肌醇对结肠癌HT-29细胞体外生长的抑制作用

目的 观察肌醇对人结肠癌HT-29细胞体外生长的影响,探讨肌醇对结肠癌细胞增殖及凋亡方面的作用。方法 采用MTT实验,检测不同浓度肌醇对结肠癌HT-29细胞的抑制率;免疫细胞化学实验测定增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况;流式细胞仪检测细胞周期变化及凋亡发生率。结果 MTT实验结果显示,随着肌醇剂量的增加,肌醇对结肠癌HT-29细胞的抑制率明显增高(F=682.048,q=8.293~44.146,P<0.05);免疫细胞化学实验显示,与对照组比较,肌醇干预组对PCNA的表达有显著抑制的作用(F=149.973,q=4.450~20.826,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,随着肌醇剂量的增加,HT-29细胞停留在G0/G1期比例增加,S期、G2/M期的比例减少(F=31.109~59.178,q=2.660~12.783,P<0.05);与对照组相比,各肌醇干预组HT-29细胞凋亡率均有明显升高(F=1 214.826,q=16.587~56.885,P<0.05),并且随着肌醇剂量的增大,各肌醇干预组细胞凋亡率逐渐升高。结论 肌醇通过阻滞HT-29细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,从而发挥抑制结肠癌HT-29细胞生长的作用。     

CAPE对人结肠癌HT-29细胞生长抑制和凋亡的作用

目的 探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的作用.方法 用不同浓度CAPE处理HT-29,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测CAPE对HT一29细胞的增殖抑制效应;采用AO/EB染色和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生.结果 CAPE对HT-29细胞的生长具有明显抑制作用,呈剂量和时间依赖性.AO/EB染色发现CAPE作用后凋亡细胞数量增加.流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,2.5、5.0、7.5、10 μg,/mL处理HT-29细胞24 h后,细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性.结论 CAPE对人结肠癌HT-29细胞具有明显的生长抑制和诱导凋亡作用.     

分化抑制因子1对结肠癌HT-29细胞增殖的影响

目的探讨检测分化抑制因子1(Id1)对结肠癌HT-29细胞增殖中的影响。方法 HT-29转染Id1表达质粒及合成Id1干扰序列转染HT-29细胞后,RT-PCR和Western blot法检测VEGF mRNA和蛋白的表达,MTT法检测各组细胞增殖情况。结果 Id1过表达能显著上调VEGF mRNA和蛋白表达(P<0.05),促进细胞的生长,Id1抑制后能显著下调VEGF mRNA和蛋白表达(P<0.05),减缓细胞的生长。结论在结肠癌HT-29细胞中Id1为VEGF的上游基因,Id1可通过调控VEGF途径来影响结肠癌细胞增殖,在肿瘤血管生成中发挥重要作用。Id1有望成为结肠癌治疗的一个新靶点。     

五味子多糖对人结肠癌HT-29细胞体外增殖及侵袭能力的抑制作用

目的:探讨五味子多糖(ASPS)对人结肠癌HT-29细胞增殖和侵袭活性的影响,阐明ASPS的抗肿瘤作用。方法:40只 Wistar大鼠随机分为对照组(给予生理盐水)和100、200、400 mg·kg^-1 ASPS组,每组10只,取各组大鼠血清,HT-29细胞体外培养,以各组大鼠血清进行预处理,采用MTT法和Transwell小室检测各组HT-29细胞的增殖抑制率和侵袭活性抑制率;Western blotting法检测各组细胞上清液中bcl-2、bax和Caspase-3蛋白表达水平。结果:与对照组和100 mg·kg^-1 ASPS组比较,200和400 mg·kg^-1 ASPS组HT-29细胞增殖抑制率和侵袭活性抑制率均升高(P<0.05,P<0.01)。400 mg·kg^-1 ASPS组HT-29细胞上清液中bcl-2蛋白表达水平低于其他组(P<0.05,P<0.01),bax和Caspase-3蛋白的表达水平高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:ASPS能显著抑制细胞的体外增殖和侵袭能力,其机制可能与下调HT-29细胞的bcl-2基因表达,上调bax和Caspase-3基因表达,激活细胞凋亡通道有关联。     

