研磨珠均质仪提取增生性瘢痕组织蛋白质的方法

目的 利用研磨珠均质仪,从临床增生性瘢痕组织样本中充分提取蛋白质。方法 临床收集烧伤后增生性瘢痕组织样本,通过玻璃匀浆器、研磨珠均质仪等方法,提取样本总蛋白,比较提取后残渣,BCA测定总蛋白浓度,蛋白凝胶电泳考马斯亮蓝染色观察蛋白质条带完整性,和western blot比较前列腺素D合成酶的含量（PTGDS）。结果 玻璃匀浆器与研磨珠均质仪联合方法残渣呈絮状均匀,获得蛋白质量最大,差异具有统计学意义（P＜0.05）,蛋白凝胶电泳考马斯亮蓝染色样本均未降解,Western blot测得联合方法提取样本中前列腺素D合成酶含量更高。结论 玻璃匀浆器与研磨珠均质仪的联合提取临床增生性瘢痕组织样本中获得蛋白质较为高效,是一种临床瘢痕组织蛋白样本提取方法。     

组织细胞中胶原蛋白的提取及ECL-Western blot分析

目的建立一种可简便、有效的胶原蛋白提取、纯化及型别分析的测定方法.方法用破碎、酶解和盐析3步法提纯胶原,用ECL-Western blot测定细胞基质胶原(200例)、正常组织及工程化修复组织中的胶原(30例).结果该法提取胶原的时间周期短,得率高于传统方法的2.5倍,纯度达到了PAGE纯化的水平.结论该法具有简便、快速、灵敏和无放射性污染等优点,为组织工程胶原的深入研究提供了有价值的测试手段.     

胶原蛋白缝线和胶原蛋白生物膜的生物相容性评价

目的:初步评价胶原蛋白缝线（CS）和胶原蛋白生物膜（CB）的生物相容性。方法:通过热原实验判断CS和CB中所含热原量是否符合人体要求;分别采用皮肤和皮内刺激实验评价CS和CB对皮肤是否具有刺激作用;通过溶血实验评价CS和CB是否具有溶血作用;通过肌肉埋植实验评价CS和CB植入兔肌肉组织后的刺激和毒性反应。结果:热原实验...     

A型肉毒毒素可抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原蛋白的合成

背景：A型肉毒毒素伤口周围局部注射可以减少瘢痕的形成,而且对瘢痕的增生挛缩有抑制作用,可以促进瘢痕的萎缩变平。 目的：观察A型肉毒毒素对人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原蛋白合成的影响。 方法：体外分离、培养人增生性瘢痕成纤维细胞,取对数生长期的细胞接种培养,使用稀释浓度为0.1 U/L A型肉毒素DMEM细胞培养基对细胞的生长过程进行干扰,对照组以含胎牛血清的DMEM培养基培养。 结果与结论：细胞接种第1~15天,对照组可见梭形的增生性瘢痕成纤维细胞分裂增殖,局部融合成细胞单层,细胞生长旺盛,细胞排列呈现高度一致性。A型肉毒毒素组细胞增殖速度慢,细胞数量少,细胞排列方向散乱,A型肉毒毒素组细胞数为对照组细胞数的79.3%,A型肉毒毒素实验组胶原蛋白合成量为正常对照组的48.4%,差异有显著性意义(P < 0.05)。提示A型肉毒毒素可以抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖以及胶原蛋白的合成。      

重组人Ⅲ型胶原蛋白的表达纯化及性能研究

目的:表达和纯化重组人Ⅲ型胶原蛋白（rhCol）,并评价其性能。方法:构建重组基因工程菌pET30a（+）-1880/pACYCDuet-hy726/BL21（DE3）,稳定共表达rhCol和脯氨酰羟化酶。通过大肠杆菌高密度发酵与盐析和柱层析蛋白纯化技术制备并纯化rhCol。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定rhC...     

