NF-κB/IκB信号通路在IL-1β诱导的肾系膜细胞环氧化酶-2表达中的作用

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)/IκB信号通路在肾小球系膜细胞环氧化酶-2(COX-2)表达中的作用。方法:放射免疫测定法检测系膜细胞培养上清中PGE₂水平;RT-PCR和Westernblot检测COX-2表达;凝胶电泳迁移率(EMSA)和Westernblot检测肾小球系膜细胞中NF-κB活化、p65亚基核转位以及IκBα和IκBβ的降解。结果:IL-1β显著上调系膜细胞PGE₂释放和COX-2表达,PDTC显著抑制IL-1β诱导的COX-2表达及PGE₂释放;IL-1β诱导系膜细胞NF-κB活化,p65核转位及胞浆内IκBα和IκBβ的降解。结论:IL-1β通过NF-κB/IκB信号转导通路诱导肾小球系膜细胞中COX-2表达。     

硝普钠对核因子κB活性影响的初步研究

目的:探讨不同浓度的硝普钠(SNP)对人外周血T淋巴细胞核因子kappa B(NF-κB)活性的影响及机制。方法: 应用人外周血T淋巴细胞培养、Western blot和RT-PCR等技术,观察不同浓度的一氧化氮(NO)供体SNP对人T细胞受植物血凝素(PHA-P)刺激30 min、120 min后IκB_α mRNA和蛋白质表达的影响。结果:中高浓度的SNP能显著减少PHA-P刺激30 min时IκB_α蛋白的降解,并明显增加刺激120 min时IκB_α mRNA的再表达。结论: 中高浓度的SNP抑制NF-κB活性的机制与其通过NO减少IκB_α降解、促进IκB_α再合成有关,而低浓度SNP对NF-κB活性影响的机制可能不是通过IκB_α。     

CCK-8抑制LPS诱导大鼠肺间质巨噬细胞TNF-α转录及NF-κB活性

目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(CCK-8)对体外脂多糖(LPS)诱导大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)TNF-α基因表达的影响,探讨核因子κB(NF-κB)是否参与这一过程,以揭示CCK-8抗炎作用的信号转导机制。方法:分离大鼠肺PIMs,经LPS、CCK-8、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育3h,用RT-PCR技术检测细胞TNF-αmRNA的表达,孵育1h,用电泳迁移率改变分析方法检测NF-κB活性,孵育30min,用Westernblot技术检测胞浆IκBα蛋白表达情况。结果:CCK-8(10^-8-10^-6mol·L^-1)明显降低了LPS诱导的TNF-αmRNA表达及NF-κB活性,增加了胞浆中IκBα蛋白水平,呈剂量依赖性,并可被丙谷胺所拮抗。结论:对LPS激活的肺PIMs,CCK-8通过抑制NF-κB活性而抑制其TNF-αmRNA表达,该作用由CCK受体介导,并与CCK-8减少IκBα蛋白降解有关,此为CCK-8抗炎作用的机制之一。     

芝麻素通过PKCα/ NF-κB 信号途径抑制肥大细胞活化

目的:观察芝麻素对肥大细胞活化和炎症介质释放的影响并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养HMC-1细胞,用10 μg/ ml 的anti-DNP IgE 处理细胞6 h 后,再用100 ng/ ml 的DNP-HAS 孵育10 min 诱导HMC-1 细胞活化,在DNP-HAS 处理前给予最终浓度25、50 和100 μg/ L 芝麻素预处理30 min 后光镜下观察芝麻素对肥大细胞脱颗粒的影响,ELISA 法检测芝麻素对肥大细胞组胺、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8 释放的影响,Western blot 方法观察芝麻素对Fc RI 受体下游信号Lyn 和 Syk,PKC琢激活,IκB琢磷酸化和NF-κB 活化的影响。结果:DNP-HAS 能明显诱导HMC-1 细胞脱颗粒,促进组胺和TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-8 等细胞因子的释放,激活Fc着RI 受体下游信号分子Lyn、Syk 和PKCα,磷酸化IκBα,促进NF-κB 活化(P<0.05)。芝麻素高(100 μg/ L)、中(50 μg/ L)浓度能明显抑制HMC-1 细胞脱颗粒和炎症介质的释放,阻断Fc着RI 受体下游信号激活,抑制NF-κB 活化(P<0.05)。结论:芝麻素通过PKCα/ NF-κB 途径抑制肥大细胞活化和炎症介质释放。     

