大鼠下颌下腺卵泡刺激素、黄体生成素的分布及与促性腺激素释放激素受体的共定位研究

目的研究卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)共定位的关系。方法采用邻片免疫组织化学共定位方法。结果大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性,阳性颗粒分布在细胞质内,细胞核阴性。邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性,大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性,小部分呈免疫反应阴性。两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内,细胞核阴性。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH。     

大鼠胃卵泡刺激素和促性腺激素释放激素受体的共定位

我们先前的研究已经研究,大鼠消化系统广泛分布有促性腺激素释放激素（GnRH）免疫反应性上皮细胞,而且证实这些细胞同样存在GnRH mRNA的杂交信号,说明胃、肠、胰腺能自身合成GnRH。随后我们又证实大鼠下颌下腺、胰腺和胃含有GnRH的受体,说明它们又是GnRH的靶器官。     

卵泡刺激素在大鼠胰腺中的定位及其与促性腺激素释放激素受体共存关系

目的：研究卵泡刺激素在大鼠胰腺中的分布及其与促性腺激素释放激素受体的共存关系。方法：采用免疫组织化学法和邻片双标记方法。结果：大鼠胰腺外分泌部腺泡内的部分腺细胞和胰岛中的部分内分泌细胞呈现FSH免疫阳性反应,阳性产物分布于胞质,胞核阴性。卵泡刺激素与促性腺激素释放激素受体在大鼠胰岛细胞中有重叠分布。结论：大鼠胰腺外分泌部的腺泡细胞和胰岛的细胞能表达卵泡刺激素。卵泡刺激素和促性腺激素释放激素受体共存于大鼠胰岛细胞中。表达卵泡刺激素的胰岛细胞可能受促性腺激素释放激素调节。     

GnRH激动剂主动免疫对GnRHR在腺垂体与子宫表达及分布的作用研究

目的探讨GnRH激动剂主动免疫对绵羊腺垂体与子宫GnRHR表达及分布的影响,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 28只5～6月龄健康母绵羊(Ovis aries)随机分为4组(n=7),实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、实验Ⅱ组(EG-Ⅱ)和实验Ⅲ组(EG-Ⅲ)于0 d和14 d分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg(0 d和14 d各1次);对照组(CG)皮下注射2.0 ml药物的溶媒(0 d和14 d各1次)。各组于70 d无菌切取腺垂体和子宫。提取腺垂体总RNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测GnRHR mRNA表达的变化,Western blotting分析子宫GnRHR蛋白表达,免疫组织化学SP法染色检测GnRHR表达的变化。结果 EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ腺垂体GnRHR mRNA表达量均低于对照组,以EG-Ⅲ最小(P<0.01)。与CG相比,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ子宫GnRHR蛋白表达水平分别减少3.46%、4.90%和24.78%(P<0.05)。子宫组织中有GnRHR分布主要见于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核,EG-Ⅲ灰度值显著低于CG(P<0.05)。结论 GnRH激动剂主动免疫可以剂量依赖性地抑制垂体GnRHR mRNA和子宫组织中GnRHR蛋白的表达。GnRHR主要分布在子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞的胞核和胞质,GnRHR激动剂免疫对子宫中GnRHR的分布具有抑制作用。     

大鼠下颌下腺卵泡刺激素受体、雌激素α受体的分布及与促性腺激素释放激素受体的共存

目的 研究卵泡刺激素受体( FSHR)和雌激素α受体(ERα)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体( GnRHR)共存.方法采用免疫组织化学定位和邻片免疫组织化学共定位方法.结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及各级导管的上皮细胞均呈FSHR和ERα免疫反应阳性;在下颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞中观察到了F...     

卵泡刺激素及其受体在大鼠胰腺的共定位观察

目的观察卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR)在大鼠胰腺中的共存关系,以了解FSH对胰腺的功能意义。方法应用免疫荧光组织化学双标记染色技术,在激光共聚焦扫描显微镜下观察染色结果。结果部分外分泌腺细胞、导管上皮细胞及部分胰岛细胞呈FSH反应阳性,呈强绿色荧光。小血管内皮细胞也呈FSH反应弱阳性,呈弱的绿色荧光。部分胰岛细胞呈FSHR反应阳性,呈强红色荧光。一些外分泌腺上皮细胞呈FSHR反应弱阳性,呈淡红色荧光。有一些胰岛细胞呈FSH和FSHR双阳性反应,呈黄色荧光或红、绿相间荧光。结论FSH及其受体均存在于大鼠胰腺中,胰岛中的部分细胞共同存在FSH及其受体,FSH可能通过旁分泌或自分泌的途径对胰腺的功能起调节作用。     

