水痘-带状疱疹病毒基因型的研究进展

水痘-带状疱疹病毒(VZV)属疱疹病毒α亚科,为双链DNA病毒,原发感染引起具有高度传染性的世界流行性疾病--水痘,潜伏感染再激活可导致带状疱疹.水痘-带状疱疹病毒虽然是人类疱疹病毒中最具遗传稳定性的一种病毒,但其基因组内仍存在多个单一核苷酸的变异,其中有些已成为VZV基因组内单核苷酸多态性(SNP)标记.目前已有几个研究组依据不同的SNP组合,将世界各地流行的VZV株划分为3～4个基因型.本文就VZV基因分型的研究状况进行综述.     

水痘-带状疱疹病毒的潜伏与再激活机制研究进展

水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)原发性感染通常会引起儿童期水痘,之后病毒可潜伏于人类外周神经节中,在数十年后重新激活造成带状疱疹,也与危及生命的脑炎、血管病变和脑膜炎等疾病有关。VZV潜伏和再激活的机制尚未得到很好的解释,原因之一是VZV只感染人类,无法使用大多数动物及动物来源的神经元模型。越来越多的证据表明,VZV潜伏是表观遗传学调控的,可用于信号通路分析和表观遗传调节鉴定的体外模型为探索VZV潜伏与再激活机制提供了帮助。此文综述了VZV的分子生物学和VZV潜伏与再激活机制方面的研究进展,并提出了未来的研究方向。     

水痘-带状疱疹病毒Oka疫苗株与野毒株序列比对

目的 观察水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)Oka疫苗株(V-Oka株)的传代稳定性,并与分离于水痘患者的野毒株进行序列比对.方法 将V-Oka株在人二倍体细胞MRC-5中连续传代培养至50代,提取32、34、38、42、46和50代V-Oka株及野毒株的DNA,对主要基因(OR...     

检测抗水痘-带状疱疹病毒抗体的糖蛋白ELISA的建立和初步验证

目的 建立抗水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)抗体的VZV糖蛋白(glycoprotein,gp) ELISA(VZVgp ELISA),提高抗VZV抗体的检测灵敏度.方法 将收获的VZV进行超声破碎和亲和层析,得到纯化的VZVgp.以VZVgp作为包被抗原,用筛选的高滴度抗VZV抗体阳性血清摸索ELISA的相关条件来建立VZVgp ELISA,并验证该法的特异性、精密度和灵敏度.同时将建立的VZVgp ELISA与同类进口试剂盒进行比较.结果 成功建立了检测抗VZV抗体的VZVgp ELISA,该法特异性强、精密度好(变异系数＜10％)、灵敏度高,与国外同类试剂盒检测结果间的差异无统计学意义(x2=1.310,P=0.252).结论 建立的VZVgp ELISA特异、灵敏,可用于人群血清抗VZV抗体的筛查和VZV感染的流行病学调查.     

水痘-带状疱疹疫苗接种预防带状疱疹

带状疱疹是由以前的水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)感染再度激活而引起,主要发生于老年人和免疫系统功能障碍者,可能是VZV特异性细胞介导免疫力减弱或丧失所致.目前治疗带状疱疹和疱疹后神经痛的方法包括抗病毒剂和止痛药,随之带来较高的经济费用.一些临床试验已证实0ka/Merck株VZV减毒活疫苗(ZostavaxTM)是安全的,能增强VZV特异性细胞介导免疫力,并能在60岁以上人群中显著降低带状疱疹和疱疹后神经痛的发生率.该疫苗最近已通过审批,一旦使用,可望明显减少带状疱疹发病和与之相关的费用.     

水痘带状疱疹病毒Oka株的培养特性和温度敏感性研究

目的  研究水痘带状疱疹病毒（varicella-herpes zoster virus,VZV）Oka株的培养特性及对温度的敏感性。方法  对VZV Oka株感染的2BS细胞进行培养,当2BS细胞的致细胞病变效应（cytopathic effect,CPE）达到10%时,开始收集0、3、6、9、12、18、24、36 h的病毒悬液并检测病毒滴度,观察病毒生长曲线。从VZV培养的第1天起,每天检测病毒蛋白浓度,连续检测7 d,观察病毒蛋白浓度变化。将3、12、24、36 h收集的病毒悬液分别于4 ℃和25 ℃放置0、3、6、9、12、24 h,并检测病毒滴度。结果  在2BS细胞的CPE达到10%后0~12 h和12~24 h,病毒生长分别进入对数期和平台期,随后进入衰亡期。在VZV培养过程中,病毒蛋白在经历2 d的初始期后,于2~6 d进入对数期,随后进入平台期。不同生长时期的病毒置于4 ℃的滴度下降幅度和速度都小于置于25 ℃。结论  VZV Oka株具有一般病毒的培养特性,并受温度影响较大。     

