促肾上腺皮质激素对慢性痛大鼠痛行为和海马内BDNF、CRF水平的影响

目的与方法:采用痛行为评分方法、免疫组化和原位杂交技术,观察促肾上腺皮质激素(ACTH)对完全福氏佐剂所致的关节炎大鼠海马内脑源性神经营养因子(BDNF)及其功能性受体trkB和促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平的影响。结果:关节炎大鼠的痛行为评分显著高于正常对照组,同时注射侧对侧海马内BDNF免疫活性(IR)神经元、CRHmRNA阳性神经元和BDNF/CRHmRNA双染神经元数在注射佐剂后 2 4h显著高于正常对照组,而腹腔注射ACTH(2 5IU/kg或 12 5IU/kg)后,上述指标显著低于关节炎组;摘除双侧肾上腺后,腹腔注射ACTH的关节炎大鼠对侧海马内BDNF-IR、CRHmRNA阳性神经元和BDNF/CRHmRNA双染神经元数明显高于未摘除肾上腺的关节炎组。结论:海马内的BDNF和CRH参与慢性痛的调制,ACTH能抑制海马内BDNF和CRH的升高而产生镇痛作用,肾上腺对ACTH发挥其功能起决定性作用.     

促肾上腺皮质激素受体在人淋巴组织中表达的研究

传统的观点认为促肾上腺皮质激素(ACTH)为一种内分泌激素。现发现，它对免疫系统也起重要的作用，主要通过位于免疫细胞膜上的ACTH受体(R)发挥其免疫调节作用。目前，关于ACTH-R在免疫活性细胞上表达的研究多集中于对分离纯化的细胞系的研究，我们运用免疫组织化学与原位杂交相结合的方法，探讨ACTH-R在人淋巴组织中的表达情况及其意义，以进一步探讨神经免疫内分泌系统的功能关系，以及ACTH受体在神经免疫内分泌相关性疾病中的可能作用。     

Urocortin-促肾上腺皮质激素释放激素肽类家族的最新成员

促肾上腺皮质激素释放激素 (ｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎｒｅｌｅａｓ 员[6 ] 。1　Ｕｒｏｃｏｒｔｉｎ的发现与命名存在有ＣＲＨ结合蛋白 (ＣＲＨｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ ,ＣＲＨ -ＢＰ) ,并且在男性和非妊娠妇女体内有较高浓度的体[6 ,11,12 ] 。 (ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅ ,ＡＮＰ)和脑利钠素 (ｂｒａｉｎｎａ ｔｒｉｕｒｅｔｉｃｐｅｐｔｉｅｄ ,ＢＮＰ)的分泌 ,这一作用远远大于　　自发现ｕｒｏｃｏｒｔｉｎ以来 ,提出了许多ｕｒｏｃｏｒｔｉｎ可能的生理作用。既然ｕｒｏｃｏｒｔｉｎ在垂体合成[18,1…     

大鼠肝促性腺激素释放激素受体的定位研究

目的探讨大鼠肝是否表达促性腺激素释放激素(GnRH)受体,为GnRH能否参与肝代谢功能的调节提供形态学依据。方法采用兔抗GnRH的抗独特型抗体的免疫组织化学SABC法及地高辛标记探针的原位分子杂交法,对5例大鼠肝GnRH受体表达进行研究。结果大鼠肝细胞既呈GnRH受体阳性又有GnRH受体mRNA杂交信号。GnRH受体阳性物质和GnRH受体mRNA杂交信号物质均分布在大鼠肝细胞的细胞质,细胞核未检测到GnRH受体阳性物质及GnRH受体mRNA杂交信号。不同部位的肝细胞其GnRH受体免疫反应强度和GnRH受体mRNA杂交信号强度存在差别。结论大鼠肝细胞能表达GnRH受体,不同部位的肝细胞对GnRH受体表达水平存在差异。     

颅脑损伤大鼠垂体促肾上腺皮质激素细胞免疫组织化学变化

目的: 观察颅脑损伤大鼠垂体远侧部促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞的免疫组织化学变化。方法: 采用落体法致大鼠颅脑损伤; 伤后24 h断头处死,用免疫组织化学和图像分析方法观察颅脑损伤后大鼠ACTH细胞的变化。结果: 颅脑损伤大鼠ACTH细胞的面数密度、平均吸光度及免疫组化反应均显著强于对照组(P<0.05)。结论: 颅脑损伤大鼠ACTH细胞合成分泌促肾上腺皮质激素功能增强。     

促肾上腺皮质激素释放因子及其受体的研究

促肾上腺皮质激素释放因子（corticotropin-releasing factor,CRF）是一种与应激密切相关的神经内分泌肽,通过与G蛋白偶联的2种受体结合发挥整合、协调内分泌、自主神经系统、免疫系统及行为学各方面对应激的反应。     

