大肠埃希菌耐药性质粒的提取及鉴定

目的检测大肠埃希菌对9种抗生素的耐药性，探讨大肠埃希菌耐药的分子机制。方法采用平皿二倍稀释法测定40株临床分离的大肠埃希菌对抗生素的敏感性，同时用碱裂解法对耐药菌株进行质粒的抽提，将得到的质粒转化至受体菌JM109进行质粒耐药性的鉴定。结果40株大肠埃希菌对头孢菌素等9种抗生素呈现出不同程度的耐药现象。对氨苄西林和青霉素的耐药性分别达到了87．5％和97．5％。从两株耐药大肠埃希菌中提取出质粒，对其中一株进行转化鉴定，确定为耐药质粒，大小约为3．0kb。结论临床分离大肠埃希菌对多种抗生素表现出较高的耐药性，而耐药性质粒的存在是细菌产生耐药性的机制之一。     

肺炎克雷伯杆菌968株耐药性分析

目的：通过对９６８株肺炎克雷伯杆菌的药敏结果分析，指导临床合理用药。方法：采用微量稀释法测细菌的最小抑菌浓度（ＭＩＣ），并根据ＮＣＣＬＳ标准分析、质控。结果：肺炎克雷伯杆菌对１１种抗生素的耐药性均有增加，尤以头孢菌素耐药性增加明显（Ｐ〈０．０５～Ｐ〈０．００５）。医院内感染分离株的耐药性比院外感染分离株高（Ｐ〈０．０１～Ｐ〈０．００５）。肺炎克雷伯杆菌中存在着多重耐药现象。结论：肺炎克雷伯杆菌耐药性逐年上升；对头孢他啶耐药菌株增加提示产超广谱β－内酰胺酶菌株的存生，应引起临床重视。     

某院肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶基因型及耐药性研究

目的调查该院临床分离肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶表型和基因型携带情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法采用Vitek2-compact全自动细菌鉴定药敏系统对临床分离菌株进行鉴定及药物敏感试验,采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶表型,采用多重PCR方法检测AmpC基因并经DNA测序确定其基因型别。结果 2010年7月至2011年6月共分离到116株肺炎克雷伯菌,产AmpC酶肺炎克雷伯菌占18.1%(21/116)。产AmpC酶肺炎克雷伯菌多重耐药情况严重,对氨基糖甙类、喹诺酮类及大多数头孢菌素类抗菌药物的耐药率在57.1%～100%,对加酶抑制剂复合药氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦及哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为90.5%、85.7%、42.9%、38.1%,所有菌株对碳青霉烯类抗生素亚安培南和美罗培南仍全部敏感。产AmpC酶菌株对头孢西丁、第3代头孢菌素及氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸等抗生素的耐药率明显高于不产酶株(P<0.05)。21株产酶菌株均携带DHA-1型AmpC酶基因。结论该院肺炎克雷伯菌产AmpC酶株检出率较高,产酶菌株多重耐药情况严重。临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生。     

冬春季节某部战士咽部细菌分布及耐药性分析

目的了解某部战士咽部机会致病菌携带情况及耐药性。方法采集70名健康战士的咽拭子标本并进行分离培养,采用全自动微生物鉴定系统对分离菌株进行鉴定及抗生素敏感性试验。结果共检出机会致病菌32株,其中流感嗜血杆菌11株（34．4％）,金黄色葡萄球菌9株（28．1％）,肺炎克雷伯菌5株（15．6％）,肺炎链球菌4株（12．5％）,G群链球菌、洛菲不动杆菌、摩根摩根菌各1株（3．1％）,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出1株,同时检出两种机会致病菌者6人。药敏结果显示：肺炎克雷伯菌除对氨苄西林,摩根摩根菌对氨苄西林、1代头孢菌素固有耐药外,包括洛菲不动杆菌对其他头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类抗生素具有高度敏感性;金黄色葡萄球菌除对青霉素敏感性低为11．1％,对四环素、左氧氟沙星、万古霉素、利奈唑胺、利福平均100％敏感;流感嗜血杆菌对复方磺胺甲恶唑均耐药,四环素敏感率9．1％,氧苄西林、头孢克洛敏感率54．5％,其他类抗生素敏感率均〉80％。结论较多战士咽部存在革兰阳性和阴性机会致病菌,各种细菌对抗菌药敏感,但也有部分耐药。     

