重组新城疫病毒rL-RVG诱导人胃腺癌细胞内质网应激和凋亡

目的: 观察新城疫病毒(newcastle disease virus, NDV)及稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(recombinant avirulent NDV LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rL-RVG)对胃腺癌HGC细胞内质网应激及凋亡的影响。方法: 将HGC细胞随机分为对照组、NDV组和rL-RVG组,分别转染PBS、NDV和rL-RVG 24 h,免疫印迹法和免疫荧光检测糖调节蛋白78 (glucose regulated protein 78, GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)表达。再将HGC细胞随机分为对照组、4-苯基丁酸钠盐(sodium phenylbutyrate, 4-PBA)组、rL-RVG组和4-PBA+rL-RVG组,4 PBA组和4-PBA+rL-RVG组分别加入4-PBA预处理4 h,然后rL-RVG组和4-PBA+rL-RVG组分别转染rL-RVG,对照组和4-PBA组转染PBS,免疫印迹法检测各组细胞GRP78、CHOP和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果： 感染HGC细胞24 h后,NDV组及rL-RVG组GRP78和CHOP表达明显高于对照组(P均<0.05),且rL-RVG组明显高于NDV组(P<0.01)。4 PBA预处理后,4-PBA+rL-RVG组GRP78、CHOP、caspase-3蛋白表达和细胞凋亡率较rL-RVG组明显降低(P<0.05)。结论： rL-RVG较NDV更易引起胃腺癌HGC细胞内质网应激,且与凋亡相关。     

辛基酚影响MCF-7细胞凋亡及bcl_2、caspase3表达

目的观察辛基酚（0P）对乳腺癌MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响。方法以流式细胞分析、DNA断端末端标记（TUNEL）试验、DNA片断率分析、流式细胞仪免疫荧光和荧光定量PCK等方法观察OP对MCF-7细胞凋亡、bcl2、bax、caspase3表达的影响。结果8、16μmol／LOP作用MCF-7细胞，TUNEL细胞阳性率和DNA片断百分率增加，48h时的凋亡率分别为（6．6&#177;1．32），（16，3&#177;3.48）『对照（43&#177;1．18）]；bcl2荧光量分别为（63．5&#177;5．84），（30．3&#177;2．49）[对照（57．2&#177;4．07）]。4μmol／LOP明显上调MCF-7细胞中bcl2 mRNA表达；16μmol／L OP则明显降低细胞中bcl2 mRNA表达，且bax、caspase3 mRNA表达明显增加。结论8、16μmol／L OP能明显诱导MCF-7乳腺癌细胞的凋亡，增加DNA片断百分率，其机制可能是通过下调细胞中bcl2的表达、上调bax、caspase3的表达来实现。     

