Exendin-4对人脐静脉内皮细胞内质网应激损伤的拮抗作用

目的 研究exendin-4(Ex-4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内质网应激相关凋亡的拮抗作用.方法 RPMI1640培养基培养HUVECs,待细胞长到培养瓶底部80％左右后,分4组干预细胞,每组8瓶,共32瓶.实验分组:①正常对照组(n=8):不做任何处理;②Ex-4组(n=8):(Ex-4,8μg/mL,45 min);③EPBS组(n=8):(EPBS,100μL/mL,30 min);④双药组(n =8):Ex-4预处理(8μg/mL,45 min),后加EPBS(100 μL/mL,30 min).免疫荧光法检测确认HUVECs上存在胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R);内源性过氧化氢酶抑制物(endogenous peroxidase blocking solution; EPBS)诱导HUVECs的凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;加入Ex-4预处理后,观察EPBS诱导HUVECs凋亡率的变化.Western blot检测细胞Calnexin、(C/EBP homologous protein,CHOP)和Bax表达情况,探讨内质网应激相关凋亡的机制.结果 ①HUVECs上有GLP-1受体表达;②与正常对照组相比,EPBS组HUVECs的凋亡率显著增加[(52.27±3.66)％ vs(7.25±0.62)％,P＜0.01)];与EPBS组比较,Ex-4的预处理可明显降低EPBS诱导的HUVECs凋亡[(37.77±2.86)％ vs(52.27±3.66)％,P＜0.01)].与正常对照组相比,EPBS能增加Calnexin[(1.76±0.16) vs(1.00±0.05),P＜0.01]、CHOP[(4.58±0.32)vs(1.00±0.12),P＜0.01]和Bax[(2.25±0.10)vs(1.00±0.06),P＜0.01]的表达;与EPBS组比较,Ex-4的预处理可显著降低Calnexin[(0.42±0.05)vs(1.76±0.16),P＜0.01]、CHOP [(0.64±0.10) vs(1.65±0.12),P＜0.01]和Bax[(1.48±0.08) vs(2.25±0.10),P＜0.01)]的表达.结论 Ex-4对EPBS诱导的HUVECs凋亡有明显抑制作用,其抑制作用可能与EX-4减少内质网应激相关蛋白Calnexin、CHOP和Bax相关.     

糖原合酶激酶-3的研究进展

糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)为内分泌系统最常见的疾病,随着生活水平的提高,生活方式的改变,老龄化人口的增加,糖尿病已经成为继心、脑血管疾病、肿瘤之后威胁人类健康的第三大疾病.     

黄连碱对人脐静脉内皮细胞内质网应激的影响

目的 建立人脐静脉内皮细胞（HUVECs）内质网应激细胞模型,观察黄连碱对HUVECs以及内质网模型细胞生长活性的影响,对CHOP、GRP78基因以及蛋白表达的影响。方法 使用10 μg/mL的衣霉素诱导HUVECs 18 h后,加入不同浓度的黄连碱再处理24 h。CCK8法检测不同浓度黄连碱对HUVECs的活性影响以及黄连碱对衣霉素诱导后的HUVECs的活性影响;采用RT-RCR法比较各组细胞中CHOP、GRP78的mRNA的表达情况;采用Western blotting和细胞免疫荧光法比较各组细胞中CHOP,GRP78的蛋白表达情况。结果 随着黄连碱浓度的增加,在1~20 μmol/L范围内的黄连碱对HUVECs的活性无影响,浓度为20 μmol/L黄连碱作用24 h后,对衣霉素诱导的HUVECs活性具有保护作用（P < 0.01）。加入衣霉素诱导18 h,HUVECs中CHOP、GRP78 mRNA水平的表达增高（P < 0.01）,再加入黄连碱继续诱导24 h后,黄连碱可以抑制衣霉素所诱导的HUVECs中CHOP、GRP78 mRNA水平的表达增高（P < 0.01）。加入衣霉素诱导18 h,HUVECs中CHOP、GRP78蛋白水平的表达增高（P < 0.01）,再加入黄连碱继续诱导24 h后,发现黄连碱可以抑制衣霉素所诱导的HUVECs中CHOP、GRP78蛋白水平的表达增高（P < 0.01）,与衣霉素诱导组相比数据具有统计学意义,细胞免疫荧光染色结果与Western blotting结果相似。结论 黄连碱可以减轻由衣霉素诱导的HUVECs过度内质网应激反应,并可提高受损细胞的活性;并可通过下调CHOP、GRP78的表达改善HUVECs过度内质网应激反应。     