囊尾蚴胶原蛋白的提取与分析

作者首次从猪囊尾蚴中提取胶原蛋白,用紫外分光仪、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、透射电镜和ＥＬＩＳＡ等方法对猪囊尾蚴胶原蛋白进行了初步分析。表明：（１）猪囊尾蚴中含有一定量的胶原蛋白;（２）胶原蛋白主要以Ⅰ型为主,分子量在８０ｋＤａ～１３０ｋＤａ之间;（３）通过酶联免疫吸附实验,检测其抗原性。对４２例脑囊虫病患者血清ＩｇＧ抗体的检测,阳性率达８８．１％,而对３０例正常人检测结果均为阴性。说明囊尾蚴胶原蛋白对人具有很强的免疫性,其抗原决定簇可刺激机体产生特异性ＩｇＧ抗体。因此猪囊尾蚴胶原蛋白是具有很强的抗原性的一组蛋白质,有望成为囊虫病新的免疫诊断用抗原。     

骨质疏松大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白的含量变化

背景：目前研究认为胶原蛋白在骨细胞的增殖与分化、骨质的形成和吸收、骨基质矿化等过程中起着非常重要的作用。 目的：观察骨质疏松模型大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量变化。 方法：SD雌性大鼠40只随机分为实验组和对照组,实验组大鼠行双侧卵巢切除16周后,取膝关节软骨和交叉韧带,采用微量羟脯氨酸测定法及酶联免疫吸附法测定大鼠膝关节软骨及前交叉韧带组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量。 结果与结论：骨质疏松膝关节模型大鼠膝关节软骨、前交叉韧带总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量明显下降(P < 0.05),Ⅰ型/Ⅱ型胶原比值也显著降低(P < 0.05),提示骨质疏松可引起膝关节内组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原含量及其比值改变,与膝关节骨性关节炎的发生密切相关。     

miR-425-5p靶向TGF-β1/Smad2信号通路减少小鼠增生性瘢痕组织胶原纤维沉积

目的 探究miR-425-5p在增生性瘢痕(HS)形成中的作用及机制。方法 通过RT-qPCR和Western blot检测了16对HS组织和正常皮肤组织中miR-425-5p、转化生长因子-β1(TGF-β1)和SMAD家庭成员2(Smad2)的水平。将成纤维细胞分为9组：对照组(control组)、miR-425-5p-mimic组、NC-mimic组、miR-425-5p-inhibitor组、NC-inhibitor组、TGF-β1-pcDNA3.1组、NC-pcDNA3.1组、miR-425-5p-mimic+NC-pcDNA3.1组和miR-425-5p-mimic+TGF-β1-pcDNA3.1组,并采用Lipofectamine 2000对细胞进行转染处理。通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-425-5p和TGF-β1的靶向关系。通过博莱霉素(BLM)诱导小鼠增生性瘢痕,然后将小鼠随机分为3组,对照组(NC-agomir)、模型组(NC-agomir+BLM)和转染miR-425-5p干预模型组(miR-425-5p-agomir+BLM),小鼠均治疗21 d。通过M...     

Smad泛素化调节因子-2及其mRNA在增生性瘢痕组织中的表达

目的研究烧伤后增生性瘢痕组织中Smad泛素化调节因子－2（Smurf2）及其mRNA的表达。方法选取烧伤后增生性瘢痕患者9例,取材于患者整形手术切除的瘢痕,同时取同一患者剩余正常皮肤作为对照。Western blotting方法检测smurf2蛋白水平,RT—PCR检测其mRNA表达;进一步分离培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞,加入外源件转化生长凶子β1（TGF—β1）刺激,观察Smurf2蛋白和mRNA水平的变化。结果增生性瘢痕组织中Smurf2蛋白水平和mRNA表达显著高于正常皮肤（P〈0．05）,而且,在外源性TGF—β1刺激下,瘢痕成纤维细胞中Smurf2蛋白和mRNA表达呈时间依赖性增加。结论烧伤后增生性搬痕组织中Smurf2及其mRNA表达增强;在TGF—β1刺激下,瘢痕成纤维细胞中Smurf2及儿mRNA表达逐渐增加。     

鱿鱼软骨Ⅱ型胶原蛋白提取方法及结构分析

目的从鱿鱼软骨中分离纯化非变性II型胶原蛋白,并对其进行结构表征。方法将鱿鱼软骨冻干后粉碎成200目软骨粉,用4%(w/w)Na OH溶液去除多糖、0.5 M EDTA溶液脱灰对软骨进行前处理,采用胃蛋白酶水解提取,Na Cl盐析用纯水透析后冷冻干燥得到II型胶原蛋白样品。通过氨基酸组成分析、SDS-PAGE电泳、紫外吸收光谱、电镜扫描等对制备的样品鉴定。结果制备的II型胶原蛋白具有3条α1链,分子量112 k Da,在224.5 nm波长处有最大紫外吸收,具有三螺旋结构特征。     

