P38、MAPK-1和AQP-4在糖皮质激素调节大鼠创伤性脑水肿中的作用

目的 探讨糖皮质激素对P38、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK-1）的调节作用及其对大鼠创伤后脑组织水通道蛋白 4（AQP-4）表达的影响。方法 选择SPF级雄性SD大鼠140只,随机分为假手术组、模型组、低剂量治疗和高剂量治疗组,各35只。假手术组单纯实施开颅手术,模型组、低剂量治疗组和高剂量治疗组用Feeney's自由落体法制备大鼠脑创伤模型,高剂量治疗组和低剂量治疗组分别予高、低甲泼尼龙尾静脉注射。分别于伤后0、6、24、72 h、7 d处死动物,取脑组织标本,透射电镜观察各组大鼠神经细胞结构变化,免疫组化法测定各组大鼠AQP-4、P38、MAPK-1的表达水平,用荧光探针原位杂交法测定AQP-4mRNA的表达。结果 ①假手术组大鼠脑神经结构基本正常,细胞质、细胞膜及细胞核完整清晰。模型组神经细胞体积缩小,细胞膜结构破坏,胞浆疏松,细胞核固缩,凋亡小体形成。与模型组相比,低剂量治疗组、高剂量治疗组大鼠神经细胞坏死程度均较轻。②低剂量治疗组及高剂量治疗组大鼠伤后24、72 h及7 d的AQP-4阳性表达率均低于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）,低剂量与高剂量治疗组间表达比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。低剂量治疗组及高剂量治疗组大鼠在伤后24、72 h及7 d的P38、MAPK-1阳性表达率均低于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）,低剂量与高剂量治疗组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。③低剂量治疗组和高剂量治疗组的AQP-4mRNA阳性表达率在伤后24、72 h及7 d均低于模型组,高于假手术组,差异有统计学意义（P＜0.05）;低剂量与高剂量治疗组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 糖皮质激素可以降低大鼠创伤后脑组织AQP-4 的表达及脑损伤,其作用机制可能与抑制P38、MAKP-1激活、降低下游 AQP-4 的表达有关。     

蜜炼川贝枇杷膏灌胃给药SD大鼠14天毒性探索研究

目的 研究京都念慈庵蜜炼川贝枇杷膏可能的毒性反应,为临床或家庭用药安全性提供参考。方法 采用大鼠14 d重复给药毒性试验,SD大鼠,按体重随机分成对照组、枇杷膏低、中、高剂量组,每组10只,雌雄各半,共40只,给药剂量分别为0、2.5、5、10 ml/（kg·d）,给药体积为10 ml/（kg·d）,相当于人临床用量的2.5、5、10倍。每天经口灌胃给药1次,连续14 d。第15天测定血液学、血液生化学各指标,同时测定心、肝、脾、肾脏器重量并计算脏器系数。结果 雌雄大鼠各剂量组体重正常增长,与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。雄性大鼠各给药组血液学检测指标与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;雌性大鼠中剂量组MCV偏低,与对照组比较,统计学意义显著（P＜0.01）;雄性大鼠中、高剂量组BUN降低,与对照组比较,统计学意义显著（P＜0.01）;雌性大鼠各给药组血液生化学检测指标与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。雌性、雄性大鼠的脏体比数据中,中剂量组肝系数升高,与对照组比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 蜜炼川贝枇杷膏SD大鼠重复给药14d未提示有明显毒性反应。     

