人参五味子汤预防小鼠哮喘的作用机制研究

目的 探讨中药人参五味子汤预防小鼠哮喘的作用及其机制。方法 40只小鼠被随机分为正常对照组（A）、模型组（B）、布地奈德治疗组（C）、人参五味子汤治疗组（D）、人参五味子汤和布地奈德联合治疗组（E）5组，每组8只。用卵白蛋白致敏建立哮喘小鼠模型；分别给予布地奈德、人参五味子汤对哮喘小鼠进行早期治疗4周。观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞学变化；采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定BALF中自细胞介素-4（IL-4）与γ-干扰素（IFN-γ）；免疫组化测定肺组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）；原位杂交结合免疫组化测定骨髓细胞表达IL-5Rα mRNA^＋的CD34^＋细胞。结果 与B组比较，C、D、E组BALF中细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞比例及IL-4、IL-4／IFN-γ比值均显著降低，IFN-γ升高；肺组织中MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1比值亦显著降低（P均〈0．01）；C组和E组IFN-γ较D组升高，其余指标均较D组明显下降（P〈0．05或P〈0．01），而C组与E组间差异无统计学意义。与A组比较，B、C、D、E组小鼠骨髓CD34^＋细胞数和IL-5Rα mRNA^＋的CD34^＋细胞比例均明显升高（P〈0．05或P〈0．01）；C组与B组差异无统计学意义，D组和E组较B组显著降低（P均〈0．01）。结论 人参五味子汤可通过影响小鼠骨髓CD34^＋造血细胞和IL-5Rα mRNA^＋的CD34^＋造血细胞向嗜酸粒细胞的转化和对气道炎症过程等途径，影响小鼠哮喘的病理过程。     

甘草酸二铵对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的：研究甘草酸二铵对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为4组：对照组（A组）10只、模型组（B组）10只、甘草酸二铵组（C组）10只和地塞米松组（D组）10只。用卵蛋白复制大鼠哮喘模型；肺组织病理观察炎症细胞的浸润情况：行支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞分类计数及细胞因子测定。结果：①哮喘模型组支气管周围明显炎细胞浸润，甘草酸二铵组较哮喘模型组明显减轻（P〈0．01），正常对照组无明显炎细胞浸润。②甘草酸二铵组BALF液中的EOS数日及炎症细胞总数与IL-4、IL-5含量明显低于模型组（P〈0．01），而IFN-λ水平明显高于哮喘模型组（P〈0．01），且与地塞米松组无显著性差异（P〉0．05）。结论：甘草酸二铵可以有效减轻哮喘大鼠气道炎症。     

血必净注射液对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1／Th2细胞因子表达的影响

目的研究血必净注射液对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨干预气道黏液高分泌的机制。方法卵蛋白腹腔注射致敏小鼠,32只小鼠随机分组为：对照组、哮喘组、地塞米松治疗组和血必净治疗组,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达变化。结果 （1）与对照组小鼠气道MUC5A mRNA表达（0.377±0.021）相比,哮喘组（1.103±0.087）明显增多（P〈0.01）;地塞米松治疗组（0.403±0.038）及血必净治疗组（0.437±0.031）小鼠气道MUC5A mRNA表达较哮喘组明显降低（P〈0.01）;（2）与对照组小鼠BALF表达IL-4[（22.812±1.978）ng/L]及IFN-γ[（101.232±9.664）ng/L]比较,哮喘组BALF表达IL-4[（87.234±6.901）ng/L]水平升高（P〈0.01）,而IFN-γ表达[（47.231±3.887）ng/L]明显降低（P〈0.01）;与哮喘组比较,地塞米松治疗组（[36.289±3.012）ng/L]及血必净治疗组IL-4水平[（38.112±2.761）ng/L]均显著降低（P〈0.01）;结论血必净注射液降低IL-4和MUC5AC的表达,提示在抑制气道黏液高分泌及控制哮喘方面具有意义。     

