兔抗猪卵透明带抗血清对金色田鼠、小鼠与家兔卵子体外抗受精作用的观察

本实验报道了在离体条件下观察兔抗猪卵透明带抗血清对田鼠、小鼠与兔卵子透明带的沉淀层形成、精子附着及穿过透明带的影响。田鼠卵子预先用抗血清处理30分钟,在明视野下,可观察到在透明带外层形成沉淀层,同种精子不能附着到卵子的透明带上,继之,受精也被抑制,然而用对照血清处理过的卵子却未出现上述现象。用抗血清处理小鼠卵子,不影响精子在透明带上的附着,但是受精却被抑制。在兔上的实验显示抗血清不能抑制受精的发生。     

孕酮对人类精子透明带结合能力影响的研究

目的:探讨不同浓度孕酮对精子透明带结合能力的影响。方法:梯度离心洗涤精子后,将精子悬液分成5组,分别加入不同浓度的孕酮溶液,孕酮终浓度为0μmol/L、0.1μmol/L、0.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L,体外获能3.5 h。将取卵后常规IVF或ICSI授精7d内未受精的废弃卵子,共收集空白组57只卵子,实验组55只卵子,与精子体外共培养;2 h后观察卵子透明带结合精子数。结果:10μmol/L、5μmol/L孕酮组透明带精子结合数(66.6±5.3,64.5±5.1)显著高于空白组(61.5±4.1,59.8±5.0),差异有统计学意义(P<0.05)。低浓度孕酮(0.1μmol/L、0.5μmol/L)与空白对照组比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:10μmol/L、5μmol/L孕酮可提高精子与卵子透明带结合力。低浓度孕酮(0.1μmol/L、0.5μmol/L)对精子透明带结合没有显著影响。     

长期停服棉酚者精子功能的探讨

观察了19名停服棉酚3—10年的志愿者(实验组)及19名年龄相近具有生育能力的健康男子(对照组),根据Rogers 法略加改进的SPA 实验,实验组和对照组的受精百分率有显著差异(P<0.01),6例重复试验者的受精百分率十分接近。经Spearman 法试验,受精浓度与精子穿入百分率等级相关,有显著差异(r_s=0.94285,P<0.05),2×C 表线性回归显著性检验说明,不同受精浓度的穿入率有非常显著差别(X~2=80.6124,P<0.001),在10~7～10~4受精浓度范围穿透百分率依次递减,说明在这段范围内随着受精浓度的增加,穿入率有显著升高趋势。精子染色体异质性实验(SCHT)显示,二组差异不明显(P>0.05)。实验组精子的ATP 含量明显低于对照组(P<0.01)。SPA 受精百分率与ATP 含量相关(r=0.5984,P<0.05)。两组的LH 和T 水平无明显差异,而实验组的FSH 水平则明显高于对照(P<0.05)。结果表明,长期停服棉酚者精子的受精功能低于正常人,可能不是血中T 水平下降之故。     

卵透明带精子受体蛋白的分子生物学研究现状及应用前景

<正> 脊椎动物卵母细胞外的卵透明带(ZP)是一种特异的糖蛋白,在精卵识别、粘附、结合及穿透过程中起重要作用。它表面的糖萼,是精卵识别的重要成份,且含有将精子特异吸附到卵子表面的精子受体。它是诱发精子顶体反应导致精子穿透的诱导物;也是在精卵结合后,由于精子受体蛋白变性,从而阻止多精子受精的屏障。因此,ZP的形态结构、生化特     

金黄仓鼠年龄和超排卵的关系

<正> 某些哺乳类动物的卵母细胞,用机械或酶解的方法去除透明带后,其种属特异性明显降低,在体外可与异种获能精子发生受精。去除透明带的仓鼠卵可与包括人在内的异种哺乳类(除狗外)的获能精子受精。在仓鼠卵的异种体外受精研究中,以人精子穿     

