细胞间粘附分子-1在血脑屏障上的表达和调控

血脑屏障 (BBB)主要由脑微血管内皮细胞 (BMEC)相互紧密连接而成 ,可阻止物质进入中枢神经系统 (CNS)。CNS要保持稳定独特的微环境有赖于BBB结构的完整。在多发性硬化 (MS)等神经系统自身免疫性疾病中 ,由于BBB遭到破坏 ,血管周围细胞 (星形细胞、巨噬细胞和小胶质细胞 )及脑微血管内皮细胞 (BMEC)释放多种炎性因子 ,脑和脊髓毛细血管内皮细胞上的粘附分子 (AMs)的表达发生改变 ,从而影响BBB的通透性。其中细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )可与白细胞上的配体结合 ,使白细胞活化后进入CNS。本文就ICAM 1表达和调控与BBB相关的几个问题作一综述     

缓解-复发型多发性硬化患者血脑屏障损害及sICAM-1、TNF-α水平的临床分析

在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)中,血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)受到破坏,淋巴细胞介导BBB损害继而浸润中枢神经系统是MS发病特征之一,而炎症细胞黏附于内皮细胞是其由循环进入脑的第一步.研究表明细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在脑微血管内皮细胞(BMEC)的表达增加与淋巴细胞黏附和穿越BBB有关,ICAM-1的水平的升高被认为是反映BBB遭到破坏[1]和病情进一步恶化的重要指标.     

NF-κB及ICAM-1在脑出血大鼠及过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞中的表达

目的： 探讨脑出血后炎症反应机制及核因子-κB(NF-κB)与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)间表达的关系。方法： 建立大鼠脑出血模型及过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞的模型，分别采用免疫组化、原位杂交、免疫细胞化学及Western blotting方法观察NF-κB和ICAM-1的表达。结果： 大鼠脑出血后NF-κB 及ICAM-1表达均增强，ICAM-1的表达高峰（1 d）先于NF-κB（4 d），但在体外实验中，过氧化氢损伤后即刻大鼠脑微血管内皮细胞中NF-κB表达即增加，2 h后ICAM-1表达也上调，NF-κB的抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC)可下调NF-κB及ICAM-1表达。结论: 在活性氧损伤中NF-κB作为ICAM-1的活化因子，可上调ICAM-1表达，但在脑出血这一复杂的病理生理变化中，尚有其它因素参与对NF-κB 及ICAM-1表达的调控。     

ICAM-1与支气管哮喘的研究进展

细胞间粘附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)是免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)超家族成员之一,对白细胞牢固黏附和白细胞从血管中迁移到炎症组织部位起着关键作用.白细胞表面粘附分子与血管内皮细胞表面的粘附分子(如:ICAM-1)相互作用后可介导白细胞从血液循环中迁移到肺组织的炎症部位,这在支气管哮喘发病机制中起着重作用.本综述将简阐述ICAM-1及其表达调控在支气管哮喘中的研究进展.     

虎杖甙对脂多糖诱导血管内皮细胞I CA M-1表达的抑制作用

目的和方法:用细胞免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描技术,研究脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的诱导作用,以及虎杖甙对ICAM-1表达的抑制作用。结果:内皮细胞未受LPS剌激时,细胞表面ICAM-1表达很弱;LPS剌激后,细胞表面ICAM-1分子在第8-36h显著增加,并与ICAM-1的表达呈剂量反应关系。虎杖甙单独处理内皮细胞时,对ICAM-1表达无明显影响;但虎杖甙预处理内皮细胞后,可显著抑制LPS对ICAM-1表达的诱导作用。结论:LPS可促进内皮细胞ICAM-1的表达,并可被虎杖甙所抑制。     

HIV-1 Tat蛋白通过抑制闭合素表达及通过基质金属蛋白酶9裂解闭合素而增加脑血管内皮细胞的通透性

血脑屏障(BBB)可以维持脑内稳态,防止循环分子和免疫细胞进入中枢神经系统。BBB由紧密连接(TJ)维系的特化脑内皮细胞组成,其完整性受大脑微脉管系统、紧密连接蛋白、大脑微血管内皮细胞(BMECs)、细胞转移途径以及酶机制等因素     

