大鼠下颌下腺卵泡刺激素受体、雌激素α受体的分布及与促性腺激素释放激素受体的共存

目的 研究卵泡刺激素受体( FSHR)和雌激素α受体(ERα)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体( GnRHR)共存.方法采用免疫组织化学定位和邻片免疫组织化学共定位方法.结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及各级导管的上皮细胞均呈FSHR和ERα免疫反应阳性;在下颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞中观察到了F...     

卵泡刺激素及其受体在胃窦癌的表达及免疫荧光定位

目的研究胃窦癌组织中卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR)的分布情况和表达,为研究FSH与肿瘤发生发展之间的关系提供形态学依据。方法运用免疫荧光法检测36例胃窦癌组织中FSH及其受体的分布,蛋白印迹法(Western blot)检测FSH及FSHR在胃窦癌细胞中的表达。结果 FSH和FSHR在胃窦癌组织细胞胞浆中均有分布,免疫荧光反应阳性物质分布于细胞质,细胞核呈阴性反应。Western blot检测相关蛋白的表达表明,病变组FSH及FSHR的表达均显著低于正常组。结论 FSH和FSHR在胃窦癌的低表达,可能与胃窦癌组织的生物学行为相关。     

大鼠胰腺卵泡刺激素(β)及其受体的免疫荧光定位及原位杂交

目的探讨大鼠胰腺组织中是否表达卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR),为进一步研究FSH对胰腺的功能调节提供理论依据。方法采用单标记免疫荧光技术和原位杂交方法进行研究。结果大鼠胰岛大部分细胞及部分胰腺外分泌部细胞呈FSH蛋白和mRNA,FSHR蛋白和mRNA免疫荧光反应阳性,阳性物质分布于细胞质,细胞核呈阴性反应。结论大鼠胰腺细胞具有自身合成和分泌FSH及其受体的功能,说明FSH对胰腺细胞的作用可能通过旁分泌或自分泌的作用实现的。     

大鼠下颌下腺卵泡刺激素及其受体的原位杂交及核心片段的序列分析

目的探讨大鼠下颌下腺组织中是否表达卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR),为进一步研究FSH对下颌下腺的功能调节提供理论依据。方法正常SD大鼠20只,体质量(200±20)g,腹腔麻醉后切取下颌下腺,采用原位杂交方法对FSH及FSHR进行细胞定位,探讨大鼠下颌下腺是否存在FSH及其受体mRNA,从下颌下腺组织中分别提取总RNA,运用RT-PCR获得FSH及其受体基因的cDNA核心序列,并对其序列进行分析。结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞含有FSH和FSHR mRNA杂交信号,信号物质分布于胞质内,胞核呈阴性反应。从大鼠下颌下腺组织中扩增的FSH及FSHR基因的特异性条带分别为193bp和413bp。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞能合成卵泡刺激素及其受体,进一步说明下颌下腺是FSH作用的靶器官。     

大鼠下颌下腺卵泡刺激素、黄体生成素的分布及与促性腺激素释放激素受体的共定位研究

目的研究卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)共定位的关系。方法采用邻片免疫组织化学共定位方法。结果大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性，阳性颗粒分布在细胞质内，细胞核阴性。邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性，大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性，小部分呈免疫反应阴性。两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内，细胞核阴性。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH。     

GnRH受体在脑膜瘤组织芯片的表达及临床意义

目的：建立人脑膜瘤组织微阵列（组织芯片）,应用组织芯片技术研究促性腺激素释放激素受体（GnRHR）在人脑膜瘤的表达及与脑膜瘤病理分级的相关性.方法：收集手术切除的脑膜瘤蜡块标本126例,制作成直径2.0 mm 的组织芯片,以正常人脑组织为对照,采用免疫组化方法检测GnRHR在不同级别脑膜瘤中的表达.结果：①126例脑膜瘤中GnRHR的阳性表达率为69.05%,随着脑膜瘤WHO分级的增高,GnRHR表达率逐渐下降;不同级别脑膜瘤的GnRHR表达率组间有统计学意义（P=0.0015）;②不同类型脑膜瘤GnRHR阳性表达间差别无统计学意义.③正常脑组织中未见到GnRHR的表达,与脑膜瘤组比较差别有统计学意义.结论：GnRHR与人脑膜瘤发生密切相关,GnRHR在超过半数的脑膜瘤中有表达,而且对脑膜瘤的发展与演变可能起着重要的促进作用.     