史他汀类药物对抗β- 淀粉样肽神经毒性的非胆固醇依赖性作用机制实验研究

目的：研究史他汀类药物通过其非胆固醇依赖性作用对抗β- 淀粉样蛋白（Aβ）的 过程中β- 淀粉样肽前体蛋白（APP）代谢、尼古丁型乙酰胆碱受体（nAChRs）表达以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路的相互作用关系，探讨史他汀类药物对阿尔茨海默氏病（AD）的可能性干预途径。方法：选择原代培养神经细胞及过表达APP670/671 的SHSY-5Y 细胞，用史他汀类药物（包括洛伐他汀、阿托伐他汀、罗苏伐他汀和辛伐他汀）、Aβ、nAChR 拮抗剂或细胞外信号调节白白激酶（ERK）抑制剂分别或合并处理。用生化方法测定细胞存活率、胆固醇含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量；用蛋白印迹法检测nAChR 多种亚单位蛋白表达水平，APP 代谢途径中α分泌型淀粉样前体蛋白（αAPP）、β分泌型淀粉样前体蛋白（βAPP）、β淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）、β淀粉样前体蛋白裂解酶2（BACE2）及解聚素金属蛋白酶结构域蛋白10 （ADAM10）等的蛋白表达水平，MAPK 通路中ERK、c-Jun 氨基末端激酶（JNK）及p38 磷酸化水平；实时荧光定量PCR 测定nAChR 亚单位mRNA 表达水平。结果：用Aβ或Aβ寡聚体处理体外培养神经细胞48 小时后见细胞存活率下降、SOD 的活性降低和MDA含量增高等毒性作用，用史他汀类药物预处理细胞24 小时，均能减轻Aβ引起的神经毒性作用。用洛伐他汀处理培养细胞24 小时后，发现α7 nAChR 蛋白及mRNA 表达水平均升高，而α4、α3 和bβ2 未见明显改变；洛伐他汀处理引起αAPP 分泌增加、βAPP减少、BACE1 蛋白表达水平降低、而BACE2 和ADAM10 增高。洛伐他汀处理亦导致phospho-ERK1/2 蛋白表达水平升高，而phospho-JNK 和phospho-p38 未见明显改变。联合应用洛伐他汀与MAPK/ERK1/2 抑制剂U0126 或α7 nAChR 拮抗剂MLA 处理培养细胞，结果显示U0126 可以抑制细胞phospho-ERK1/2 的磷酸化，降低α7 nAChR 蛋白表达水平，减少αAPP 的分泌，同时阻断洛伐他汀引起的MAPK/ERK1/2 信号转导通路活化、α7 nAChR 蛋白表达水平升高以及αAPP 分泌增加等作用；MLA 处理神经细胞仅能减少αAPP 的分泌，对其自身的蛋白表达及phospho-ERK1/2 的磷酸化均无明显影响，MLA 与洛伐他汀共同处理细胞后仅见洛伐他汀诱导的αAPP 分泌增加作用被减弱，而MAPK/ERK1/2 的活化以及α7 nAChR 蛋白表达水平的上调均未被减弱。结论：采用不引起细胞胆固醇水平改变的史他汀类药物剂量处理培养细胞，能减轻Aβ引起神经细胞毒性作用，引起MAPK/ERK1/2 信号转导通路活化、α7 nAChR 蛋白表达水平升高以及αAPP 分泌增加；其作用机制可能是首先活化phosphor-ERK1/2 信号转导通路，该通路的活化刺激α7 nAChR 的表达，最终增强APP 的非淀粉样代谢过程，活化α- 分泌酶，从而促进αAPP 的分泌，产生对抗Aβ的神经保护作用。     

NADH对X射线照射正常肝细胞L02后PARP和Caspase 3活性的影响

目的：为了研究NADH对X射线诱导的细胞凋亡和PARP、Caspase 3活性的影响。方法设假照射组、对照组及处理组。处理组正常肝细胞在6MV Varian 5．0Gy照射后立即加入含NADH（400μg／mL） RPMI 1640完全培养基,假照射组和对照组只加入培养液,培养24 h,用Annexin V／PI法检测细胞凋亡率;流式细胞仪检测bcl－2和bax蛋白阳性表达率;免疫印迹检测PARP和Caspase3活性。结果处理组与对照组相比细胞凋亡率明显下降, bax蛋白阳性表达百分率明显下调,而bcl－2表达则明显上调（P＜0．05）。对照组PARP和Caspase 3蛋白均出现剪切片断,处理组未发现剪切片断形成。结论 NADH具有抗辐射诱导的L02肝细胞凋亡损伤作用,其作用机制可能通过bcl－2和bax调控线粒体途径有关。     

