内的抗流感病毒作用。结果不同来源黄芩提取物均能降低流感病毒感染小鼠的死亡率（P〈0．05）,延长小鼠的存活时间（p〈0．05）,降低肺指数（P〈0．05）。结论不同来源黄芩提取物均具有良好的抗流感病毒感染作用,其中以河北黄芩水提组效果最佳。     

双解口服液抗流感病毒实验研究

采用鸡胚培养法测定了双解口服液对流感病毒的抑制作用，实验结果表明，双解口服液之原药液及浓度为1：2以下时对鸡胚无明显毒性作用；浓度在1：2时对所试流感病毒有较强的抑制作用；浓度在1：5时也有一定的抑制作用；浓度在1：10时仍有较轻的抗病毒作用且有一定的量效关系。     

田基黄体内抗甲3型流感病毒作用研究

目的：从体内抗病毒实验观察田基黄抗甲3型流感病毒作用。方法：以病毒滴鼻感染小鼠,观察田基黄对肺指数、病毒致小鼠死亡率的影响。结果：口服10 g/kg&;#183;d田基黄可明显抑制甲3型流感病毒引起的小鼠肺组织炎性实变,降低甲3型流感病毒感染小鼠的死亡率。结论：田基黄是一种治疗流行性感冒的有效药物。     

双黄口服液抗流感病毒的实验研究

采用鸡胚培养法测定了双黄口服液对三种流感病毒的抑制作用。试验结果表明，双黄口服液在浓度为１：２以下时，对鸡胚无毒性作用；浓度在１：２，１：５时，对不同稀释度的病毒均有较强的抑制作用；浓度在１：１０，１：２０时，也有一定的抑制作用。