核因子-κB在痂下水肿液诱导单核细胞表达细胞因子过程中的作用

目的:了解核因子κB(NF-κB)活化在烧伤患者痂下水肿液(STF)诱导单核细胞分泌细胞因子中的作用,探讨STF激活单核细胞的细胞信号转导机制。方法:收集烧伤患者痂下水肿液和体外培养的人外周血单核细胞(PBMCs),分别用正常人血清、烧伤患者STF、烧伤患者STF+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激PBMCs(依次分为对照组、STF组、STF+PDTC组)。电泳迁移率分析法检测单核细胞NF-κB活性;酶联免疫吸附测定法检测PBMCs培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)8含量。结果:刺激PBMCs后0.5 h,STF组NF-κB活性迅速升高,0.5 h达(32.23±4.12)×104积分灰度值,1 h达(36.44±5.01)×104积分灰度值,达高峰值,与对照组比较差异非常显著(P0.01),刺激2 h后NF-κB活性逐渐回复基础状态;STF刺激PBMCs后1h,细胞培养上清液TNF-α含量即升高达峰值,明显高于对照组(P0.01);上清液中IL-8含量在刺激后4 h达峰值,也明显高于对照组(P0.01)。STF+PDTC组较STF组NF-κB活性、培养上清液中TNF-α和IL-8含量也明显降低(P0.01)。结论:STF可通过活化NF-κB,从而刺激PBMCs对细胞因子的合成和释放,提示NF-κB活化在STF诱导PBMCs分泌细胞因子过程中起重要作用。     

慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠肾组织Akt信号通路蛋白表达及泼尼松的调控作用

目的:研究慢性移植物抗宿主病(GvHD)狼疮小鼠肾组织Akt信号通路蛋白在体内是否存在异常活化及泼尼松对Akt信号通路蛋白活化的调控作用。方法:肾组织Akt和磷酸化IκBα蛋白检测采用Western blot方法, NF-κB活性检测采用电泳迁移率改变实验(EMSA)。结果:注射单细胞悬液后第8周和第1２周, 狼疮鼠肾组织Akt活性、磷酸化IκBα及NF-κB活性均显著高于正常对照组(Ｐ＜0.05), 第16周, 狼疮鼠肾组织Akt活性、磷酸化IκBα及NF-κB活性均与正常对照组无显著差别(Ｐ＞0.05);第8周和第1２周时, 狼疮小鼠肾组织Akt活性与NF-κB活性均呈正相关 (分别为r=0.523和r=0.574, Ｐ＜0.05)。 泼尼松对狼疮小鼠外周血抗dsDNA抗体滴度和尿蛋白具有显著的抑制作用, 对肾脏病理改变有显著的改善作用, 同时, 泼尼松亦显著抑制狼疮小鼠肾组织Akt活性、磷酸化IκBα和NF-κB活性。结论：GvHD狼疮小鼠肾组织存在Akt-NF-κB信号通路异常活化, 泼尼松对该模型具有治疗作用可能与其抑制体内Akt-NF-κB信号通路异常活化有关。     

核转录因子κB信号通路在应力调控成肌细胞分化中的作用

背景：NF-κB信号通路在细胞生长分化、炎症反应、肿瘤生长等过程中发挥重要的调节作用,也参与成肌细胞分化的调控。 目的：分析NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化中的作用及其作用机制。 方法：成功构建大鼠C2C12成肌细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,以0.5 Hz的加载频率和10%的细胞拉伸变形幅度对细胞进行拉伸培养2,6,12,24 h。 结果与结论：①C2C12成肌细胞在周期性机械拉伸力作用下,NF-κB信号通路被激活。当细胞受到应力刺激6 h后,胞核NF-κB p65亚基蛋白表达水平开始增强,24 h内NF-κB p65亚基蛋白表达水平达到峰值。加力12,24 h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P < 0.05)。②IκBα蛋白表达水平在加力6 h后表达显著下降,24 h内IκBα蛋白表达水平减弱达到最低。加力12,24 h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P < 0.05)。③周期性张应力促进C2C12成肌细胞分化过程中Myogenin的表达,加入NF-κB信号通路特异性抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸 (20 μmol/L) 后再加力,Myogenin的表达明显降低。以上结果提示：①NF-κB信号通路可能参与应力介导的C2C12成肌细胞分化的调控过程。②当细胞受到应力刺激时,胞质IκBα发生磷酸化并降解。③NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化过程中发挥重要作用,但不是这一调控过程的惟一通路。     