大鼠脂肪细胞TSH受体机能研究

目的：研究TSH及Graves'TgC对大鼠脂肪细胞的作用。方法：获取大鼠游离的脂肪细胞。溶脱TSH受体。采用A蛋白尾析柱纯化Graves患者的IgG以脂肪细胞内cAMP浓度及释放到孵化液中甘油浓度作为脂肪分解指标,用cAMP及甘油试剂盒测定cAMP浓度及甘油浓度。结果：1mU／ml的TSll能增加大鼠雅高脂肪细胞的cAMP浓度及甘油的释放。脓苷引起cAMP及甘油的TSH剂量依赖曲线向右移。Gare’TgG抑制[125I]-TSH结合于大鼠脂肪细胞膜上ISH受体,并能刺激雅高脂肪细胞内cAMP的形成。结论：ISH受体功能性表达于脂肪细胞,其生物学效应是通过活化腺耷环化酶而实现的。     

大鼠下颌下腺卵泡刺激素受体、雌激素α受体的分布及与促性腺激素释放激素受体的共存

目的 研究卵泡刺激素受体( FSHR)和雌激素α受体(ERα)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体( GnRHR)共存.方法采用免疫组织化学定位和邻片免疫组织化学共定位方法.结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及各级导管的上皮细胞均呈FSHR和ERα免疫反应阳性;在下颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞中观察到了F...     

大鼠胃肠道促肾上腺皮质激素免疫反应性细胞的观察

用ＰＡＰ免疫组织化学方法观察了１０只正常大鼠胃肠道促肾上腺皮质激素免疫反应性细胞的分布及形态特点。结果如下：促肾上腺皮质激素免疫反应性细胞主要分布在胃窦、胃体及十二指肠。细胞形态多样，有柱状、锥体状及特殊的杯状等。促肾上腺皮质激素免疫反应性细胞基部紧贴基膜，免疫反应性强弱不一。多数细胞促肾上腺皮质激素免疫反应性阳性物质可达肠倥面或腺腔面，有时腔内可见到有促肾上腺皮质激素免疫反应性阳性物质，说明促肾     

人红细胞免疫小鼠促肾上腺皮质释放激素受体的表达特征

目的　主要探讨人红细胞（ＨＲＢＣ） 免疫过程中脾细胞促肾上腺皮质释放激素（ＣＲＨ）受体的表达特征。方法　以ＨＲＢＣ 免疫小鼠,在动态观察抗体产生及血浆中ＣＲＨ 水平的同时,采用放射配体法检测脾细胞ＣＲＨ 受体的表达情况,并分析抗体产生及受体表达与神经内分泌肽之间的相互关系。结果　测定表明脾细胞上不仅存在ＣＲＨ 受体,并且在免疫过程中第５ 天达高峰（ Ｐ＜ ０－０５） ,相关性分析得知,其与抗体产生密切相关（ ｒ ＝ ０－９３） 。结论　ＣＲＨ 样神经肽类激素可能通过免疫细胞上的ＣＲＨ 受体进行信息传递,为进一步了解神经内分泌免疫调节机制提供依据。     

趋化因子受体对免疫应答的调节及其治疗意义

趋化因子 (ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ)是一类对血细胞迁移和聚集有调节作用的小分子多肽 ,根据多肽链一级结构中半胱氨酸 (ｃｙｓｔｅｉｎｅ ,ｃｙｓ)残基的位置 ,可分为 4个亚族 :ＣＣ、ＣＸＣ、Ｃ和ＣＸ3Ｃ。其活性的发挥有赖其相应受体 ,即七次跨膜受体 (Ｇ蛋白偶联受体 )的存在 ,后者在粒细胞、单核 /巨噬细胞、Ｔ细胞膜上有不同种类的表达 ,因此众多的趋化因子对免疫细胞的作用呈现了相应的选择性。天然 (ｎａｉｖｅ)Ｔ细胞迁出胸腺后在外周血及周围淋巴器官内循环 ,与成熟的抗原递呈细胞 (ａｎｔｉｇｅｎ -ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌ,…     

Independence of measles-specific humoral and cellular immune responses to vaccination

With a larger, independent cohort and more sophisticated measures, we sought to confirm our work that indicated independence of humoral and cellular immunity following measles vaccination. We recruited an age-stratified random cohort of 764 healthy subjects from all socioeconomic strata, all with medical-record documentation of 2 age-appropriate doses of measles-containing vaccine. We quantified measles-specific neutralizing antibody levels and assayed the interferon-γ (IFN-γ) enzyme-linked immunosorbent spot assay (ELISPOT) response to measles virus. We also measured secreted cytokines from the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) in response to measles virus by performing enzyme-linked immunosorbent assays as secondary measures of cellular immune status. The median antibody level and median IFN-γ ELISPOT response were 844 mIU/mL (interquartile range [IQR]: 418-1,752) and 36 (IQR: 13.00-69.00) spot-forming cells (per 2 × 10(5) PBMCs), respectively. We observed only a very weak and negative correlation (Spearman's r(s) or ρ of -0.090 [95% confidence interval: -0.162--0.018]). We observed a similar lack of quantitatively important correlations between the neutralizing antibody level and any of the secondary measures. Our data confirm the independence of humoral and cellular immune responses after the second dose of measles vaccination. As researchers pursue novel measles vaccine and measles vaccine delivery systems, they must not infer that humoral responses predict cellular responses.     