乙酰半胱氨酸纳米活性炭缓释微囊对大鼠非酒精性脂肪性肝炎抗氧化作用的影响

目的 探讨乙酰半胱氨酸纳米活性碳缓释微囊（ACNAC）对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝脏抗氧化能力的影响.方法 通过高脂饮食12周诱导建立NASH大鼠动物模型,分别给予ACNAC高、中、低每日不同剂量（800 mg/kg、400 mg/kg和200 mg/kg）与易善复（0.692 mg/kg）、乙酰半胱氨酸（400 mg/kg）连续灌胃8周后,检测血清生化指标、肝匀浆丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（SOD）活性、还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及肝脏病理指标.结果 ACNAC中剂量组与高脂组相比,血清ALT、AST明显下降（P＜0.01 、P ＜0.05）,且优于易善复组（P＜0.05）.血清TCHOL 、TG、LDL-C和CR检测结果差异虽无统计学意义,但其数值上ACNAC明显低于高脂组,且优于易善复组和NAC组.ACNAC高、中、低三组与高脂组相比,SOD活力明显升高（P ＜0.01） 、GSH含量明显升高（P＜0.01）,ACNAC中剂量组与高脂组比较GSH-PX活性明显升高（P＜0.05）但略低于易善复组（P＜0.01））.结论 相关剂量的乙酰半胱氨酸纳米活性炭缓释微囊可增强非酒精性脂肪性肝炎大鼠的抗氧化能力.     

心肌标志物联合检测对川崎病早期诊断的临床意义

目的 探讨心肌标志物联合检测对川崎病患儿早期心肌损伤的诊断价值。方法　选取2016年1月~2018年12月本院收治的93例川崎病患儿,根据 cTnⅠ是否阳性分为心肌损伤组41例,无心肌损伤组52例,另选取同期来院体检的健康儿童45例设为健康对照组。采用白蛋白钴结合试验分别测定两组血清缺铁修饰白蛋白（IMA）、化学发光法检测肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、免疫抑制法测定肌酸激酶同工酶（CK-MB）。结果 ①心肌损伤组的IMA、cTnⅠ、CK-MB 水平高于健康对照组和无心肌损伤组（P＜0.05）,而无心肌损伤组的心电图、IMA、cTnⅠ、CK-MB和健康对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;②心肌损伤组的IMA、cTnⅠ、CK-MB 的阳性率高于健康对照组和无心肌损伤组（P＜0.05）,而无心肌损伤组和健康对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;心肌损伤组阳性率从高到低依次为IMA 、cTnⅠ、CK-MB,IMA阳性率高于cTnⅠ和CKMB阳性率,统计学意义显著（P＜0.01）,cTnⅠ阳性率高于CKMB,统计学意义显著（P＜0.01）;③三种指标联合检测的阳性率高于单个指标,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 IMA 、cTnⅠ和CK-MB联合检测,有助于早期诊断川崎病的心肌损伤。     

褪黑素对烟雾吸入所致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的通过建立褪黑素干预大鼠烟雾吸入性损伤模型,探讨褪黑素对急性肺损伤的保护作用。方法成年清洁级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、损伤组和褪黑素组。空白组不做任何处理,损伤组于吸入性损伤处理后腹腔注射1%乙醇生理盐水（10ml/kg）,褪黑素组于吸入性损伤处理后腹腔注射褪黑素（10mg/kg,1次/8h）。三组大鼠分别在3h、12h、24h三个时相腹主动脉取血2ml后处死,动脉血离心后检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）含量和白细胞介素10（IL-10）。肺组织匀浆测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）的含量。取右下肺组织作病理切片,光镜下观察肺组织病理情况。结果光镜下见空白组大鼠肺泡腔结构完整,壁光滑;损伤组肺泡壁增厚,肺间质炎症细胞浸润;褪黑素组肺组织较损伤组病理表现有所减轻。褪黑素组各时相点血清TNF-α和IL-6含量高于空白组（P〈0.05）,低于损伤组（P〈0.05）。损伤组各时相点IL-10含量与空白组相比无统计学差异（P〉0.05）,而褪黑素组IL-10含量与空白组、损伤组相比均升高（P〈0.05）。褪黑素组各时相点肺组织SOD含量均高于损伤组（P〈0.05）,低于空白组（P〈0.05）。褪黑素组各时相肺组织MDA和MPO含量均高于空白组（P〈0.05）,低于损伤组（P〈0.05）。结论褪黑素可以减轻炎症及氧化应激,对烟雾吸入性损伤所致急性肺损伤发挥一定的保护作用。     