儿童肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药物敏感分析

目的了解儿童肺炎克雷伯菌感染状况、特点及细菌耐药性分析,以期指导临床合理用药。方法采用VITEK全自动微生物分析鉴定系统对临床分离的肺炎克雷伯菌菌株进行细菌鉴定和药物敏感试验。结果共分离出肺炎克雷伯菌122株,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌62株(50.82%),不产ESBLs肺炎克雷伯菌60株(49.18%);产ESBLs肺炎克雷伯菌62株中有45株(72.58%)从痰液分离中得到。分离出来的产ESBLs肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类抗生素如氨苄西林、替卡西林及头孢噻吩完全耐药,对头孢西丁和亚胺培南完全敏感;分离出来的不产ESBLs肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类抗生素氨苄西林完全耐药,对头孢西丁和亚胺培南完全敏感。结论肺炎克雷伯菌产ESBLs率较高;临床治疗前应尽可能进行肺炎克雷伯菌培养及药敏试验,以合理和规范用药。     

1998～2002年我院临床克雷伯杆菌耐药情况连续监测研究

目的：连续监测克雷伯杆菌耐药性，分析其耐药趋势。方法：对我院1998至2002年临床分离的505株克雷伯杆菌，采用纸片扩散法检测耐药性。结果：克雷伯杆菌对青霉素类广泛耐药，对第一、二代头孢菌素的耐药率已降至30％，对氟喹诺酮类敏感率在50％，左右，对氨基糖苷类、三代头孢菌素敏感率较高，对四代头孢菌素、三代头孢菌素，β-内酰胺酶抑制剂复合物、碳青霉烯类高度敏感。克雷伯杆菌对氨基糖苷类、β-内酰胺类的敏感性逐年下降，对部分三代头孢菌素，β-内酰胺酶抑制剂复合物的敏感性也呈下降趋势，检测出多株耐亚胺培南菌株。肺炎克雷伯杆菌对氨基糖苷类敏感率高于臭鼻克雷伯杆菌、催产克雷伯杆菌，臭鼻克雷伯杆菌对环丙沙星耐药率最高，催产克雷伯杆菌对氨基糖苷类耐药率最高。结论：克雷伯杆菌临床感染率及耐药性逐年增加，必须对克雷伯杆菌的耐药情况及耐药机制进行深入研究。     

102株呼吸道嗜血杆菌的分离及耐药性分析

目的：了解嗜血杆菌的分离，鉴定及其β-内酰胺酶的产生和耐药性。方法：采用专用嗜血杆菌分离培养基（HAE）分离细菌，在血琼脂平板和M-H平板上做卫星试验对分离出的细菌进行鉴定，采用K-B法进行药敏试验。结果：在726份痰及咽拭子标本中，分离出102株嗜血杆菌，分离率为14.0%；嗜血杆菌β-内酰胺酶的产生率为14.7%；流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率分别为50.0%和40.0%。对复方新诺明的耐药率分别为79.0%和82.5%，对环丙沙星的耐药率分别为69.4%和75.0%。而对阿奇霉素，氨曲南，二代和三代头孢菌素的敏感率均高于90%。结论：痰和咽拭子标本中嗜血杆菌的分离率无明显区别。分离出的嗜血杆菌主要以流感嗜血杆菌为主，对阿奇霉素，氨曲南，二代和三代头孢菌素的敏感性要高于其它抗生素，可作为首选治疗用药。     

98例肺炎克雷伯菌的临床分布及药敏分析

目的　了解肺炎克雷伯菌的临床分布及其耐药性情况。方法　采用FORTUNE .IMS微生物鉴定 /药敏分析系统 ,对各类临床标本中分离的 98株肺炎克雷伯菌进行分析。结果　 5 0 %以上呼吸道痰标本可分离出肺炎克雷伯菌属。肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素、了胺卡那霉素、氨曲南敏感性较高 ,而对氨苄西林、哌拉西林耐药较为严重。结论　高龄、严重基础性疾病、大量广谱抗菌药物的使用是肺炎克雷伯菌感染的易感因素 ,此菌对 2 2种常用抗菌药物的耐药性均有逐年增加的趋势。     