1,25-二羟维生素D3负性调控被动致敏人气道平滑肌细胞中的NF-κB信号通路

 目的：探讨1,25-二羟维生素D3［1,25-(OH)2D3］对被动致敏人气道平滑肌细胞(HASMCs)中核因子κB（NF-κB）信号通路的影响。方法：原代培养HASMCs并使之被动致敏,以1,25-(OH)2D3作为干预因素。EMSA法检测NF-κB的DNA结合活性;免疫细胞化学染色技术观察NF-κB p65的核易位情况;Western blotting法检测核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及p-IκBα蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR检测维生素D受体(VDR)、维生素D 24-羟化酶(CYP24)和IκBα mRNA的表达水平;放线菌素D处理实验检测IκBα mRNA的表达。结果：(1) 1,25-(OH)2D3显著削弱被动致敏HASMCs中NF-κB的DNA结合活性及其亚单位 p65的核易位;(2) 1,25-(OH)2D3能通过增加被动致敏HASMCs中IκBα的mRNA稳定性及减少其蛋白磷酸化水平2个途径显著上调细胞中IκBα的表达;(3) 1,25-(OH)2D3显著上调被动致敏HASMCs中VDR的mRNA表达并诱发其功能性反应。结论：1,25-(OH)2D3能通过上调被动致敏HASMCs中IκBα的表达抑制细胞NF-κB信号通路,且这一作用与VDR有关,这可能是其调控被动致敏HASMCs的重要作用机制。     

同型半胱氨酸硫内酯损伤血管内皮细胞的机制研究

目的: 在体外培养的内皮细胞中探讨同型半胱氨酸硫内酯(HTL)致血管内皮细胞损伤作用及其机制。方法: 体外培养的人脐静脉内皮细胞,与不同浓度的HTL孵育,用ELISA检测内皮细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和可溶性细胞间黏附分子(sICAM)-1的浓度,荧光显微镜检测活性氧簇(ROS)的含量、核转录因子κB(NF-κB)的激活及IκBα蛋白表达,同时检测内皮细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量与一氧化氮(NO)水平。结果: HTL(1 mmol/L)孵育内皮细胞3 h后显著增加细胞 ROS含量,刺激NF-κB转入胞核而活化,孵育细胞24 h后明显升高细胞上清液中sICAM-1和TNF-α浓度;降低细胞活力和NO的水平,增加LDH的漏出量。抗氧化剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂Apocynin和NF-κB抑制剂PDTC可显著抑制HTL所致ROS含量的增加以及NF-κB激活,降低HTL刺激的培养液中sICAM-1和TNF-α的浓度,增加培养液中NO水平。结论: HTL诱导的血管内皮细胞功能损伤的机制可能与诱导氧化应激以及NF-κB活化有关。     

NF-κB在人巨细胞病毒感染诱导宿主细胞增殖、凋亡中的作用

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)是否通过激活核转录因子(NF-κB)调控宿主细胞增殖与凋亡。方法:用HCMVAD169株感染人胚肺成纤维细胞(HEL),采用免疫组化和Westernblot方法检测宿主细胞NF-κB和Bcl-2蛋白的表达与I-κBα的变化,应用MTT方法观察细胞的增殖活性,同时用流式细胞术检测细胞凋亡指数。结果:HCMV感染后48h细胞核表达NF-κB蛋白最多,24hI-κBα降到最低,120hNF-κB失活,bcl-2的表达与NF-κB的活性改变一致。HCMV感染在72h前抑制宿主细胞凋亡,促进细胞增殖,在120h可诱导宿主细胞凋亡。结论:NF-κB在HCMV感染诱导宿主细胞增殖与凋亡中起作用,与HCMV疾病的发生发展有关。     

