HLA-B27基因在强直性脊椎炎中的临床应用

目的：为评价ＨＬＡ－Ｂ２７基因在强直性脊椎炎的临床诊断价值。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＰ地１４１例风湿性病人ＨＬＡ－Ｂ２７工与血沉、影像学Ｘ光片报告开面指标进行比较。结果：强直性脊椎炎病人组ＨＬＡ－Ｂ２７是性率６８．８％与风湿必 人组ＨＬＡ－Ｂ２７基因阳性率１１．４％,比较,Ｐ〈０．００５,有非常显著性划;强直性脊椎炎病人Ｂ２７基因阳性率６８．８％,与血沉结果升高率８７．５％比较,Ｐ〉０．０５,无显著     

用顺序特异引物聚合酶链反应技术对HLA-B基因分型

目的采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）建立汉族人群ＨＬＡ－Ｂ基因分型方法。方法肾移植供受者临床样本ＤＮＡ３１９份，Ｂ基因标准系列ＤＮＡ６２份。设计合成Ｂ座位５２个特异性引物和１对阳性对照引物，组成４１个ＰＣＲ反应，建立ＰＣＲ－ＳＳＰ方法。一步法完成对Ｂ座位的基因分型。结果经双盲验证，并与血清学方法比较。结果所有临床样本和标准ＤＮＡ，ＰＣＲ－ＳＳＰ基因分型均获得成功。可准确分辨ＨＬＡ－Ｂ座位等位基因４１个，实际检出汉族人群Ｂ抗原特异性３２个。无假阳性和假阴性，４０份样本的重复率１００％，总耗时５小时。分型结果经双盲验证完全符合。与血清学分型结果比较显示：７８份血清学空白中１７例存在第二个基因，２６份血清学分型结果错误。总误差率１３．５％。结论用ＰＣＲ－ＳＳＰ技术行ＨＬＡ－Ｂ基因分型，分辨率高、特异性强、重复性好、相对简捷快速，分型结果较血清学方法更加精确可靠，适合于临床应用。     

HLA-B27抗血清筛选

<正>HLA-B27是人类白细胞B位点上的一个抗原,它与强直性脊柱炎（anky losing spondy litis,AS）的发病密切相关。国内外许多研究表明AS患者中95％以上为HLA-B27阳性,而正常人群中仅4％～6％左右为阳性。HLA-B27抗原检测现已作为临床诊断强直性脊柱炎的重要标志之一。目前国内大多数实验室仍采用血清学方法来检测B27抗原,因而制备一套特异性好,效价高的HLA-B27抗血清是至关重要的。我们在三年时间内收集了 3 000份产后血,进行筛选。     

采用 PCR-SSP法检测HLA-B27基因

目的：建立顺序特异引物聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法检测ＨＩＡ－Ｂ２７基因并与血清学方法比较。方法：设计合成Ｂ２７特异物３个和内源性阳性对照２个,建立ＰＣＲ－ＳＳＰ方法,用于Ｂ２７基因分型。血清学分型为一步法单克隆抗估方法。临床样本１００份,不源于可疑强直性脊柱炎患者。快速酚氯仿法提取模板ＤＮＡ。结果：１００例临床样本ＰＣＲ－ＳＳＰ行Ｂ２７基因分型均获成功。总耗时４ｈ。其中Ｂ２７阴性５８例,阳     

流式细胞术和微量细胞毒法检测HLA-B27的比较

人白细胞相关抗原 (ＨＬＡ Ｂ2 7)分子 (简称Ｂ2 7)的生理功能是携带提呈的细菌多肽 ,并激活ＣＤ8+ Ｔ细胞。Ｂ2 7因与强直性脊柱炎 (ＡＳ)等脊柱关节病 (ＳＰＡ)的关联 ,是所有疾病与ＨＬＡ相关中最为密切的 ,多年来一直是风湿病学界研究的热点之一[1] 。分析Ｂ2 7的表达对ＡＳ的发病机制、诊断、预防及预后判断都有重要意义[2 ,3 ] 。既往采用微量细胞毒法检测ＨＬＡ Ｂ2 7表型 ,本文采用流式细胞术进行检测 ,并比较了两种方法的优缺点。1　材料和方法1.1　材料　微量细胞毒法用倒置显微镜产自重庆光学仪器厂。标准羊抗人血清、Ｂ2 7抗原…     