α7 神经型尼古丁受体对突触功能和钙信号通路的影响及在阿尔茨海默氏病中的神经保护作用机制研究

目的：研究β- 淀粉样蛋白（ β-amyloid protein,Aβ） 的聚集是否会引起突触形态及相关蛋白表达水平的变化以及与Aβ、胆碱能受体及突触功能密切相关的钙离子通路是否发生变化,进一步探讨这些改变之间是否具有一定的相关性;研究特异性激动原代海马神经元中的 α7nAChR 对突触形态及其相关蛋白、钙信号通路相关蛋白、Ca2+ 浓度以及 α7nAChR 对抗 Aβ 毒性作用的神经保护作用机制,为进一步阐明AD 发病机制提供一定的理论依据。方法：原代培养大鼠海马神经元细胞;实验细胞分为A 组：对照组;B 组：α7nAChRs 特异性激动剂 PNU-282987 处理组;C 组：Aβ1-42 寡聚体处理组;D 组：PNU-282987+ Aβ1-42 寡聚体处理组;采用Real-time PCR 法和蛋白免疫印迹（ Western Blot） 法分别测定各组细胞中突触相关蛋白Syn、PSD95、SNAP25、DYN1、AP180,钙信号通路相关蛋白CaM、CaMKⅡ、pCaMKⅡ、CREB、PCREB mRNA 和蛋白表达水平的变化,流式细胞仪检测神经细胞钙离子水平。结果：Aβ1-42 寡聚体可引起神经元细胞内钙超载,Aβ1-42 寡聚体可减少各组细胞中突触相关蛋白Syn、PSD95、SNAP25、DYN1、AP180 和钙信号通路相关蛋白CaMKⅡ、pCaMKⅡ、CREB、pCREB mRNA 及蛋白表达水平,增加CaM mRNA 及蛋白的表达水平;特异性激动海马神经元细胞α7nAChR 后神经细胞内钙离子水平相对减少,神经元细胞中的突触相关蛋白Syn、PSD95、SNAP25、DYN1、AP180 和钙信号通路相关蛋白CaMKⅡ、pCaMKⅡ、CREB、pCREB mRNA 及蛋白表达水平升高,且能对抗Aβ对突触蛋白及钙通路相关蛋白的影响。结论：Aβ1-42 寡聚体对细胞的神经毒性能够损伤突触功能以及钙信号通路;α7nAChR 可增加突触相关蛋白的表达以及可能通过激活钙信号通路来抵抗Aβ的神经毒性发挥神经保护作用。     

重组新城疫病毒疫苗rl-RVG对A_(549)荷瘤小鼠瘤体生长的抑制作用

目的:探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(NDV)疫苗(rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能的免疫机制。方法:建立A_(549)荷瘤鼠模型并随机分为rlRVG组、NDV组和对照组,每组10只,分别于瘤体注射rl-RVG,NDV和PBS,每周2次,共3周。测量三组瘤体体积;PCR法测NDV及狂犬病毒糖蛋白(RVG)的表达,蛋白印迹法检测皮下瘤体组织RVG、NDV蛋白表达;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)细胞数。结果:与对照组相比,rl-RVG组及NDV组荷瘤鼠瘤体增长明显缓慢;NDV在rl-RVG组和NDV组中均有表达,而RVG在rl-RVG组中表达,对照组未见二者表达;rl-RVG组及NDV组瘤体NK细胞数明显增多,且rl-RVG组明显高于NDV组。结论:rl-RVG成功转染至A549荷瘤鼠,对其瘤体生长有着明显的抑制作用,可能与rl-RVG激活机体的免疫反应相关。     

骨髓间充质干细胞抗肺泡上皮细胞凋亡作用研究

目的 研究骨髓间充质干细胞对LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用.方法 用人肺泡上皮细胞株(A549细胞株)与人骨髓间充质干细胞株(第3代hBMMSC株)建立Transwell非接触分层共培养体系,分4组:(1)空白对照组;PBS+A549; (2) LPS诱导组;LPS+A549; (3) BMMSC对照组:BS+A549+BMMSC; (4) BMMSC干预组:LPS+A549+BMMSC.采用Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测A549细胞凋亡率;Western blotting检测caspase 3、bcl-2和bax蛋白表达.结果 10 μg/mL LPS可体外诱导A549细胞凋亡;BMMSC干预组A549细胞凋亡率、caspase-3与bax蛋白表达水平明显低于LPS诱导组、空白对照组和BMMSC对照组(P＜0.01);bcl-2蛋白表达水平显著高于LPS诱导组、空白对照组和BMMSC对照组(P＜0.01).结论 与LPS诱导的A549细胞共培养,BMMSC能促进A549细胞表达抗凋亡蛋白bcl-2和抑制促凋亡蛋白caspase-3和bax的表达,具有抗细胞凋亡作用.     

