原发性肝癌CD44v mRNA和DCC mRNA表达的对比研究

目的：研究原发性肝癌中转移相关基因ＣＤ４４ｖ与抑癌基因ＤＣＣ表达间的关系以及观察它们在原发性肝癌侵袭转移中的作用。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ检测３０例原发性肝癌中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ和ＤＣＣｍＲＮＡ的表达情况,结合其转移相关的临床病理指标分析它们间的关系以及在转移中的作用。结果：３０例受检标本中,ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ中度以上表达２３例（７６６７％）,ＤＣＣｍＲＮＡ表达缺失者１８例（６０％）,且二者基本重合。其中,１３例病人（Ⅰ组,占４３３３％）同时出现ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ中度以上表达而ＤＣＣｍＲＮＡ表达缺失,５例ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ阴性及微弱表达的病例（Ⅱ组）ＤＣＣｍＲＮＡ为中度以上表达（１６６７％）。肿瘤包膜缺少、门静脉癌栓、瘤周卫星结节形成等与转移有关的病理指标Ⅰ组明显重于Ⅱ组。结论：在原发性肝癌的侵袭转移过程中,ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ的高表达与ＤＣＣｍＲＮＡ的表达缺失关系密切,二者间可能有协同关系。ＤＣＣ表达缺失有利于癌细胞从主瘤上脱落而ＣＤ４４ｖ的表达则有利于游离的肿瘤细胞在局部形成转移灶。     

DCC基因及其表达

DCC基因是由Fearon等研究结直肠肿瘤用定位克隆的方法确定并命名的一个肿瘤抑制基因,长约1.4Mb,至少有29个外显子。其编码产物的氨基酸序列与神经细胞粘附分子有明显的同源性。DCC基因在细胞分化以及肿瘤特别是结直肠肿瘤发生发展中具有重要意义。     

大肠癌中端粒酶RNA的表达及意义

目的：探讨端粒酶RNA（hTR)表达在大肠癌发生、发展的意义以及与细胞增殖的关系。方法：应用原位杂交方法检测26例大肠癌、18例大肠腺癌、18例大肠息肉及5例炎症病变中端粒酶hTR的表达。应用免疫组化En Vision法检测Ki-67抗原的表达,反映细胞增殖活性。结果：26例大肠癌tTR以强阳性表达为主（21／26,80．8％）;18例大肠腺癌hTR大部分呈弱阳性表达（12／18,66．7％）,少数呈强阳性（5／18,27．8％）;息肉、炎症hTR为弱表达。端粒酶hTR表达在大肠良、恶性病变中存在差异（P＜0．01）,并且随肿瘤分化程度的下降、浸润深度的增加以及淋巴结转移的发生,hTR表达增强（P＜0．05）。此外,在细胞增殖活跃区域,显示出高水平hTR的表达。结论：在大肠肿瘤发生早期就有端粒酶hTR表达的上调,而且hTR表达与肿瘤分化程度、浸润和转移等呈正相关。hTR表达也与细胞增殖活性相关。用原位杂交方法检测端粒酶hTR的表达,有助于大肠肿瘤的早期诊断以及生物学行为的评估。     

DCC基因与妇科肿瘤的研究

结直肠癌缺失基因，即DCC基因，近年来发现的大肠癌中一个重要的肿瘤抑制基因，其在妇科肿瘤中的作用与日益受到研究的重视，但有关此方面的研究国内尚未见报道。本就DCC基因的分子生物学特性、作用机制、与妇科肿瘤关系的研究等方面作一简要综述。     

DCC基因与妇科肿瘤的研究

结直肠癌缺失基因 ,即 DCC基因 ,是近年来发现的大肠癌中一个重要的肿瘤抑制基因 ,其在妇科肿瘤中的作用也日益受到研究者的重视 ,但有关此方面的研究国内尚未见报道。本文就 DCC基因的分子生物学特性、作用机制、与妇科肿瘤关系的研究等方面作一简要综述     

DCC基因与妇科肿瘤研究新进展

结直肠癌缺失基因——DCC基因是近年来发现的一个重要的肿瘤抑制基因,其失活和表达异常与大肠癌的诊断、治疗及预后关系密切。DCC基因在妇科肿瘤的发生发展中所起的作用已受到国内外诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状作一简要综述。     