水痘减毒活疫苗病毒的单核苷酸多态性分析

水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus,VZV）是引起水痘和带状疱疹的主要病原体,Oka株水痘减毒活疫苗（V-Oka）能有效预防水痘发生。V-Oka株与Oka亲本株之间存在至少42个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点差异,部分位点与V-Oka株的减毒特性有关。目前已知有6个SNP位点为疫苗型位点,可用于区分V-Oka病毒与野生型病毒。近期研究发现某些SNP位点与疫苗相关皮疹有关。此文对水痘减毒活疫苗的重要SNP位点做一综述。     

EB病毒与干燥综合征的相关性研究

目的研究EB病毒感染与干燥综合征发病及致病作用的关系。方法通过回顾2016年1月至2017年12月在山西大医院就诊的72例干燥综合征病例和60名健康体检者并收集其外周血样本和乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝外周血标本,用酶联免疫吸附试验检测血清EB病毒抗体4项[抗早期抗原IgG抗体(EAIgG)、抗衣壳抗原IgM抗体(VCA-IgM)、抗衣壳抗原IgG抗体(VCA-IgG)、抗核心抗原IgG抗体(EBNA-IgG)],用实时荧光免疫定量聚合酶链反应(PCR)检测外周血单个核细胞的EB病毒核酸。比较2组各检测项目的阳性率,使用Kappa一致性检验评估2类检测结果之间的一致性,并根据EV病毒DNA阳性与否进行分组,研究EB病毒活动与干燥综合征临床表现是否相关。结果 (1)VCA-IgG在疾病组及健康对照组中的阳性率为97.2%(70/72)及98.3%(59/60)(χ2=0.182,P=0.670);EBNA-IgG在疾病组及健康对照组中的阳性率为95.8%(69/72)及95.0%(57/60)(χ2=0.052,P=0.819);EA-IgG在疾病组及健康对照组中的阳性率为11.1%(8/72)及5.0%(3/60)(χ2=1.600,P=0.206);VCA-IgM在疾病组及健康对照组中的阳性率为23.6%(17/72)及0(0/60)(χ2=16.261,P<0.01)。外周血单核细胞中EB病毒核酸在2组中的阳性率分别为31.9%(23/72)及13.3%(8/60)(χ2=6.308,P=0.012)。(2)相同标本单个核细胞EB病毒核酸与血清EA-IgG、VCA-IgM检测结果的一致性较差(Kappa值分别为0.023和0.050)。(3)EB病毒活动与干燥综合征临床表现无相关性(P>0.05)。结论干燥综合征患者EB病毒感染阳性率明显高于健康体检人群;EB病毒核酸与EB病毒血清学检测结果之间的一致性较差;EB病毒活动与干燥综合征的病情无关。因此,EB病毒可能参与了干燥综合征的发病,而非促进病情活动。     

应用间接荧光免疫法测定细胞中特异CMV病毒早期抗体（PENA）方法的建立

目的：介绍了敏感、稳定、快速、简便的实验室检测CMV的方法。方法：对508例病人应用间接荧光免疫法测定细胞核中的特异病毒早期抗体（PENA）。结果：强阳性252例，阳性率50．60％；弱阳性81例，阳性率16．27％。结论：该方法操作简便，可对CMV感染进行早期测定及诊断，同时具有敏感性和稳定性，是测定CMV感激的一种较好的方法。     

抗汉城病毒荧光单克隆抗体的制备及初步应用

目的 制备抗汉城病毒（Seoul virus,SEOV）荧光单克隆抗体（单抗）,并初步应用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液的病毒灭活验证。 方法  以SEOV L-99株灭活病毒原液为免疫原,采用小鼠杂交瘤细胞融合技术,筛选抗SEOV特异性单抗杂交瘤;小鼠体内诱生法制备单抗腹水,蛋白A亲和层析纯化单抗,并以蛋白质印迹法鉴定其特异性;间接ELISA测定单抗效价和相对亲和力;纯化单抗采用搅拌法标记异硫氰酸荧光素,并分别采用直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法对Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行病毒灭活验证。结果 共筛选出4株特异性抗SEOV L-99株杂交瘤1D5、2E3、3A4及5B7。蛋白质印迹法鉴定4株单抗均与SEOV L-99株核衣壳蛋白发生特异性反应;间接ELISA测定腹水效价为3.13×10^-8~ 1.25×10^-7;相对亲和力顺序为1D5>3A4>2E3>5B7;纯化抗体纯度>95%;异硫氰酸荧光素标记1D5株单抗的结合比率为3.4;直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法检测盲传3代的Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液,病毒灭活验证结果一致。结论 成功筛选到高效价特异性抗SEOV单抗,并制备成荧光单抗,可用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗生产工艺中的病毒灭活验证。     