槲皮素抑制ADMA引起的脐静脉内皮细胞内质网应激和细胞凋亡

目的 探讨槲皮素改善ADMA引起脐静脉内皮细胞凋亡的可能机制。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,应用流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况,应用Western blot法检测内质网应激蛋白PERK磷酸化水平及IRE1的蛋白表达量,用RT-PCR检测ATF4及CHOP mRNA表达量。结果 ADMA诱导脐静脉内皮细胞凋亡,槲皮素可以抑制ADMA引起的PERK磷酸化及IRE1蛋白表达,并可以减少ATF4及CHOP mRNA量,继而改善ADMA引起的细胞凋亡。结论 槲皮素抑制ADMA引起的脐静脉内皮细胞内质网应激继而抑制细胞凋亡。     

褪黑素减轻高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的机制

目的 探究褪黑素(MLT)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及其可能的分子机制。方法 培养HUVEC并分为3组：对照组、模型组和治疗组。对照组用葡萄糖浓度为5.5 mmol/L的DMEM培养基处理,模型组用高糖(葡萄糖浓度为30 mmol/L)的DMEM培养基处理,治疗组用含有100μmol/L MLT的高糖DMEM培养基处理。MTT法检测高糖及MLT对HUVEC增殖的影响,试剂盒法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,流式细胞术检测活性氧(ROS)的生成,Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡和坏死情况,Western blot检测高糖及MLT对HUVEC内质网应激和细胞焦亡相关蛋白表达的影响。结果 与对照组相比,模型组的细胞增殖水平下降;细胞培养上清液中LDH释放量增加;HUVEC中ROS生成增加;双染试验显示,蓝色荧光和红色荧光增加,GRP78、ATF4、CHOP、IRE1α、PERK、ATF6α、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β蛋白表达量增加。与模型组相比,治疗组的细胞增殖水平升高;细胞培养上清液中LDH释放量减...     

17-β雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶基因表达的影响

目的：阐明雌二醇对内皮细胞一氧化氮（ＮＯ）生成及一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ）基因表达的影响。方法：观察雌二醇作用于原代人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）一定时间（１～２４ｈ）后的ＮＯ产量，采用Ｇｒｅｉｓ反应测定代谢产物ＮＯ－２的量及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术分析雌二醇作用于ＨＵＶＥＣ１８ｈｃＮＯＳｍＲＮＡ的表达。结果：１００、３０、１０及１ｎｍｏｌ·Ｌ－１的雌二醇作用下，ＨＵＶＥＣ分别于１、４、１２及１８ｈ起，ＮＯ－２产量有明显增高。０．１ｎｍｏｌ·Ｌ－１雌二醇作用２４ｈ内，ＮＯ－２产量与对照组比较差异无统计学意义。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明：１～１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１雌二醇可明显促进ｃＮＯＳｍＲＮＡ的表达；而０．１ｎｍｏｌ·Ｌ－１雌二醇无此效应。结论：雌二醇可促进ＨＵＶＥＣＮＯ的生成及ｃＮＯＳ基因的表达，可能为雌激素保护作用的重要机制，雌二醇作用的阈浓度可能在０．１～１ｎｍｏｌ·Ｌ－１之间     