GnRH及其受体在兔卵巢和子宫的分布

目的探讨GnRH与其受体(GnRHR)在卵巢和子宫组织中的分布,研究GnRH-A(激动剂Alarelin)主动免疫对GnRH和GnRHR分布的影响。方法 24只日本大耳白雌兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为4组(n=6),实验组和对照组。其中实验1组(EG-1)、实验2组(EG-2)和实验3组(EG-3)分别在兔颈背侧皮下注射1.0m(l100μg/ml、100μg/ml和50μg/ml)GnRH-A抗原,EG-2和EG-3于20d以原剂量加强注射1次,102d无菌采集垂体、卵巢和子宫。用SP法染色,图像分析技术进行定位与分析。结果卵巢和子宫均有GnRH和GnRHR阳性细胞分布,主要见于卵母细胞、卵泡细胞、子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞;GnRH-A的剂量不同,GnRH和GnRH阳性细胞的染色强度也不同,即GnRHR和GnRH的表达量不同。GnRH-A能增加GnRH和GnRH的分布与表达,EG-2的作用更为明显。结论卵巢和子宫中均有GnRH和GnRHR细胞分布,GnRH-A免疫能增强GnRH和GnRHR的表达。     

Alarelin免疫绵羊对垂体GnRHR、FSHR和LHR基因表达与生殖激素分泌的作用

 目的 探讨GnRHago主动免疫对绵羊腺垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及生殖激素合成与释放作用,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 42只5-6月龄母绵羊（Ovis aries）随机分为6组（n =7）,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg,0d和14d各1次,共2次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg,0d、7d、14d和21d各1次,共4次;对照组皮下注射药物的溶媒,0d和14d各1次,共2次。于70d在颈动脉放血处死绵羊,无菌切取腺垂体、子宫及卵巢。用ELISA测定血清GnRH抗体浓度,以激素检测试剂盒分别测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。提取腺垂体总RNA,PCR扩增与反转录,实时荧光定量PCR（FQ-PCR）,分析GnRHR、FSHR和LHR mRNA的表达。 结果 绵羊腺垂体中有丰富的RNA。特异性条带扩分别为2150 bp,1100bp和180bp左右。实验组GnRHR、FSHR和LHR mRNA值均低于对照组,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ的mRNA值低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ。实验组血清GnRH浓度逐渐降低值谷值,之后上升,70d 时达到免疫注射前水平。实验组血清FSH浓度始终高于对照组（P＜0.05）。35d时EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。实验组和对照组血清E2含量无显著差异。结论 阿拉瑞林主动免疫可抑制垂体GnRHR mRNA、FSHR mRNA和LHR mRNA的表达,促进垂体合成与释放FSH,增加血清FSH含量,降低GnRH和LH浓度,对E2浓度无明显影响。增加阿拉瑞林抗原的免疫剂量和注射次数,作用更加明显。     

GnRH-A主动免疫公兔对垂体GnRHR、FSH-β和LH-β基因表达的影响

目的探讨GnRH-A激动剂(阿拉瑞林)主动免疫对公兔的去势效果和垂体GnRHR、FSH-β和LH-βmRNA表达的影响。方法 30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为三组(n=10),在实验1组(EG-Ⅰ)和实验2组(EG-Ⅱ)颈部皮下注射1.0mL(100μg/mL)阿拉瑞林抗原乳剂EG-Ⅱ于20d以相同剂量重复注射1次,用荧光定量PCR分析垂体中GnRHR、FSH-β和LH-β mRNA的表达,并测定GnRHR的核苷酸序列。结果 EG-Ⅰ和EG-ⅡGnRH抗体水平高于对照组(P0.05),EG-Ⅱ在49d达到峰值,显著高于EG-Ⅰ(P0.05)和对照组(P0.01),而后开始逐渐下降。28d以后,EG-Ⅱ和EG-Ⅰ血清睾酮浓度低于对照组(P0.05),且EG-Ⅱ低于EG-Ⅰ(P0.01);公兔GnRHR的核苷酸为1179bp,同源性达96%。结论阿拉瑞林免疫可以明显提高血清GnRH抗体水平,降低垂体GnRHR、FSH-β和LH-β基因表达,减少睾酮的合成与分泌,从而导致性器官发育受阻,具有明显的作用,加强免疫效果更佳。     

