不同培养基对小鼠小脑浦肯野细胞发育的影响

目的　研究小鼠小脑浦肯野细胞的体外培养条件。方法　分别用有血清和无血清培养基培养小鼠小脑浦肯野细胞 ,应用免疫荧光染色和ABC法染色观察细胞形态 ,测定树突面积和胞体直径。结果　用无血清添加N3 的DMEM /F1 2培养基比有血清培养基培养的浦肯野细胞发育出的树突更多 ;在DMEM/F1 2培养基中加入T3 后浦肯野细胞的树突面积和胞体直径较大。结论　无血清培养基更有利于浦肯野细胞的维持培养 ;添加T3 的DMEM /F1 2 /N3 培养基有利于浦肯野细胞的发育。     

不同碘营养对哺乳期大鼠及子代甲状腺功能的影响

目的 研究不同碘营养对哺乳期大鼠及子代甲状腺功能的影响,为孕期科学补碘及甲状腺疾病筛查提供依据。方法 选择断乳2周SPF级Wistar大鼠180只,按随机数字表法,以碘摄入量为0.00、1.50、5.50、70.00和350.00μg/L分5组,饮用含碘化钾去离子水干预3个月交配受孕。每组取15只妊娠大鼠并随机留存每只孕鼠3～4只子代大鼠;继续干预21天,取哺乳期大鼠及子代主动脉血并分离血清检测甲状腺功能指标。结果 动物模型建立成功,各组大鼠尿碘含量比较,差异有统计学意义(尿碘中位数分别为3.54、51.41、286.80、644.19、2368.70μg/L,P<0.01)。哺乳期各组大鼠TgAb、TPOAb和双抗体阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);MID组、SID组TgAb阳性率明显高于NI组(P<0.05);MID组TPOAb阳性率明显高于NI组(P<0.05);MID组、MIE组双抗体阳性率明显高于NI组(P<0.05)。子代大鼠:各组间TSH、FT₄、FT₃、TgAb、TPOAb和双抗体阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);SIE组、MIE组、MID组的TSH均与NI组比较,差异有统计学意义(P<0.05);SID组FT₄水平与NI组比较,差异有统计学意义(P<0.05);MIE组、MID组、SID组FT₃水平与NI组比较,差异有统计学意义(P<0.05);SID组TgAb阳性率与NI组比较,差异有统计学意义(P<0.05);MID组、SID组TPOAb阳性率与NI组比较,差异有统计学意义(P<0.05);SID组双抗体阳性率高于NI组(P<0.05)。SID组亲代和子代大鼠TSH间呈正相关;MID组亲代大鼠FT₃与子代大鼠FT₄、FT₃、ATPO呈正相关;NI组亲代大鼠ATG、ATPO与子代大鼠的FT₄呈正相关;MIE组:亲代大鼠FT₃与子代ATG呈正相关;亲代大鼠ATG与子代ATG呈负相关;SIE组:亲代大鼠ATG与子代TSH呈正相关,而亲代大鼠ATPO与子代ATG呈负相关;以上相关分析结果比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 碘缺乏和碘过量均可导致哺乳期大鼠及子代甲状腺激素水平发生改变,会引起亲代大鼠及其子代的甲状腺相关抗体阳性率升高。当碘缺乏及正常摄入时,亲代与子代大鼠的某几个甲状腺功能指标间呈正相关。当碘过量摄入时,亲代与子代大鼠不同甲状腺功能指标间均呈负相关。     

不同碘营养水平对子代大鼠小脑神经细胞形态的影响

【目的】研究不同碘营养水平对子代大鼠小脑神经细胞形态发育的影响。【方法】应用MIAS-2000型图像分析系统对子代大鼠小脑各层的神经细胞进行形态学测量。【结果】低碘组（LI）14d龄外颗粒层（EGL）厚度明显大于正常碘组（NI）,14d和28d龄分子层厚度、Purkinje细胞截面积、颗粒细胞密度均明显小于NI组,且有统计学差异;各高碘组（HI）与NI组比较,随碘摄入量的增多,14d和28d龄分子层厚度、Purkinje细胞截面积、颗粒细胞密度有降低的趋势,尤其是50倍和100倍高碘组（50HI和100HI）颗粒细胞密度明显小于NI组,且有统计学差异。【结论】低碘和严重高碘可以影响小脑EGL细胞向分子层和内颗粒层神经细胞分化和迁移,同时影响了Purkinje细胞和颗粒细胞的正常发育;但轻度高碘组未见明显变化,提示：大鼠对高碘的耐受性要强于低碘。     