吗啡对胃癌细胞系HGC27细胞增殖的影响及其机制

目的探讨吗啡对人胃癌细胞系HGC27细胞增殖的影响及其机制。方法体外培养的HGC27细胞,用不同浓度吗啡处理24、48、72 h,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;实验组用吗啡（浓度分别为0.05、0.1、0.2μmol/L）处理HGC27细胞48 h,对照组加入不含药物的培养基,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡、分光光度计检测细胞凋亡蛋白酶-3（Casepase-3）相对活性、western blot法检p16、bcl-2、bax基因表达情况。结果吗啡（浓度0.025～0.4μmol/L）能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;吗啡（浓度分别为0.05、0.1、0.2μmol/L）作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为9.4%、11.5%、21.4%,而对照组凋亡率仅为2.2%;Casepase-3相对活性显著增加,处理后Casepase-3相对活性分别为（1.32±0.08）、（1.85±0.06）和（2.45±0.07）,对照组为（0.92±0.07）;p16和bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,呈剂量依赖性。结论吗啡能抑制HGC27细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与上调p16表达,进而引起bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,并增加细胞Casepase-3活性有关。     

前列腺癌p53、bcl-2、bax基因表达与凋亡、增殖的关系

目的:研究前列腺癌组织中细胞增殖与细胞凋亡,及其相关蛋白表达意义。方法:采用原位细胞凋亡标记技术(TUNEL)及免疫组织化学ABC法对36例前列腺癌(Pca)和11例正常前列腺(NP)组织石蜡切片p53、bcl鄄2、bax、PCNA蛋白及细胞凋亡检测。结果:前列腺癌细胞的增殖指数和细胞凋亡指数较NP明显增高,且AI/PI比值较正常组织AI/PI低(P<0.01);随着肿瘤分级的增加,细胞增殖水平明显增加(P<0.01)。p53蛋白表达与前列腺癌细胞增殖水平相关;bcl鄄2蛋白表达与细胞凋亡水平相关(P<0.05);bax基因表达与凋亡无关,但发现它们的bcl鄄2/bax的比值与凋亡有关。表明高bcl鄄2/bax比值多见于低凋亡组,低bcl鄄2/bax比值多见于高凋亡组。结论:细胞增殖与细胞凋亡均参与了前列腺癌的发生、发展。p53基因与细胞增殖水平的调控有关。bcl鄄2和bax在细胞凋亡调节中起到重要作用,由于bcl鄄2蛋白过量表达引起bcl鄄2/bax失平衡,在前列腺癌发生、发展过程中起到重要作用。     