胃癌组织DCC基因表达的研究

应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对２６例胃癌组织ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ的表达进行分析。２６例胃癌中发现表达缺失８例，占３０．７％。在不同类型胃癌中，肠型胃癌表达缺失占４４．４％（４／９），弥漫型为２３．５％（４／１７）。ＤＣＣ基因表达改变与临床病理因素无显著相关（Ｐ＞０．０５）。以上结果提示ＤＣＣ基因表达缺失在胃癌的发生发展中可能起一定作用     

DCC基因在大肠癌中的表达及与Bcl-2, Bax关系

目的：探讨DCC(deleted in colorectal carcinoma)基因在大肠癌组织中的表达情况及与Bcl-2，Bax蛋白之间的关系。 方法：采用免疫组织化学法结合图像分析技术观察74例大肠癌组织中DCC，Bcl-2，Bax蛋白的表达情况。 结果：大肠癌组织中，DCC蛋白失表达率为 54.1% (40/74)，其表达在不同的肿瘤分化程度 (P＝0.002)及Dukes分期中有差异 (P＝0.042)； Bcl-2蛋白表达阳性率为60.8% (45/74)，其表达与不同的大肠癌临床Dukes分期 (P＝0.032)及是否有淋巴结转移 (P<0.001)中有差异；Bax蛋白表达阳性率为48.6% (36/74)，在不同的大肠癌组织学类型、分化程度、Dukes分期及淋巴结是否转移中均无差异 (P>0.05)。大肠癌中DCC蛋白表达与Bcl-2表达水平呈负相关（r＝－0.201, P＝0.043），与Bax表达水平呈正相关（r＝0.296, P＝0.005）。 结论：大肠癌中DCC表达缺失频率较高，且可能通过上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达阻止细胞凋亡，从而促进大肠癌发生。     

DCC基因与卵巢肿瘤研究新进展

DCC基因即结直肠癌缺失基因，是目前发现的最长的肿瘤抑制基因，其结构复杂，经国内外许多研究者研究发现其在卵巢肿瘤发生中扮演重要角色，目前已受到诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状予以综述。     

DCC基因与卵巢肿瘤研究新进展

DCC基因即结直肠癌缺失基因,是目前发现的最长的肿瘤抑制基因,其结构复杂,经国内外许多研究者研究发现其在卵巢肿瘤发生中扮演重要角色,目前已受到诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状予以综述。     

乳腺良恶性病变组织端粒长度和端粒酶活性检测

目的　比较乳腺良恶性病变端粒长度改变及其在肿瘤发生发展中的意义 ;探讨端粒酶活性与临床病理参数的关系及其在乳腺癌诊断中的价值。方法　Southern印迹杂交检测TRF长度 ,端粒重复扩增分析 (TRAP)方法检测端粒酶活性。结果　乳腺癌组织平均TRF为 (5 2± 2 8)kb ,与正常组织比较明显缩短 (P <0 0 0 1) ,从正常乳腺组织到乳腺良性病变、乳腺原位癌及浸润性癌平均TRF呈递减趋势。 5 8例乳腺癌中 4 9例端粒酶阳性 (84 7% ) ,端粒酶活性与临床病理参数无相关性 ;癌旁组织端粒酶为阴性 ,而 7例乳腺增生症和 6例乳腺纤维腺瘤中分别有 1例端粒酶阳性 ,与乳腺癌比其差异有显著性 (P <0 0 0 1)。结论　端粒长度在肿瘤发生发展过程中渐进性缩短 ,并最终触发端粒酶的激活 ;端粒酶活性检测有望成为乳腺癌诊断的可靠标记物     

端粒及端粒酶活性的调控机制

广义的端粒由帽子、双链的串联重复序列的DNA核心部分及亚端粒构成,其结合蛋白是一个复合体,由TRF1、TRF2、TIN2、Pot1、TPP1、RAP1 6个亚单位组成;另外,还结合组蛋白的特定成分H3K9三甲基聚合体和H4K20三甲基聚合体.端粒酶主要由hTerc、hTert、dyskerin构成.端粒的功能主要受端粒酶的活性调控;而端粒酶活性主要受hTert及hTerc的转录水平和转录后的剪切、hTert的翻译等因素的调控.端粒与端粒酶结构和功能的异常与细胞衰老及肿瘤的发生、发展关系密切.     