剖宫产术后子宫疤痕妊娠的临床诊治

剖宫产术后子宫疤痕妊娠是临床上一种极度危险的妊娠类型,它是剖宫产的远期并发症之一,其确切发病机理目前尚不完全明确,与多种因素相关。目前,临床治疗剖宫产瘢痕妊娠没有统一的规范标准,无一种理想的、一致的治疗途径及方法。本文综述剖宫产术后子宫疤痕妊娠的临床诊治,目的在于为剖宫产瘢痕妊娠的临床诊治提供一定的参考依据。     

举宫杯在腹腔镜下剖宫产瘢痕妊娠病灶清除术中的临床应用

目的 探讨举宫杯在经腹腔镜下剖宫产瘢痕妊娠病灶清除术中的临床应用价值。方法 回顾性分析2016年1月~2018年6月在我院住院治疗的52例剖宫产瘢痕妊娠患者相关资料。根据治疗方式不同分组,将经安置举宫杯后行腹腔镜下剖宫产瘢痕妊娠病灶清除术的28例设为研究组,将未安置举宫杯直接行腹腔镜下剖宫产瘢痕妊娠病灶清除术的24例设为对照组。比较两组术中出血量、手术时间、术后月经恢复时间、HCG恢复正常时间、取尿管时间、术后疼痛、持续性切口妊娠发生、住院时间及费用。结果 研究组术中出血量（56.67±0.55）ml、手术时间（58.51±0.67）ml,取尿管时间（1.08±0.03）d均少于对照组的（121.50±1.24）ml、（118.98±4.74）ml、（2.16±0.05）d,具有统计学意义（P＜0.05）。两组术后月经恢为复时间、HCG复常时间、术后疼痛、住院时间、住院费用、术后疼痛、术后持续性切口妊娠发生情况比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 举宫杯在腹腔镜下剖宫产瘢痕妊娠病灶清除术中具有减少出血量、缩短手术时间等优点,对降低手术难度具有重要意义。     

Capillary Growth of Rat Aortic Segments Cultured in Collagen Gel without Serum

The process of angiogenesis was studied under serum-free conditions using rat aortic segments in three-dimensional collagen gel. In serum-free and growth factor free conditions, the capillaries formed networks and tube-like structures, and the endothelial cells produced von Willebrand factor, laminin and type IV collagen, but the number of capillaries was lower and their growth was slower than in medium containing 20% fetal calf serum (FCS). Incorporation of bromodeoxyuridine (BrdU) and inhibition of growth by hydroxyurea suggested that capillary growth depended mainly on cell proliferation and not on migration. Capillary growth in PRMI 1640 or DM EM was similar and more efficient than in MEM. Only slight growth was seen in Medium 199 and HAM-F12. The addition of serum to the medium accelerated capillary growth in proportion to the amount added. In serum-free conditions, ITS(+) and fibroblast growth factor (FGF) promoted capillary growth, but not to a significant extent. There ware no differences in capillary growth among the gel matrices used (type I collagen, type I+ 11 collagen, type I IV collagen, fibrin and plasma clot).     

剖宫产瘢痕妊娠病灶切除术与子宫动脉栓塞术后 清宫的效果比较

目的 比较剖宫产瘢痕妊娠病（CSP）灶切除与子宫动脉栓塞后清宫的临床效果。方法 回顾性分析2015年1月~2018年6月我院收治的110例剖宫产瘢痕妊娠患者的临床资料,根据手术方式分为手术组（52例）和清宫组（58例）,手术组行瘢痕病灶切除术,清宫组同期行子宫动脉栓塞后清宫,比较两组术中出血量、血HCG下降至正常的时间、住院费用及术后第1次月经量改变情况。结果 手术组平均出血量为（80.59±17.12）ml,高于清宫组的（8.65±1.53）ml,差异有统计学意义（P＜0.05）;手术组血HCG下降至正常时间为（22.40±7.45）d,少于清宫组的（31.80±8.24）d,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组住院费用比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;清宫组有9例出现术后第1次月经量减少,手术组无患者发生月经量改变。结论 瘢痕妊娠病灶切除与子宫动脉栓塞后清宫的住院费用相当,但子宫动脉栓塞后清宫有瘢痕持续存在、术后血HCG下降缓慢、部分患者出现月经量减少的缺点,故对于肌壁厚度＜4 mm,有再生育要求的CSP患者,瘢痕病灶切除术应作为首选的治疗措施。     