胶质细胞源性神经营养因子在针刺营养小脑浦肯野细胞机制探析

小脑性共济失调是多系统萎缩(multiple system atrophy,MSA)MSA-C亚型的首发和突出症状,临床表现为进行性步态和肢体共济失调。小脑浦肯野细胞及相关神经元的萎缩及丧失是导致此疾病的重要原因,但目前尚没有能够明确改善患者症状的有效药物。研究已证实,胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)是对小脑浦肯野细胞最有效的神经营养因子,针刺治疗能够通过神经-体液-内分泌途径调节GDNF的释放,因此,该文将对GDNF在针刺营养小脑浦肯野细胞的机制作一浅析。     

缺血对大鼠小脑浦肯野细胞动作电位编码的影响

目的:通过减慢小脑蚓部矢状切片灌流速度来模拟缺血,探讨缺血早期小脑浦肯野细胞内在电生理特性的变化及其可能机制。方法:取小脑蚓部做矢状切片(400μm),通过Axoclamp-2B放大器全细胞记录模式记录缺血后浦肯野细胞动作电位的阈电位和不应期的电信号,并输入pClamp 9.2软件获取和分析群集发放的动作电位间距和动作电位峰时程标准差,进行数据采集和分析,观察缺血时浦肯野细胞内在电生理特性的变化。结果:在减慢脑片灌流速度后的短时间内,小脑浦肯野细胞群集发放的动作电位的不应期缩短和激发动作电位的阈电位降低(P<0.01)。结论:缺血改变动作电位的不应期和阈电位,使浦肯野细胞过度兴奋,动作电位的编码能力降低。     

针刺预处理对大鼠小脑浦肯野细胞缺血性损伤的影响

目的:研究针刺预处理百会穴+双侧足三里穴对脑缺血诱导的大鼠小脑浦肯野细胞损伤的影响。方法:将雄性SD大鼠30只随机分为正常对照组、针刺百会穴+双侧足三里穴组(针刺穴位组)和针刺非穴位组,各10只。采用糖氧剥夺的脑缺血模型,观察针刺预处理治疗后大鼠小脑浦肯野细胞的存活率,检测小脑组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:与正常对照组比较,针刺非穴位组大鼠脑缺血后浦肯野细胞死亡率明显增加,MDA水平明显增高,SOD活性明显降低(P<0.01);与针刺非穴位组比较,针刺穴位组大鼠小脑浦肯野细胞存活率明显增加,小脑组织中MDA含量明显降低,SOD活性明显增加(P<0.01)。结论:针刺百会穴+双侧足三里穴对大鼠小脑浦肯野细胞缺血性损伤具有一定的保护作用,其机制可能与小脑组织中活性氧的生成减少和清除增加有关。     

胶质细胞源性神经营养因子在针刺营养小脑浦肯野细胞机制探析简

小脑性共济失调是多系统萎缩（multiplesystematrophy,MSA）MSA—C亚型的首发和突出症状,临床表现为进行性步态和肢体共济失调。小脑浦肯野细胞及相关神经元的萎缩及丧失是导致此疾病的重要原因,但目前尚没有能够明确改善患者症状的有效药物。研究已证实,胶质细胞源性神经营养因子（glialcellline—derivedneurotrophicfactor,GDNF）是对小脑浦肯野细胞最有效的神经营养因子,针刺治疗能够通过神经-体液-内分泌途径调节GDNF的释放,因此,该文将对GDNF在针刺营养小脑浦肯野细胞的机制作一浅析。     