不同激发方式对大鼠哮喘模型的影响

【目的】探讨泵雾化和超声雾化两种激发方式制备大鼠哮喘模型的优劣。【方法】将24只SD大鼠分为三组：对照组、超声雾化组和泵雾化组,每组各8只。对照组予1mL生理盐水腹腔注射,其余两组予10％卵蛋白（0VA）混合液1mL致敏。2周后再以0VA进行激发,泵雾化组用高频雾化器雾化吸入2％0VA进行激发,超声雾化组用超声雾化器进行激发,对照组以生理盐水激发。各组实验大鼠均采用BUXCO测定气道阻力;取右肺组织用于HE、Masson和AB_PAs染色,分析气道炎症和气道重塑情况;做左肺支气管肺泡灌洗（BAL）,其灌洗液（BALF）行细胞学分析。【结果】①激发结束时,超声雾化组和泵雾化组大鼠均出现呼吸急促、点头状呼吸、腹肌痉挛等表现,而对照组大鼠激发前后无明显变化,呼吸平稳,运动敏捷。与对照组比较,泵雾化组和超声雾化组支气管周围炎性细胞浸润评分、支气管管壁周围嗜酸性粒细胞（EOS）显著增高（P〈0．01）;泵雾化组与超声雾化组无显著差异（P〉0．05）;②与对照组比较,泵雾化组与超声雾化组气道平滑肌面积、杯状细胞占上皮细胞百分比以及胶原沉积面积均明显增高（P〈0．01）;泵雾化组较超声雾化组更高（P〈0．01）;③相对于对照组,泵雾化组及超声雾化组BALF细胞总数、各细胞分类中EOS,淋巴细胞显著增高（P〈0．01）;但泵雾化组与超声雾化组无显著差异（P〉0．05）;④超声雾化组及泵雾化组大鼠Raw值均大于对照组（P〈0．01）;泵雾化组大鼠Raw值较超声雾化组明显增高（P〈0．05）。【结论】①0VA超声雾化或泵雾化激发均能够成功复制哮喘大鼠模型。②使用改良后泵雾化激发的方式复制哮喘大鼠模型优于传统的超声雾化激发方式。     

瘦素在肥胖哮喘小鼠气道重构中的作用

目的探讨脂肪因子瘦素在支气管哮喘气道重构中的作用。方法高脂饮食制造肥胖模型,经腹腔注射与雾化吸入卵蛋白（OVA）制作慢性哮喘模型。45只雌性C57／6J小鼠随机分为对照组,单纯哮喘组,肥胖哮喘组,每组15只,于末次激发48h内处死小鼠;计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类。肺组织HE观察各组小鼠肺组织病理变化及ELISA法测定血清中瘦素水平。结果肥胖哮喘组小鼠BALF中自细胞总数及嗜酸性粒细胞比例以及气道管壁厚度和气道平滑肌厚度均较单纯哮喘组和对照组显著增加（P〈0．05）。对照组血清瘦素为（1438．54±208．14）pg／mL,明显低于单纯哮喘和肥胖哮喘组[（1677,75±214．36）pg／mL,（2114．20±189．15）pg／mL,P〈0,05）],血清瘦素水平与气管壁厚度和气道平滑肌厚度呈正相关（P〈0．05）。结论肥胖通过瘦素参与了哮喘气道重构过程,纠正瘦素失衡有望成为肥胖哮喘患者治疗的新方向。     

平喘方对支气管哮喘模型大鼠气道顺应性影响研究

目的研究平喘方防治支气管哮喘的作用机理。方法通过对SD大鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发，建立支气管哮喘大鼠模型。于哮喘激发后28d观察空白对照组、哮喘模型组，平喘方组、地塞米松组各组大鼠气道顺应性及肺组织病理变化。结果模型组较空白对照组Co显著减小（P〈0．01），Cp显著增高（P〈0．01），气遗顺应性下降；光镜下，模型大鼠肺内细支气管上皮部分损伤脱落，细支气管壁上平滑肌细胞增生，胶原纤维增多。平喘方组较模型组Co显著增加（P〈0．01），Cp显著减少（P〈0．01）．气道顺应性改善；光镜下，平喘方组大鼠支气管壁上胶原纤维减少。结论平喘方能明显改善气道顺应性，改善腔原沉积，改善气道重建。     