糖原合酶激酶-3β与颅脑照射后认知障碍的相关性研究进展

近年来,随着医疗技术的不断进步,接受颅脑照射治疗的肿瘤患者的长期生存率大幅提升。因此,颅脑照射的远期并发症,如智力下降、记忆力减退、甚至是痴呆等问题愈来愈受到人们的重视。糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)是一种高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,广泛存在于真核生物的细胞质中,目前已发现有GSK-3α和GSK-3β两种亚型。GSK-3β在脑组织尤其是海马区域中高表达,广泛参与各种神经退行性疾病、神经精神类疾病和癌症等多种重大疾病的发病过程。研究显示GSK-3β参与细胞炎症反应、糖原代谢、神经系统功能等的调控,激活GSK-3β的活性会影响整个生命周期中的细胞增殖、衰老、凋亡及突触的可塑性,进而导致神经系统认知功能的障碍。目前,GSK-3β与颅脑照射后认知障碍的相关性研究较少,该文结合国内外近年来的研究成果对GSK-3β在颅脑照射后认知功能障碍中的作用展开综述。     

糖原合酶激酶-3β在肝癌细胞迁移过程中的作用

目的通过调节糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)来观察其对肝癌细胞迁移能力的影响,研究GSK-3β在肝癌细胞迁移过程中发挥的作用。方法分别应用GSK-3特异性抑制剂LiCl和SB216763抑制GSK-3β的活性,或转染GSK-3βWT、GSK-3βS9A、GID5-6质粒影响GSK-3β的活性,通过划痕实验、小室迁移实验、微管组织中心体(MTOC)实验等观察处理前后肝癌细胞系SMMC-7721和Hep3B迁移能力的改变,并用免疫细胞化学法观察肝癌细胞迁移后磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)的分布。结果划痕实验发现,用LiCl和SB216763处理后,SMMC-7721细胞的相对迁移率分别下降36.44%和41.78%,Hep3B细胞的相对迁移率都下降26.66%。转染GSK-3βWT后,GSK-3β和pGSK-3β表达上调,SMMC-7721细胞相对迁移率降为61.27%;转染GSK-3βS9A后,GSK-3β表达上调,pGSK-3β变化不明显,SMMC-7721细胞相对迁移率降为38.61%;转染GID5-6后,GSK-3β变化不明显,pGSK-3β表达增多,SMMC-7721细胞相对迁移率降为36.49...     

红景天苷对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用研究

目的观察红景天苷对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法实验于2017年2月—2017年11月在青海大学高原医学研究中心实验室进行。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)株贴壁后,以MTS法观察不同浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞活力的影响,根据糖浓度分组。糖浓度5.5 mmol/L作为正常对照组,糖浓度45 mmol/L作为模型组,以不同红景天苷浓度(1×10~(-5)mol/L、5×10~(-5)mol/L、1×10~(-4)4mol/L、2×10~(-4)4mol/L)作用于模型损伤组,并通过MTS法观察细胞活力,WST-1法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力,TBA法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,观察红景天苷对血管内皮细胞损伤的保护作用。结果与模型损伤组比较,细胞培养24 h、48 h,红景天苷5×10~(-5)mol/L、1×10~(-4)4mol/L、2×10~(-4)4mol/L组细胞活力均明显增加(F=5.111、16.330,P<0.01),细胞内MDA含量均明显下降(F=22.567、28.382,P<0.01),细胞内SOD活力均明显增加(F=23.388、82.244,P<0.01);培养48 h,红景天苷1×10~(-5)mol/L组细胞活力与模型损伤组比较显著增加(P=0.04)。结论红景天苷可以降低高糖损伤的HUVEC的氧化应激水平,从而对高糖损伤的血管内皮细胞提供一定的保护作用。     

4-苯基丁酸对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的 探究4-苯基丁酸(4-PBA)通过调节过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响。方法 使用30 mmol/L高糖刺激HUVECs, CCK-8法检测HUVECs活性,免疫荧光法检测HUVECs氧化应激水平,原位末端标记法(TUNEL法)检测HUVECs凋亡水平,免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应(PCR)法检测HUVECs PGC-1α蛋白及基因表达水平;逆转录PCR检测超氧化物歧化酶1(Sod1)和Sod2。结果 30 mmol/L高糖刺激HUVECs 2 d后其活性明显降低,氧化应激水平明显升高,凋亡水平明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05);4-PBA (1.0 mmol/L)干预后可促进PGC-1α高表达,Sod1、Sod2表达明显上调,凋亡水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 4-PBA可能通过调节PGC-1α发挥抗氧化效应,抑制高糖诱导的细胞损伤。     