DNA甲基化在病理性瘢痕中的作用研究

病理性瘢痕是指烧伤、创伤和手术等后创面过度修复引起,以胶原等大量细胞外基质产生与沉积失衡为特征的皮肤纤维增生性疾病,包括增生性瘢痕与瘢痕疙瘩等。随着对增生性瘢痕研究的不断深入,人们发现DNA甲基化在瘢痕形成的发生和发展过程中起着重要的作用。本文就DNA甲基化在病理性瘢痕中作用的研究进展进行综述。     

经阴道彩色多普勒超声在诊断剖宫产子宫疤痕妊娠中的 价值研究

目的 观察在剖宫产子宫疤痕妊娠中应用经阴道彩色多普勒超声的诊断价值。方法 选取2015年2月~2017年6月在我院就诊治疗的剖宫产子宫疤痕妊娠患者120例,均经临床病理学确诊,所有患者全部行经阴道和腹部彩色多普勒超声检查,并记为观察组（阴道超声组）和对照组（腹部超声组）,观察并对比两组的检查诊断结果和声像学分析结果。结果 观察组检查准确率为93.33%,高于对照组的81.67%,差异具有统计学意义（P＜0.05）;观察组患者中切口处孕囊型26例,包块型21例,混合型9例,对照组患者中切口处孕囊型25例,包块型19例,混合型5例,两组间相比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 在剖宫产子宫疤痕妊娠中应用经阴道彩色多普勒超声进行诊断,具有更高的准确性,对于临床确诊有更佳的意义,值得推广应用。     

胶原蛋白面膜联合口服药物治疗面部 激素依赖性皮炎疗效观察

目的 观察胶原蛋白面膜在面部激素依赖性皮炎治疗中的有效性。方法 选取2015年5月~2018年1月我院200例面部激素依赖性皮炎患者,采用随机数表法分为治疗组103例和对照组97例。治疗组采用胶原蛋白面膜联合口服复方甘草酸苷胶囊、羟氯喹治疗,对照组单纯口服复方甘草胶囊、羟氯喹治疗,观察两组患者治疗有效率及不良反应情况。结果 治疗组治疗有效率为89.32%,高于对照组的72.16%,组间比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;治疗后两组患者均未出现明显不良反应,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 胶原蛋白面膜联合复方甘草酸苷胶囊、羟氯喹治疗面部激素赖性皮炎疗效确切,可修复皮肤屏障功能,提高治疗效果,不良反应少,值得临床推广。     

角膜胶原交联术的应用研究

角膜胶原交联术是一种新型的角膜塑形技术。采用紫外线照射浸润了核黄素的角膜组织,使其发生光化学反应,从而增强角膜的力学强度和生物学稳定性。这种技术最初用于成年人进展型圆锥角膜,经过多年发展,在照射途径、照射能量、照射时间、光敏剂的选择等各方面研究不断深入,并与各种角膜手术相结合,开拓了更广泛的应用领域。其安全性、有效性、临床应用的局限性和并发症等方面认识也更深刻,本文就以上各方面进行综述。     

增生性瘢痕分子信号通路研究

增生性瘢痕是临床常见的皮肤纤维增生性疾病,因伤口过度愈合而形成的。其从外观和机体功能方面均给患者带来心理和生理上的痛苦,严重者甚至影响患者自信心,使其产生自卑心理。增生性瘢痕的形成机制虽未完全清楚,但伴随着相关研究的不断深化,目前关于该病发病机制的研究已经进入到细胞、分子和基因水平。其中转化生长因子-β1信号通路、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路、Hippo信号通路、Notch信号通路和Hedgehog信号通路参与了增生性瘢痕的形成过程,本文主要就上述信号通路在增生性瘢痕发病机制中的研究做一综述,旨在为进一步认识增生性瘢痕的发病机制提供参考。