金雀异黄酮对大鼠小脑浦肯野细胞缺血后动作电位编码的影响

目的:观察金雀异黄酮(genistein,GEN)对大鼠小脑浦肯野细胞缺血后动作电位编码的影响。方法:采用微电极技术和全细胞膜片钳方法,观察大鼠小脑浦肯野细胞在200μmol/L GEN培养10 min后缺血时动作电位编码的变化。结果:缺血诱导大鼠小脑浦肯野细胞序列发放的动作电位峰间距缩短,动作电位峰时程标准差增大,细胞过度兴奋,动作电位编码的精确性降低。GEN能抑制脑缺血后序列发放的动作电位峰间距缩短及动作电位峰时程标准差显著增大。结论:GEN能预防小脑浦肯野细胞的过度兴奋,稳定缺血后细胞动作电位的编码能力。     

细胞内高钙对小鼠小脑浦肯野细胞动作电位编码的影响

目的：通过向细胞内微量注射IP3受体激动剂诱发细胞内高钙,探讨细胞内高钙对小鼠小脑浦肯野细胞内在电生理特性变化的影响。方法：取小鼠小脑蚓部做矢状切片（400μm）。采用Axoclamp-2B放大器全细胞记录模式,记录细胞内Ca2＋浓度升高前后浦肯野细胞动作电位的阈电位和绝对不应期 电信号输入pClamp9.2软件获取和分析群集发放的动作电位峰间距和动作电位峰时程标准差,进行数据采集和分析,观察细胞内Ca2＋浓度升高早期浦肯野细胞内在电生理特性的变化。结果：细胞内Ca2＋浓度升高后的短时间内,与高钙前相比,小脑浦肯野细胞群集发放动作电位的不应期缩短和激发动作电位的阈电位降低（P〈0.001）。结论：细胞内高钙改变动作电位的不应期和阈电位,使浦肯野细胞兴奋增加,动作电位的编码能力降低。     

大鼠孕期和哺乳期高蛋白饮食对子代代谢相关激素的影响

目的：探讨母体孕期和哺乳期高蛋白饮食对子代代谢相关激素的影响。方法：雌性Wistar大鼠交配成功后(F0代),随机分为3组：ProⅠ组、ProⅡ组、ProⅢ组,分别喂以不同蛋白含量的等热卡纯化饲料：DietⅠ(蛋白质：14%;碳水化合物：69.3%,E/E)、DietⅡ(蛋白质：24%;碳水化合物：59.3%;E/E)、DietⅢ(蛋白质：34%;碳水化合物：49.3%,E/E),相应饮食贯穿孕期和哺乳期。子代(F1代)出生后3 d(P3)剔除雌性并小窝喂养,于P21断乳后均以正常标准饲料喂养至实验结束(P77)。期间采集子代P21、P49、P77血样,并检测其代谢相关激素的水平。结果：P21时点,ProⅠ组F1代血清胰岛素样生长因子(IGF-1)水平低于ProⅡ组(P＜0.01);至P49时点,ProⅡ组、ProⅢ组IGF-1水平均高于ProⅠ组(P＜0.01);至P77时点,ProⅢ组IGF-1水平为3组中最高(P＜0.01)。P21时点,ProⅡ组F1代血清瘦素(Leptin)水平为3组中最高(P＜0.01);P49和P77时点,ProⅠ组Leptin水平持续低于ProⅡ组和ProⅢ组(P＜0.05)。ProⅢ组F1代P49时点血浆神经肽Y(NPY)水平低于ProⅠ组(P＜0.01),P77时点各组无差异(P＞0.05)。ProⅢ组P77时点胃促生长素(Ghrelin)水平高于ProⅠ组和ProⅡ组(P＜0.01),P49时点各组无差异(P＞0.05)。结论：大鼠孕期和哺乳期高蛋白饮食可引起其子代外周血中Leptin、Ghrelin、IGF-1水平升高,对外周血中NPY浓度影响较小。     