GnRH及其受体在兔卵巢和子宫的分布

目的探讨GnRH与其受体(GnRHR)在卵巢和子宫组织中的分布,研究GnRH-A(激动剂Alarelin)主动免疫对GnRH和GnRHR分布的影响。方法 24只日本大耳白雌兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为4组(n=6),实验组和对照组。其中实验1组(EG-1)、实验2组(EG-2)和实验3组(EG-3)分别在兔颈背侧皮下注射1.0m(l100μg/ml、100μg/ml和50μg/ml)GnRH-A抗原,EG-2和EG-3于20d以原剂量加强注射1次,102d无菌采集垂体、卵巢和子宫。用SP法染色,图像分析技术进行定位与分析。结果卵巢和子宫均有GnRH和GnRHR阳性细胞分布,主要见于卵母细胞、卵泡细胞、子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞;GnRH-A的剂量不同,GnRH和GnRH阳性细胞的染色强度也不同,即GnRHR和GnRH的表达量不同。GnRH-A能增加GnRH和GnRH的分布与表达,EG-2的作用更为明显。结论卵巢和子宫中均有GnRH和GnRHR细胞分布,GnRH-A免疫能增强GnRH和GnRHR的表达。     

脊髓灰质炎病毒受体与胃癌患者预后的关系

目的:探讨脊髓灰质炎病毒受体（PVR）对胃癌患者预后的价值。方法:采用生物信息学方法分析PVR mRNA在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达及其与预后的关系。回顾性分析73例接受手术治疗的胃癌患者的临床病理资料。采用免疫组化方法检测胃癌组织及癌旁正常组织中PVR的表达水平,分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果:胃癌组织...     

光照应激对SD大鼠胃促性腺激素释放激素受体表达的影响

目的 观察光照应激状态下SD大鼠胃内促性腺激素释放激素受体（GnRHR）的表达变化。 方法 建立SD大鼠光照应激模型(共64只,实验组与对照组各32只),24h持续光照,分别取光照1d、2d、3d、4d、1周、2周、3周、4周和相应对照组大鼠的胃,采用免疫组织化学、Western blotting和实时PCR法检测GnRHR在各时间段大鼠胃黏膜中的定位及蛋白和mRNA的表达变化。 结果 GnRHR阳性细胞广泛分布于大鼠胃底腺壁细胞中,在对照组和实验组中的定位无差异。实验组大鼠的GnRHR蛋白表达水平高于其相应的对照组。持续光照1～4周后,实验组与其对照组相比差异显著（P<0.05）;当持续光照2周时,GnRHR的表达至最高水平,与其对照组相比,差异极显著（P<0.01）。实验组大鼠胃GnRHR mRNA表达水平高于对照组,持续光照3～4周后,实验组大鼠胃GnRHR mRNA表达水平显著增加（P<0.05）。 结论 光照应激可以影响消化道内GnRHR的表达,提示GnRH通过其受体介导,对消化功能具有潜在的生理调节功能。GnRH除参与消化道正常生理功能外,可能还是一种参与应激反应的激素。     

FSH受体在大鼠下颌下腺的定位及其与FSH的共存关系

目的研究大鼠下颌下腺FSH受体的定位及其与FSH的免疫共定位关系,证明下颌下腺是FSH的一个靶器官。方法制备大鼠下颌下腺石蜡连续切片以免疫组化SABC法分别研究FSH和FSHR的免疫定位。结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、颗粒曲管、排泄管及分泌管上皮细胞内有FSHR和FSH免疫反应阳性物质共存,阳性物质分布在胞质内,胞核阴性。结论大鼠下颌下腺存在FSHR,是雌激素的靶器官,而且FSHR和FSH共存于下颌下腺相同的细胞,FSH可能通过FSHR的介导调节下颌下腺的功能。     