补肾宁心方对人单核-血管内皮细胞粘附的影响

目的:探讨补肾宁心方对人单核-血管内皮细胞粘附的影响及机理。方法:以培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入氧化的低密度脂蛋白(ox-LDL)或在试验体系中加入灌服补肾宁心方的兔血清,以孟加拉玫瑰红活细胞染色法测定人单核细胞系U937与HUVECs的粘附,并用流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)以及E-选择素的表达。结果:ox-LDL显著增强单核U937细胞与内皮细胞之间的相互粘附,如在试验体系中加入灌服补肾宁心方的动物血清,则粘附率明显降低(P＜0.01)。流式细胞仪分析结果显示ox-LDL能明显促进内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1以及E-选择素的表达,补肾宁心方中药灌服血清可显著下调内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1以及E-选择素的表达(P＜0.01)。结论:补肾宁心方含药血清可能通过下调内皮细胞表面粘附分子的表达抑制单核-血管内皮细胞粘附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

药物对C反应蛋白诱导脑微血管内皮细胞黏附分子表达的作用

目的探讨一些药物对C反应蛋白（CRP）诱导脑微血管内皮细胞黏附分子表达的作用，为缺血性脑损伤机制及防治策略的进一步研究提供理论依据。方法培养脑微血管内皮细胞（bEnd．3），经辛伐他汀、吡格列酮、Heroin和AG490预处理后与CRP共孵育，采用免疫蛋白印迹（Westernblot-ting）检测细胞黏附分子表达。结果CRP能显著诱导bEnd．3细胞表达细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管细胞黏附分子（VCAM-1），信号转导子及转录激活子-3（STA33）酪氨酸残基快速磷酸化。辛伐他汀、吡格列酮和AG490均能显著减少ICAM-1、VCAM-1的表达。结论CRP上调黏附分子表达的作用可能与JAK／STAT信号转导通路有关。辛伐他汀、吡格列酮均能抑制CRP诱导的脑内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达，可能是它们对缺血性脑损伤的保护机制之一。     

丹参醇提取物对内皮细胞VCAM-1、ICAM-1表达的影响

众所周知,粘附分子在内皮细胞受损过程中起了重要作用,中药丹参对血栓性疾病有治疗和预防作用,对内皮细胞有保护作用,但保护机制的研究尚不充分,如对内皮细胞粘附分子的表达是否有影响,还未见文献报道。本文用丹参醇提取物作用内皮细胞后,检测血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的变化,以进一步阐明丹参对内皮细胞保护作用的机制,为临床上用丹参防治心血管疾病补充理论依据。     

反义寡核苷酸抑制缺氧/再给氧时内皮细胞细胞间粘附分子-1的表达

目的:探讨反义寡核苷酸(AS-ODN)对缺氧/再给氧(H/R)时内皮细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:流式细胞仪测定肾小球血管内皮细胞在缺氧、再给氧及加入AS-ODN后ICAM-1表达的阳性百分率。结果:缺氧10h,肾小球血管内皮细胞ICAM-1的表达与对照组无显著性差异,再给氧6hICAM-1的表达明显高于正常,加入AS-ODN后,ICAM-1阳性细胞的百分率下降40.6%。结论:AS-ODN可以降低H/R时内皮细胞ICAM-1的表达。     

糖基化终产物刺激大鼠骨髓内皮细胞表达细胞间粘附分子-1的机制探讨

目的:探讨糖基化终产物(AGEs)致内皮细胞表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)与自由基产生之间的关系。方法:内皮细胞(EC)用抗AGEs抗体、抗IL-1多抗、N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理1 h后AGEs作用6 h,测定IL-1、超氧化物歧化酶(SOD)、ICAM-1、内皮细胞-中性粒细胞粘附率。结果:AGEs刺激后ICAM-1表达增加[吸光度(A)为0.65-0.14 vs 0.11-0.02]的内皮细胞SOD活性降低[(0.69-0.19)10³U/L vs(1.71-0.42)10³U/L]。ICAM-1的增加可被抗AGEs抗体[吸光度(A)为(0.12-0.01)]、NAC[吸光度(A)为(0.11-0.05)]和抗ICAM-1抗体[吸光度(A)为(0.10-0.04)]抑制。外源性IL-1也可刺激内皮细胞表达ICAM-1[吸光度(A)为(0.72-0.23)]。结论:AGEs刺激内皮细胞表达ICAM-1可能与其导致细胞自由基的产生有关;AGEs还可通过刺激其他细胞产生细胞因子间接作用于EC,参与促进ICAM-1表达。     