罗格列酮对人结肠癌细胞HT-29生长的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体（PPARγ）配体罗格列酮（ROZ）对人结肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响。方法体外培养人结肠癌细胞HT-29细胞,MTT比色法测定药物对细胞增殖的抑制作用。用流式细胞术观察细胞凋亡率。结果 50μmol/L及以上浓度的ROZ可抑制体外培养的HT-29细胞生长。50μmol/L以上浓度的ROZ能诱导HT-29细胞凋亡,呈浓度依赖性。结论 ROZ可以抑制人结肠癌细胞HT-29细胞生长,并诱导其凋亡。     

EGCG抑制结肠癌HT-29细胞生长及血管生成的作用机制

目的   探讨表没食子儿茶素没食子酸酯( EGCG )对人结肠癌细胞HT-29生长的影响及抑制血管生成的相关机制。方法   EGCG（0、25、50、100μg /mL）作用于结肠癌细胞株HT-29 24h后, 采用MTT法检测EGCG对HT-29细胞生长的作用,应用RT-PCR及Western blot分别检测EGCG干预前后HT-29结肠癌细胞中TGFβ1、 15-PGDH、COX-2、VEGFmRNA及蛋白的表达情况。结果   MTT显示EGCG抑制HT-29细胞的生长,并随着浓度的增加及时间的延长抑制作用逐渐增强（P＜0.05）; TGF-β1、15-PGDH mRNA及蛋白表达量随着EGCG 浓度的增加而增加,COX-2、VEGF mRNA及蛋白表达量随着EGCG 浓度的增加而下降(P<0.05) 。结论   EGCG呈浓度及时间依赖性抑制HT-29细胞的增殖,可能通过诱导HT-29细胞中TGF-β1、15-PGDH, 抑制COX-2、VEGF mRNA及蛋白表达预防结肠癌的血管生成。     

二甲双胍对人结肠癌HT29细胞的抑制作用及可能机制

目的 探讨二甲双胍对人结肠癌HT29细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。 方法 体外培养人结肠癌细胞株HT29,随机分为2组,二甲双胍干预组采用5,10,20及40 mmol/L的二甲双胍进行干预,对照组加入等量PBS液,干预24,48及72 h后用MTT法检测细胞的增殖情况。二甲双胍干预组HT29细胞在上述各浓度的二甲双胍干预24 h后,于光镜下观察形态学改变; 40 mmol/L的二甲双胍干预48 h后,行AnnexinV-FITC和PI染色,并采用流式细胞术检测分析凋亡情况。二甲双胍干预组二甲双胍干预浓度为5及40 mmol/L,对照组加入等量PBS液,干预48 h,Western-blot法检测PI3K,AKT,P-AKT,GSK-3β及P-GSK-3β蛋白的表达。 结果 二甲双胍可抑制结肠癌HT29细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性,各组间抑制率差别有统计学意义(P均<0.05)。光镜下可见细胞数目减少,由多边形变为圆形,体积缩小,核固缩,细胞核溶解,且随着二甲双胍浓度的增高,细胞凋亡比例升高。流式实验结果显示,干预48 h的二甲双胍干预组凋亡率大于对照组(P<0.05)。Western-blot检测结果显示,二甲双胍可抑制HT29细胞的PI3K,P-AKT及P-GSK-3β蛋白表达量,且呈浓度依赖性,而对AKT及GSK-3β蛋白表达量无明显影响。 结论 二甲双胍可抑制人结肠癌HT29细胞的增殖能力并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT/GSK-3β通路相关蛋白的表达有关。     

黄芪多糖抗心肌缺血作用与机制

目的研究黄芪多糖抗心肌缺血作用及其机制。方法 40只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组（复方丹参片）及黄芪多糖高、低剂量组,采用冠状动脉结扎的方法建立大鼠心肌缺血模型。TUNEL法观察各组大鼠的心肌细胞凋亡情况,采用Real-time PCR和Western blot检测各组大鼠心肌细胞凋亡相关因子mRNA和蛋白表达相关水平,并探讨它们之间的相互关系。结果与模型组相比,给药组bcl-2mRNA和蛋白表达明显升高（P〈0.05）,caspase-3mRNA和蛋白表达明显降低（P〈0.05）,给药组能明显改善心肌细胞凋亡。结论黄芪多糖对心肌缺血大鼠模型心肌梗死有明显保护作用,其作用机制可能与上调bcl-2及下调caspase-3相关。     