糖原合酶激酶-3β对蛋白磷酸酯酶2A甲基化的调节

目的 :研究磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)信号通路及其中重要组分糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)对蛋白磷酸酯酶2A(protein phosphotase 2A,PP2A)甲基化修饰的调节。方法 :用分子生物学及药物学手段改变Hep G2和HEK-293T细胞中PI3K信号通路及此通路中重要分子GSK-3β的活性,用Western blots分析PI3K信号通路及GSK-3β活性改变对PP2A的催化亚基-C亚基(catalytic subunit C,PP2A-C)甲基化修饰的影响。采用GSTpull down探讨PP2A-C特异性的亮氨酸甲基转移酶(leucine carboxyl methyltransferase-1,LCMT-1)与GSK-3β之间是否存在相互作用。结果:用LY294002下调细胞的PI3K信号通路,促进PP2A-C的甲基化。用GSK-3β抑制剂AR-A014418处理细胞抑制PP2A-C的甲基化。GSK-3β的GST融合蛋白GST-GSK-3β可以pull down LCMT-1。结论 :PI3K信号通路参与PP2A催化亚基甲基化的调节,抑制GSK-3β减少PP2A-C的甲基化修饰。GSK-3β与LCMT-1存在相互作用,GSK-3β可能通过LCMT-1,调节PP2A-C的甲基化修饰,进而影响PP2A的活性。     

高糖高脂促进人脐静脉内皮细胞间充质转化

目的 探究高糖高脂刺激对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)间充质转化的影响。方法 将培养至第6代的HUVEC设为对照组(CON组),以常用的间充质转化诱导剂TGF-β1为阳性对照(TGF-β1组),给予33mmol/L高糖加0.1mmol/L棕榈酸模拟高糖高脂环境对HUVEC进行刺激为HG+HP组,显微镜下观察细胞形态变化。并通过免疫荧光、Western-blot法检测内皮细胞特异性的标记因子VE-Cadherin和CD31,以及平滑肌细胞特异性标记因子α-SMA和N-Cadherin等蛋白的表达情况。结果 显微镜下观察发现,HUVEC经过TGFβ1培养处理72h后,细胞形态由饱满圆润的短梭形逐渐变成了长梭形,细胞间隙变大,与CON组相比有明显改变,而HG+HP组细胞形态与TGF-β1组相似。免疫荧光和Western-blot结果显示,与CON组相比,HG+HP组内皮细胞标记物VE-Cadherin和CD31表达量显著下降(P<0.05),而平滑肌细胞标记物α-SMA和N-Cadherin表达量显著上升(P<0.05)。结论 高糖高脂刺激可以促进人脐静脉内皮细胞的间充质转化。     

糖尿病大鼠糖原合酶激酶-3与记忆障碍的关系

目的 探讨糖尿病大鼠皮质糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)的变化在记忆障碍中的作用.方法 用链脲佐菌素(Streptozotocin STZ)建立糖尿病大鼠模型,用32p放射性标记法检测对照组,DM(Diabetes mellitus)组,DM+碳酸锂(Li2CO3)组GSK-3的活性,用蛋白印迹法检测磷酸化GSK-3β的表达,用电跳台试验检测大鼠的学习及记忆保留情况.结果 与对照组(1.07±0.07)相比,DM组的GSK-3活性(1.38±0.08)明显升高(P＜0.01),GSK-3βSer9位点的磷酸化水平(0.84±0.06)比对照组(1.05±0.08)明显降低(P＜0.01),并且,犯错次数[(2.6±0.89)次/3min]比对照组[(1.20±0.84)次/3min]增加(P＜0.05),潜伏期[(94.00±23.02)s/3min]也比对照组明显缩短[(144.00±20.74]s/3min](P＜0.01),应用Li2CO3干预后,GSK-3活性(1.13±0.06)明显降低(P＜0.01),GSK-3βSer9位点的磷酸化水平(0.97±0.06)恢复(P＜0.01),犯错次数[(1.40±0.55)次/3min]降低(P＜0.05),潜伏期[(130.00±18.72)s/3min]明显延长(P＜0.05).结论 糖尿病大鼠脑皮质GSK-3活性升高,可能导致其学习及记忆障碍,Li2CO3抑制GSK-3后,明显改善糖尿病大鼠的学习及记忆障碍.     