加味玉屏风散对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平的影响

目的：探讨白细胞介素-5（IL-5）、粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）在哮喘发病过程中的作用及补脾益气中药加味玉屏风散对其含量的影响。方法：将24只大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和加味玉屏风散组，每组8只。采用卵白蛋白、灭活百日咳杆菌疫苗和氢氧化铝干粉配制的溶液腹腔注射致敏以及卵白蛋白雾化吸入激发制备大鼠哮喘模型；正常对照组用等量生理盐水替代抗原液；加味玉屏风散组则胃饲加味玉屏散水溶液。观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及细胞分类，以及IL-5、GM—CSF、TNF-α和sIL-2R含量的变化。结果：与正常对照组比较．哮喘模型组BALF中IL-5、GM—CSF、TNF-α和sIL-2R含量均显著增高（P〈0．05或P〈0．01），尤其是IL-5增高更加显著；相关分析表明，GM—CSF与IL-5、GM-CSF与TNF-α均呈显著正相关（r1=0．519，r2=0．521，P均〈0．05）。加味玉屏风散能降低BALF中这4种细胞因子的含量（P〈0．05或P〈0．01）。结论：IL-5、GM—CSF、TNF-α和sIL-2R在哮喘大鼠的气道炎性细胞浸润过程中起重要作用，可能加速了哮喘非特异性气道炎症的发生发展，并对嗜酸粒细胞的聚集、迁移、活化和黏附有协同作用。加味玉屏风散可以通过降低细胞因子水平来改善气道的炎症状况。     

木犀草素抑制支气管哮喘气道重塑的作用

目的：观察中药木犀草素对哮喘小鼠气道重塑的抑制作用并探讨其可能机制。方法：实验于2006—01／04在南京医科大学呼吸病研究室完成。SPF级雄性BALB／c小鼠32只，体质量18～22g，随机数字表法分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、木犀草素组，每组8只。卵蛋白致敏反复雾化吸入共8周，建立慢性哮喘模型，每次雾化前30min，正常对照组、哮喘模型组生理盐水灌胃，地塞米松组、木犀草素组分别使用地塞米松及木犀草素进行干预。观察支气管肺泡灌洗液中自细胞介素5和γ-干扰素水平的变化。对肺组织切片行苏木精一伊红染色，借助图像分析软件测量基底膜周径、平滑肌面积、管壁面积，计算出支气管管壁厚度和平滑肌厚度。结果：纳入小鼠32只，均进入结果分析。①经过反复抗原激发，哮喘模型组肺泡灌洗液中自细胞介素5水平明显高于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[（50．7&;#177;2．9），（16．1&;#177;1．2），（26．8&;#177;1．5），（25．9&;#177;2．6）ng／L，P〈0．05]。②γ-干扰素水平明显低于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[（38．1&;#177;3.3），（64．2&;#177;3．5），（58．2&;#177;4．2），（54．3&;#177;2.4）ng／L，P〈0．05]。③哮喘模型组支气管管壁厚度和平滑肌厚度明显高于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[管壁厚度：（17．1&;#177;1．6），（12．7&;#177;1．1），（14.3&;#177;1．1），（14．0&;#177;1．2）μm；平滑肌厚度：（6．0&;#177;0．5），（4．5&;#177;0．4），（5．0&;#177;0．5），（5．2&;#177;0．6）μm，P〈0．05]。结论：木犀草素可抑制气道壁的增厚和平滑肌增殖，减轻气道重塑。     

糖皮质激素对哮喘小鼠肺部炎症和支气管肺泡灌洗液中白介素-25、干扰素-γ的影响

目的:通过观察各实验组小鼠肺部炎症情况和检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-25(IL-25或IL-17E)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平,探讨糖皮质激素对小鼠支气管哮喘的治疗作用机制.方法:清洁级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组和布地奈德组.以卵清蛋白致敏激发法建立哮喘小鼠模型.显微镜下观察肺组织病理切片;收集BALF,计算嗜酸性粒细胞(EOS)绝对计数百分比;用ELISA法测定BALF中IL-25和IFN-γ的水平,并做相关性分析.结果:哮喘组小鼠BALF中白细胞总数、EOS数目和百分比分别与正常组、地塞米松组和布地奈德组相比均明显增加(P<0.01).在正常组、地塞米松组和布地奈德组之间对这3个指标进行两两比较差异均无显著性(P>0.05).哮喘组小鼠BALF中IL-25和IFN-γ水平分别与正常组、地塞米松组和布地奈德组相比均减低(P<0.05),在正常组、地塞米松组和布地奈德组之间对这两个指标进行两两比较差异均无显著性(P>0.05).各组小鼠BALF中IL-25和IFN-γ水平都呈正相关关系.结论:糖皮质激素可减轻肺部炎症,促进IL-25和IFN-γ的表达,抑制哮喘症状.     