高碘对大鼠凝血功能的影响

目的 建立高碘喂养的大鼠动物模型,观察不同浓度的高碘对大鼠凝血功能影响的剂量与效应关系.方法 实验分4组:①正常饲料+正常水组(NI);②正常饲料+10倍碘组(10HI);③正常饲料+50倍碘组(50HI);④正常饲料+100倍碘组(100HI);每周称体重,饲养6个月,用乙醚麻醉,从眼球静脉取血,CA7000全自动凝血分析仪测定凝血酶原时间(PT-time)、凝血酶原时间国际标准化比值(PT-INR)、活化部分凝血活酶时间(AFIT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原时间(Fbg-time)、纤维蛋白原浓度(Fbg-c)、抗凝血酶Ⅲ活性(AT3:A)和D-二聚体(D-dimer).结果 与NI相比,10HI组的大鼠PT-time、PT-INR、Fbg-time、TT、APTT和AT3:A数值降低(PT、PT-INR、Fbg-time、AT3:A:P<0.05;TT、APTT P<0.01),Fbg-c数值升高(P<0.01);而50HI和100HI组的大鼠PT-time、PT-INR、Fbg-time、TT、APTT数值升高(50HI组的Fbg-time、TT P<0.05;50HI、100HI组的其它指标P均<0.01),Fbg-c数值降低(50HI组:P<0.05,100HI组P<0.01).结论 适量高碘对大鼠凝血功能有促进作用,但是随着碘浓度升高,凝血功能降低.     

妊娠期碘营养状况与评估指标述评及合理碘量摄入推荐

适宜的碘营养状态是维持机体正常甲状腺功能和代谢所必需的,妊娠期妇女维持适宜的碘营养状态尤为重要。因为不适宜的碘营养状态不仅会影响母体的健康更会对胎儿发育造成不良影响。碘缺乏及碘过量均会对孕妇及其子代带来不良影响。虽然尿碘、甲状腺肿、甲状腺球蛋白、血清碘、膳食碘食物频率调查问卷等指标可以用来评估妊娠期碘营养状况,也是目前的研究热点,但均存在不足,需更多的研究进一步探讨适用于妊娠期碘营养状态评估的指标。不同的国家和地区应制定不同的孕妇补碘策略。     

济宁市部分学龄前儿童碘营养状况调查分析

目的 了解济宁市部分学龄前儿童碘营养状况,为今后碘缺乏病防治工作提供科学依据.方法 尿碘测定采用碘催化砷铈原理,使用尿碘快速定量检测试剂盒对180名学龄前儿童尿碘进行检测,并对家长进行碘缺乏病相关知识问卷调查.结果 180名4～5岁儿童尿碘检测中位数为150μg/L,符合国标(GB16006-1995IDD消除标准)和...     

体外培养小脑浦肯野神经元转染及条件的优化

目的 探讨用化学转染试剂体外转染小脑浦肯野神经元的最佳转染条件.方法 体外分离培养E18 d的昆明小白鼠的小脑浦肯野神经元,用lipofectamineTM2000、磷酸钙沉淀试剂、Effectene转染试剂包被质粒分别转染体外培养7 d的浦肯野神经元.另外,用lipofectamineTM2000包被质粒,分别转染7、14、21 d以及28 d浦肯野神经元.每组分为5个样本.48 h后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率.结果 (1)3种转染试剂的最高转染率分别为lipofectamineTM2000(19.63±5.76)%、磷酸钙沉淀法(1.84±1.85)%、Effectene(1.48±1.38)%.lipofectamineTM2000与其他两种方法的转染率均有显著差异.(2)2 μl的lipofectamineTM2000的转染效率为(15.11±4.01)%,细胞存活率与对照组没有明显差异,为(92.98±2.10)%.(3)培养早期(7 d、14 d)的浦肯野神经元损伤小,与对照组没有明显差异.结论 该实验首次证实了lipofectamineTM2000能有效地转染体外培养的小脑浦肯野神经元.不同的发育阶段对转染效率也有较大的影响,lipofectamineTM2000比较适合早期的浦肯野神经元转染.     