梅河口市医院2010年细菌分离及耐药分析

目的:了解梅河口市中心医院临床分离前五位细菌对常用抗菌药物的耐药性。方法:统计2010年我院临床细菌培养鉴定及药敏结果,用WHONET5.4软件进行统计分析。结果:2010年我院分离细菌前五位为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBL分别为33.3%和25.7%。结论:细菌感染菌株分离率及耐药率与CHINET细菌耐药监测网大致相同,但分离铜绿假单胞菌对头孢菌素类抗生素的耐药性呈快速增长趋势,肠杆菌对碳青霉烯类抗生素、氨基糖苷类抗生素中的阿米卡星仍保持较敏感优势。     

急重症监护病房鲍氏不动杆菌感染与耐药性分析

目的 分析鲍氏不动杆菌耐药性，探讨防治对策。方法 鲍氏不动杆菌鉴定用ATB细菌鉴定仪，药敏采用纸片扩散法（K—B）法，耐药率显著性检验用x^2检验。结果 3年间共分离鲍氏不动杆菌62株，对亚胺培南耐药率最低，仅1．6％，美洛匹宁、多粘霉素E次之，为8．1％，头孢哌酮／舒巴坦耐药率为9．7％，其他头孢菌素抗生素耐药率高达70％～97％，酶抑制剂能显著增加抗菌活性，舒巴坦作用最强，他唑巴坦次之。急诊监护病房分离的鲍氏不动杆菌菌株对头孢菌素类抗生素的耐药率低于呼吸监护病房分离的菌株，有显著性差异（P〈0．05）。结论 鲍氏不动杆菌具有高耐药性，应规范抗生素使用，加强耐药性监控，根据药物敏感结果选择抗生素。     

HMGN2对肺炎克雷伯氏杆菌耐药性的影响

目的探讨HMGN2对肺炎克雷伯氏杆菌耐药性的影响。方法分离、纯化并鉴定兔胸腺组织HMGN2。用质粒提取试剂盒提取耐药肺炎克雷伯杆菌中的质粒pMG252,PCR扩增其耐药基因qnrA;凝胶阻滞实验检测HMGN2与耐药质粒pMG252及qnrA基因结合;用不同浓度的HMGN2刺激培养肺炎克雷伯氏杆菌,然后用试管二倍稀释法测定环丙沙星对其MIC值的改变,微量法测定细菌的生长曲线,检测HMGN2对耐药菌株耐药性的逆转效果;将重组HMGN2及耐药质粒pMG252转化到大肠杆菌DH5α中,检测重组HMGN2对细菌耐药性的影响。结果HMGN2可明显阻滞pMG252质粒及qnrA基因的泳动速率,且随HMGN2浓度增加,qnrA基因的泳动速率逐渐减慢;15μg／ml HMGN2与细菌共孵育后,环丙沙星对耐药肺炎克雷伯氏杆菌的MIC值明显下降,且该耐药株的生长与对照组和低剂量组相比明显的受到抑制;pET-32a-c（＋）-HMGN2重组表达质粒可时环丙沙星对大肠杆菌DH5μ的MIC值明显小于其对照组,下降到其1／16。结论HMGN2能有效逆转含耐药质粒pMG252的肺炎克雷伯氏杆菌等对喹诺酮类抗生素的耐药性。     

200株肺炎克雷伯杆菌耐药性分析

目的：测定肺炎克雷伯杆菌对12种抗菌药物的耐药性，方法：采用VITEK－32型全自动微生物分析仪测定200株肺炎克雷伯杆菌的药敏和超广谱β－内酰胺酶。结果：肺炎克雷伯杆菌对氨苄西林和替卡西林的耐药率超过90％，阿莫西林／棒酸52．5％，头孢西丁，头孢噻肟，头孢他定，庆大霉素，妥布霉素，奈替米星，萘啶酸，培福沙星为36％－44％，未发现对亚胺培南的耐药菌，肺炎克雷伯杆菌产生超广谱β－内酰3胺酶为20％。结论：亚胺增南对肺炎克雷伯杆菌的耐药率最低，应作为治疗重症肺炎克雷伯杆菌感染的首选用药。     