n-3多不饱和脂肪酸对哮喘小鼠白三烯B4及5脂氧合酶基因表达的影响

目的：探讨n-3多不饱和脂肪酸（n-3PUFA）对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中白三烯B4（LTB4）水平、肺组织5脂氧合酶（5-LO）mRNA表达的影响及其可能的机制.方法：建立小鼠卵蛋白哮喘模型．分别灌胃不同剂量的n-3PUFA干预．用ELISA的方法检测BALF中LTB4含量；用RT—PCR的方法检测肺组织中5-LO mRNA表达的变化．结果：哮喘小鼠BALF中LTB4水平、肺组织5-LO基因表达水平较正常对照组显著升高（P〈0．01）；灌胃n-3PUFA干预的3个剂量组与模型组相比，LTB4含量、5-LO基因表达水平下降（P〈0．05）.结论：LTB4在气道里的高浓度及5LO基因表达的上调在哮喘小鼠发病中起重要作用，n—3PUFA可以降低哮喘小鼠BALF中LTB4的浓度，抑制肺组织5-LO mRNA表达，从而起到对抗哮喘气道炎症的作用.     

C型CpG单链寡核苷酸对哮喘小鼠Th1／Th2相关细胞因子的影响

目的C型CpG—ODN对哮喘小鼠Th1／Th2相关细胞因子的影响，为CpG-ODN进一步应用提供依据。方法利用人工合成C型的CpG-ODN（ODN-M362），将其注射于哮喘小鼠腹腔，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测注射后小鼠的Th1和Th2细胞因子的含量，分析其有无差异性。结果C型CpG-ODN组BALF中EOS数量，血清IL-4水平明显低于对照组和哮喘组（P〈0．01），血清IFN-γ明显升高于对照组和哮喘组（P〈0．01）。结论C型的CpG-ODN，对哮喘小鼠Th1／Th2失衡有明显的逆转作用。     

尘螨粗提浸液致敏小鼠的方法学研究

目的建立尘螨过敏性哮喘小鼠模型,比较不同致敏方式在相同尘螨粗提浸液(CDM)激发下的结果,评价CDM哮喘模型。方法 C57BL/6小鼠随机分成5组,各组分别采用不同的致敏程序致敏,试验第15～18天采用相同剂量与方式的CDM浸液激发。对照组致敏与激发均以磷酸盐缓冲液替代过敏原。从症状、肺泡灌洗液(BALF)的白细胞介素(IL-4)与干扰素-γ(IFN-γ)水平及细胞计数与肺组织病理方面进行评估。结果各模型组从症状,组织病理,BAIF细胞计数、分类(细胞总数增加,其中嗜酸性粒细胞所占比例增大,与对照组比较,P0.05)及细胞因子检测(IL-4与对照组比较,P0.05)等均表现出了过敏性哮喘的特点。但是模型组间细胞因子差异无统计学意义。结论各模型组均能够建立小鼠过敏性哮喘模型,证明了CDM的免疫耐受与常规过敏原不同,同时验证了抗原间可能存在协同作用。     

橙皮苷对过敏性哮喘小鼠肺组织炎症及肺泡灌洗液中细胞因子水平影响

目的研究橙皮苷对过敏性哮喘小鼠肺组织炎症及肺泡灌洗液中细胞因子水平影响。方法实验分为:对照组、模型组、实验1组、实验2组和实验3组。模型组、实验1组、实验2组和实验3组构建哮喘模型,实验1组、实验2组和实验3组在实验第25天、26天、27天灌胃橙皮苷(浓度分别为:12 mg/kg、24 mg/kg、36 mg/kg),对照组给予等量的磷酸盐缓冲液(PBS)代替。对小鼠进行哮喘发作情况行为学评分和肺组织炎症评分,酶联免疫吸附(ELISA)检测肺泡灌洗液中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)水平,同时对肺泡灌洗液中炎性细胞数目进行分类计数,Western blot检测肺组织中NF-κBp65蛋白水平。结果与对照组比较,模型组小鼠哮喘发作情况行为学评分和肺组织炎症评分升高,肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13水平也升高,肺泡灌洗液中炎性细胞总数、中性粒细胞数目、嗜酸性粒细胞数目、淋巴细胞数目升高,肺组织中NF-κBp65蛋白水平升高。橙皮苷灌胃处理后过敏性哮喘小鼠哮喘发作情况行为学评分、肺组织炎症评分降低,肺泡灌洗液中炎性细胞总数、中性粒细胞数目、嗜酸性粒细胞数目、淋巴细胞数目减少,IL-4、IL-5、IL-13水平降低,IFN-γ水平升高,IL-10水平也升高,与未经橙皮苷处理的哮喘小鼠比较,差异有统计学意义(P<0.05),呈剂量依赖性。结论橙皮苷能够呈剂量依赖性减轻过敏性哮喘小鼠炎症,调节肺泡灌洗液中细胞因子表达。     

