敲低卷曲螺旋结构域蛋白34表达对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的研究应用慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference)技术敲低卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)的表达,分析其对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法选取膀胱癌T24细胞分别同时感染阴性对照si RNA(阴性对照组)和CCDC34-si RNA(CCDC34干扰组)慢病毒载体,荧光显微镜下观察慢病毒感染效率;实时定量PCR和Western blot验证CCDC34的干扰效率;Brd U掺入实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测干扰CCDC34表达对T24细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。结果与阴性对照组相比,感染CCDC34-si RNA的T24细胞中CCDC34 m RNA及蛋白表达水平均显著下降。Brd U实验显示CCDC34干扰组的细胞增殖能力较阴性对照组受到显著抑制(P<0.05),且细胞凋亡显著增加[(8.77±0.38)%vs.(3.91±0.08)%,P<0.01]。划痕实验显示,慢病毒感染24 h后CCDC34干扰组的细胞迁移率显著低于阴性对照组(0.40±0.04 vs.0.79±0.01,P<0.01)。Transwell侵袭实验同时显示CCDC34干扰组膀胱癌T24细胞的侵袭率也显著低于阴性对照组(1.44±0.03 vs.1.63±0.05,P<0.05)。结论慢病毒介导的RNA干扰技术可下调CCDC34蛋白在T24细胞中的表达,显著抑制了膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进了肿瘤细胞的凋亡。CCDC34有望成为膀胱癌生物标记物和治疗的潜在新靶点。     

lncRNA PCAT19靶向miR-769-5p促进口腔鳞癌HSC3细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨lncRNA PCAT19对口腔鳞癌HSC3细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的分子机制。方法 收集45例口腔鳞癌患者癌组织和癌旁组织，qRT-PCR法检测组织中PCAT19和miR-769-5p表达。体外培养HSC3细胞，转染PCAT19小干扰RNA或miR-769-5p模拟物、或共转染PCAT19小干扰RNA与miR-769-5p抑制剂后，CCK-8法和单克隆实验检测细胞增殖；划痕实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证PCAT19和miR-769-5p的调控关系。结果 口腔鳞癌组织中PCAT19表达高于癌旁组织，miR-769-5p表达低于癌旁组织（P <0.05）。干扰PCAT19或过表达miR-769-5p后，HSC3细胞OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数、N-cadherin蛋白表达降低，E-cadherin蛋白表达升高（P <0.05）。PCAT19靶向负调控miR-769-5p。下调miR-769-5p逆转了干扰PCAT19对HSC3...     

LIM结构域蛋白4对胃癌细胞转移及增殖能力的作用及机制

目的 探讨LIM结构域蛋白4(Lmo4)在胃癌和癌旁组织、不同胃癌细胞株中的表达差异,阐明Lmo4在胃癌发生发展中的作用及机制。方法 应用qRT-PCR和免疫组织化学技术,检测2019年4月至2020年6月浦口区中心医院90例胃癌患者的癌组织及对应癌旁组织中Lmo4 mRNA的表达差异,分析Lmo4表达与胃癌临床病理因素的相关性。采用western blot方法比较不同人胃癌细胞株中Lmo4的表达,筛选高表达和低表达细胞。通过RNA干扰技术抑制BGC-823胃癌细胞中Lmo4的表达,应用平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、划痕试验、CCK-8实验及western blot等方法检测Lmo4沉默对胃癌细胞生长迁移能力及细胞通路的影响。构建Lmo4过表达质粒Lmo4-pcDNA,并通过western blot检测其对胃癌细胞增殖、迁移及上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白的影响,运用细胞周期试验评价Lmo4过表达后细胞增殖情况的改变。结果 qRT-PCR和免疫组织化学结果均显示胃癌组织中Lmo4相对表达量明显高于对应的癌旁组织(P<0.01),且Lmo4在胃癌组织中的表达与肿...     

Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中表达意义

目的探讨Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及鳞癌癌变过程中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测45例口腔扁平苔藓（扁平苔藓组）和46例口腔鳞癌（鳞癌组）和15例正常口腔黏膜组织（对照组）中Caspase-3及P53蛋白的表达情况并进行比较。结果Caspase-3蛋白表达在扁平苔藓组（71．11％）高于鳞癌组（47．83％）（P〈0．05）、但低于对照组（93．33％）（P〈0．05）;P53蛋白在鳞癌组中阳性表达率（78．26％）明显高于对照组（0）和扁平苔藓组（28．89％）（P均〈0．05）;Caspase-3蛋白与P53蛋白呈负相关（r=0．339,P=0．021）。结论Caspase-3蛋白可抑制口腔扁平苔藓和鳞癌的发展,P53蛋白则在其发展中起促进作用。     