NF-κB在脓毒症血浆诱导的内皮细胞损伤和凋亡中的作用

 目的：探讨核因子κB（NF-κB）在脓毒症血浆诱导的内皮细胞损伤和凋亡中的作用。方法：应用脓毒症患者血浆刺激人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,健康对照者血浆作为阴性对照。用酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫荧光法检测NF-κB的核移位,流式细胞术检测内皮细胞凋亡。结果：脓毒症患者血中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和von Willebrand因子(vWF)明显高于正常人。在一定范围和时间内,脓毒症血浆刺激HUVECs释放vWF呈时间、剂量依赖关系,应用NF-κB拮抗剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）阻断后,vWF降低。脓毒症血浆刺激HUVECs时,NF-κB活化,从胞浆移位入胞核。脓毒症血浆引起内皮细胞凋亡增加,加入NF-κB拮抗剂PDTC后HUVECs凋亡明显增加。结论: NF-κB参与了脓毒症引起的内皮细胞损伤,抑制了内皮细胞凋亡。     

IκBα转基因小鼠肝脏免疫细胞亚群的初步分析

目的:分析IκBα转基因小鼠肝脏组织形态、免疫细胞分群、凋亡状态以及表型分子等。方法:HE 组织染色分析野生型小鼠和IκBα转基因小鼠肝脏组织形态变化;利用流式细胞术分析野生型小鼠和I资B琢转基因小鼠肝脏组织中NK、NKT、T 细胞比例和表型分子,进一步采用Annexin V 标记法检测小鼠肝脏免疫细胞的凋亡状态;定量PCR 法检测趋化因子和细胞因子的表达含量。结果:与野生型小鼠相比, IκBα-转基因鼠肝脏组织损伤严重; IκBα转基因小鼠肝脏NK、NKT、T 细胞比例均显著下降,NK 细胞凋亡的比例增加,并且NKp46 在IκBα转基因小鼠肝脏NK 细胞中表达降低。在此过程中,还观察到IκBα转基因小鼠肝脏细胞因子谱发生改变,IFN-γ、CCL2 等表达显著下降,而IL-2、IL-15 等并没有显著变化。结论: IκBα转基因小鼠肝脏组织形态、免疫细胞亚群比例、表型及细胞因子谱均发生改变。     

辣椒素对脂多糖诱导血管内皮细胞活化的影响及机制

 目的:探讨辣椒素对脂多糖（LPS）刺激后小鼠主动脉内皮细胞活化的影响,并探讨其可能机制。方法:（1）体外分离培养小鼠主动脉内皮细胞,免疫荧光鉴定内皮细胞特异性标志。（2）以100 μg/L LPS作用于血管内皮细胞后,以不同浓度的辣椒素（50 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L）进行干预,分别于12、24和48 h收集主动脉血管内皮细胞及细胞上清液。采用ELISA法检测各组细胞上清液中的可溶性细胞间黏附分子 1（sICAM-1）、可溶性血管细胞黏附分子 1（sVCAM-1）和可溶性P-选择素(sP-selectin)水平,Western blotting法检测各组主动脉血管内皮细胞核内NF-κB p65水平和胞浆p-IκBα、IκBα水平。结果:与对照组相比,LPS组细胞上清液中sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1含量显著升高（P<0.05）, LPS能够时间依赖性上调sICAM-1和sVCAM-1的含量。与同时点的LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1水平。与对照组相比,LPS作用24 h后, 细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白水平显著升高（P<0.05）,胞浆IκBα蛋白水平显著降低（P<0.05）。与同时点LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白的水平（P<0.05）,剂量依赖性上调胞浆IκBα蛋白水平（P<0.05）。结论: 辣椒素能够显著抑制LPS作用后血管内皮细胞活化水平,该效应可能是通过下调IκBα降解和NF-κB p65胞核内转位而实现的。     