EGFR与PDGFR-α在肺腺癌中的表达及意义

目的探讨血小板衍生生长因子受体（PDGFR-α）和表皮生长因子受体（EGFR）与肺腺癌发生发展的关系。方法免疫组化SP法检测PDGFR-α与EGFR在60例肺腺癌原发灶和24例正常支气管黏膜中的表达。结果 PDGFR-α主要在肺腺癌细胞质表达,少数在细胞核表达;EGFR主要表达于肿瘤细胞的细胞膜上,细胞浆中也有表达。二者均在肺腺癌细胞中过度表达（P〈0.05）。PDGFR-α的阳性表达率在肺腺癌高分化组明显高于低分化组（P〈0.05）,而EGFR在肺腺癌高分化组和低分化组中的表达相仿（P〉0.05）。结论 PDGFR-α的阳性表达与肺腺癌的分化程度呈正相关,EGFR的阳性表达与肺腺癌的分化程度无相关性。     

糖尿病肾病大鼠动物模型建立及INF-α干预机制研究

目的 探讨糖尿病肾病大鼠动物模型建立及TNF-α干预机制。方法 选择 SD大鼠60只作为对象,随机数字法分为对照组和观察组,各30只。对照组大鼠腹腔注射柠檬酸缓冲液,观察组在对照组基础上采用高糖高脂饲料联合5%葡萄糖饮水喂养,诱导胰岛素抵抗,2周后腹腔注射STZ,连续注射3 d,诱发持续高糖血症。采用酶联免疫吸附法在建模前、建模2周、建模4周检测观察组大鼠血糖、尿白蛋白、肌酐水平,同时检测两组大鼠TNF-α水平,分析糖尿病动物模型建立及TNF-α干预机制。结果 ①对照组大鼠全身状态良好,体质量增加,皮毛光滑亮泽,观察组大鼠建模成功后出现多食、多饮、多尿及生长迟缓现象,成模4周后体重低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;②观察组建模2周血糖水平（8.21±0.21）mmol/L,建模4周血糖水平（31.21±1.04）mmol/L,均高于对照组的（6.32±0.19）mmol/L、（6.74±0.24）mmol/L）,差异有统计学意义（P＜0.05）;③观察组建模2周TNF-α水平为（3.03±0.23）mmol/L,建模4周TNF-α水平为（12.10±1.12）mmol/L,均高于对照组的（1.64±0.58）mmol/L、（1.69±0.62）mmol/L,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 高糖高脂饲料联合浓度为5%葡萄糖饮水配合小剂量STZ能建立理想的糖尿病肾病大鼠动物模型,可以明确糖尿病肾病发展伴有TNF-α炎症因子水平升高,进一步为TNF-α干预机制研究奠定了基础。     

胰岛素对烟雾吸入性损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的 探讨胰岛素对烟雾吸入性损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 将成年清洁级雌性SD大鼠66只随机分为3组,正常对照组6只、吸入性损伤组和胰岛素治疗组各30只.胰岛素治疗组于烟雾吸入性损伤后皮下注射胰岛素5 U/kg,吸入性损伤组同样致伤后于相同部位注射等体积的生理盐水,正常对照组不做任何处理.各组均在伤在2 h、6 h、12 h、24 h、48 h监测血糖值.光镜进行肺组织切片病理形态学观察.采用原位末端标记法TUNEL观察肺组织细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测抗凋亡蛋白Bcl-2及Bax的表达变化.结果 光镜观察HE切片,正常对照组大鼠肺泡结构清晰完整.吸入性损伤组大鼠肺组织肺泡间隔增宽、炎细胞浸润,胰岛素治疗组与吸入性损伤组比较病理表现有所减轻.凋亡指数（AI）、Bax 和 Bcl-2在各时间点均明显高于正常对照组（P〈0.01）.胰岛素治疗组伤后2 h AI、Bax和Bcl-2和吸入性损伤组间差异无统计学差异（P〉0.05）,但12 h以后两组AI、Bax和Bcl-2比较时差异均有高度统计学意义（P〈0.01）,24 h各值达高峰,差异也具有高度统计学意义（P〈0.01）.结论 吸入性损伤后早期给予胰岛素可以直接促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax等促凋亡蛋白的表达,对吸入性损伤后肺脏组织细胞的凋亡有抑制作用,在肺损伤早期起到保护肺组织作用.     