口腔疣状癌、口腔鳞癌与癌基因关系的研究进展

<正>1948年,Ackerman[1]首次将疣状癌作为独立的实体瘤从鳞状细胞癌中划分出来并予以命名,口腔疣状癌在临床表现及病理特症与口腔鳞癌较为相似,但其有明显较好的预后。然而,导致两者明显不同的生物学行为的相关病理因素仍然不完全清楚。本文就近年来两者在病因、病理的差异及与癌基因关系的研究做一综述。1口腔疣状癌和口腔鳞癌的病因口腔疣状癌与口腔鳞癌的发病原因仍不十分明 更多还原     

蜂毒肽对口腔鳞癌细胞的增殖及迁移能力的影响

目的 探讨蜂毒肽对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖性、迁移性的影响及其作用机制.方法 以用四种不同浓度梯度(2、4、8、16 μg/ml)的蜂毒肽分别处理的OSCC细胞系为蜂毒肽组,以不含药的培养液处理的细胞系为对照组.采用MTT实验检测蜂毒肽对OSCC细胞系Scc-15...     

血清视黄醇结合蛋白-4检测对口腔鳞癌的早期诊断价值

目的探寻血清人视黄醇结合蛋白(RBP4)在口腔鳞癌中的检测价值。方法通过ELISA对60例口腔鳞癌患者、12例黏膜白斑患者和25例健康志愿者的血清RBP4浓度进行检测,对RBP4水平与临床参数(性别、年龄、是否吸烟、肿瘤大小、肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移程度)的关系进行统计分析,最后通过ROC曲线分析血清RBP4对口腔鳞癌的检测价值。结果口腔鳞癌患者血清RBP4浓度高于显著高于健康志愿者(P<0.01),同时也高于黏膜白斑患者(P<0.05),并且高表达的RBP4与肿瘤大小密切相关,通过ROC分析显示血清RBP4对于口腔鳞癌患者有很好的早期诊断价值。结论血清RBP4在口腔鳞癌患者中高表达,可作为口腔鳞癌早期诊断的依据。     

巨噬细胞炎症蛋白1α对多发性骨髓瘤细胞增殖与迁移能力的影响

我们通过检测多发性骨髓瘤（MM）患骨髓及KM3细胞培养上清液中巨噬细胞炎症蛋白1α（MIP-1α）水平，体外运用细胞培养技术分析瘤细胞在MIP-1α作用下的增殖、迁移作用，从而探讨MIP-1α对瘤细胞增殖与迁移能力的影响。     

Hh信号通路分子TPX2对口腔鳞癌增殖的作用探讨

目的 探讨与分析Hedgehog(Hh)信号通路分子TPX2对口腔鳞癌增殖的作用。方法 选取2022年1月—2023年7月呼伦贝尔职业技术学院口腔教研室培养的6株CAL-27人口腔鳞癌细胞株为研究对象,将转染Lv-pc3.0 vector的3株CAL-27人口腔鳞癌细胞株作为对照组,将转染Lv-pc3.0-shTPX2的3株CAL-27人口腔鳞癌细胞株作为Lv-shTPX2组,对比两组CAL-27人口腔鳞癌细胞株细胞周期、细胞增殖与目的基因、蛋白表达情况。结果 转染后24、48 h,Lv-shTPX2组的TPX2 mRNA[(5.44±0.17)、（5.18±0.47）]与蛋白相对表达水平[（2.01±0.23）、（1.33±0.16）]低于对照组的TPX2 mRNA[(24.59±0.33)、（24.58±2.76）]与蛋白相对表达水平[（10.47±0.16）、（7.48±0.33）],差异有统计学意义（t=89.352,12.002,52.299,29.045,P均<0.05）;Lv-shTPX2组的细胞增殖指数更低,差异有统计学意义（P<0.05）。转染48 h后,...     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合溴结构域蛋白4抑制剂治疗脑胶质瘤的疗效研究

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂伏立诺他(SAHA)与溴结构域蛋白4(BRD4)抑制剂JQ1联合用药在动物模型水平治疗脑胶质瘤的疗效.方法:采用MTT法测试SAHA、JQ1及二者联合用药对体外培养的U87、U251、U373MG和C6这4种胶质瘤细胞的抑制活性.选择抑制活性最强的胶质瘤细胞构建皮下荷瘤鼠模型...     

