中药清肝饮对在鼠肝贮脂细胞和成纤维细胞增殖效应的调控作用

目的：研究中药清肝饮对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖生性的影响。方法：采用胶原酶灌流,密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞,以＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）和＾３Ｈ－脯氨酸（＾３Ｈ－Ｐｒｏ）的掺入法观察细胞增殖效应。结果：清肝馀结ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的抑制细胞增殖和胶原合成作用,并随清肝饮浓度的升高而作用增强。结论：清肝饮对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖     

中药清肝饮对大鼠肝贮脂细胞和成纤维细胞增殖效应的调控作用

目的：研究中药清肝饮对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖活性的影响。方法：采 用胶原酶灌流,密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞,以３Ｈ－胸腺嘧啶（３Ｈ－ＴｄＲ）和３Ｈ－脯氨酸（３Ｈ－Ｐｒｏ）的 掺入法观察细胞增殖效应。结果：清肝饮对ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的抑制细胞增殖和胶原合成作用,并随清肝 饮浓度的升高而作用增强。结论：清肝饮对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖活性具有抑制作用。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞增殖的影响

为了探讨中药肾康注射液（ＳＫ）对肾小球系膜细胞增殖的影响,笔者采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率无明显低于对照组,提示肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。     

瓜蒌注射液对兔主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察瓜蒌注射液对培养的兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响。采用液闪法测定平滑肌细胞（ＳＭＣ）氚－胸腺嘧啶核苷掺入量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、前列环素（ＰＧＩ２）及环磷酸腺苷的含量。结果：瓜蒌注射液能抑制ＳＭＣ的＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量,其作用呈剂量依赖关系;增加ＳＯＤ活性,降低ＬＰＯ,升高ＰＧＩ２和ｃＡＭＰ水平（Ｐ均〈０．０５￣０．０１）。提示：瓜蒌注射液     

青心酮对猪肺动脉平滑肌细胞增生的抑制作用

在培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）内加入青心酮（３．４－ＤＨＡＰ）（６．２５×１０－５Ｍ－１０－３Ｍ／Ｌ）注射液，用结晶紫染色法，３Ｈ－ＴｄＲ掺入以及用ＳＰ免疫细胞化学检测ＰＣＮＡ表达，观察对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响，结果表明青心酮对１０％小牛血清引起的ＰＡＳＭＣ增生的作用与异搏定（６．２５×１０－６－１０－４Ｍ／Ｌ）相似，呈剂量依赖性抑制细胞增殖。提示青心酮可用于慢性肺动脉高压肺血管改建的防治。     

DDPH对实验性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B,bFGF,c-sis,c-myc的影响

目的：观察１（２，６二甲基苯氧基）２（３，４二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对实验性高血压大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦＢ，ｂＦＧＦ及其相关癌基因ｃｓｉｓ，ｃｍｙｃ表达的影响。方法：采用氚胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入法，电镜，免疫组化，原位杂交法进行实验观察。结果：ＤＤＰＨ在降低血压同时，能减少ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网和３ＨＴｄＲ掺入量，并能逆转ＶＳＭＣ增殖时ＰＤＧＦＢ，ｂＦＧＦ抗原及ｃｓｉｓ，ｃｍｙｃｍＲＮＡ的表达增强。结论：ＤＤＰＨ能抑制实验性高血压大鼠的ＶＳＭＣ增殖，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗白血病的疗效机理。该当以ＨＬ－６０细胞株为体外模型，终浓度为０．２０μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３作用２４、４８ｈ后，用ＰＩ／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ双标记，流式细胞术观察Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０细胞凋亡及其对细胞株端粒酶活性的影响。结果：Ａｓ２Ｏ３作用于ＨＬ－６０细胞后ＰＩ阴性／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ细胞性细胞增多，提示细胞发生凋亡，ＤＮＡ周期分析显示主要作用在     

滋补肝肾,益气活血方药对血管平滑肌细胞增殖及相关基因表 …

目的：采用血清药理学方法研究滋补肝肾、益气活血方药对内皮素（ＥＴ）诱导的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和ＷＫＹ大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖及相关基因表达的影响。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验检测ＶＳＭＣ增殖状态,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测中药血甭中ＶＳＭＣ诱导一氧化氮合酶基因和ＥＴ－诱导和ｃ－ｊｕｎ、增殖细胞怕（ＰＣＮＡ）基因表达活性的影响。结果：中导型一氧     

树舌多糖对小鼠HepA癌细胞3H-TdR和(6-3H)一Glucose掺入的影响

就树舌多糖ＧＦ抗小鼠ＨｅｐＡ癌细胞作用机制方面做７初步研究，结果发现树舌多糖６Ｆ可抑制Ｈｅｐ。Ａ细胞掺入３Ｈ－ＴｄＲ（Ｐ＜０．０１）和抑制其对［６－３Ｈ］－Ｇｌｕｓｃｏｓ掺入（Ｐ＜０．０１），从而影响ＨｅｐＡ细胞的ＤＮＡ合成和糖代谢。表明树舌多糖ＧＦ是一种新型有效的抗癌活性物质     