糖原合酶激酶-3β在缺血后处理脑保护效应中的作用

目的:观察缺血后处理对脑皮质神经元的保护效应及糖原台酶激酶-3β(GSK-3β)活性的改变,探讨其可能机制.方法:雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组(n=10):阳性对照组(1/R组),假手术组(S组),后处理组(IPost).采用4-VO法建立大鼠全脑缺血再灌注模型.IPost组分离双侧颈总动脉,夹闭10min,开放30s,夹闭10s,反复三次.手术后2天处死大鼠,取出脑组织,采用TUNEL法检测大鼠皮质神经元凋亡情况;TTC法检测大鼠脑部梗死面积;光谱法检测GSK-3β活性.结果:与I/R组相比,IPost组皮质神经元凋亡和梗死面积显著减少(P<0.01):与S组比较,皮质神经无凋亡和梗死面积增加(P<0.01);与S组相比,IPost组GSK-3β活性降低,但明显高于 I/R组(均为P<0.01).结论:脑缺血后处理能使GSK-3β活性增高,减少皮质神绎元凋亡和梗死面积,从而有效减轻脑缺血再灌注引起的损伤.     

ox-HDL_3对人脐静脉内皮细胞的损伤作用

目的:探讨氧化高密度脂蛋白3(ox-HDL3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的损伤作用。方法:体外培养HU-VECs与不同浓度(50~200mg/L)ox-HDL3共孵育,用普通光镜和荧光显微镜分别观察HUVECs形态及核形态的变化,用噻唑兰(MTT)比色法检测细胞存活状况。结果:ox-HDL3使内皮细胞数目减少,形态改变;Hoechst 33258染色后可见大量的细胞核浓缩呈高亮度蓝色荧光的凋亡细胞;MTT结果显示,细胞存活率下降,且呈剂量依赖性。结论:ox-HDL3可导致内皮细胞受损,从而促进动脉粥样硬化的发生发展。     

20(S)-PPD促内质网应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的:观察原人参二醇(protopanaxadiol,PPD)中20(S)-PPD对人脐静脉内皮细胞凋亡的作用并探讨其作用机制。方法:20(S)-PPD处理人脐静脉内皮细胞,MTT法检测细胞增殖,DAPI染色检测细胞核形态变化,Calpain活性检测试剂盒检测胞质Calpain活性,内质网荧光探针3,3-二己基恶羰花青碘化物染色检测细胞内质网形态变化,实时定量PCR检测拼接XBP-1以及CHOP mRNA水平,Western blot检测Caspase-3、Caspase-8、bax、bcl-2、ATF-6、磷酸化IRE1、磷酸化PERK、ATF-4以及CHOP蛋白水平。结果:20(S)-PPD 10μmol/L以上处理人脐静脉内皮细胞6 h或5μmol/L以上处理24 h均能显著抑制其细胞活力。20(S)-PPD 10μmol/L处理人脐静脉内皮细胞6 h后,DAPI染色发现细胞出现明显染色质固缩及核碎片;内质网荧光探针3,3-二己基恶羰花青碘化物染色显示内质网形态发生显著变化,出现内质网碎片并且在核周聚集成颗粒;胞质Calpain活性未见显著改变;Western blot检测到凋亡相关蛋白Caspase-3活性片段,Caspase-8表达水平无显著变化且未检出其活性片段,bax表达未见显著改变,而bcl-2表达显著下调,ATF-6表达未见显著改变,磷酸化IRE1显著增加;实时定量PCR结果显示拼接XBP-1s mRNA显著增加,磷酸化PERK及ATF-4显著增加,CHOP mRNA及蛋白水平显著增加。结论:20(S)-PPD通过内质网应激激活IRE1与PERK途径,进一步下调bcl-2而导致人脐静脉内皮细胞凋亡。     