下呼吸道肺炎克雷伯杆菌感染耐药性分析

目的：研究肺炎克雷伯杆菌下呼吸道感染的发生率及耐药性。方法：采用纸片扩散法(K-B)，对下呼吸道感染患者的痰及气管抽吸物分离所得的121株肺炎克雷伯杆菌进行常规药敏检测。结果：肺炎克雷伯杆菌下呼吸道感染率及耐药率均明显升高，且出现耐4代头孢菌素及β-内酰胺酶抑制剂／第3代头孢菌素复合物的肺炎克雷伯杆菌。结论：肺炎克雷伯杆菌下呼吸道感染率及耐药率均明显升高，有必要调整该地区抗菌谱及对该地区肺炎克雷伯杆菌ESBLs基因型进行研究。     

多重耐药肺炎克雷伯菌耐药基因的初步定位研究

目的对临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因进行初步定位，为制定临床治疗策略提供理论基础。方法用法国Bio—Merieux公司vitek-60全自动细菌鉴定仪鉴定菌种，双纸片法检测产超广谱8-内酰胺酶，纸片法做药敏试验。用Qiagen plasmid midi kit试剂盒提取该菌质粒，并将质粒电转入感受态大肠杆菌中，用含Amp（50μg／m1）的（LB）选择培养基筛选转化子，然后提取转化子质粒，与肺炎克雷伯菌质粒同时用0．5％的琼脂糖进行电泳分析。肺炎克雷伯菌，电转前、电转后大肠杆菌做药敏试验。结果质粒电泳图谱显示，转化子DH5a所含质粒与肺炎克雷伯菌所含质粒相同，电转化取得成功；肺炎克雷伯菌对17种抗生素均耐药，感受态大肠杆菌对17种抗生素均敏感，转化子DH5n对头孢呋辛和氨苄西林耐药，对其余15种抗生素表现不同程度的敏感。结论本株肺炎克雷伯菌的质粒上可以确定有耐头孢呋辛和氨苄西林的基因，并且能在转化子DH5a中成功表达：头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢吡肟、氨曲南的耐药基因可能位于质粒上，但未能完全表达；而环丙沙星、阿米卡星、庆大霉素的耐药基因比较复杂，初步判断不在质粒上；头孢西丁、美洛培南、亚胺培南则无法做出判断。     

47株肺炎克雷伯杆菌对12种抗生素的耐药性分析

用Ｋ－ Ｂ纸片扩散法测定苏州地区４４７ 株肺炎克雷伯杆菌对１２ 种常用抗生素的耐药性。结果：４７７ 株肺炎克雷伯杆菌对常用抗生素的总耐药率依次为：氨苄西林８７．４ ％ 、安美汀５２％ 、哌拉西林４０．８ ％ 、菌必治３０ ．７ ％ 、复方新诺明２７ ．４％ 、庆大霉素２３．４％ 、头孢唑啉２３．１ ％ 、阿米卡星１７．１％ 、头孢哌酮１６ ．３ ％ 、氟哌酸１２ ．７ ％ 、亚胺硫霉素５ ．４ ％ ,舒普深无１ 株耐药。提示肺炎克雷伯杆菌的耐药株日趋增多,应在不同地区开展耐药性监测,以合理选用抗生素     

下呼吸道标本肺炎克雷伯菌的耐药性分析及产ESBLs和AmpC酶的检测

目的探讨下呼吸道标本肺炎克雷伯菌的耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）的检测。方法采用双纸片协同扩散法检测ESBLs和改良三维试验检测AmpC酶,并采用纸片扩散（K-B）法检测180株肺炎克雷伯菌对18种常用抗生素的耐药率。结果180株分离的肺炎克雷伯菌中检出单产ESBEs70株（38．9％）,单产AmpC酶22株（12．2％）,同时产AmpC酶和ESBLs即超超广谱-内酰胺酶（SSBLs）12株（6．7％）。单产AmpC酶、ESBLs及SSBLs对18种常用抗生素的耐药率均高于不产酶菌株（除哌拉西林／他巴唑）。结论下呼吸道感染肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生ESBLs和AmpC酶,临床经验用药可选择β-内酰胺类／β-内酰胺酶抑制剂和头霉素类抗生素,对重症感染首选碳青霉烯类抗生素。     