咖啡酸对高同型半胱氨酸引起的小鼠软脑膜细静脉内白细胞滚动和黏附的抑制作用

目的:研究咖啡酸(CA)对同型半胱氨酸(Hcy)引起的小鼠软脑膜细静脉内滚动和黏附白细胞的抑制作用。方法:取雄性C576J/BL小鼠(体重18~22g)分成3组,每组5只,Hcy组皮下注射Hcy(0.1mg/g体重)0.2ml,Hcy+CA组皮下注射Hcy(0.1mg/g体重)0.1ml后即刻肌肉注射CA(10mg/kg体重)0.1ml,Control组皮下注射生理盐水0.2ml,4h后采用研磨法建立脑非创伤性观察窗,用动态微循环观察系统观测各组小鼠软脑膜细静脉内滚动和黏附的白细胞数量。之后取脑组织,石蜡切片,用免疫组织化学方法观察脑皮层组织中微血管内皮细胞E-选择素(E-selectin)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果:与Control组相比,Hcy组小鼠软脑膜细静脉内滚动和黏附的白细胞数量显著增加(P<0.01),且脑皮层微血管内皮E-selectin及ICAM-1的阳性区域也增加。Hcy+CA组小鼠软脑膜细静脉内白细胞的滚动和黏附数量明显少于Hcy组(P<0.05),微血管内皮的E-selectin及ICAM-1表达也明显下调。结论:CA可以抑制Hcy引起的小鼠软脑膜细静脉内白细胞的滚动和黏附,该作用与其抑制脑微血管内皮E-selectin及ICAM-1的表达有关。     

尼古丁对中性粒细胞活化及细胞间粘附分子基因表达的影响

目的:观察尼古丁对中性粒细胞(PMNs)的活化,PMNs与内皮细胞的粘附及内皮细胞表达ICAM-1mRNA,有助于阐明尼古丁在慢性阻塞性肺疾患(COPD)炎症发病中的作用。方法:测定β-葡萄糖醛酸苷酶及溶菌酶活性,以反映PMNs的活化;培养人脐静脉内皮细胞,观察PMNs与内皮细胞的粘附;制备探针,提取总RNA,Northern杂交测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA。结果:尼古丁可活化PMNs,增加PMNs－内皮细胞粘附;增强ICAM-1mRNA表达,764-3可明显抑制尼古丁的上述作用。结论:尼古丁通过活化PMNs,促进PMNs－内皮细胞粘附,在COPD慢性炎症发病中起重要作用。而这种粘附作用的增加与粘附分子表达增强有关;抑制尼古丁的上述作用可能是764-3抗炎作用的部分机理。     

旁路活化补体协同TNF-α对血管内皮细胞ICAM-1表达和粘附作用的影响

目的:探讨旁路活化补体协同TNF-α对血管内皮细胞ICAM-1表达及中性粒细胞-内皮细胞(PMN-EC)粘附的影响。方法:采用酵母多糖活化人血清(ZAHS)单独、和TNF-α协同作用于体外培养的内皮细胞单层, 用直接细胞计数和改良细胞ELISA方法检测中性粒细胞-内皮细胞粘附率的变化和细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达。结果:旁路活化补体单独作用于内皮细胞对PMN-EC粘附和ICAM-1的表达仅有轻微影响;和40μg/L的TNF-α共同作用可以明显促进PMN-EC粘附率和ICAM-1的表达。结论:旁路活化补体对TNF-α诱导的PMN-EC粘附及ICAM-1的表达具有促进作用, 从而引起炎症反应。     

脑缺血血脑屏障损伤与蛋白水解酶的相关性研究

血脑屏障（brain blood barrier，BBB）主要也括三层结构：脑血管内皮细胞、基底膜和星形胶质细胞的足突。有学者认为BBB包括两道屏障：一为毛细血管和毛细血管后做静脉腔面的内皮细胞，包括内皮之间的紧密连接，它们的作用是限制血浆成分不使其外流。一旦缺血，内皮屏障的完整性就受到破坏，白细胞黏附受体开始存内皮细胞上表达，微血管整合素表达发生异常。     