缺氧诱导因子-1α基因在严重烫伤延迟复苏大鼠肺组织中的表达

目的观察大鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达变化,探讨其与肺组织损伤的相关性。方法雄性SD大鼠120只,随机分为延迟复苏组（DF,n=60）、即时复苏组（IF,n=50）和正常对照组（NC,n=10）,建立Ⅲ度烫伤面积30％TBSA的模型,分别于伤后1、6、12、24、48和72h取材,采用组织病理学、组织芯片技术、免疫组织化学染色与图象分析技术,观察肺组织病理改变与HIF-1α的表达。结果DF组伤后6—24h肺组织病理损伤严重,IF组相对较轻。HIF-1α的阳性表达位于肺泡上皮细胞胞核,DF组表达明显强于IF组,而NC组表达阴性。HIF-1α表达的灰度值定量分析结果显示：DF组与IF组在伤后72h各时相点表达均升高,与NC组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;DF组在各时相点HIF-1α表达均高于相对应的IF组各时相点,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论严重烫伤延迟复苏后大鼠肺组织HIF-1α的高表达与肺组织的损伤的程度是一致的,推测其参与了严重烫伤延迟复苏后大鼠肺组织的损伤。     

解毒清肺合剂对肺炎支原体感染大鼠肺组织NF-κB和p38 MAPK通路的影响

目的:观察解毒清肺合剂对肺炎支原体(MP)感染大鼠肺组织的治疗作用并探讨其作用机制。方法:SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、解毒清肺组和阳性对照组4组,每组10只。实验组大鼠鼻孔内缓慢滴入1×10~9CFU/L MP菌液连续4 d,各组在接种完成后第2天处死1只大鼠进行MP核酸检测,同时其余大鼠开始灌胃治疗,空白对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,解毒清肺组每天给予8 mL/kg的解毒清肺合剂,阳性对照组给予地塞米松磷酸钠(0.5 mg·kg·d~(-1)),连续治疗4周。实验结束后处死大鼠,收集血清和支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测血清和BALF中白细胞介素12(IL-12)、IL-13和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;取右肺组织用于观察病理形态和HE染色,左肺组织用于NF-κB p50、I-κBα和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的mRNA及蛋白水平的检测。结果:MP核酸检测结果显示,除空白对照组外其余大鼠均感染了MP,表明MP感染大鼠造模成功。治疗第1天模型组和解毒清肺组肺组织病理评分显著高于空白对照组(P0.05),治疗结束后模型组的肺组织病理评分显著高于空白对照组、解毒清肺组和阳性对照组(P0.01)。MP感染后模型组血清和BALF中IL-12水平显著低于空白对照组(P0.05),解毒清肺组和阳性对照组血清和BALF中IL-12水平显著高于模型组(P0.05);模型组大鼠血清和BALF中IL-13和TNF-α水平显著升高,解毒清肺组和阳性对照组IL-13和TNF-α水平显著低于模型组(P0.05),解毒清肺组与阳性对照组无显著差异。RT-qPCR检测结果显示,模型组NF-κB p50和p38 MAPK的mRNA表达水平显著升高(P0.01),解毒清肺组和阳性对照组NF-κB p50和p38 MAPK的mRNA表达水平与模型组比较显著降低(P0.01);模型组I-κBα的mRNA表达水平较对照组显著降低,解毒清肺组和阳性对照组I-κBα的mRNA表达水平较模型组显著升高(P0.05),解毒清肺组NF-κB p50、p38、MAPK和I-κBα与阳性对照组比较差异无统计学显著性。Western blot检测结果显示肺组织中模型组的NF-κB p50和p38 MAPK蛋白表达水平显著高于空白对照组,治疗后表达水平显著降低;模型组I-κBα蛋白表达水平显著低于空白对照组,解毒清肺组其蛋白表达水平显著升高,解毒清肺组与阳性对照组无显著差异。结论:解毒清肺合剂可能通过NF-κB和p38 MAPK通路减轻肺炎支原体引起的肺组织炎症。     