氨基肽酶抑制剂对大鼠分辨学习及海马和小脑细胞发育的影响

观察氨基肽酶的抑制剂ｂｅｓｔａｔｉｎ对幼鼠分辨学习及海马和小脑细胞发育的影响。方法以Ｓｐｒａｑｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠为实验动物，从生后１日龄起分别注射氨基肽酶抑制剂Ｂｅｓｔａｔｉｎ（１ｍｇ／ｋｇ）、Ｎａｌｏｘｏｎｅ－Ｂｅｓｔａｔｉｎ（２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ）和生理盐水，连续注射４５天，观察１６日龄幼鼠的吸乳迷津分辨学习，３０日龄幼鼠的Ｙ迷津明暗分辨学习行为和４５日龄幼鼠海马、小脑的显微结构。采用本实验室沿用方法进行行为实验，并进行统计学处理。形态学观察采用硫瑾染色法，并统计海马及小脑细胞数目、大小及皮层厚度。结果生后注射Ｂｅｓｔａｔｉｎ后，能够明显抑制幼鼠的ＡＤＬ和ＢＤＬ学习能力，而有效剂量的Ｎａｌｏｘｏｎｅ能反转这种效应；组织学片子上看到Ｂｅｓｔａｔｉｎ组的小脑皮层厚明显低于对照组，Ｎａｌｏｘｏｎｅ组海马的ＣＡ１和ＣＡ２区细胞数则明显高于对照组。此外Ｂｅｓｔａｔｉｎ组ＣＡ１区的细胞明显大于对照组。结论提示在生后脑发育中Ｂｅｓｔａｔｉｎ可能通过内源性阿片系统影响海马、小脑形态的生后发育从而影响幼鼠的学习记忆     

衡水市水源性高碘地区儿童碘营养与甲状腺肿现状调查

目的了解高碘地区重点人群碘营养状况以及病情变化趋势。方法选取居民饮用水水碘中位数在150～300μg／L的3个高碘乡,监测8—10岁儿童尿碘含量、8～10岁儿童甲状腺肿大情况（B超法）、居民饮用水碘含量、居民户盐碘含量。结果本次共应用B超检8～10岁儿童643人,甲状腺肿大47人,平均肿大率为7．31％。检测8～10岁儿童尿碘323份,尿碘中位数456．7μg/L。水碘39份,水碘中位数为256．4μg／L。居民户盐样320份,无碘盐率为78．4％。结论衡水市水源性高碘地区8—10岁儿童碘营养过量,儿童甲肿率处于较高发病水平,重点人群受高碘危害较为严重,形势不容乐观。应进一步加强改水及无碘盐供应管理,确保高碘地区群众健康。     

碘过量对大鼠脾脏影响的形态学研究

目的:对不同碘过量水平大鼠的脾脏进行形态学研究,探讨碘过量对机体免疫功能的影响。方法:断乳1个月Wistar大鼠24只,雌雄各半,随机分为4组:适碘组(NI)、10倍碘组(10 HI)、50倍碘组(50 HI)和100倍碘组(100HI)。给以不同浓度碘化钾水喂养3个月后,处死取脾脏,对脾脏进行光镜结构观察,并对大鼠脾脏脾小体、脾小体生发中心、动脉周鞘和边缘区的体密度进行测量。结果:低水平碘过量(10 HI)大鼠脾脏未见明显形态学改变,高水平碘过量(50 HI和100 HI)大鼠脾脏脾小体、脾小体生发中心、动脉周鞘和边缘区的体密度明显增高,即呈现功能活跃的表现。结论:高水平碘过量可引起大鼠免疫功能增强。     

碘盐食用率不同地区8-10岁儿童碘营养水平评价

目的了解碘盐食用率不同地区的8-10岁儿童碘营养水平,为采取防制策略和措施提供依据。方法分别选择碘盐食用率在90%以下和以上的乡村作为实验组和对照组,对其8-10岁学生（283名）及其家庭（83户）的甲状腺肿大、尿碘、血色素、碘盐食用情况、饮用水碘含量及饮食习惯进行分析评价。结果两组学生甲状腺肿大率和贫血率均在5%和2%以下,无统计学意义（P〉0.05）。尿碘中位数分别为133.1μg/L和192.7μg/L,有统计学意义（χ^2=42.4,P〈0.05）。碘盐食用率分别为52.4%和95.0%,有统计学意义（u=3.43,P〈0.05）。饮用水碘中位数分别为32.1μg/L和63.2μg/L,有统计学意义（χ^2=28.1,P〈0.05）。结论碘盐食用率不同地区居民的碘营养水平适宜,碘盐、饮用水碘含量和饮食习惯可能是影响儿童碘营养水平的共同因素。