扶正化瘀方对3T3细胞殖和胶原生成的影响

为了探讨扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制。以体外培养的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞作为肝脏成纤维细胞的替代模型，用扶正化瘀方药物血清，以１０％的浓度被添加到培养液中，通过［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入法和免疫细胞化学，观察药物血清对３Ｔ３细胞［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入量和胶原生成的影响。结果表明药物血清组［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入量明显少于正常大鼠血清组。药物血清组Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原量均明显低于正常大鼠血清组，其中Ⅰ、Ⅲ型胶原更     

柴胡皂甙d通过磷酸化p38诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡

目的研究柴胡皂甙d(SSd)抑制视网膜母细胞瘤(Rb)细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制。方法应用~3H-胸腺嘧啶掺入分析法观察SSd对细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析SSd对Y79细胞周期的影响,以DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡,用Westem blot分析p38的磷酸化。结果SSd可明显地抑制Y79细胞的生长,10μg/ml SSd处理9h时,~3H-胸腺嘧啶掺入率下降达55．15%,此条件下,SSd可诱导Y79细胞凋亡。在此过程中,p38被激活,即磷酸化。结论SSd可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡,其过程是由磷酸化的p38介导。     

蝎毒对白血病HL—60细胞生长的抑制和诱导凋亡作用研究

目的：研究蝎毒对HL－60细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法：应用MTT法观察蝎毒对细胞的抑制作用,光镜、荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变,原位末端标记检测DNA断裂,流式细胞术分析凋亡细胞和bcl-2蛋白表达。结果：蝎毒可明显地抑制HL－60细胞生长和诱导细胞凋亡,作用在一定范围内呈对浓度和时间的依赖性,蝎毒并能下调HL－60细胞bcl-2蛋白表达。结论：蝎毒能抑制HL－60细胞生长和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与bcl－2蛋白表达的下降有关。     

基于聚类分析对中药活性成分逆转HL60/HTM耐药性评价研究

目的:对具有耐药逆转作用的数种中药成分进行聚类分析。方法:MTT比色法测定补骨脂素、补骨脂甲素、姜黄素、槲皮素、贝母碱、异补骨脂定、补骨脂酚、大黄酸八种中药成分HL60/HT细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪测定细胞内化疗药物HT荧光强度及细胞P糖蛋白表达;测定得到的相关数据,通过聚类分析方法进行药物分组。结果:8种药物的逆转倍数在6.2～12.5之间,HL60/HT细胞中HT浓度在9.6～25.6之间,HL60/HT细胞P-gp表达率在29.3～50.1之间。结论:基于4种实验指标可将八种药物按相似性聚类分成3组:补骨脂素、姜黄素、槲皮素3种成分为第一组,补骨脂甲素、贝母碱、异补骨脂定、大黄酸四种成分为第2组,补骨脂酚为第3组。     

柴胡皂苷-d对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响

目的探讨柴胡皂苷-d（saikosaponin—d,SSd）对脂多糖（1ipopolysaccharides,LPS）作用后肾小球系膜细胞（mesangialcell,MC）增殖及细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的异常增生的影响,为肾小球硬化的防治提供实验依据。方法体外培养、鉴定大鼠肾小球MC。利用MTT、LDH释放实验、流式细胞技术观察SSd对LPS刺激后MC增殖的作用,ELISA法检测细胞外基质Ⅳ型胶原（type1Vcollagen,ColⅣ）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）及转化生长因子（transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1）。细胞免疫化学法检测细胞素依赖性蛋白激酶4（cyclin—dependentkinase4,CDK4）、c—Jun、c—Fos。结果SSd对MC增殖有抑制作用,可使Go／G1期细胞增多,并诱导细胞凋亡;SSd可抑制MC分泌ColⅣ、FN、TGF-β1,并抑制了CDK4、c-Jun、C—Fos的表达。结论SSd对肾小球硬化（glomerulosclerosis,GS）的抑制作用是通过抑制CDK4、c—Jun、c-Fos的表达实现的。     

人参皂甙诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：观察人参皂甙（GS）是否具有诱导髓性白血病HL－60细胞株的凋亡作用。方法：取不同浓度的GS处理HL－60细胞，观察GS所致的细胞形态学的变化；流式细胞术分析细胞DNH含量的改变，并进行DNA片段分析（DNA Ladder);用Annexin V-FITC试验法分析细胞凋亡百分率。结果：人参皂甙能够抑制HL－60细胞生长，在一定剂量和时间范围内可引起细胞凋亡。结论：提示人参皂甙能特异性地诱导HL－60细胞凋亡，可为临床应用人参皂甙作为化疗药物的辅助剂治疗白血病提供实验依据。     