补体旁路激活对内皮细胞表达IL-8的影响

目的:探讨补体旁路活化途径直接促进内皮细胞表达IL-8,以及核转录因子kappa B(NF-κB)对该效应的调控作用。方法:应用酵母多糖活化人血清(ZAHS)直接作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)单层,检测如下指标:①放射免疫(RIA)检测IL-8的表达水平,并用原位杂交(ISH)检测胞浆中mRNA水平;②凝胶电泳迁移率(EMSA)方法测定NF-κB的活化。 结果:① 0.14 mL ZAHS能够诱导内皮细胞表达IL-8,4 h开始即有明显上升,ZAHS作用6 h,内皮细胞胞浆中IL-8 mRNA含量明显增加;②ZAHS能够激活NF-κB,30 min时即有活化,60 min明显增加,120 min达到高峰。NF-κB抑制剂咯啶二硫氨基甲酸脂(PDTC) 20 μmol/L预处理HUVECs 单层2 h,可以明显降低IL-8的表达(P＜0.05)。结论:补体旁路活化直接在转录水平诱导HUVECs表达IL-8,NF-κB参与调控该过程。     

NF-κB参与脂多糖致永生化小鼠脑血管内皮细胞通透性增高的调控

目的: 探讨脂多糖(LPS)对永生化小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3通透性的影响及可能的机制。方法: 实验分3组:bEnd.3细胞组、bEnd.3/vector细胞组和bEnd.3/muIκBα细胞组,后2组中分别转染空载pcDNA3.1hygro质粒和IκBα显性负性突变体DNMu-IκBα质粒。利用报告基因法、跨内皮细胞电阻抗(TEER)法、直接荧光染色法和免疫印迹(Western blotting)法分别检测LPS对细胞的NF-κB活性、细胞通透性、骨架蛋白F-actin分布、紧密连接蛋白(ZO-1和claudin-5)表达以及肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化水平的影响。结果: bEnd.3组和bEnd.3/vector组细胞中,LPS作用0.5 h可引起NF-κB活化(P<0.05);3 h时细胞TEER开始下降(P<0.05),并伴随细胞F-actin重构,ZO-1表达下调;12 h时,LPS对细胞的TEER、F-actin、ZO-1和claudin-5的破坏程度均达到最高。LPS对bEnd.3组和bEnd.3/vector组细胞早期损害伴有MLC磷酸化增加。而bEnd.3/muIκBα组细胞的NF-κB活性被明显抑制;相应时点,LPS对细胞的TEER、F-actin、ZO-1和claudin-5的损害作用也被减轻。同时LPS引起细胞MLC磷酸化增加的作用被明显抑制。结论: LPS通过破坏紧密连接增加脑微血管内皮细胞的通透性,该过程受NF-κB调控。     

原发性高血压患者中抗α1肾上腺素受体自身抗体激活大鼠主动脉平滑肌细胞内NF-κB

 目的：探讨高血压患者血清中抗α1肾上腺素受体自身抗体（autoantibodies against α1-adrenergic receptor, α1-AAs)拟去甲肾上腺素的激动样效应及胞内信号分子活化机制。方法：培养大鼠主动脉平滑肌细胞。将收集的原发性高血压病人血清进行免疫亲和层析法纯化,ELISA检测其滴度后以1∶80刺激细胞,并设立不同的处理组。将α1-AAs刺激大鼠主动脉平滑肌细胞后,经Western blotting及免疫荧光方法分析胞内核因子κB (nuclear factor κB, NF-κB) 信号分子激活及表达状况。结果：Western bltting显示α1-AAs刺激组中胞内核因子NF-κB (p50)表达较空白对照组明显增强,且可被α1受体阻滞剂哌唑嗪和NF-κB拮抗剂PDTC明显抑制（P<0.05）。免疫荧光实验中,α1-AAs组荧光强度显著高于空白对照组和α1-AAs＋哌唑嗪组(P<0.01)。结论:高血压患者血清中α1-AAs能够致大鼠主动脉平滑肌细胞NF-κB活化。     

NF-κB活化在IL-1β诱导的小鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用

目的:研究NF-κB在rhIL-1β刺激引起的体外培养的鼠肾小球系膜细胞表达IL-6中的作用。方法:NF-κΒ活性检测采用电泳迁移率改变法(EMSA),IL-6mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PR)检测,培养上清IL-6蛋白含量采用ELISA检测。结果:rhIL-1β刺激肾小球系膜细胞时,在上调IL-6蛋白和基因表达的同时亦激活NF-κB,而且这种上调作用可被NF-κB特异性抑制剂PDTC所阻抑。结论:IL-1β诱导鼠肾小球系膜细胞表达IL-6是通过NF-κB调控,NF-κB可能参与肾小球肾炎的免疫炎症反应。     