疑似强直性脊柱炎患者HLA-B27与B13抗原关联的分析

ＨＬＡ Ｂ2 7与强直性脊柱炎 (ＡＳ)发病相关已得到公认。美国、加拿大、挪威和荷兰白种人的ＨＬＡ Ｂ6 0抗原可增加ＨＬＡ Ｂ2 7阳性个体的ＡＳ易感性〔1〕。我们在对疑似ＡＳ患者检测ＨＬＡ Ｂ2 7抗原中 ,发现相当多的患者存在ＨＬＡ Ｂ2 7/Ｂ13抗原关联现象 ,结果如下。材料与方法检测对象 :1999年 1月～ 2 0 0 1年 5月期间 ,由我室进行ＨＬＡ Ｂ2 7检测的来自江苏、安徽两省的 75 0名临床怀疑为ＡＳ的患者 ,男性 5 37人 ,女性 2 13人。检测方法 :采用微量淋巴细胞毒法 (ＮＩＨ标准 )。试剂由ＯｎｅＬａｍｂｄａ公司 (美国 )提供 ,每次实…     

强直性脊椎炎病人HLA—B27等位基因与HLA—A,B抗原 …

调查强直性脊椎炎病人中Ｂ２７等位基因与其它ＨＬＡ－Ａ、Ｂ抗原之间的关系，为ＡＳ与Ｂ２７关联机理提供线索。方法ＨＬＡ－Ａ１Ｂ抗原分型采用ＮＩＨ标准微量淋巴细胞毒方法，Ｂ２７等位基因的检测采用聚合酶链反应／顺序特异的寡核苷酸探针方法。对上海地区６８例ＡＳ病人和３１８例正常对照进行调查。     

人工合成HLA-B_(27)多肽抗原的单克隆抗体研究

本文报道用人工合成HLA-B_(27)抗原决定基的多肽为免疫原来制备McAb的研究.根据计算机对B_(27)分子一级结构的B细胞识别序列的分析结果,用固相法合成了B_(27)分子多态区抗原决定基上P_(62-24)与P_(69-84)两个肽段,分别与KLH和BSA载体偶联,免疫RALB/c小鼠.当按常规方法免疫动物进行5次融合,所得17株抗小肽McAb均可与载体分子有较强的交叉反应.当在融合前的末次加强免疫改为仅用不接载体的小肽来进行,三次融合就获得了9株不与载体分子发生交叉反应的特异性抗肽McAb,为今后鉴定出可和天然B_(27)分子起反应的McAb提供了基础.文中对这二种免疫方案还作了比较和讨论。     

强直性脊椎炎与HLA—B27等位基因研究

为探索强直性脊椎炎与ＨＬＡ－Ｂ２７关联机理，建立非同位素地高辛杆标记的ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对中国上海地区６８例ＨＬＡ－Ｂ２７一的强直性脊椎炎病人和７例ＨＬＡ－Ｂ２７了性正常对照进行了ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的检测，结果显示在病人和正常对照级中Ｂ＊２７０４都是最常见的等位基因，各占７６．８％和７１．４％，Ｂ＊２７０５亦是常见的等位基因，分别占２０．３％和２８．６％，两组间比较差异无显著性；在病人组还检出     

用猴的类DPB基因诱导的PCR指纹图对HLA-DP基因快速相容性测定

目的 将PCR指纹图用于个体间HLA－DP的基因水平交叉配型,确定供－受体间DPB基因的相容性。方法 引入猴的类DPB等位基因的扩增产物作通用性异源双链生成物（UHG）,使原不有产生POCR指纹图的DPB基因扩增产物在非变性PAGE中显示特定的“卫星条带”,从而可用于供受体间HLA－DP基因的相容性测定。结果 11株和HLA纯合的B淋巴细胞系和随机个体进行PCR－DPB指纹图及交叉配型分析,能敏感地反映了个体间DP基因的差异,特别是在纯合子DPB＊0201和杂合子DPB＊0402／0501中初步发现了可能存在着未能被PCR－RFLP区分的新的亚型或新的等位基因,但是尚不能区分DPB＊0201和DPB＊0402两个等位基因,有待今后进一步探索。结论 初步表明该技术可有效判别供－受体DBP基因匹配性,并有简单、快速等优点。     

用PCR-SSP作HLA-B位点分型及B22亚型分析

目的:用DNA分型弥补血清学HLAB位点分型的欠缺并了解南方汉族B22亚型分布情况。方法:采用标准细胞作参照,建立B位点的PCRSSP分型方法;并对血清学B22阳性标本进行B22亚型分析。结果:104株标准细胞PCRSSP分型结果与已知结果完全一致,17例白血病人及同胞分型与血清学一致,1例不符;B22亚型以B5401最多,B5601较少,1例分型格局异常,可能为新B22等位基因或错配的DNA双链。结论:PCRSSP可用于B位点的DNA分型,比血清学更直观精确,操作简便,不受疾病状态影响。     

HLA-B27亚型及其与强直性脊柱炎关系的研究进展

强直性脊柱炎(AS)是与mA关联最强的疾病.HLA-B27由22个以上同种异型基因型(亚型B*2701～B*22)组成,不同亚型核苷酸序列之间只存在个别位点的差异,其亚型具有分布不同的种族和人种流行情况,以B*2705分布最广.近年来建立了大量的AS动物模型,人类B27转基因鼠实验证实B27分子是AS的原发关联成分,这种带有B27等位基因的实验动物可发生类似人类AS疾病.目前倾向于以关节源性肽假说来解释HLA-B27在AS发病中的作用.     