参附汤上调HL60细胞热休克蛋白和糖皮质激素受体mRNA表达及其对细胞存活的影响

目的:探讨中药方剂参附汤对HL60细胞热休克反应时热休克蛋白信使核糖核酸(heat shock protein mRNA, HSPmRNA)和糖皮质激素受体信使核糖核酸(glucocorticoid receptor mRNA,GRmRNA)表达及对细胞存活率的影响.方法:建立细胞热休克模型,用动物血清学方法制备参附汤(SFT)血清,用Northern blot分析HSPmRNA和GRmRNA的改变,用台盼蓝拒染法观察细胞存活率.结果:HL60细胞热休克反应时GRmRNA明显减少,细胞存活率下降,HSPmRNA则增加;该细胞经SFT处理后在热休克反应时,GRmRNA表达增加,细胞存活率提高,HSPmRNA进一步增加.结论:SFT可上调HL60细胞热休克反应时HSPmRNA和GRmRNA表达,提高糖皮质激素的生物学效应和抗细胞损伤能力,从而提高HL60细胞在热休克时的存活率,这可能是临床上SFT用于治疗失血性休克的机制之一.     

参附汤上调HL60细胞热休克蛋白和糖皮质激素受体mRNA表达及其对细胞存活的影响

目的;探讨中药方剂参附汤对HL60细胞热休克反应时热休克蛋白信使核糖核酸（heat shock protein mRNA,HSPmRNA)和糖皮质激素受体信使核糖核酸（glucocorticoid receptor mRNA,GRmRNA)表达及对细胞存活率的影响。方法：建立细胞热休克模型,用动物血清学方法制备参附汤（SFT）血清,用Northern blot分析HSPmRNA的改变,用台盼蓝拒梁法观察细胞存活率。结果：HL60细胞热休克反应时GRmRNA明显减少,细胞存活率下降,HSPmRNA则增加;该细胞经SFT处理后在热休克反应时,GRmRNA表达增加,细胞存活率提高,HSPmRNA进一步增加。结论：SFT中上调HL60细胞热休克反应时HSPmRNA和GRmRNA表达,提高糖皮质激素的生物学效应和抗细胞损伤能力,从而提高HL60细胞在热休克时的存活率,这可能是临床上SFT用于治疗失血性休克的机制之一。     

中华眼镜蛇蛇毒组分C诱导白血病细胞凋亡作用的研究

目的：研究眼镜蛇蛇毒组分Ｃ诱导白血病细胞凋亡的作用及机制。方法：应用光学显微镜透射电镜，脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）电泳，流式细胞仪，逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）等方法，观察白血病细胞经过眼镜蛇蛇毒组分Ｃ处理后，形态学，生物化学及Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ基因表达水平的变化。结果：眼镜蛇蛇毒组分Ｃ能诱导人粒细胞白血病细胞系（ＨＬ６０）发生凋亡形态学和生物化学变化；     

软坚消瘤片药物血清对乳腺癌MCF-7细胞生长的机制研究

目的：通过观察软坚消瘤片药物血清对乳腺癌MCF-7细胞的芳香化酶和雌激素受体基因的表达、细胞增殖周期及细胞凋亡的影响,探讨软坚消瘤片治疗乳腺肿块性疾病的可能机制。方法：制备软坚消瘤片含药动物血清,以体外培养的MCF-7细胞为研究对象,以qRT-PCR法检测乳腺癌细胞芳香化酶（CYP19）及雌激素受体（ER）mRNA表达水平;流式细胞术（FCM）测定细胞增殖周期和凋亡水平;MTS实验测定细胞生长曲线。结果：与空白对照组比较,含药血清组作用细胞24h后能明显抑制乳腺癌细胞株MCF-7的CYP19mRNA、ERmRNA表达水平,表达水平分别降低0.32和0.09倍;药物血清作用48h后S期和G2/M期细胞所占比例降低,尤以G2/M期最为显著,相应的G0/G1期细胞增加,药物血清抑制了细胞增殖的正常进行;凋亡实验示细胞早期凋亡率增加,药物血清组总体凋亡率高于对照组;药物血清作用细胞48h以后细胞生长曲线幅度开始明显低于对照组,在96h时抑制效果最明显。结论：软坚消瘤片药物血清影响乳腺癌MCF-7细胞的雌激素合成及其作用发挥,同时抑制一定时段的细胞生长。     

红芪多糖HPS-3体外诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡研究

目的:研究红芪多糖均一组分HPS-3体外对人胃腺癌MGC-803细胞增殖及凋亡的作用。方法:应用MTT法、显微荧光术和流式细胞术测定HPS-3对MGC-803细胞的增殖、细胞周期和诱导凋亡的影响,应用流式细胞术测定对Bc1-2和Bax蛋白表达的影响。结果:HPS-3对MGC-803细胞具有抑制增殖、G2/M期阻滞和诱导凋亡作用;HPS-3降低bcl-2蛋白表达,对Bax蛋白表达无明显作用。结论:HPS-3可通过抑制人胃腺癌MGC-803细胞的生长增殖、G2/M期阻滞、诱导细胞凋亡,降低bcl-2蛋白等作用机制发挥肿瘤作用。