酸性成纤维细胞生长因子对大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的作用及其影响机制。 方法将60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为3组：阴性对照组、脂多糖损伤组、aFGF干预组,每组20只。采用经气管插管给予脂多糖5 mg·kg^－1制备大鼠ALI模型,aFGF干预组则于给予脂多糖24 h后,经气道给予aFGF 1 000 μ·g^－1。3组均于48 h后苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变,计算肺损伤评分,测定肺水清除率,称量肺湿/干重比,免疫组织化学染色法观察肺泡表面活性蛋白C(SP-C)的表达,酶联免疫吸附试验法测定肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。蛋白质印迹法检测肺组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白表达水平。数据采用单因素方差分析(进一步两两比较采用LSD法)或非参数检验。 结果(1)aFGF干预组肺损伤评分[(6.33±0.42)分]与脂多糖损伤组肺损伤评分[(11.00±0.37)分]较阴性对照组[(1.01±0.26)分]均升高,但aFGF干预组肺损伤评分明显低于脂多糖损伤组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)aFGF干预组肺水清除率[(27.41±1.05)%]与脂多糖损伤组肺水清除率[(15.59±0.64)%]较阴性对照组[(30.63±0.91)%]均有所下降,但aFGF干预组明显高于脂多糖损伤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)脂多糖损伤组肺水聚集(肺湿/干重比为6.32±0.32)较阴性对照组(4.17±0.05)明显升高,aFGF干预组(5.18±0.10)也高于阴性对照组,但与脂多糖损伤组相比,肺湿/干重比有所改善且差异有统计学意义(P<0.05)。(4)aFGF干预组TNF-α水平[(762.50±23.93) pg/mL]与脂多糖损伤组TNF-α水平[(1460.01±17.96) pg/mL]较阴性对照组[(49.51±10.75) pg/mL]均明显升高,但aFGF干预组较脂多糖损伤组有明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)aFGF干预组p-p38 MAPK/β-actin比值(0.38±0.01)明显高于阴性对照组(0.18±0.01),差异有统计学意义(P<0.05),且明显高于脂多糖损伤组(0.12±0.01),差异有统计学意义(P<0.01)。 结论aFGF对脂多糖诱导的ALI大鼠具有肺保护作用,其机制可能为aFGF通过激活p38 MAPK通路,减少细胞凋亡,促进肺泡上皮细胞再生所致。     

右美托咪定对大鼠脑创伤后炎症反应及认知功能的影响

目的 观察右美托咪定对大鼠脑创伤后炎症反应及认知功能的影响。方法 将20只成年雄性SD大鼠随机分为实验对照（CON）组和右美托咪定（DEX）组,各10只。应用可控皮层撞击法制备大鼠颅脑外伤模型。DEX组大鼠清醒后即可腹腔注射右美托咪定100 μg/kg,对照组不予处理,两组大鼠分别在创伤后6 h、24 h、72 h采用ELISA法对其血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平进行检测,并进行新物体识别测试。结果 两组血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平在脑创伤6 h、24 h、72 h比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,两组TNF-α、IL-6水平在24 h下降,并于72 h再次升高,且CON组高于DEX组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组IL-1β水平在24 h、72 h时升高,且CON组高于DEX组,差异有统计学意义（P＜0.05）;各个时间点两组大鼠新物体识别测试结果比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 右美托咪定可减轻大鼠脑创伤后炎症反应,是否影响恢复期认知功能还需进一步观察。     