大鼠胰腺卵泡刺激素(β)及其受体的免疫荧光定位及原位杂交

目的探讨大鼠胰腺组织中是否表达卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR),为进一步研究FSH对胰腺的功能调节提供理论依据。方法采用单标记免疫荧光技术和原位杂交方法进行研究。结果大鼠胰岛大部分细胞及部分胰腺外分泌部细胞呈FSH蛋白和mRNA,FSHR蛋白和mRNA免疫荧光反应阳性,阳性物质分布于细胞质,细胞核呈阴性反应。结论大鼠胰腺细胞具有自身合成和分泌FSH及其受体的功能,说明FSH对胰腺细胞的作用可能通过旁分泌或自分泌的作用实现的。     

被动吸烟下调大鼠卵泡刺激素、黄体生成素、促性腺激素释放激素及其受体的表达

目的 研究被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构、激素受体及血清中激素的影响. 方法 Wistar大鼠32只,分为实验组和对照组(各16只).实验组大鼠吸烟3个月,对照组不予吸烟,3个月后处死大鼠.光镜及电镜下观察各组大鼠卵巢结构的改变,免疫组织化学染色检测激素受体的改变,酶联免疫吸附试验检测血清中激素的改变情况. 结果 实验组大鼠卵巢髓质血管收缩、减少,间质疏松.卵巢颗粒细胞内线粒体水样变、空泡样变,线粒体嵴断裂、模糊;粗面内质网脱颗粒样变.血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)水平比对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05).实验组大鼠卵巢组织中卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)的表达显著低于对照组(P＜0.01,P＜0.05). 结论 被动吸烟可使大鼠血清中FSH、LH及GnRH水平明显降低,大鼠卵巢中FSHR及LHR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的结构及功能,引起生殖内分泌失调.     

胃癌患者性激素水平测定及临床意义

目的:探讨胃癌患者性激素水平变化及临床意义。方法:采用化学发光免疫分析法,测定134例胃癌患者血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)水平,根据TNM分期对各期胃癌患者E2及T含量进行分析。结果:男性及女性胃癌患者E2、T含量明显低于对照组(P<0.05),女性患者E2水平较对照组下降更为明显(P<0.01);女性患者PLR水平显著性升高(P<0.01)、TNM各期胃癌患者E2、T水平变化为低分化者明显高于高分化者(P<0.01)。结论:了解胃癌患者血清性激素水平,对分析胃癌与性激素的关系有重要意义。     

促性腺激素释放激素受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布

目的探讨颈胸神经节是否具备接受促性腺激素释放激素(GnRH)作用的条件。方法实验采用免疫组织化学SP法,观察GnRH受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布特点。结果在颈胸神经节中,神经元胞体均为GnRH受体免疫反应阳性,其细胞膜以及膜下胞质中的颗粒状物质呈棕黄色,GnRH受体为强阳性表达,而胞核呈阴性表达。部分神经元可见其突起,呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达。卫星细胞也呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达。图像分析表明,呈阳性反应的神经元胞体与节内其他阳性成分相比,其GnRH受体相对表达量差异性极显著(P0.01)。结论在雌性山羊颈胸神经节中,神经元胞体是GnRH发挥作用的主要靶细胞,颈胸神经节具备接受GnRH作用的条件。提示GnRH有可能通过作用于颈胸神经节交感节后神经元上的GnRH受体来影响心肺器官的功能活动,即颈胸神经节可能是心肺功能活动中协调GnRH内分泌调节和该神经节自主神经调节两途径之间的中继站。     

中空纤维测定法在胃癌临床前药效研究中的应用

目的 探讨中空纤维测定法在胃癌临床前药效研究中的应用。方法 将胃癌细胞株SNU-16、 SNU-484、SNU-668分别通过中空纤维管移植于裸鼠的皮下和腹腔,随后用标准的抗癌药物紫杉醇制剂给予治疗,将每个细胞株的中空纤维的活性与异种移植物的活性进行比较。结果 使用优化的接种密度和时间表,紫杉醇治疗在胃癌细胞株SNU-16和SNU-484有效,经紫杉醇处理后的SNU-16和SNU-484胃癌细胞株减少大于50%,但在SNU-668无效。与中空纤维测定结果一致,胃癌细胞株SNU-16和SNU-484在异种移植模型中紫杉醇治疗后也表现出肿瘤消退。结论 本实验研究表明中空纤维测定法对于筛选具有抗胃癌活性的小分子物质是有效的。     