平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响

目的 探讨平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响及可能的机制。方法 健康雌性昆明小鼠40只,随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、平喘固本合剂治疗组（C组）。用卵清清蛋白致敏建立哮喘小鼠气道急性炎症模型,各组分别给予相应药物治疗10 d。对各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞进行分类与计数,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织的病理变化,同时应用ELISA法测定BALF中白细胞介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）水平的变化。结果 与A组比较,B组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞明显增多（F=85.70-127.69,P＜0.05）,哮喘模型制作成功;C组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞较B组均明显减少,但较A组升高,差异有显著性（q=2.15-10.08,P＜0.05）。与A组比较,B组中IL-4含量、IL-4/IFN-γ明显升高,IFN-γ明显降低,差异有统计学意义（F=186.17-378.06,q=17.02-21.46,P＜0.05）;与B组比较,C组IL-4、IL-4/IFN-γ降低,IFN-γ升高,差异有显著性（q=4.80-7.18,P＜0.05）。HE染色显示,C组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及肺组织黏膜水肿等炎症表现较B组明显减轻。 结论 平喘固本合剂对急性哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用,其作用机制可能与其抑制IL-4的表达、抑制炎性细胞聚积及促进IFN-γ的表达有关。     

昆布多糖对急性哮喘小鼠气道炎症及重塑影响的研究

目的 观察昆布多糖对卵清蛋白(OVA)致敏激发哮喘小鼠气道炎症及重塑的影响.方法 将32只昆明系小鼠被随机分为模型组、激素吸入组、昆布多糖组和对照组4组,每组8只.经OVA致敏激发制模成功后,模型组用生理盐水0.3 ml灌胃干预,激素吸入组雾化吸入布地奈德混悬液0.4 ml(200 μg)+生理盐水3.6 ml干预,昆布多糖组采用昆布多糖50 mg/kg灌胃干预,均每日1次.对照组采用生理盐水代替OVA致敏激发和灌胃干预.各组动物于42 d后麻醉,行右肺支气管肺泡灌洗留取灌洗液(BALF),并取右肺组织进行病理学观察.在光镜下计数BALF中细胞总数及分类;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平;肺组织病理学改变程度在苏木素-伊红(HE)染色后于光镜下进行评价;肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达采用免疫组化法检测.结果 与模型组比较,昆布多糖组及激素吸入组BALF中细胞总数及分类计数、IL-4、肺组织病理学评分均显著降低,IFN-γ显著升高(P均<0.01);激素吸入组MMP-9、TIMP-1及昆布多糖组TIMP-1均显著下降(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,昆布多糖组各指标差异仍有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与昆布多糖组比较,激素吸入组细胞总数及分类计数、IFN-γ、病理学评分、MMP-9、TIMP-1差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 昆布多糖在一定程度上能抑制急性哮喘小鼠的气道炎症,减轻气道重塑的发生,可能是一种新的治疗哮喘的辅助药物.     

重组鼠白细胞介素-12腺病毒载体对哮喘小鼠模型IL-4、IFN-γ表达的影响

目的探讨重组鼠白细胞介素-12(IL-12)基因的腺病毒载体(AdCMVIL-12)对小鼠支气管哮喘模型IL-4、IFN-γ表达的影响。方法雌性BALB/c小鼠50只,按数字随机表法分为5组,每组10只:哮喘模型组、AdCMVIL-12组、AdCMVLacZ组、激素治疗组和正常对照组。并于第20天分别鼻内吸入50μL生理盐水和5×108 PFU AdC-MVIL-12。第28天收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),检测IL-4、IFN-γ的变化,RT-PCR方法检测各组肺组织中IL-4、IFN-γmRNA的表达水平。结果哮喘模型组与对照组、AdCMVIL-12组相比较,BALF中的IL-4表达水平明显升高,而IFN-γ在AdCMVIL-12组中的表达水平显著上升。RT-PCR结果显示,哮喘模型组小鼠肺组织IL-4mRNA的表达与AdCMVIL-12组、激素治疗组及正常对照组相比较明显升高;而IFN-γmRNA的表达水平明显下降。结论 AdCMVIL-12对哮喘小鼠的气道及肺组织内的IL-4表达有明显的抑制作用,其机制可能与AdCMVIL-12阻断IL-4的表达,调节Th1/Th2类细胞因子的平衡有关。     