少量人类精子以空卵透明带为冻贮载体的冷冻保存

目的:探讨空卵透明带作贮存载体冷冻保存少量人类精子。方法:将人或金黄地鼠卵内的细胞成份全部除去,制备成空卵透明带,分别显微注入人睾丸精子、附睾精子和射出精子后冷冻保存,并与正常供精者射出精子作对照。结果:解冻后卵透明带在溶液中容易识别寻找,卵透明带内的精子易于观察。附睾精子组(n=11)与供精者射出精子组(n=7)的冷冻精子活动率和存活率无显著性差异(P>0.05),但睾丸精子组(n=7)这两项参数值均显著低于附睾精子和射出精子组(P<0.01)。含6％、7.5％和9％不同甘油浓度的冷冻保护剂,对冷冻精子活动率无显著性影响(P>0.05);冻贮于人和金黄地鼠空卵透明带内的精子,两者的冷冻精子活动率也无显著性差异(P>0.05〕。结论:空卵透明带是冻贮少量人类精子的合适载体。     

人受精卵和未受精卵培养液中尿激酶型纤溶酶原激活因子的含量比较

本研究采用ELISA双抗夹心法测定了15例患不育症妇女25个受精卵和18个未受精卵培养液中尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)的含量.实验结果表明:受精卵培养液中uPA的含量为(530±546)IU/L,未受精卵培养液中uPA含量为(22O±55)IU/L,P<0.05,两者有显著性差异.提示uPA在精卵受精过程中可能有益于精子穿透卵子的透明带.提高受精成功率.     

抗精子单克隆抗体抑制小鼠体外受精

抗人精子单克隆抗体YWKⅠ和YWK-Ⅱ及抗兔精子单克隆抗体rSMP-B均能显著抑制人精子穿入去透明带金黄地鼠卵。在本文的小鼠体外受精实验中,获能精子先与10倍稀释的抗精子单克隆抗体作用10min后再与卵子混合。结果表明:三种抗精子单克隆抗体对小鼠体外受精均有明显的抑制,其中YWM-Ⅰ使受精率下降至16.9%。此外还发现YWK-Ⅱ及rSMP-B主要抑制小鼠精子穿入透明带,而YWK-Ⅰ除此之外还抑制穿入透明带后的精子进一步完成受精。     

精子功能检测对选择IVF或ICSI治疗不育症的临床意义

本文评价了精子功能检测对选择体外受精(IVF)或卵胞浆精子注射(ICSI)治疗不育症的临床意义。精子功能缺陷所导致的精子与透明带结合反应(即透明带结合、透明带诱发顶体反应和透明带穿透)异常是IVF受精失败的主要原因。在常规精液分析中,精子形态学测定对预测精子受精能力最有价值,但精子形态学评估则是最难做准确和稳定。IVF受精失败的卵子是很有用的生物材料,可用来测定精子形态和顶体功能。人卵透明带有选择性地与正常形态和完整顶体的精子相结合。透明带诱发顶体反应与精子穿透明带的能力呈显著正相关。在不明原因不育症患者中,约25%的不育原因可能是透明带诱发顶体反应缺陷或低下所引起。在严重畸形精子症(正常形态率≤5%)、少精子症的不育病人中,精子与透明带结合异常比率很高。因此,临床上应把这些有精子缺陷,尤其是会影响精子与透明带结合的患者检测出来,采用ICSI治疗,避免这些病人用IVF治疗而导致很低的受精率。精子形态学分析和精子与透明带结合试验有助于临床选择IVF或ICSI治疗不育患者。     