miR-144、miR-451在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探究胃癌患者组织中miR-144、miR-451的表达与临床病理参数及预后的关系。方法2013年6月至2014年6月,收集115例胃癌患者的癌组织及癌旁正常组织,采用实时定量PCR检测组织中miR-144、miR-451的表达水平;分析胃癌组织中miR-144、miR-451的表达与患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线评估miR-144、miR-451的表达与患者预后的关系,并采用Cox回归模型分析胃癌患者预后的影响因素。结果胃癌组织中miR-144相对表达量为0.214±0.069,低于癌旁正常组织的1.124±0.157,miR-451相对表达量为0.354±0.087,低于癌旁正常组织的1.084±0.108,差异均有统计学意义(均P<0.05);miR-144、miR-451的表达均与肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果表明,与miR-144高表达组、miR-451高表达组相比,miR-144低表达组、miR-451低表达组患者术后5年总生存率较低,术后中位生存时间较短(均P<0.05)。Cox回归模型发现,远处转移、较高TNM分期、miR-144低表达、miR-451低表达是影响胃癌患者预后的危险因素(均P<0.05)。结论胃癌组织中miR-144、miR-451呈低表达,其与患者病情进展和预后有关,检测胃癌组织中miR-144、miR-451的表达可能有利于患者的病情和预后判断。     

胃癌组织雌激素受体的研究

以PAP法研究胃癌组织石蜡切片中的雌激素受体(ER),发现212例中ER(+)36例(17.0%);男性156例中ER(+)20例(12.8%),女性56例中ER(+)16例(28.6%),ER阳性率绝经后约为绝经前的3倍。肉眼分型以Borrmann Ⅲ型和Ⅳ型为最高;组织学类型以女性的未分化型为最高。本文证实雌激素非靶器官肿瘤—胃癌组织中存在有激素受体ER。     

漳州地区贲门癌临床病理资料分析

目的了解漳州地区的贲门癌患者临床病理资料及流行病学的特点,为疾病的诊断与评估提供依据。方法将2013年7月至2014年6月期间于漳州市医院、中国人民解放军第一七五医院和龙海市第一医院进行手术治疗的贲门癌患者作为研究对象,对其一般资料、肿瘤病理类型等进行回顾性分析。结果贲门癌高发年龄为老年人(60岁)组。贲门癌与胃窦癌在分化程度、浸润深度、淋巴结转移、病灶大小差异有统计学意义(P0.05)。结论该地区贲门癌好发于老年男性,以中高分化腺癌为主。贲门癌与胃窦癌的临床病理特征有很大不同。早期贲门癌检出率低。     

晚期胃癌患者癌组织人表皮生长因子受体-2蛋白表达及与生存时间的关系

目的:观察人表皮生长因子受体-2(HER-2/neu)蛋白表达在晚期胃癌患者不同情况下的分布及与患者生存时间的关系。方法:收集60例胃癌患者的临床资料和HER-2/neu免疫组化检测结果,分析HER-2/neu蛋白表达在不同性别、年龄、病理分型、癌变部位及转移器官数量胃癌患者中的阳性率,并比较HER-2/neu阳性、阴性患者的生存时间。结果:60例胃癌患者中HER-2/neu蛋白阳性者10例,阳性率为16.67%;不同性别及≤60岁和60岁患者间HER-2/neu阳性表达率差异无统计学意义(P0.05)。不同癌变部位、不同病理分型和不同转移器官数量胃癌患者间HER-2/neu阳性表达率差异均有统计学意义(P0.05)。10例HER-2/neu蛋白阳性者中位生存期为2.89个月,而HER-2/neu蛋白阴性者中位生存期为11.9个月,生存时间12个月者多于其总数的1/2(32例),生存时间24个月者6例。HER-2/neu阴性胃癌患者预后显著好于HER-2/neu阳性胃癌患者。结论:胃癌患者HER-2/neu蛋白表达阳性,提示预后不佳。     

胃癌相关MicroRNA研究进展

MicroRNA简称MiRNA,是近年来的研究热点。它们是一类内源性短链非编码小分子核糖核苷酸,长度一般为19～24个核糖核苷酸。MiRNA从DNA转录后经Drosha和Dicer酶修饰后能够与靶点mRNA互补结合从而调控其靶基因的表达。越来越多的的研究证实它们在器官发育和癌症形成过程中都起到了一定的调节作用。近年来MiRNA在癌症形成以及进展中的调节作用得到了广泛的研究。其中,MiRNA在胃癌发生、发展、侵袭、转移中的作用的研究也日益增多。特别是2009年以来,这方面的文献数量有了前所未有的提高。本文目的在于对目前MiRNA分子在胃癌形成、进展、预后以及耐药等方面的作用进行综述,以便研究者能够更好地把握胃癌相关MiR-NA分子的研究进展,为将来的研究以及临床应用打下基础。