MicroRNA expression profiling of human metastatic cancers identifies cancer gene targets

Small non‐coding microRNAs (miRNAs) contribute to cancer development and progression, and are differentially expressed in normal tissues and cancers. However, the specific role of miRNAs in the metastatic process is still unknown. To seek a specific miRNA expression signature characterizing the metastatic phenotype of solid tumours, we performed a miRNA microarray analysis on 43 paired primary tumours (ten colon, ten bladder, 13 breast, and ten lung cancers) and one of their related metastatic lymph nodes. We identified a metastatic cancer miRNA signature comprising 15 overexpressed and 17 underexpressed miRNAs. Our results were confirmed by qRT‐PCR analysis. Among the miRNAs identified, some have a well‐characterized association with cancer progression, eg miR‐10b, miR‐21, miR‐30a, miR‐30e, miR‐125b, miR‐141, miR‐200b, miR‐200c, and miR‐205. To further support our data, we performed an immunohistochemical analysis for three well‐defined miRNA gene targets (PDCD4, DHFR, and HOXD10 genes) on a small series of paired colon, breast, and bladder cancers, and one of their metastatic lymph nodes. We found that the immunohistochemical expression of these targets significantly follows the corresponding miRNA deregulation. Our results suggest that specific miRNAs may be directly involved in cancer metastasis and that they may represent a novel diagnostic tool in the characterization of metastatic cancer gene targets. Copyright © 2009 Pathological Society of Great Britain and Ireland. Published by John Wiley & Sons, Ltd.     

乳腺癌发生过程中NOEY2基因启动子区甲基化及mRNA表达

目的 探讨乳腺癌发生过程中抑癌基因NOEY2启动子区甲基化状态及其对mRNA表达的影响。方法 应用甲基化特异性PCR及双亚硫酸钠基因测序技术检测MCF10模型中乳腺增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCFIODCIS．com、浸润癌细胞系MCF10CA1a、MCF10CA1d、MCF10CA1h及正常乳腺组织中NOEY2基因启动子区CpG岛Ⅰ甲基化状态,然后用RT-PCR和实时PCR技术检测上述样品的mRNA表达水平。结果 MCF10模型的增生细胞系、癌前细胞系、导管内癌细胞系、浸润癌细胞系均发生该基因启动子区CpG岛Ⅰ高度甲基化;与正常乳腺组织相比,上述细胞系mRNA表达显著减少。结论 NOEY2基因启动子区高度甲基化及相应的mRNA表达减少是乳腺癌发生过程中的早期事件,与乳腺癌发生有关,可能成为早期诊断乳腺癌的潜在分子生物学标记。     

胃和大肠腺上皮分化癌的多态性观察

目的 探讨胃和大肠腺上皮分化癌的组织学类型及组织学分级变异规律。方法 对233例进展期胃和大肠腺上皮分化癌的根治术标本进行回顾性观察分析。结果 233例胃和大肠腺上皮分化癌的在向固有肌层浸润时，116例发生组织学分型或组织学分级变异而呈两种及两种以上组织学构型，117例组织学构型无变异。结论 胃和大肠腺上皮分化癌的组织学构型变异与其生长微环境改变可能有关。     

肺癌组织p16和Rb基因mRNA表达的双重原位杂交观察

目的：研究Ｐ１６和Ｒｂ基因在ｍＲＮＡ表达及其与肺癌的关系。方法：制备ｐ１６和Ｒｂ基因ｃＤＮＡ探针,采用双重原位杂交的方法,地８９例肺癌和正常肺组织进行了Ｐ１６ 一Ｒｂ基因ｍＲＮＡ表达的定位研究。结果：小细胞肺癌ｐ１６ｍＲＮＡ阳性表达率高达８２．４％,而非小细胞肺癌阳性率为４５．８％,两者差异有显著性。非小细胞肺癌ＲｂｍＲＮＡ阳性表达率为８１．９％,而小细胞肺癌一率仅５．９％,两者差异有高度显著性,     