黄芪注射液对结肠癌SW480细胞的生长抑制作用

目的：探索研究黄芪注射液对人结肠癌细胞株SW480细胞的生长抑制和凋亡作用机制。方法：实验设空白对照组、奥沙利铂对照组和黄芪注射液实验组（125、250、500、1 000μg/ml）。MTT法检测黄芪注射液对SW480细胞生长增殖和凋亡的影响;流式细胞仪PI染色检测SW480细胞的凋亡。结果：与空白对照组相比,黄芪注射液对SW480细胞生长增殖有明显的抑制作用,且与作用浓度呈正比（P=0.000〈0.01）;流式细胞仪显示,黄芪注射液作用SW480细胞48 h后,125、250、500、1 000μg/ml各组的凋亡率分别为24.2%、42.6%、64.1%、84.0%,较空白对照有明显升高,有显著性差异（P=0.000〈0.01）。结论：黄芪注射液能抑制SW480细胞生长,促进结肠癌细胞凋亡。     

辣椒素对人结肠癌SW480细胞株增殖作用的影响

目的 了解辣椒素对人结肠癌 SW480 细胞株增殖作用的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用MTT检测法,观察终浓度100～400 μmol/L的辣椒素作用24、48 h对人结肠癌SW480 细胞株生长作用的影响;采用流式细胞仪检测400 μmol/L辣椒素作用人结肠癌 SW480 细胞株后其细胞周期变化和凋亡率.结果 辣椒素能抑制结肠癌 SW480 细胞株增殖,呈浓度、时间依赖性.在400μmol/L辣椒素作用下,结肠癌SW480细胞株停滞于G0/G1期.辣椒素作用24、48 h,SW480 细胞凋亡率升高(F=8.73、8.10,q=4.86～7.30,P<0.01).结论 辣椒素抑制 SW480 细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能是阻滞细胞周期于G0/G1,期.     

黄芪多糖抗氧化作用研究

目的:观察黄芪多糖的抗氧化作用。方法:应用D-半乳糖复制小鼠衰老模型与AS兔模型。结果:黄芪多糖显著提高了血SOD、CAT及GSH-PX活力,降低了血浆、脑匀浆及肝匀浆中LPO水平。并显著降低了TG、TC、LDL-C、ApoA、ApoB、MDA和TRAC水平,升高了HDL-C和SOD水平。结论:黄芪多糖有较好的抗氧化作用,从而起到抗衰老及抗AS作用。     

黄芪多糖佐剂对脾脏NK细胞及NKT细胞的作用

目的 观察脾脏NK细胞及NKT细胞在黄芪多糖(APS)发挥免疫佐剂功能的作用.方法 使用鸡卵白蛋白(OVA)与APS经皮下免疫C57BL/6小鼠3次.末次免疫7～14 d,取血清,使用ELISA观察OVA特异性抗体的含量;分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测NK和NKT细胞的百分比含量;使用PMA和Ionimycin刺激淋巴细胞,使用细胞内细胞因子染色的方法检测IFN-γ和IL-4的分泌情况.结果 APS组小鼠OVA特异性抗体含量明显高于OVA组小鼠(P＜0.05),但小鼠脾脏内NK和NKT细胞的百分比含量与OVA组和正常小鼠差别不大(P＞0.05).经PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NK细胞中IL-4+细胞明显高于OVA组和正常组(P＜0.05),且IFN-γ+细胞的比例明显下降(P＜0.05);虽然经过PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NKT细胞中IL-4+细胞升高不明显,但是IFN-γ+细胞的比例明显下降(P＜0.05).结论 APS可以通过调节NK和NKT细胞的功能来促进体液免疫应答.     

脂肪酸合酶抑制剂阻遏人结肠癌细胞增殖的实验研究

目的：探讨脂肪酸合酶抑制剂对人结肠癌细胞增殖的影响。方法：应用细胞形态学，ＭＴＴ法及成集落实验方法进行检测和观察。结果：癌细胞在脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素作用下，细胞增殖被阻遏，并呈现剂量－效应关系。同时发现癌细胞呈现细胞凋亡的形态学改变。凋亡的表现为细胞固缩，核染色质凝聚，边集或断裂。     

黄芪水煎剂和黄芪多糖对CD3AK细胞毒性的增强作用

目的探讨黄芪水煎剂和黄芪多糖(APS)对CD3AK细胞毒性的增强作用.方法将黄芪水煎剂、不同浓度的APS分别加入CD3AK细胞和靶细胞K562中,共同培养24 h后,用MTT比色法测定CD3AK细胞毒性.结果黄芪水煎剂和APS具有明显增强CD3AK细胞的毒性(P＜0.001),有效剂量为0.01 g/L.结论黄芪水煎剂和黄芪多糖能够增强CD3AK细胞的细胞毒性作用.     