抗-HCV阳性无病毒血症患者HCV特异性免疫反应研究

目的　研究抗HCV阳性无病毒血症患者特异的体液及细胞免疫状态。方法　对 15例抗HCV阳性无病毒血症患者 ,15例慢性HCV持续感染者及 15例正常对照者进行研究 ,通过MTT、LDH释放法、酶联免疫等方法观察患者外周T细胞反应、自然杀伤 (NK)细胞活性、细胞因子分泌及特异性体液免疫反应。结果　无病毒血症者T细胞增殖反应明显大于持续感染者及对照组 ,并且T细胞对核心区抗原增殖最大 ,NS3次之 ,对NS5则无明显增值。而NK细胞活性较持续感染者及对照组稍高 ,但无统计学差异。此外我们观察了患者抗HCV抗体产生 ,发现无病毒血症患者与持续感染者抗 -HCV抗体产生无明显统计学差异。还观察到在无病毒血症组抗原刺激后产生IFN明显高于持续感染组 ,两组在无抗原刺激下IFN产生水平均极低下。结论　抗HCV阳性无病毒血症患者 ,其T细胞免疫及抗体的产生均高于持续感染者 ,这可能在病毒的清除中起一定作用 ,而免疫反应在慢性HCV感染中的作用及机制 ,尚需进一步研究     

黄芪多糖、人参茎叶皂甙对创伤小鼠血浆及免疫细胞内cAMP、cGMP的影响

本实验利用小鼠闭合性创伤模型，观察创伤后第４天小鼠血浆、免疫细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量的变化及黄芪多糖（ＡＰＳ）、人参茎叶皂甙（ＧＳ）的调节作用。结果显示：创伤后小鼠血浆内ｃＡＭＰ水平增高，ｃＧＭＰ水平下降，ＣＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值升高。腹腔巨噬细胞及脾细胞、胸腺细胞、肠系膜淋巴结细胞在静息状态和激活状态时的ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量也显示相似的改变。ＡＰＳ（２５０ｍｇ／ｋｇ）、ＧＳ（５０ｍｇ／ｋｇ）体内应用（每天一次，连续４天）可明显降低创伤小鼠血浆及免疫细胞内ｃＡＭＰ水平，升高其ｃＧＭＰ水平。一定浓度范围内的ＡＰＳ（５０～２５０μｇ／ｍｌ）、ＧＳ（１．０～１００μｇ／ｍｌ）在体外可明显拮抗创伤小鼠激活状态的巨噬细胞及脾细胞内ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值的增高。提示：ＡＰＳ，ＧＳ可纠正创伤小鼠血浆及免疫细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ的比例失衡。     

免疫活性细胞回输前后HCV滴度及C区和E2区CTL表位变化

目的：观察免疫活性细胞回输前后慢性丙型肝炎患者外周血丙型肝炎病毒（HCV）滴度及C区和E2区CTL表位的变化情况。方法：定量PCR检测4例接受免疫活性细胞回输的慢性丙型肝炎患者外周血HCV滴度，并利用分子克隆、基因测序和计算机辅助分析技术分析不同时间点不同分离株CTL表位的变化情况。结果：4例患者在接受免疫活性细胞回输前后血清ALT水平存在不同程度波动，其差值从第2例患者的58到第1例患者的198，同时HCV滴度也发生了较大变化，其变化倍数从第3例患者的25．37倍到第4例患者的882．35倍，其对数转换值的波动幅度在1．40－2．94之间。在免疫活性细胞回输后4例患者外周血HCV滴度均出现了不同程度的一过性下降。在全部观察期内HCV C区和E2区的CTL表位编码区均未出现明确的变化。结论：机体免疫攻击状态发生改变时可引起患者体内丙型肝炎病毒滴度的变化，但不伴随目前观察的CTL表位编码基因的改变。     