Polymorphism of HLA-B27 in Taiwanese Chinese

Heterogeneity of HLA-B27 is represented by a family of 24 closely related alleles/subtypes. Frequency and disease association of these alleles with spondyloarthropathies differ among ethnic groups. Accurate investigation of frequencies of alleles is often hindered by the size and demographic region of sample tested. With an ever-increasing number of B27 alleles being discovered, it is becoming imperative to establish disease association of each individual alleles and its biological importance. In a large number of normal healthy Taiwanese Chinese individuals (75,777) tested nationally, over a period of five years, in a single immunogenetics centre, we found additional B27 subtypes not revealed in a previous Taiwanese Chinese population study. The subtypes found in Taiwanese Chinese and the frequencies of each of the subtypes are reported.     

HLA-A位点PCR-SSP基因分型和血清学分型的比较

目的：建立优化ＨＬＡ－Ａ位点ＰＣＲ－ＳＰ分型方法。方法：采用普通扩增仪和Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管对细胞系ＤＮＡ和３７个健康正常人进行基因分型,血清学检测采用标准淋巴细胞毒试验方法。结果：发现引物浓度和浓度比、ＤＮＡ的纯度及酶的选用,是影响ＨＬＡ－Ａ位点ＰＣＲ－ＳＳＰ分型准确性的重要因素。该方法对３７个标本的基因分型结果与血清学结果相符合。结论：ＰＣＲ－ＳＳＰ方法具有简便准确的优点,可以作为ＨＬＡ－Ａ位     

HLA-B27: portraying immunodominant viral epitopes

Although the crystal structure of HLA-B27 has been known for a long time, only recently have X-ray diffraction studies of this molecule in complex with individual peptides become available. The report of three such structures involving viral epitopes that are immunodominant in HLA-B27-restricted T cell responses against influenza, Epstein-Barr and HIV viruses significantly improves our perception of critical aspects of the immunological and pathogenetic roles of HLA-B27, including (1) the molecular basis of its peptide-binding specificity and how this is modulated by subtype polymorphism, (2) the relationship between the structural and the antigenic features of immunodominant viral epitopes, (3) the basis for long term non-progression to AIDS of HIV-infected HLA-B27+ individuals, and (4) the structural features of microbial peptides influencing NK receptor engagement. Here, I discuss the implications of this and related studies for the relevance of HLA-B27 in host defense and as a pathogenetic molecule in spondyloarthritis.     

HLA-DR位点的基因芯片分型与临床应用

目的：建立一种新型的HLA－DR位点的基因分型方法，为HLA－DR的基因分型提供一个较新的思路。方法：利用基因芯片技术HLA不同基因亚型的独特序列设计探讨，制成分型芯片；待检测样品经PCR反应标记上荧光之后，与芯片进行杂交，根据杂交产生的荧光信号值分析确定样品DR位点的基因亚型，将这一方法应用于70份标准DNA和200份医院移植供受者的HLA－DR基因分型并将部分样品进行基因测序。结果：检测结果表明HLA－DR基因分型芯片可准确分辨出DR位点等位基因30大类，耗时3h 。结论：基因芯片用HLA－DR的基因分型，分辨率高，特异性强，重复性好，操作简便，对比常规的PCR－SSP和PCR－SSO方法，HLA－DR基因芯片方法更为直观，并具有集成化优势。可以在一张芯片上同时检测HLAⅠ类的A、B位点，并实现一张芯片多人份，适合于临床应用和骨髓库，脐血库的建立。     

HLA-B27 PCR辅助诊断幼年强直性脊椎炎

目的：辅助诊断幼年强直性脊椎炎。方法：用ＰＣＲ技术对２４例临床表现为类风湿关节炎少关节型患儿的ＤＮＡ进行ＨＬＡ－Ｂ２７基因分析。结果：２４份标本中７例ＰＣＲ检测Ｂ２７基因阳性,占分析的２９．２％（７／２４）。７例Ｂ２７基因阳性病例中男５例,女２例,平均年龄１０．４岁。结论：Ｂ２７检测可作为诊断或鉴别诊断幼年强直性脊椎炎的重要指标,利于疾病病鉴别和预后估计。