肝抗原自身抗体测定在自身免疫性肝病的临床评价

目的 探讨肝抗原自身抗体在自身免疫性肝病患者血清中的阳性率。方法 155例患者分为三组：自身免疫性肝病组45例，包括自身免疫性肝炎（AIH）15例、原发性胆汁性肝硬化（PBC）20例、原发性硬化性胆管炎（PSC）10例；病毒性肝炎组50例；不明原因肝损伤组30例。分别用间接免疫荧光法、免疫印迹法检测肝抗原（SAL／LP、LKM，1、LC-1、LC-1）自身抗体。结果 抗SLP／LP抗体在AIH患者血清中阳性率为46．4％，明显高于LKM．1（13．3％）、LC-1（0％）及AMA-M2（13．3％）抗体，并且在病毒性肝炎患者血清中呈阴性反应。抗AMA-M2抗体在PBC患者血清中阳性率达95．0％。不明原因肝损伤组患者中有6．6％的AMA—M2抗体阳性。结论 抗SLA／LP抗体对AIH具有特异性，肝抗原自身抗体的检测将有助于自身免疫性肝病患者的诊断及治疗。     

联合检测丙型肝炎抗体和核心总抗原的临床价值探讨

目的探讨联合检测丙型肝炎抗体和核心总抗原（HCV—cAg）在临床中的应用价值。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）法联合检测HCV抗体和HCV—cAg,并与荧光定量PCR法检测丙型肝炎核酸（HCV—RNA）的结果进行对照。结果157例患者中共检出HCV抗体阳性149例、HCV—cAg阳性99例、HCV-RNA阳性115例;5例HCV抗体阴性而HCV—cAg阳性的患者,经HCV—RNA证实为HCV感染;共检出HCV抗体或HCV—cAg阳性154例,另外3例经HCV—RNA排除HCV感染。结论联合检测HCV抗体和HCV—cAg提高了HCV感染的检出效率,可有效避免漏检,适合在普通医疗机构推广使用。     

宝安区6~15岁在校儿童高浓度麻疹IgG抗体影响因素研究

目的研究分析宝安区6~15岁在校儿童高浓度麻疹免疫球蛋白G(IgG)抗体影响因素。方法研究共调查宝安区6~15岁在校儿童444例,均采集静脉血1 ml,分离血清并进行麻疹IgG抗体的定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,并对高浓度麻疹IgG抗体影响因素进行单因素及多因素分析。结果单因素分析结果显示:年龄、父亲文化程度、母亲文化程度、麻疹疫苗接种剂次、首针接种月龄是6~15岁在校儿童高浓度麻疹IgG抗体的影响因素,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、首针接种月龄为6~15岁在校儿童高浓度麻疹IgG抗体的主要危险因素,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论儿童麻疹发病的预防控制,对于麻疹疫苗首剂的接种,可以考虑将首剂接种月龄延后,以提高疫苗的效力。对于该年龄段的儿童可以考虑结合实际情况,适时进行加强免疫。     

两种双抗原夹心法检测抗人类免疫缺陷病毒抗体的方法比较

目的 探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)与胶体金法检测抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV抗体)的灵敏度及特异度.方法(1)灵敏度试验:将15份经免疫印迹法确诊为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者的血清进行倍比稀释,应用ELISA法和胶体金法检测所有患者血清原液、稀释血清的抗HIV抗体,记录两种方法抗HIV抗体检测结果为阳性的最大稀释倍数.(2)特异度试验:应用上述两种方法同时检测200份非AIDS患者的血清,记录两种方法的阴性率.结果(1)灵敏度试验:ELISA法的最大稀释倍数显著高于胶体金法(P＜0.05).(2)特异度试验:两种方法的阴性率均为100％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ELISA法抗HIV抗体的灵敏度优于胶体金法,但是两种方法检测血清原液的灵敏度、特异度结果均一致,因此胶体金法可以代替ELISA法用于AIDS的初筛试验.     

测定六价轮状病毒疫苗各型病毒滴度的荧光灶试验的验证

目的  验证荧光灶试验（fluorescence focus assay,FFA）作为测定六价轮状病毒疫苗各型病毒滴度方法的可行性。方法  采用FFA法测定轮状病毒G1、G2、G3、G4、G8、G9型滴度,并验证该法的专属性、精密度、线性、准确性、范围和耐用性。 结果  各型病毒均可与对应的单克隆抗体（单抗）发生特异性荧光灶反应,不与抗异型病毒单抗发生交叉反应。试验内和试验间测定结果的相对标准偏差均小于5%。各型轮状病毒实测滴度与理论滴度间的线性相关系数均≥0.99。不同稀释度各型病毒的回收率为90%~120%。改变病毒培养时间对检测结果没有影响。该法的定量限为：G1、G2、G3、G4、G8、G9型滴度分别>2.8、>4.2 、>3.7、>3.6、>4.1和>4.2 lg荧光灶单位/ml,均符合六价轮状病毒疫苗的质控要求。结论  该法测定不同型轮状病毒滴度具有较好的专属性、精密度、线性和准确性,可用于六价轮状病毒疫苗各型病毒滴度的测定。