补肾活血中药介导Wnt/β-catenin信号通路延缓椎间盘终板压力退变的机制研究

背景　椎间盘退行性变是导致脊柱退行性疾病发生的根本因素,终板是椎间盘力学传导与营养传输的主要结构,终板退变会加速椎间盘退变的发生,中药复方对延缓椎间盘退变具有独特的疗效,但具体作用机制尚不完全明确。目的　观察补肾活血中药对压力下离体兔脊柱运动节段椎体终板的影响,阐明其调控终板软骨细胞、延缓椎间盘退行性变的效应特点及作用机制。方法　2019年将40只健康新西兰兔采用随机数字表法分为对照组、中药组、中药抑制剂组、中药激动剂组,每组10只。采用具有自主知识产权的脊柱运动节段离体加载和培养装置进行造模,并通过HE染色病理形态学方法、免疫组化法、荧光定量聚合酶链式反应法（RT-PCR）和Western blot检测方法检测相关指标,包括蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Wnt-3α、β-catenin mRNA和蛋白的表达水平。结果　（1）药物对椎间盘退变的影响：①HE染色显示,培养第7天时中药组软骨细胞分散程度、数目及软骨层排列均较对照组完整;培养第14天时对照组、中药组终板软骨组织退变程度均加重,对照组退变程度较中药组更加明显。②免疫组化法检测结果显示,中药组培养第1、3天时细胞外基质蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量均较对照组升高（P<0.05）;中药组及对照组培养第7、14天细胞外基质蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量均较培养前降低（P<0.05）;中药组细胞外基质蛋白多糖表达量与对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,而对照组Ⅱ型胶原表达量较中药组升高（P<0.05）。③RT-PCR检测结果显示,中药组及对照组培养第1、3、7、14天时Wnt-3α和β-catenin mRNA表达水平均较培养前降低（P<0.05）,中药组培养第1、3、7、14天时Wnt-3α、β-catenin mRNA表达水平均较对照组降低（P<0.05）。④Western blot检测结果显示,中药组及对照组培养第1、3、7、14天时Wnt-3α、β-catenin蛋白表达水平与培养前比较,差异有统计学意义（P<0.05）;中药组培养第1、3、7、14天时Wnt-3α蛋白表达水平较对照组升高（P<0.05）,但β-catenin蛋白表达水平较对照组降低（P<0.05）。（2）药物延缓椎间盘退变机制：①HE染色显示,中药激动剂组较中药抑制剂组培养第3天时终板软骨组织结构的完整性、软骨层排列较好。②免疫组化法检测结果显示,中药激动剂组、中药抑制剂组蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量分别与中药组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。③RT-PCR检测结果显示,中药激动剂组、中药抑制剂组第3天时Wnt-3α mRNA表达水平分别与中药组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;中药激动剂组β-catenin mRNA表达水平较中药组降低（P<0.05）,中药抑制剂组β-catenin mRNA表达水平较中药组升高（P<0.05）。④Western blot检测结果显示,中药激动剂组第3天时Wnt-3α和β-catenin蛋白表达水平以及中药抑制剂组Wnt-3α蛋白表达水平分别与中药组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;而中药抑制剂组β-catenin蛋白表达水平较中药组升高（P<0.05）。结论　补肾活血中药可以通过介导Wnt/β-catenin信号通路调控终板软骨细胞延缓椎间盘退变进程。     

CHD病人心肌细胞凋亡及bcl-2家族蛋白和caspase-3的调节作用

目的：观察CHD病人心肌细胞凋亡情况及bcl-2、bcl-xl、bax和bad及caspase-3和心肌氧化性应激对心肌细胞凋亡的调节作用。方法：研究以进行常规CPB手术无肺动脉高压的ASD病人为对照组（ASD组，n=5）、以合并CHD的RHD病人为观察组（RHD组,n=5）。并行循环后留取右心室全层心肌标本。用原位TUNEL技术检测凋亡心肌细胞。用流式细胞仪测定右心室bcl-2、bcl-xl、bax和bad蛋白表达。分别用Z－DEVD－AMC底物降解法和TBARS方法测定右心室caspase-3活性和MDA含量。结果：CHD病人右心室心肌细胞凋亡数、caspase-3活性和MDA含量均明显高于ASD病人（分别P＝0．026，0．013和0．002）；与ASD病人比较，CHD病人右心室促凋亡蛋白bax和bad表达明显上调（P＜0．003和0．001）。而两组抗凋亡蛋白bcl-2和bcl-xl表达之间无显著性差异（均P＞0．01）。结论：心肌细胞凋亡参与CHD的病理生理过程。CHD病人的心肌细胞凋亡与心肌细胞bax和bad蛋白表达上调、caspase-3激活以及心肌氧化性应激增高有关。     

兔脑出血灶周围脑组织细胞凋亡及bcl-2和bax的检测

目的 :探讨兔脑出血灶周围脑组织中bcl 2、bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法 :家兔 40只 ,分为A、B、C、D 4组。B、C、D 3组采用兔自体血二次注射法制作脑出血模型 ,分别于模型制作完成后 12h ,2 4h ,72h断头处死 ,运用TUNEL法、免疫组化SP技术 ,检测出血灶周围脑组织中细胞凋亡及bcl 2、bax蛋白表达。结果 :出血灶周围脑组织中细胞凋亡、bcl 2和bax蛋白表达在各组间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。bcl 2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关 (r=- 0 .781,P <0 .0 5 ) ,bax蛋白表达与其呈正相关 (r=0 .72 3,P <0 .0 5 )。结论 :出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡 ,细胞凋亡的变化在一定程度上反映了周围脑组织的损伤程度。bcl 2和bax蛋白对凋亡具有调控作用。     