卵泡刺激素受体在大鼠下颌下腺及胃的定位和分布研究

目的研究卵泡刺激素受体（FSHR）在大鼠下颌下腺和胃的定位、分布.方法采用免疫组织化学ABC法.结果大鼠下颌下腺浆液性腺上皮细胞,颗粒曲管及大于颗粒曲管的导管上皮细胞以及胃底腺壁细胞均呈FSHR免疫反应阳性,阳性物质主要位于细胞质内,细胞核呈阴性反应.结论大鼠下颌下腺、胃底腺壁细胞存在FSHR,卵泡刺激素可能通过FSHR的介导对上述两个器官功能进行调控.     

大鼠消化道促性腺激素释放激素受体的免疫组织化学研究

探讨大鼠消化道是否存在ＧｎＲＨ受体及其定位。方法采用兔抗ＧｎＲＨ抗独型抗体的免疫组织化学ＡＢＣ法。结果胃底腺壁细胞,胃小凹上皮细胞及肌间神经丛的副交感神经节细胞呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。     

Evidence that prostate gonadotropin-releasing hormone receptors mediate an anti-tumourigenic response to analogue therapy in hormone refractory prostate cancer

Gonadotropin-releasing hormone analogue (GnRHa) therapy is an established method of androgen withdrawal in the treatment of prostate cancer. The present study investigated if the expression of prostate GnRH receptors (GnRHRs) might influence the response to GnRHa. GnRHR protein expression was first studied in a panel of prostate cancer cell lines. In androgen-dependent cells, GnRHR expression was unchanged following acute or chronic androgen withdrawal. In these cells, GnRHa significantly inhibited androgen-induced cell proliferation (p = 0.01). In contrast, GnRHa was unable to further suppress basal levels of cell proliferation induced by androgen withdrawal. In androgen-independent prostate cancer cells, variable levels of GnRHR expression were observed. In these cells, GnRHa treatment blocked cell proliferation (p = 0.001) and invasion (up to 70%) induced by fibroblast growth factor stimulation. Crucially, this effect was only evident in cells that expressed high levels of the GnRHR. GnRHa treatment also significantly inhibited the ability of these cells to recover from a cytotoxic insult (50% inhibition). The clinical significance of prostate GnRHR was tested by immunohistochemistry in a preliminary cohort of patients treated with GnRHa or surgical castration. There was no association between GnRHR expression and pathological grade, clinical stage, time to PSA nadir (p = 0.82) (n = 35) or progression to hormone refractory disease (p = 0.22) (n = 21), irrespective of the treatment method. GnRHa therapy in the presence of high GnRHR expression however, was found to be associated with longer disease-specific survival (mean survival 85 months, p = 0.002). In contrast, high GnRHR expression was not associated with survival among surgically castrated patients (mean survival 50 months, p = 0.7). Taken together, these data support the notion of a functional interaction between GnRHa and the GnRHR, which results in an anti-tumourigenic effect on prostate cancer cells. Findings from this report have direct implications for the use of GnRHR as a novel therapeutic target in hormone refractory prostate cancer.     

卵泡刺激素受体基因多态性与西北地区汉族妇女卵巢反应性的关系

目的探讨卵泡刺激素受体基因（FSHR）-29（rsl394205）和Asn680Ser（rs6166）位点多态性与西北地区汉族妇女控制性超排卵（COH）中卵巢反应性的关系。方法采用限制性酶切技术对卵巢高反应患者45例,卵巢低反应患者27例和卵巢正常反应的对照69例的FSHR基因-29（rsl394205）位点和第10号外显子Asn680Ser（rs6166）位点进行分型,并通过Fisher’s精确检验的方法分析基因型和等位基因的分布频率。结果①FSHR基因-29位点基因型、等位基因频率在三组间分布无差异。②Asn680Ser位点基因型、等位基因频率在卵巢高反应组与正常对照组间无统计学差异（P〉0．05）;Ser／Ser基因型频率在卵巢低反应中占40．7％,与正常对照组差异有统计学意义（P〈0．01）;携带G等位基因者发生卵巢低反应的风险增加（OR=2．37,％95CI=[1．25-4．52]）。结论FSHRAsn680Ser位基因多态性与西北地区汉族妇女COH中的卵巢低反应相关。当Asn680Ser（rs6166）位点G等位基因的存在增加卵巢低反应的风险。     