Reduced expression of APC and DCC gene protein in breast cancer

AIMS: To investigate if the adenomatous polyposis coli (APC) protein and the deleted in colorectal cancer (DCC) protein expression can be demonstrated by an immuno-histochemical method and to study the role of APC and DCC gene inactivation in the development and progression of breast cancer using colorectal cancer as a control model. METHODS AND RESULTS: The reduced or loss of protein expression of the APC and DCC genes was studied in 27 surgical specimens of primary breast cancer using an immunohistochemical method. Reduced or lost expression was identified in 11 out of 27 samples (40.7%) for the APC gene and 15 out of 27 samples (55.6%) for the DCC gene. No statistically significant difference was observed between the reduced or lost protein expression and the histological grading of breast tumour for both the APC and the DCC gene. CONCLUSIONS: Both gene proteins can be demonstrated by the immunohistochemical method. Reduced or loss of APC and DCC gene product were observed in 40.7% and 55.6% cases of primary breast cancer respectively. Further work is required to investigate the significance of the finding.     

结直肠癌nm23基因表达、突变与侵袭、转移的相关性

目的　探讨nm2 3基因异常表达及突变与结直肠癌侵袭、转移之间的关系。方法　应用免疫组化LDP法、流式细胞术、PCR SSCP法对 1 5 0例结直肠癌标本及正常黏膜组织和 1 6例大肠腺瘤分 3组进行nm2 3蛋白检测和基因突变的筛查。结果　①免疫组化发现 73例结直肠癌中nm2 3 H1蛋白表达水平低于正常黏膜组织和良性腺瘤 (P <0 0 0 1 ,P <0 0 0 1 ) ,转移癌表达低于原发癌 (P <0 0 0 1 ) ,结直肠癌nm2 3 H1蛋白表达与组织分化、肠壁浸润、Dukes分期、转移均密切相关 (P <0 0 0 1 ) ,低表达组术后预后差于高表达组 (P <0 0 0 1 ) ;②流式细胞术研究表明 ,nm2 3 H1蛋白在癌组织表达低于癌旁组织 ;在结直肠癌伴有转移 (3/ 1 4 )时其表达低于未发生转移者 (1 1 / 1 4 ) ;③nm2 3 H1基因第 2～ 5位外显子在 6 3例结直肠癌组织中未发现异常突变。结论　结直肠癌中nm2 3基因突变可能是小概率事件 ,在结直肠癌的侵袭、转移中不发挥主要作用 ,而nm2 3 H1蛋白表达降低则与结直肠癌的侵袭、转移有关 ,提示检测nm2 3蛋白表达是判断结直肠癌预后有价值的指标之一。     

人免疫缺陷病毒1(HIV-1)膜蛋白基因片段在酵母中的克隆表达

目的为获得足够量的膜糖蛋白,以便于对不同ＨＩＶ分离株膜糖蛋白的结构与功能进行进一步的研究。方法从人免疫缺陷病毒１（ＨＩＶ－１）ＨＸＢ２分离株原病毒基因组的重组质粒ｐＨＸＢ２中克隆了两段膜糖蛋白基因（ＥＮＶ）片段。以酵母穿梭诱导表达质粒ｐＹＥＳ２为载体,构建了两个相应的重组表达质粒ｐＹＥＮＶ１和ｐＹＥＮＶ２;进一步利用大肠杆菌β－半乳糖苷酶基因（β－ｌａｃＺ）构建了ＨＩＶ－１膜外糖蛋白ＤＮＡ片段与β－ｌａｃＺ基因的融合表达质粒。将此３种质粒分别转化单细胞真核生物酿酒酵母ＢＪ１９９１,得到的转化子经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析。结果克隆的基因片段在酿酒酵母中产生了分子质量为５０×１０３的特异性诱导蛋白;对含此融合表达质粒的酵母转化子半乳糖诱导后表达产物的免疫检测表明,与对照菌株相比,融合表达产物具有和ＨＩＶ－１阳性血清抗体反应的抗原性。结论可通过β－半乳糖苷酶活性的测定直接指示抗原片段的表达;为表达的膜糖蛋白片段的进一步分离纯化打下了一定基础