糖原合酶激酶3-β对胃癌细胞生长周期和转移的影响

目的:探讨GSK-3β功能改变对胃癌细胞生长周期和转移的影响.方法:LY294002单独或联合LiC1影响胃癌细胞株SCG-7901 GSK-3β活性,Western blotting检测总GSK-3β、p-GSK-3βser9表达,MTT和FCM检测细胞增殖及周期分布,细胞免疫化学检测E-cadhefin、β-eatenin表达,细胞粘附实验观察细胞与基质的粘附力.结果:LY294002干预细胞72 h后,总GSK-3β表达无改变,P-GSK-3βser9表达下降;增殖受抑制;细胞周期阻滞于G0/G1期;E-cadherin表达增高,β-catenin表达下降;细胞与基质粘附力降低.LiC1部分拈抗LY294002对细胞的生长抑制、周期阻滞及对E-cadherin、β-catenin表达的改变和细胞与基质粘附力的影响.结论:GSK-3β可促进胃癌细胞G1-S期周期阻滞、抑制细胞生长并可上调E-eadherin表达抑制细胞转移.     

TRPC_3参与缺氧诱导人脐静脉血管内皮细胞凋亡

目的:探讨瞬时受体电位通道蛋白3(TRPC3)在缺氧诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)凋亡中的作用。方法:采用HUVECs细胞株,复苏传代后计数稀释,接种于6孔培养板中,实验组分为常氧对照组(5%CO2+95%空气)和缺氧组(1%O2+5%CO2+94%N2),处理24h后,应用实时荧光定量RT-PCR法及WesternBlot法检测TRPC3mRNA和蛋白水平的表达变化。构建靶向TRPC3基因的siRNA和无关序列质粒表达载体,分别转染至HUVECs,缺氧处理后再用四甲基偶氮唑盐比色法(Methods the tetrazolium,MTT)检测各组细胞存活率,Hoechest33342荧光染色观察细胞凋亡。结果:缺氧处理24h,HUVECs中TRPC3mRNA和蛋白表达明显升高,细胞存活率为67.4%,与常氧对照组有显著性差异(P<0.05);缺氧+TRPC3干扰组细胞存活率为92.7%,与缺氧组有显著性差异(P<0.05);缺氧+TRPC3假干扰组与缺氧组无显著性差异(P>0.05)。荧光显微镜下观察,常氧对照组胞核均匀蓝染;缺氧处理组和缺氧+TRPC3假干扰组胞核明显固缩、凝聚,可见凋亡小体;而缺氧+TRPC3干扰组胞核均匀蓝染。结论:TRPC3参与缺氧诱导HUVECs凋亡。     

氯化锂通过抑制糖原合酶激酶3β维持缺氧心肌的缝隙连接

目的 在心肌慢性缺氧环境下,研究氯化锂对心肌间缝隙连接的影响.方法 将25只C57BL/6J小鼠分为常氧组、缺氧组、常氧对照组、缺氧+生理盐水组和缺氧+氯化锂组.缺氧组采用10％氧浓度缺氧4周.缺氧+生理盐水组和缺氧+氯化锂组分别腹腔注射生理盐水和氯化锂.用电生理和心导管检查,评价心律失常情况、心率和射血分数.用免疫荧光观察连接蛋白43(Cx43)的分布情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Cx43、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)和糖原合酶激酶3β(GSK-3β)的水平.结果 与常氧组比,缺氧组小鼠心率较快[(448±18)次/min vs.(401±13)次/min,P＜0.05],左心室射血分数降低[(56±5)％ vs.(73±4)％,P＜0.05],心律失常评分增加[(3.4±0.5)分vs.(0.6±0.5)分,P＜0.05],Cx43表达减少.与缺氧+生理盐水组比,缺氧+氯化锂组的小鼠心率降低[(412±11)次/min vs.(454±18)次/min,P＜0.05],射血分数增加[(69±3)％vs.(55±4)％,P＜0.05],心律失常评分减少[(1.8±0.4)％vs.(3.0±0.7)％,P＜0.05],Cx43增加,p-GSK-3β与总GSK-3β的比值增加.结论 在心肌慢性缺氧中,氯化锂能通过抑制GSK-3β信号,维持缝隙连接,降低心律失常发生率.