GnRH激动剂主动免疫对GnRHR在腺垂体与子宫表达及分布的作用研究

目的探讨GnRH激动剂主动免疫对绵羊腺垂体与子宫GnRHR表达及分布的影响,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 28只5～6月龄健康母绵羊(Ovis aries)随机分为4组(n=7),实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、实验Ⅱ组(EG-Ⅱ)和实验Ⅲ组(EG-Ⅲ)于0 d和14 d分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg(0 d和14 d各1次);对照组(CG)皮下注射2.0 ml药物的溶媒(0 d和14 d各1次)。各组于70 d无菌切取腺垂体和子宫。提取腺垂体总RNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测GnRHR mRNA表达的变化,Western blotting分析子宫GnRHR蛋白表达,免疫组织化学SP法染色检测GnRHR表达的变化。结果 EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ腺垂体GnRHR mRNA表达量均低于对照组,以EG-Ⅲ最小(P<0.01)。与CG相比,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ子宫GnRHR蛋白表达水平分别减少3.46%、4.90%和24.78%(P<0.05)。子宫组织中有GnRHR分布主要见于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核,EG-Ⅲ灰度值显著低于CG(P<0.05)。结论 GnRH激动剂主动免疫可以剂量依赖性地抑制垂体GnRHR mRNA和子宫组织中GnRHR蛋白的表达。GnRHR主要分布在子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞的胞核和胞质,GnRHR激动剂免疫对子宫中GnRHR的分布具有抑制作用。     

Detection of gonadotropin-releasing hormone receptor in normal human pituitary cells and pituitary adenomas using immunohistochemistry

Gonadotropin-releasing hormone (GnRH), which is a well-known regulator of gonadotroph function, has recently been considered to be a paracrine factor involved in the control of somatotroph, lactotroph, and corticotroph cells. GnRH action is initiated by binding to a specific cell surface receptor, the gonadotropin-releasing hormone receptor (GnRHR), which is expressed by follicle-stimulating hormone/luteinizing hormone (FSH/LH) cells. Using in situ hybridization techniques, GnRHR messenger ribonucleic acid (mRNA) has recently been detected in normal human anterior pituitary gland and in various pituitary adenomas, including FSH/LH-cell, growth hormone (GH)-cell, adrenocorticotropic hormone (ACTH)-cell, and null-cell adenomas. However, immunohistochemical studies indicating the specific cell distribution of GnRHR in normal pituitary cells have never been reported. The aim of the present investigation was to evaluate the immunohistochemical expression of GnRHR in different types of normal pituitary cells and related tumors. Using double-label immunohistochemical techniques on formalin-fixed and paraffin-embedded tissues and specific antibodies directed against pituitary hormones and GnRHR, we found GnRHR immunoreactivity not only in FSH/LH cells, but also in GH- and thyroid-stimulating hormone (TSH) cells. GnRHR was detected in FSH/LH-cell, GH-cell, mixed GH- and prolactin (PRL)-cell, and α-subunit (α-SU)/null-cell adenomas. The findings of this study suggest that the interaction between GnRH and GnRHR may play a role in paracrine/autocrine regulation of different types of normal pituitary cells and pituitary adenomas. Received: 24 January 2000 / Accepted: 12 April 2000     

黄体生成素及其受体在大鼠肝脏的定位

目的观察黄体生成素(LH)及其受体(LHR)在大鼠肝脏的定位分布,为研究LH是否参与肝代谢功能的调节提供形态学依据。方法应用免疫荧光组织化学双标染色技术,在激光共聚焦扫描显微镜下观察染色结果。结果大鼠肝细胞既呈LH阳性又有LHR阳性,LH和LHR免疫反应阳性物质均分布在大鼠肝细胞的细胞质,细胞核为阴性。不同部位的肝细胞LH及其受体免疫反应强度存在差别。结论 LH及其受体存在于大鼠肝脏细胞,可能对肝脏的功能起调节作用。