人精子甘露糖受体的表达与精卵融合的关系

目的:研究人精子甘露糖受体(MR)的表达与精卵融合的关系。方法:正常人活精子获能培养后与去透明带金黄地鼠卵行精子穿透试验(SPA)监测精卵相互作用,同时用异硫氰酸荧光素偶联的甘露糖化牛血清白蛋白(FITC-DMA)检测精子甘露糖受体的表达并分析SPA各项指标与精子甘露糖受体表达的关系。结果:SPA指标中穿透指数、结合指数均与精子MR表达率呈正相关。结论:人精子MR与精-卵膜融合密切相关,可能起某种介导作用。     

抗猪卵透明带抗体对人精卵结合的抑制作用

早在1972年Shivers就首先用兔抗田鼠卵透明带抗体在体外实验中阻止田鼠精卵结合获得成功,以后在鼠、狗、松猴等动物实验中也证实了这种抗受精作用。近年来多种动物的实验研究证实不同动物的卵透明带之间存在着种间交叉反应,同时还发现猪与人卵透明带也可能具有种间交叉免疫性。本实验提取猪卵透明带作为抗原免疫家兔制备兔抗猪卵透明带抗血清,试图通过体外实验方法观察其对人精卵结合的影响,以求证实兔抗猪卵透明带抗体对人精卵结合的抑制作用以及人与猪卵透明带的种间交叉反应。     

腺苷脱氨酶活性对人精子运动的影响

本研究发现人精子膜中有腺苷脱氨酶(ADA)活性,其Km值为266.94±1.31μM。比牛附睾尾部精子膜中ADA的Km高一个数量级。我们发现活力低于50%的不育者精子膜中的ADA活性(154.22±88.49 μM/mg/h,14例)明显高于正常人精子膜中的ADA活性(67.45±17.66μM/mg/h,25例),p<0.01。用ADA的特异性抑制物erythro-9-(2-hydroxy 1-3-nonyl)adenine(EHNA)处理洗过的正常人精子6 h后,实验组精子活力(91%)明显高于对照组(0%),p<0.01;同样条件下测得34例不育者精子的活力(83.86±11.21%)明显高于对照组(68.27±18.73%),p<0.01。另外EH NA处理后的精子,其穿透去透明带金黄地鼠卵的能力均有升高,正常人精子从54±8.66%升高到83±6.69%,不育者精子从21.33±55%升高到77±9.67%,p<0.01。上述结果表明精子膜上的ADA活性对精子的生理功能有影响     

精索静脉曲张不育患者术后未育者精子穿卵率的远期观察

目的 :对精索静脉曲张不育患者术后未育者的精子穿卵率作远期观察。方法 :1双侧经髂窝或经腹腔镜精索静脉高位结扎术 ;2人精子去透明带地鼠卵穿透试验 (SPA)。结果 :2 9例精索静脉曲张不育患者 ,术后 1 .5～ 2年随访仍未育 ,作 SPA,与术前 SPA穿卵率对比 ,精索静脉曲张 °组 (n=1 7)有 7例改善了穿卵率 ,精索静脉曲张 °组 (n=1 2 )有 2例改善了穿卵率。但两组穿卵率的升高幅度不大。结论 :精索静脉曲张不育患者术后较长时间仍未育者 ,虽部份患者的精子穿卵率已有改善 ,但穿卵率的增加程度不高。术前精索静脉曲张严重的患者 ,术后可能难以提高穿卵率。应建立 SPA对患者术后精子受精能力作评估 ,以及时调整治疗措施。     

哺乳类动物受精的分子基础

哺乳类动物受精时,直线前进的精子经过在雌性动物生殖道中自发的获能过程后,成为具有受精能力的成熟精子。运行至输卵管壶腹部的获能精子与卵丘－卵母细胞复合体相遇后开始受精过程。哺乳类的受精,除了精子与卵母细胞外基质层（卵丘细胞层和透明带）、精子与卵母细胞质膜间的相互作用过程外,还包括精子的顶体反应、卵母细胞的透明带反应和卵黄膜封锁反应等生理生化过程。 经过上述分子事件后,精子进入卵母细胞胞质中,完成受精过程（图１）。本文将详细探讨哺乳类受精的初步机理。 需要指出的是,受精前,卵母细胞停留在减数分裂Ⅱ中期…     