住院呼吸道感染患儿嗜血杆菌检出率及耐药性调查

目的：了解呼吸道感染患儿嗜血杆菌的检出及耐药情况。方法：对我院2002年6月呼吸内科住院的急性呼吸道感染患儿55例，用低压吸引器接一次性吸痰管，吸取患儿咽喉部痰液进行培养分离嗜血杆菌，采用法国生物梅里埃公司ATBNH药敏条件进行药敏分析。结果：嗜血杆菌检出率29．1％，对头孢三代类、阿奇霉素、环丙沙星、泰能、氨曲南等抗生素敏感，对红霉素、复方新诺明、氨苄西林等出现不同程度的耐药，其耐药率分别为81．2％、68．8％、31．2％。结论：本地区儿童呼吸道感染以嗜血杆菌感染率较高，且以副流感嗜血杆菌感染为主，临床上应首选头孢三代、阿奇霉素、泰能等类抗生素治疗为宜。     

呼吸道感染常见革兰氏阴性杆菌的药敏分析

目的：了解呼吸道感染常见革兰氏阴性杆菌的耐药状况，为l临床合理用药提供依据。方法：对471株革兰氏阴性杆菌进行药敏试验(MIC法)，同时对肺炎克雷伯氏杆菌、大肠埃希氏菌进行超广谱争内酰胺酶(ESBLs)确认实验。结果：分离菌株主要是铜绿假单胞菌(106株，22．5％)、肺炎克雷伯杆菌(87株，18．5％)、阴沟肠杆菌(56株，11．9％)、鲍曼不动杆菌(56株，1．9％)、大肠埃希菌(20株，4．2％)。其中鲍曼不动杆菌对亚胺硫霉素最敏感。铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌是产诱导型p内酰胺酶(IB)的主要菌，对丁胺卡那酶素、亚胺硫霉素较敏感。阴沟肠杆菌的产酶株对β-内酰胺酶抑制剂、四代头孢菌素、氨基糖甙类、磺胺类抗生素的耐药率明显低于非产酶株组。肺炎克雷伯杆菌与大肠埃希菌是产ESBLs的主要菌，两者对β-内酰胺酶抑制剂、氨基糖甙类、碳青霉烯类较敏感，而对头孢菌素酶特别是三代头孢菌素耐药率较高，且产酶株的耐药率明显高于非产酶株。结论：呼吸道感染常见革兰氏阴性杆菌依次为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌，其耐药率普遍较高，并有较高的多重耐药率，临床上应根据药敏结果合理选择抗菌素。     

272例化脓性扁桃体炎患儿咽拭子培养分析

目的探讨儿童化脓性扁桃体炎病原菌的种类和耐药性。方法采用咽拭子采集2006年10月．2007年10月272例临床诊断化脓性扁桃体炎患儿脓性分泌物进行培养及药物敏感性分析。结果272例化脓性扁桃体炎惠儿中阳性112例，最常见的致病菌为流感嗜血杆菌（28．57％）、金色葡萄球菌（25％）、副流感嗜血杆菌（12．5％）和肺炎克雷伯菌（11．61％）。这些常见致病菌对青霉素类抗生素及头孢一、二代耐药率较高，而对头孢三代、氨基糖甙类、阿奇霉素耐药率低；亚胺培南和万古霉素尚无耐药菌株。结论目前儿童化腋性扁桃体炎常见病原菌变化不大，但对青霉素类药物基本耐药，一、二代头孢菌素耐药率较高，阿奇霉素可作为临床一线药物。     

447株肺炎克雷伯杆菌对12种抗生素的耐药性分析

用Ｋ－Ｂ纸片扩散法测定苏州地区４４７株肺炎克雷伯杆菌对１２种常用抗生素的耐药性。结果：４７７株肺炎克雷后杆菌对常用抗生素的总耐药率依次为：氨苄西林８７．４％、安美汀５２％、哌拉西林４０．８％、菌必治３０．７％、复方新诺明２７．４％、庆大霉素２３．４％、头孢唑啉２３．１％、阿米卡星１７．１％、头孢哌酮１６．３％、氟哌酸１２．７％、亚胺硫霉素５．４％,舒普深无１株耐药。提示肺炎克雷伯杆菌的耐药株日趋增