多抗甲素增强大鼠腹腔巨噬细胞抗癌免疫功能的研究

目的 本实验探讨腹腔内注射多抗甲素增强大鼠腹腔免疫功能的机制。方法 大鼠腹腔内分别注射0．5、1．0和1．5mg的多抗甲素。2d后处死大鼠分离巨噬细胞。计数并测定乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶（AcP）的活性，巨噬细胞吞噬活力，一氧化氮（NO）的分泌以及对人K562细胞的细胞毒性进行分析。同时采集大网膜，对大网膜乳斑的数量和面积进行了观察分析。结果 大鼠腹腔巨噬细胞数量、LDH和ACP的活性、吞噬活力、NO的分泌以及细胞毒性随着多抗甲素剂量的增加而增加。并且多抗甲素也显著增加了大网膜乳斑的数量和面积。结论 腹腔内注射多抗甲素可显著增加大鼠大网膜乳斑的数量和面积，并因此增加PMφ的数量，增强PMφ的活性。因而增强了腹腔巨噬细胞的免疫功能。     

人偏肺病毒DNA疫苗的构建和小鼠免疫反应的研究

目的 构建人偏肺病毒(hMPV)DNA疫苗,小鼠免疫后评价其细胞和体液免疫水平.方法 利用PCR方法,从hMPV的cDNA中扩增融合蛋白FATM(缺失跨膜区)基因和基质蛋白M基因,构建DNA疫苗pcDNA3.1His-FATM和pcDNA3.1His-M,瞬时转染后用Western Blot和间接免疫荧光方法检测F、M蛋白表达.疫苗肌内注射免疫小鼠,ELISA和ELISPOT方法分别检测血清IgG抗体和小鼠脾细胞CTL水平.结果 Western Blot和间接免疫荧光(IFA)方法证明构建的疫苗可表达FATM和M蛋白.peDNA3.1His-FATM单独免疫小鼠,血清抗体滴度为1:44;与pcDNA3.1His-M联合免疫后,血清抗体滴度为1:64.ELISPOT检测证明,联合免疫组小鼠脾细胞产生IFN-γ的效应CD8+T细胞数为42±8.9,高于单独免疫组32±7.4的水平.结论 DNA疫苗peDNA3.1His-F△TM可以诱导产生特异性的体液和细胞免疫,与pcDNA3.1His-M联合免疫,可以提高免疫水平.     

人博卡病毒VP2病毒样颗粒诱导特异性细胞免疫反应的研究

目的 探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测人博卡病毒(HBoV) VP2病毒样颗粒(VLPs)诱导特异性细胞免疫反应的最佳条件.方法 HBoV VP2 VLPs免疫小鼠后,用ELISPOT方法检测小鼠的特异性细胞免疫反应,观察不同多肽刺激、不同细胞培养时间、不同细胞浓度以及不同浓度特异性刺激多肽条件下ELISPOT结果.结果 多肽P3(GYIPIENEL)及P5(LYQMPFFLL)刺激HBoV1 VLPs免疫小鼠脾脏淋巴细胞产生斑点数分别为233个/10(6)和157个/10(6)细胞,P8(GYIPVIHEL)刺激HBoV2 VLPs免疫小鼠脾脏淋巴细胞产生斑点数为113个/10(6)细胞;培养时间以24 h为最佳,此时HBoV1与HBoV2实验组特异性分泌IFN-(ｒ)的比率分别为232个/10(6)和119个/10(6)细胞;小鼠脾脏淋巴细胞浓度以5×10(5)为最佳,此时HBoV1与HBoV2实验组特异性分泌IFN-(γ)的比率分别为232个/10(6)和108个/10(6)细胞;刺激物浓度10μg/ml为最佳,HBoV1与HBoV2实验组特异性分泌IFN-(γ)的比率分别为233个/10(6)和96个/10(6)细胞.结论 HBoV1与HBoV2特异性BABL/c小鼠T细胞表位多肽分别为HBoV1:P3;HBoV2:P8.检测人博卡病毒VP2病毒样颗粒诱导特异性细胞免疫反应ELISPOT方法最佳实验条件为:培养时间24 h,细胞浓度5×10(5)细胞/孔,刺激多肽终浓度10 μg/ml,可用于HBoV在小鼠上的细胞免疫研究.     

热灭活嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后肿瘤细胞免疫学性状的变化

目的： 比较热灭活嗜酸乳杆菌黏附于宫颈癌HeLa细胞后对肿瘤细胞免疫学性状的影响。方法： 运用流式细胞技术检测热灭活嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后免疫分子表达状况，运用MTT法分析淋巴细胞对HeLa细胞的杀伤作用。结果： 热灭活的嗜酸乳杆菌黏附于HeLa细胞后不影响MHC-I分子的表达（P>0.05），可显著增强CD80、CD86的表达，并且可以显著增强NK细胞对其杀伤活性（P<0.05）。细胞毒性淋巴细胞（CTL）对热灭活嗜酸乳杆菌黏附的HeLa细胞的杀伤作用显著高于对照组（P<0.05）。结论： 热灭活嗜酸乳杆菌黏附于宫颈癌HeLa细胞后可增强其诱导抗肿瘤效应。