尿酸诱导树突状细胞成熟的信号转导机制研究

目的: 观察树突状细胞(DCs)成熟过程中MAPKs和NF-κB信号分子表达情况,探讨尿酸刺激DCs成熟的分子机制。方法: 用尿酸体外刺激大鼠未成熟 DCs,在不同时点(0~45 min),免疫印迹方法检测p- p38、p-ERK1/2、p-JNK和NF-κB p65表达情况;以MAPKs和NF-κB信号分子抑制剂分别联合尿酸刺激DCs 48 h后,用流式细胞术检测表面分子CD83、CD86、IA/IE的表达;ELISA法测定IL-12 p70的水平。结果: (1)尿酸刺激后15 min,DCs p- p38、p-ERK1/2、p-JNK和NF-κB p65表达量明显增加,30 min时达到最大值;使用相应信号分子抑制剂后,相关蛋白表达均不能测出。(2)经p38、JNK、NF-κB p65等信号通路抑制剂预处理后,与单独尿酸刺激相比,DCs CD83、CD86、IA/IE等表面分子表达及IL-12 p70分泌水平均出现下降(P＜0.05或P<0.01),ERK1/2抑制剂预处理者,则出现表达上升(P＜0.05)。结论: 尿酸可以调节DCs p38、ERK1/2、JNK、 NF-κB等信号分子的活化,从而促进DCs表面分子表达及IL-12 p70分泌。这可能为尿酸能诱导DCs成熟及提高免疫功能的分子机制之一。     

二十碳五烯酸对脂多糖处理的人脐静脉内皮细胞核转录因子κB的表达及细胞因子分泌的影响

目的: 探讨二十碳五烯酸(EPA)对脂多糖(LPS)处理的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)核转录因子κB(NF-κB)表达以及VEGF、IL-1α和IL-6分泌的影响。方法: 体外生长良好的传代HUVECs分为对照组、LPS组、0.030 g/L EPA+LPS处理组、0.050 g/L EPA+LPS处理组。LPS组仅加入LPS进行培养,EPA处理组先加入2种浓度的EPA(EPA终浓度分别为0.030 g/L和0.050 g/L)培养1 h,再加入LPS进行培养。LPS刺激6 h、12 h、24 h后,收集各组上清液,ELISA检测上清液中VEGF、IL-1α和IL-6的分泌量;LPS刺激24 h后的沉淀细胞,用Western blotting法检测HUVECs NF-κB p65的蛋白表达。结果: 与对照组相比,LPS刺激后,HUVECs NF-κB p65表达和VEGF 、IL-1α、IL-6分泌显著升高(P<0.05)。EPA抑制LPS处理的HUVECs NF-κB p65的蛋白表达及VEGF、IL-1α和IL-6分泌,除LPS刺激后6 h, EPA处理组IL-6的分泌量与LPS组比较无显著差异(P>0.05)外,其余均差异显著(P<0.05)。结论: LPS使HUVECs NF-κB蛋白表达增加,促进其VEGF及细胞因子表达。EPA抑制LPS处理的HUVECs NF-κB的表达,VEGF和细胞因子的分泌,为EPA应用于各种新生血管性疾病和炎症性疾病的防治提供了理论依据。     

温郁金二萜类化合物C对脂多糖诱导的人胃腺癌SGC7901细胞内NF-κB信号通路的影响

目的: 研究温郁金二萜类化合物C(RC)对脂多糖诱导的人胃腺癌SGC7901细胞核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)活性影响。方法: 以10 mg/L脂多糖(LPS)刺激体外培养的SGC7901细胞建立炎症模型,设正常对照组、LPS刺激组、RC预干预组(RC干预后以LPS刺激)。蛋白质印迹法检测IKK、p-p65、p65和p-IκBα蛋白表达,凝胶迁移阻滞实验检测p65与DNA结合活性。结果: 与炎症模型组比较,经温郁金二萜类化合物干预后,细胞中的IKK、p-p65、p65和p-IκBα蛋白表达均减少;入核p65蛋白与DNA结合活性减弱。结论: 温郁金二萜类化合物通过抑制核因子-κB信号通路起抗炎作用。