p16和细胞周期蛋白D1蛋白在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的　研究口腔鳞癌组织中p16及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达以及与临床生物学特性和细胞增殖的关系。方法　采用免疫组化方法检测49例原发性口腔鳞癌组织及20例正常口腔黏膜组织中p16及cyclin D1蛋白的表达水平，Ki-67作为细胞增殖活性的指标也被检测。结果　p16在口腔鳞癌中阳性表达率显著低于正常口腔黏膜组织(P<0.05)，cyclin D1蛋白和Ki-67在口腔鳞癌中阳性表达率显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.05) ；cyclin D1蛋白过表达与临床分级及淋巴结转移有关(P值分别<0.05)，p16缺失表达与淋巴结转移有关(P<0.05)；p16负表达和cyclin D1过表达与细胞增殖评价因子Ki-67呈负相关(r=-0.598和-0.658, P<0.05)。结论　在鳞癌的发生发展过程中，p16的缺失表达和cyclinD1的过表达两者可能单独或共同参与。p16的缺失可能还与口腔鳞癌细胞的分化、转移及增值和预后有关。     

shRNA沉默CD151表达对肺癌细胞A549增殖和迁移的影响

目的:检测CD151 shRNA对人肺癌细胞株A549增殖和迁移的影响.方法:构建CD151基因shRNA表达载体,转染人肺癌细胞株A549,逆转录PCR(RT-PCR)检测CD151 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,划痕试验检测细胞迁移能力,RT-PCR检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达.结果:转染CD151基因shRNA表达栽体后,CD151 mRNA表达显著降低,A549细胞增殖和迁移能力明显下降,与对照相比均有统计学意义(P<0.05),同时伴有MMP-9mRNA表达水平降低.结论:CD151基因沉默可以显著抑制肺癌细胞的增殖和迁移能力,MMP-9基因表达下降可能参与这一过程.     

PDCD4在口腔鳞癌中的表达及意义

目的研究PDCD4蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测PDCD4蛋白在54例口腔鳞癌组织和15例正常口腔黏膜组织中的阳性表达,并结合临床资料进行统计学分析。结果口腔鳞癌组织PDCD4蛋白的阳性表达率明显低于口腔正常黏膜组织(P0.01)。随着PDCD4表达水平的降低,口腔鳞癌恶性程度增高的可能性也随之增加(P0.05)。PDCD4蛋白表达与口腔鳞癌淋巴结转移无明显相关性(P0.05)。结论 PDCD4蛋白在口腔鳞癌中低表达,与口腔鳞癌的发生发展有密切联系。     

p16基因与口腔鳞癌发生发展关系的研究

对于抑癌基因来说，除了p53在口腔鳞癌发生中有重要作用，p16的异常改变与口腔鳞癌的发生也有密切关系。p16又称多种肿瘤抑制基因(multiple tumor suppressor，MTS)，是第一个发现的最直接抑制肿瘤细胞发生的细胞固有成分，它是通过直接、专一地抑制细胞周期CDK4＼CDK6起作用的基因，它属于细胞周期蛋白依赖性抑制因子(CKI)的一种：CKI是一类小分子蛋白质，     

不同浓度薏苡仁提取物对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制

目的 探讨不同浓度薏苡仁提取物对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 体外培养人OSCC CAL27细胞,按照实验设计分为高剂量组、低剂量组、对照组,高、低剂量组分别予20、10μmol/L薏苡仁提取物干预,对照组不予任何干预.各组细胞培养24 h后采用MTT法、细胞划痕法、Transw...     

miRNA-375对宫颈癌细胞系SiHa增殖能力和迁移能力的影响及相关机制研究

目的研究微小RNA-375(miR-375)对宫颈癌细胞系SiHa增殖能力和迁移能力的影响及相关机制。方法收集宫颈癌细胞系SiHa,将细胞随机分为A组(转染对照抑制剂)、B组(转染对照模拟基因)、C组(转染miR-375抑制剂)、D组(转染miR-375模拟基因)。通过实时荧光定量PCR法对SiHa细胞中miR-375的表达水平进行检测,并用免疫蛋白印迹法对磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α(PIK3CA)蛋白的表达水平进行检测;采用MTT法对SiHa增殖活性进行检测,并用划痕实验对细胞迁移能力进行检测;采用双荧光素酶报告基因实验对miR-375与PIK3CA的靶向关系进行验证。结果采用生物学信息软件检测结果发现,miR-375与PIK3CA 3'-UTR存在结合位点。双荧光素酶报告基因检测结果可见,miR-375模拟基因+PIK3CA-Mut共转染组荧光素酶活性与对照模拟基因+PIK3CAMut共转染组比较,并无显著差异(P 0. 05);而相比对照模拟基因+PIK3CA-WT共转染组,共转染miRNA模拟基因和PIK3CA-WT后细胞荧光活性明显下降(P 0. 05)。相比A组,C组SiHa细胞中miR-375的相对表达量明显下降(P 0. 05);相比B组,D组SiHa细胞中miR-375的相对表达量明显增高(P 0. 05)。经免疫蛋白印迹法检测结果可见,相比A组,C组SiHa细胞中PIK3CA蛋白的表达水平明显增高(P 0. 05);相比B组,D组PIK3CA蛋白的表达水平明显下降(P 0. 05)。细胞培养后1 d、2 d、3 d,相比A组,C组SiHa细胞增殖活性明显升高(P 0. 05);相比B组,D组SiHa细胞增殖活性明显下降(P 0. 05)。划痕实验结果可见,相比A组,C组SiHa细胞迁移能力明显增强(P 0. 05);相比B组,D组SiHa细胞迁移能力明显减弱(P 0. 05)。结论 miR-375具有阻滞宫颈癌细胞增殖和迁移的作用,其作用机制可能与靶向调控PIK3CA密切相关。     