环氧化酶-2、bcl-2与bax在胃癌的表达及意义

目的 研究环氧化酶-2(cox-2)与bcl-2、bax在胃癌中的表达及其与胃癌细胞凋亡的关系。方法 采用SP免疫组织化学法检测胃癌及癌旁组织各60例标本中cox-2、bcl-2、bax的表达，用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测胃癌及癌旁组织的凋亡率。结果 胃癌组织的cox-2、bcl-2的表达明显高于癌旁组织(P＜0．05)，bax的表达明显低于癌旁组织(P＜0．05)，cox-2阳性组胃癌组织的凋亡率显著低于阴性组；cox-2的表达与bcl-2呈正相关，与bax呈负相关。结论 cox-2、bcl-2、bax的异常表达与胃癌细胞凋亡抑制有关；cox-2能够上调bcl-2的表达并下调bax的表达使胃癌细胞凋亡抑制。     

一氧化氮诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的变化

目的 探讨在一氧化氮(NO)诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的动态变化。方法 用NO供体硝普钠(SNP)诱导SMMC-7721和HepG2肝癌细胞株凋亡，RT-PCR的方法检测bcl-2、ba xmRNA表达水平，并采用凝胶分析系统进行半定量分析。结果 1．0mmol/L可降低SMMC-7721和HepG2细胞bcL2、bax mRNA的表达水平，提高bax/bc1-2 mRNA的比值并呈时间依赖性。HepG2细胞bcl-2和bax mRNA降低的幅度较SMMC-7721细胞小(P＜0．05)，开始变化的时间也较SMMC-7721细胞迟。结论 NO诱导肝癌细胞株的凋亡，可能与其bcl-2、bax mRNA表达水平变化导致bax/bc1-2 mRNA比值上升有关。     

PDGF及白介素-10对大鼠肝星形细胞bcl-2/bax的影响

目的　探讨血小板衍生生长因子 (PDGF)及白介素 - 1 0 (IL - 1 0 )对体外培养的肝星形细胞 (HSC)表达bcl- 2 / bax的影响。　方法　原位灌流法分离 HSC,体外培养激活 ,分为对照组 (C组 )、PDGF干预组 (P组 )、IL - 1 0干预组 (I组 )及 PDGF和 IL - 1 0共同干预组 (T组 )。采用半定量 RT- PCR方法对各组细胞的 bcl- 2、bax在 RNA水平的表达进行比较分析。　结果　 P、I及 T组 bcl- 2 m RNA的表达均明显低于 C组 (P<0 .0 1 ) ,T组 bcl- 2表达量也显著低于 P组 (P<0 .0 1 ) ;但 P和 I组 ,I与 T组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。P组、I组及 T组 bax m RNA的表达均明显高于 C组 (P<0 .0 1 ) ,T组 bax表达量也显著高于 P组 (P<0 .0 1 ) ,T与 I组差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,但 P和 I组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。　结论　 PDGF的作用以促进 HSC增殖为主 ;IL - 1 0能通过调节 bcl- 2 / bax表达而促进 HSC凋亡 ,具有抑制 HSC增殖的作用     