延龄草总皂苷诱导结肠癌细胞HT-29凋亡的作用及机制研究

目的探讨延龄草总皂苷对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其机制。方法采用流式细胞术研究延龄草总皂苷对HT-29细胞线粒体膜电位以及凋亡的作用;Western blotting法检测给予HT-29细胞不同浓度延龄草总皂苷后凋亡相关蛋白Caspase-3,8,9,Bax和Bcl-2表达的变化。结果延龄草总皂苷能诱导HT-29细胞的凋亡;延龄草总皂苷可促进HT-29细胞Caspase-3,9及Bax的表达,降低Bc1-2的表达,且均呈剂量依赖性。结论延龄草总皂苷可以通过线粒体途径诱导HT-29细胞凋亡。     

半枝莲提取物诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的机制研究

目的探讨半枝莲提取物在体外诱导结肠癌HT-29细胞株凋亡的作用机制。方法采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度半枝莲提取物组,干预24 h。倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定不同浓度半枝莲提取物对HT-29细胞增殖的影响,DNA Ladder试剂盒检测药物作用后细胞凋亡情况,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位变化,应用比色法分析Caspase-9和Caspase-3的活化情况。结果半枝莲提取物干预HT-29细胞24 h后,HT-29细胞密度明显减少、细胞变小,可明显抑制HT-29细胞增殖,细胞凋亡增加,线粒体膜电位丧失,具有显著地剂量依赖,并出现明显的DNA Lad-der条带;Caspase-9和Caspase-3的活化随着药物浓度的升高而增加。结论半枝莲提取物能通过线粒体通路诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

HT-29细胞生长增殖的影响及其机制初探

目的 研究经过温热、放射及热放联合处理后人大肠癌HT-29细胞系生长增殖的变化情况。方法 温热、放射及热放联合处理后，观察不同处理方法对体外培养人大肠癌TH-29细胞系在电镜下的形态改变。结果 与单纯温热或照射相比，联合处理后的HT-29细胞生长和增殖能力受到更明显的抑制，同时明显增加了HT-29细胞的凋亡比例：温热对HT-29细胞杀伤作用以胞浆损伤尤为明显，照射对HT-29细胞杀伤作用表现在以细胞凋亡形式为主的细胞核损伤，经联合处理造成胞浆与核的共同损伤。结论 与单纯温热或照射处理相比，联合处理能够更明显抑制HT-29细胞的生长增殖能力，加重细胞损伤；温热、照射联合杀伤效应机制可能在于两种处理侧重于不同的靶结构。     

联合索拉非尼与TRAIL对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的:研究多激酶抑制剂甲苯磺酸索拉非尼(SOR)是否具有增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:体外培养HT-29细胞。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析亚二倍体(sub-G1)细胞百分率。比色法测定细胞Caspase-3活性。AO/EB双染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果:SOR(5μmol/L)和TRAIL(100ng/mL)以及两者合用作用48小时HT-29细胞的sub-G1百分率分别是4.65%±2.33%、5.29%±2.80%和42.6.50%±4.65%;HT-29细胞的Caspase-3的活性分别是培养基组的1.24、1.37和9.51倍。两者合用展示出细胞核染色质固缩和碎裂的典型凋亡细胞形态。结论:亚细胞毒性浓度的SOR具有增强TRAIL诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。     

黄芪多糖对肿瘤免疫调节作用的研究进展

为了探讨黄芪多糖时肿瘤免疫调节作用及部分作用机制.本文阅读了国内外有关文献并进行综述,得出黄芪多糖具有明显的免疫促进、双向调节的多方面作用,并对调节肿瘤免疫有重要作用.     

脂氧合酶抑制剂NDGA对HT-29结肠癌细胞转移影响的研究

12 3.宁津县中医院外科，山东 宁津 253400）目的：探讨脂氧合酶抑制剂去甲二氢愈创木酸（nordihydroguaiaretic acid，NDGA）在体外对结肠癌HT 29细胞株转移的影响。方法：应用不同浓度的NDGA处理HT 29结肠癌细胞，RT PCR检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）,流式细胞仪检测CD44v6表达的变化；扫描电镜观察癌细胞表面微绒毛的变化。结果：经过NDGA作用后，CD44v6、VEGF随着药物浓度的增大，表达逐步下调。扫描电镜检测NDGA处理癌细胞48?h后，癌细胞微绒毛卷曲成小球状。结论：NDGA能够抑制HT 29结肠癌细胞转移。