辛伐他汀对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用

目的探讨辛伐他汀对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用。方法雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、盐水组、辛伐他汀小剂量组、辛伐他汀大剂量组,每组6只。辛伐他汀大剂量组和小剂量组烟雾吸入致伤后,用灌胃器给予辛伐他汀大剂量组50mg/kg辛伐他汀,给予辛伐他汀小剂量组25mg/kg辛伐他汀。盐水组烟雾吸入致伤后灌入等体积的生理盐水,每日一次。正常组不做致伤及灌液处理。四组大鼠分别于48h后取左肺组织行病理切片光镜观察。腹主动脉取血2ml,离心后取血清检测肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-10含量,并取右肺组织匀浆取上清液检测髓过氧化物酶、脂质过氧化物酶和超氧化物歧化酶含量。结果光镜下正常组肺泡结构清晰完整,盐水组肺泡腔内可见大量粒细胞聚集、浸润,肺泡间隔增厚,而辛伐他汀大剂量和小剂量组上述病理表现明显减轻。与盐水组相比,辛伐他汀小剂量组肿瘤坏死因子水平降低(P<0.01),脂质过氧化物酶含量降低(P<0.05);辛伐他汀大剂量组肿瘤坏死因子、白细胞介素-6含量降低(P<0.01),白细胞介素-10含量升高(P<0.01),髓过氧化物酶、脂质过氧化物酶水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶水平升高(P<0.05)。结论辛伐他汀可减轻炎症及氧化应激,对烟雾所致吸入性损伤大鼠的肺起保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤作用的实验研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的作用。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(SO组)、SAP组、NAC组。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型,造模后30min腹腔注射5%NAC(0.2ml/100g)干预SAP模型,12h后处死大鼠。检测各组血清淀粉酶(AMY)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、胰腺和肺组织病理学评分、肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表达的变化。结果:与SO组比较,SAP组AMY、MPO、胰腺和肺组织病理学评分明显升高(P<0.01),TNF-α和ICAM-1mRNA表达明显增强(P<0.01);应用NAC处理后,AMY和MPO水平下降,胰腺和肺组织损伤缓解,TNF-α和ICAM-1mRNA表达减弱,与SAP组有明显差异(P<0.01)。结论:NAC对SAP大鼠肺损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肺组织TNF-α和ICAM-1mRNA的表达有关。     

小鼠吸入性损伤模型的建立与吸入性损伤对小鼠肺TNF-α、内脏器官NF-κB及生存率影响的实验研究

目的建立小鼠烟雾吸入性损伤模型,观察烟雾吸入对小鼠肺肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内脏器官核转录因子-kappa B(NF-κB)及生存率的影响。 方法将190只BALB/c小鼠,随机选取10只,设为对照组;其余180只小鼠随机分为6组,每组30只,采用自制致伤装置,以松木屑和煤油作为发烟材料,对6组小鼠分别进行6、8、10、12、14、16 min烟雾吸入致伤,对照组小鼠不经烟雾吸入,其他处理同各烟雾吸入组。观察吸入性损伤后小鼠行为状态及72 h生存变化情况;各组小鼠死亡后立即取肺、心、肝、肾组织,观察其病理改变及检测组织细胞NF-κB活化状态积分值,并测定小鼠肺组织内TNF-α含量。数据间比较采用单因素方差分析及t检验。 结果(1)对照组,致伤6、8、10 min组小鼠在吸入致伤过程中均存活,而致伤12、14、16 min组小鼠在致伤过程中分别出现部分或全部死亡;除对照组外,各致伤组存活小鼠伤后出现呼吸急促、活动减少、随后自行恢复至正常状态;对照组,致伤6、8、10、12、14、16 min组伤后72 h生存率分别为100%、100%、97%、73%、52%、43%和0;(2)伤后死亡小鼠各器官组织有不同程度的炎症细胞浸润、充血、水肿等病理表现;(3)致伤14 min组伤后死亡的小鼠肺、心、肝、肾组织内可见大量位于细胞核中的NF-κB p65阳性染色,该阳性染色信号在伤后24～72 h时间段死亡小鼠上述器官组织的NF-κB p65蛋白积分光密度(IOD)值分别为3 245.37±296.40、2 022.92±356.52、2 148.70±310.99、2 054.61±260.56,均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);(4)致伤14 min组伤后24～72 h死亡小鼠的肺组织TNF-α的含量(54.86±5.24)pg/mL明显高于对照组(27.84±4.08)pg/mL、致伤时死亡(31.24±4.46)pg/mL及伤后0～24 h内死亡(45.09±4.69)pg/mL,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。 结论持续8～14 min烟雾吸入导致后续72 h内相应小鼠生存率下降、肺组织TNF-α表达显著上调以及多器官内的急性炎症反应和NF-κB信号通路的显著激活。烟雾吸入时间大于16 min时致小鼠即刻死亡。     