口服卡介苗对哮喘患者Th1/Th2平衡的影响

目的探讨口服卡介苗（BCG）对哮喘患者Th1/Th2平衡的影响。方法45例哮喘患者随机分为常规治疗组、口服卡介苗组,常规组用支气管扩张剂解痉平喘治疗,卡介苗组在常规治疗基础上加用口服卡介苗,疗程3个月。20例健康成人为对照组。治疗前后测定肺功能（FEV1）、PPD、症状评分,用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定血浆IL-4和IFN-γ水平,并采用三色流式细胞法测定外周血Th1/Th2细胞之比。检测药物不良反应。结果常规组、卡介苗组治疗前后FEV1相比无显著差异（P〉0.05）;治疗前后常规组哮喘症状评分无明显差异（P〉0.05）,而卡介苗组有显著差异（P〈0.05）;治疗后卡介苗组PPD阳转率为85.71%,与常规组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗前两组血浆IL-4均较正常对照组明显升高,而IFN-γ水平明显降低（P均〈0.01）,治疗后与常规组相比,卡介苗组血浆IL-4水平明显下降,IFN-γ水平明显升高（P均〈0.05）;治疗前常规组、卡介苗组Th1细胞IFN-γ表达率、Th1/Th2低于对照组,而Th2细胞IL-4表达率均高与对照组,差异有显著性（P〈0.01）;常规组治疗前后Th1细胞IFN-γ表达率、Th2细胞IL-4表达率无显著差异（P〉0.05）;卡介苗组Th1细胞IFN-γ表达率治疗后（17.48±9.78）%,较治疗前（10.79±9.79）%显著增高（P〈0.05）,Th2细胞IL-4表达率治疗前后分别为（8.75±8.2）%和（4.45±8.1）%,治疗前后有显著差异（P〈0.05）;治疗期间未见药物不良反应。结论Th1/Th2失平衡是哮喘发病的重要机理,口服卡介苗操作简单、方便、副作用小,可以纠正哮喘患者Th1/Th2失衡。     

FasL基因和屋尘螨过敏原基因共表达质粒DNA疫苗对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用

目的:观察FasL基因和屋尘螨过敏原Derp2基因共表达质粒的DNA疫苗(DNA-FasL-Derp2)对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用。方法:DNA-FasL-Derp2肌注接种屋尘螨致敏/激发C57BL/6小鼠,再次激发后处死小鼠。观察肺组织病理变化,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数和分类计数,以及IL-5、IFN-γ水平。并与仅编码Derp2基因的DNA疫苗(DNA-Derp2)比较。结果:接种DNA-FasL-Derp2和DNA-Derp2均能显著减轻屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症,减少BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞比例,降低BALF中IL-5水平,以DNA-FasL-Derp2更显著。结论:DNA-FasL-Derp2可有效抑制屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症,而且比DNA-Derp2更有效。     

T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的 研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1（TIM-1）对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨气道黏液高分泌的机制.方法 OVA腹腔注射致敏小鼠,随机分组为：正常对照组（A组）、哮喘组（B组）和哮喘＋ TIM-1抗体处理组（C组）,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALD中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMCs） TIM-1 mRNA及气道MUC5AC mRNA表达.结果 （1）与A组小鼠外周血PBMCs表达TIM-1 mRNA（0.618±0.043）相比,B组（1.129±1.101）及C组（0.898±0.071）TIM-1 mRNA表达明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;（2）B组和C组小鼠BALF中IL-4表达分别为（67.123±3.341） ng/L和（44.217±2.201）ng/L,较A组[（23.211±2.142） ng/L]明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;B组及C组小鼠BALF表达IFN1分别为（53.475±4.776） ng/L和（87.116±5.611）ng/L,均低于A组[（124.624±9.292） ng/L] （P ＜0.01）,而C组与B组相比,有所增加（P＜0.01）;（3）B组（1.004±0.081）及C组（0.673±0.029）小鼠气道MUC5A mRNA表达与A组（0.314±0.027）相比,明显增加（P＜0.01）,且C组低于B组（P＜0.01）;（4）小鼠外周血PBMCs TIM-1 mRNA表达与IL-4、MUC5AC表达呈正相关,而与IFN-γ表达呈负相关.结论 抑制TIM-1表达可减少IL-4和MUC5AC的分泌,提高IFN-γ表达,提示在调节黏液高分泌及哮喘治疗中具有意义.