浅蓝菌素对人结肠癌裸鼠移植瘤bcl-2及bax基因表达水平的影响

目的 :通过观察人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤bcl 2及bax基因表达水平 ,探讨脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素选择性的抑瘤途径和机制。方法 :建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型 ,浅蓝菌素每公斤体重 160mg腹腔注射 ,1次·d-1,连续10d ,第 17天处死并解剖动物 ,瘤组织作免疫组织化学检测bcl 2及bax基因表达水平。结果 :浅蓝菌素处理组结肠癌LoVo细胞移植瘤bcl 2基因蛋白表达率为 68.5 % ;对照组bcl 2蛋白阳性表达率为 87.8% ,阳性细胞弥漫分布。两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。bax基因蛋白在浅蓝菌素组移植瘤组织阳性表达率为 75 .4% ,主要呈强阳性表达 ;对照组阳性表达率为 9.5 %。两组间比较有统计学差异 (P <0 .0 1)。结论 :浅蓝菌素可使结肠癌LoVo细胞移植瘤的bcl 2基因表达下调 ,bax基因表达增强 ,提示bcl 2及bax基因在浅蓝菌素诱导的人结肠癌LoVo细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

rL-IL29对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响及相关机制

目的: 探讨表达IL-29的重组新城疫病毒LoSota株（recombinant Newcastle disease virus LoSota line expressing IL 29,rL IL29）对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法: 体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549细胞为rL-IL29组,LoSota株新城疫病毒（NDVL）感染的A549细胞为NDVL组及PBS处理的A549细胞为对照组。蛋白质印迹法检测各组A549细胞中NDV HN、IL-29蛋白的表达;CCK8法、划痕试验及Transwell侵袭实验检测rL IL29对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞E-钙黏蛋白、MMP2、波形蛋白及AKT/NF κB通路相关蛋白的表达水平。结果： A549细胞感染rL-IL29后,NDV HN及IL-29蛋白均稳定表达,且明显高于NDVL组及对照组;rL-IL29及NDVL感染A549细胞后能够抑制细胞的增殖、迁移及侵袭,且rL-IL29作用更强;与对照组及NDVL组比较,rL-IL29感染后A549细胞中E-钙黏蛋白表达量明显增加,波形蛋白、MMP2（66 kDa/72 kDa）、p AKT及P65蛋白表达明显减弱（均P＜0.05）。 结论： rL-IL29可能通过阻碍AKT/NF-κB信号通路上调E-钙黏蛋白表达和下调波形蛋白、MMP2蛋白表达,从而抑制肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移。     

新城疫病毒对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的抑瘤作用

目的 观察新城疫病毒（NDV）对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法 建立人肺腺癌细胞系在裸小鼠体内移植瘤动物模型,瘤体内1次局部注射NDV病毒作抗肿瘤研究,同时设PBS对照。观察5周,绘制肿瘤生长曲线,处死后量瘤并作光电镜观察其病理学改变。结果 NDV对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的生长有明显地抑制作用（抑瘤率为71.62%)。NDV组与对照组瘤重均值之间差异显著（P＜0.01）。对照组14％的肿瘤发生肝及肺的转移。电镜下可见肿瘤细胞内NDV粒子出芽。结论 NDV对裸小鼠有俩腺癌移植瘤有明显地抑瘤作用。其抑瘤作用与NDV选择性地在肿瘤细胞内增殖并导致肿瘤细胞凋亡及溶解肿瘤细胞有关。     

阿司匹林对大肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的 观察阿司匹林对人结肠癌细胞系LoVo细胞增殖、凋亡的影响及探讨可能的作用机制.方法 用不同浓度阿司匹林处理体外培养的LoVo细胞24、48、72h,MTT法检测其对结肠癌LoVo细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,阿司匹林（浓度分别为2、4、8mmol/L）分别处理LoVo细胞48h,行流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度计检测easepase-3相对活性,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2＋浓度的变化,Western blot法检测bcl-2、bax基因表达情况.结果 阿司匹林（浓度1～10mmol/L）能显著抑制LoVo细胞增殖,呈剂量、时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;阿司匹林处理LoVo细胞48h后,细胞凋亡率分别为11.4％、22.3％、37.1％,对照组凋亡率为2.4％;阿司匹林处理细胞48h后,casepase-3相对活性显著增加;阿司匹林能上调bax的表达并下调bcl-2表达,呈剂量依赖性.结论 阿司匹林均能抑制LoVo细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能为增加细胞内Ca2含量、casepase-3活性及上调bax的表达并下调bcl-2表达.