N-乙酰半胱氨酸联合阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠氧化应激的影响

 目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)联合阿奇霉素(AZI)对慢性阻塞性肺疾病(COPD) 模型大鼠氧化应激的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即正常对照(control)组、模型(model)组、AZI治疗组、NAC治疗组和联合治疗组(AZI+NAC组)。采用烟熏联合气管内滴入脂多糖的方法诱导大鼠COPD模型。NAC组和AZI组大鼠每日烟熏前30 min分别给予NAC和AZI灌胃,AZI+NAC组则给予NAC和AZI联合灌胃。第31天行肺功能检测后处死大鼠,提取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数,并采用ELISA法测定BALF中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。制作肺组织切片及肺匀浆,测定肺匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。结果:与control组对比,其余4组均出现肺功能的下降,组织病理提示炎症细胞浸润、肺泡破坏等表现。与control组比较,其余4组BALF中白细胞总数、单核巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均显著增高(P<0.05);与model组、AZI组、NAC组比较,AZI+NAC组BALF中白细胞总数、中性粒细胞和淋巴细胞均显著下降(P<0.05)。与model组对比,AZI组、NAC组和AZI+NAC组IL-8、IL-17、TNF-α和MDA含量均显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性均显著增高(P<0.05);与AZI组和NAC组比较,AZI+NAC组IL-8、IL-17、TNF-α和MDA含量均下降,SOD和GSH-Px活性均增高,差异有统计学显著性(P<0.01)。结论:NAC和AZI均能减轻COPD模型大鼠肺部炎症和氧化损伤,两者联合能增强抗氧化作用,可能更适合COPD的临床治疗。     

雾化吸入米力农对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用

目的探讨米力农对大鼠烟雾吸入性损伤肺保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠32只,随机分为正常组（Ⅰ组）、生理盐水组（Ⅱ组）、低剂量米力农组（Ⅲ组）、高剂量米力农组（Ⅳ组）,每组8只。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组建立吸入性损伤模型,伤后30min开始分别给予雾化生理盐水、0.4mg/ml米力农、1mg/ml米力农,每次10min,间隔50min,共4次,Ⅰ组不予处理。最后一次雾化治疗结束后30min后,检测4组大鼠血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,以及肺组织匀浆中丙二醛（MDA）含量、髓过氧化物酶（MPO）和超氧化物歧化酶（SOD）活性,取左肺组织经做病理HE染色切片光镜观察。结果Ⅲ组以及Ⅳ组的IL-6、TNF-α、MDA、MPO均比Ⅱ组降低,IL-10、SOD活性增高;Ⅳ组相对于Ⅲ组IL-6、MDA、MPO降低,SOD活性增高（P〈0.05）。光镜下Ⅲ组和Ⅳ组较生理盐水组肺组织炎细胞浸润减少,肺水肿减轻。结论吸入性损伤后,早期雾化吸入米力农可以调节炎症/抗炎症以及氧化/抗氧化的平衡,对肺损伤早期起到肺组织保护作用。     

乙酰半胱氨酸对小鼠缺血再灌注损伤肝肺组织的保护作用及机制

目的:研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中肝肺组织的保护作用及机制.方法:制备BALB/c小鼠肝部分缺血再灌注损伤模型, 将小鼠随机分为3组: 假手术组(SH组), 缺血再灌注组(I/R组)和NAC组(I/R-NAC组).分别于再灌注后1 h、 3 h取静脉血测定血清TNF-α浓度和ALT水平;取肺组织标本测湿干质量比及病理.同时取肝、肺组织行RT-PCR以观测Toll样受体2/4(TLR2/4)表达.结果:肺组织病理结果显示I/R组肺组织毛细血管充血, 肺泡结构破坏, 肺泡间质中性粒细胞浸润, 肺泡腔内不同程度渗出及少量红细胞.肺湿干质量比显示肺水肿.缺血再灌注后静脉血清TNF-α浓度和ALT水平较假手术组显著升高.受损肝叶和肺组织内均出现TLR2/4 mRNA高表达, NAC干预后, 肺水肿明显减轻;TLR2/4 mRNA表达受到抑制;血清TNF-α浓度和ALT水平较I/R组明显下降.结论:N-乙酰半胱氨酸抑制再灌注后TLR2/4的活化, 降低TNF-α的分泌, 从而减轻缺血再灌注肝、肺组织的损伤.