兔抗猪卵透明带抗体对体外精-卵结合的影响

以猪卵透明带免疫家兔后制备兔抗猪卵透明带抗血清,通过体外实验方法观察兔抗猪卵透明带抗体对猪和家兔精-卵结合的影响。结果发现:经抗血清处理的同种猪卵表面形成明显免疫沉淀环(间接荧光测定1:2000呈强阳性),并对猪的精-卵结合有明显抑制作用,随着抗血清浓度增高,精子结合数明显下降。但在兔卵未见免疫沉淀环形成和精-卵结合抑制作用。     

轻度子宫内膜异位症患者腹腔液对精子功能的影响

探讨轻度子宫内膜异位症患者腹腔液对精子功能的影响。方法采用去透明带地鼠卵穿透试为检测方法，以精子穿卵率及受精卵外精子附着数为指标，子宫内膜异位症组及正常对照组在腹腔镜直视下收集腹腔液，将正常人精子按１：１的比例稀释，观察腹腔液对精子穿卵的影响。     

透明带内精子冻存的初步实验研究

Cohen首次将精子冻存于人、小鼠、仓鼠空透明带内 ,经复苏后 ,回收率可达 4 4 %～ 94 % ,复苏后精子对体外成熟的卵母细胞行卵细胞浆内单精子注射 (intracytoplasmicspermin jection ,ICSI)后 ,可获正常双原核卵[1] 。本研究利用人受精前未成熟卵、ICSI后受精异常卵及发育停滞胚胎的透明带 ,以保存睾丸精子及取精困难的少弱精症患者的精子 ,同时比较了不同来源精子的冻融耐受性。1　材料与方法1.1　材料　精子取自接受ICSI治疗的男性不育患者 ,因女方原因行常规体外受精胚胎移植 (invitrofertilizationandembryotransfer,IVF ET)的…     

微穿刺技术的应用——输精管结扎后对金黄田鼠附睾液肉毒硷和α-糖苷酶的影响

26只金黄田鼠单侧输精管结扎,分术后1、2、3和6个月4组观察,另以21只同龄雄鼠做对照组,微穿刺取附睾液。术后3个月结扎侧睾丸明显萎缩,平均重为0.796±0.263g,正常对照组为1.182±0.032g(均为均数±SD)。术后4个组结扎侧附睾重量均明显增加,精子比容比对照组分别降低25%、65%、59%和55%,精子密度也相应下降。术后2、3、6个月结扎侧附睾尾液肉毒硷浓度有明显下降,分别为对照组的60.3%、23.4%和22.7%,提示输精管结扎使金黄田鼠附睾对吸收和浓缩肉毒硷的功能下降。各组附睾液中性α-糖苷酶的活性均无明显改变。     

体外精子穿透试验的几点改进

<正> 七十年代建立起来的体外人精子穿透无透明带仓鼠卵试验(简称SPA),是评定精子授精能力的新技术。此法较完整地体现了包括精子获能、顶体反应、精卵膜融合和协调的鞭毛运动等精子功能的生物学现象。已证实,与常规精液分析不同,SPA试验与精子授精能力有良好的相关关系。特别适用于评定反常的精子功能。本室SPA操作程序与国内外同类实验不尽相同,故介绍如下。     

缩短人精卵共同孵育时间对体外受精-胚胎移植中胚胎质量与临床结果的影响

在常规进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的过程中，精子和卵子共同孵育的时间平均为16～20h。在此期间，大量已获得受精能力的精子围绕着卵冠丘的复合体、高浓度的精子代谢产物以及因精子穿透卵丘而驱散的颗粒细胞、部分退化和死亡的精子，可能析出一些不利于胚胎发育的物质。已有研究表明，人类精-卵相互作用和受精发生在性交后20