p27、p53蛋白在口腔鳞癌中的表达和意义

目的 探讨口腔鳞癌中p27与p53基因表达特征和临床病理意义。方法 对38例口腔鳞癌组织采用免疫组化方法检测p27及p53蛋白表达。结果 38例口腔鳞癌中印蛋白阳性表达22例，阳性率57．9％，p53阳性表达21例，阳性率55．3％。p27在鳞癌Ⅰ级中阳性表达17例（68．0％），Ⅱ级中阳性2例（40．0％），Ⅲ-Ⅳ级中阳性3例（37．5％）。p53在鳞癌Ⅰ级病例中阳性10例（40．0％），Ⅱ级中1例（20．0％），Ⅲ，Ⅳ级中7例（87．5％）。结论 p27蛋白阳性表达率随病理恶性程度增高而降低，但无统计学意义。p53蛋白阳性表达率随病理恶性程度升高而增高，提示D53基因与口腔鳞癌细胞分化有相关性。p27和p53表达在鳞癌中呈负相关。     

miR-21对晶状体上皮细胞增殖、迁移的影响

目的探讨miR-21对晶状体上皮细胞增殖、迁移的影响。方法人晶状体上皮细胞(HLE-B3)随机分为三组,实验组转染miR-21模拟剂(mimic),对照组转染miR-21阴性对照(NC),空白组加入等剂量的磷酸盐缓冲液(PBS)。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,双染法检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移,Western-blot检测细胞Bcl-2、Akt蛋白表达。对三组上述各指标进行比较。结果转染48 h后,实验组中miR-21相对表达水平显著上升,与空白组、对照组比较差异均有统计学意义(P 0. 05)。转染24 h、48 h后,实验组的细胞增殖活性显著低于空白组与对照组(P 0. 05);转染48 h后,实验组的细胞凋亡率显著高于空白组与对照组(P 0. 05),迁移距离与过膜细胞数都显著少于空白组与对照组(P 0. 05)。转染48 h后,实验组的Bcl-2、Akt蛋白表达水平显著低于空白组与对照组(P 0. 05),空白组与对照组对比差异无统计学意义(P 0. 05)。结论 miR-21能通过调节晶状体上皮细胞中Bcl-2、Akt蛋白的表达,从而抑制细胞增殖与迁移,促进细胞凋亡。     

口腔鳞癌中Angiopoietin的表达及功能的研究进展

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma)是一种常见的实体肿瘤,占所有恶性肿瘤的4%.有研究显示[1-2]:在下一个十年,许多癌症的发生率会下降,而口腔鳞状细胞癌的发生率却会显著上升.虽然手术和放疗在不断改进,但口腔鳞状细胞癌的治疗仍然存在困难,生存率未发生大的改观.肿瘤的生长和转移是依赖于血管生成(angiogenesis)的.     

microRNA-19对肝癌细胞系迁移与侵袭能力的影响

目的 比较不同转移潜能肝癌细胞系中microRNA-19（mir-19）表达变化,探讨mir-19对不同转移潜能肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 应用TaqMan MGB探针法定量分析mir-19在高转移潜能肝癌细胞系（MHCC97H、LM3）和低转移潜能肝癌细胞系（HepG2、7402）的表达差异.利用转染试剂将人工合成的mir-19的前体转染高转移潜能细胞系,人工合成的mir-19抑制剂转染低转移潜能细胞系.采用细胞计数试剂盒-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）检测mir-19对细胞增殖的影响,Transwell小室检测mir-19对细胞的迁移和侵袭能力的影响.结果 在不同转移潜能的细胞系中,mir-19表达水平在高转移潜能细胞系较低转移潜能细胞系表达下调（P〈0.05）.功能实验显示mir-19可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖（P〈0.05）,利用生物信息学预测mir-19的靶基因发现,许多癌基因3＇UTR包含与mir-19的互补序列.结论 mir-19可能部分通过调节CREB3L4、PDE4A、JAM2、RUNX2等的表达来抑制肝癌细胞的增殖和侵袭转移.