产科抗磷脂综合征患者血清对脐静脉内皮细胞活化的研究

目的观察产科抗磷脂综合征患者血清对脐静脉内皮细胞活化的影响。方法用采集的16例APS患者和10例健康对照者血清分别处理体外培养的脐静脉内皮细胞,用逆转录定量聚合酶链反应检测脐静脉内皮细胞上细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和E-选择素（E-selectin）mRNA表达,用流式细胞仪检测二者蛋白的表达。结果APS血清处理后脐静脉内皮细胞上粘附分子ICAM-1和E-selectin mRNA和蛋白均比对照组明显升高,差异有显著性（P〈0.05）。结论抗磷脂综合征患者血清可激活脐静脉内皮细胞,使粘附分子表达增加。     

犀角地黄汤对肾上腺素与低温处理大鼠血管内皮细胞粘附分子表达的影响

目的： 研究犀角地黄汤对血瘀证血管内皮细胞粘附分子表达的影响。 方法： 采用免疫组织化学和RT-PCR 2种方法观察犀角地黄汤不同剂量（高、中、低）对血瘀证（大鼠）血管内皮细胞胞间粘附分子-1（ICAM-1）、血管细胞粘附分子（VCAM-1）、血小板-内皮细胞粘附分子（PECAM-1）和诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。 结果： 模型组ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOS的表达明显高于对照组，犀角地黄汤能减少模型组动物ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOS的表达，而且随着药物剂量的减少，各分子表达递增，呈量效关系。 结论： 犀角地黄汤能降低血瘀证大鼠血管内皮细胞粘附分子高表达，具有一定的量效关系。     

终末糖基化产物对培养的人脐静脉内皮细胞粘附分子表达的影响

目的：探讨终末糖基化产物在糖尿病动脉粥样硬化（AS）形成中的作用机理。 方法： 分离正常人脐静脉内皮细胞（HUVECs），将终末糖基化终产物（AGE）修饰的人血清白蛋白（AGE-HSA）、人血清白蛋白（HSA）与HUVECs在体外共同培养，并用荧光单克隆抗体染色，流式细胞仪定量检测细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）的表达。 结果： 正常人HUVEC表达ICAM-1和VCAM-1。AGE-HSA能以时间和剂量依赖的方式上调ICAM-1、VCAM-1的表达（P<0.05），而HSA对HUVECs上述粘附分子的表达均无影响。 结论： AGE能上调HUVECs粘附分子的表达，从而促进AS时单核/巨噬细胞的浸润。     

019 液体切应力对内皮细胞粘附分子及单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的: 观察流体切应力对内皮细胞粘附分子ICAM-1、 VCAM-1及单核细胞趋化蛋白质(MCP-1)表达的影响以及在动脉粥样硬化发病中的意义. 方法: 以人静脉内皮细胞(HUVEC), 作观测对象, 采用平行板流动腔产生一定大小的切应力, 采用免疫组化ABC法观测经0.72 Pa作用不同时间(30 min、 5 h)后, 粘附分子表达的变化, 采用ELISA方法测定灌流液中MCP-1蛋白浓度, 反映内皮细胞表达MCP-1的变化. 结果: 粘附分子测定的结果如下: 切应力作用30 min后, ICAM-1的阳性表达率(%)为56.3±10.2, 作用5 h后为58.6±6.8, 而对照组(静态)为44.7±11.6, 此结果表明切应力能引起HUVEC上ICAM-1表达显著增加. 未见其对VCAM-1表达的影响. MCP-1蛋白浓度测量的结果是: 切应力作用30 min后, 灌流液中MCP-1浓度为76.6±26.1 pg/ml, 作用5 h后为323.4±106.7 pg/ml, 作用12 h后为1 152.7±377.5 pg/ml, 对照组为186.0±74.8 pg/ml, 以上结果表明0.72 Pa切应力作用可引起MCP-1表达时间依赖性增加. 结论: ICAM-1是介导白细胞(包括单核细胞)血管内皮细胞粘附的粘附分子, 本研究结果显示: 切应力可引起HUVEC上ICAM-1表达增加, 有促进白细胞粘附的作用. MCP-1是特异性作用于单核细胞(MC)的强趋化蛋白, 对MC在内皮下聚集起启动和放大作用, 故在AS发生和发展中起重要作用. 本研究结果表明0.72 Pa切应力可引起HUVEC表达MCP-1呈时间依赖性增加.     

凝血酶对大鼠脑微血管内皮细胞的影响

目的 :探讨凝血酶 (Thrombin ,TM )对脑微血管内皮的影响。方法 :将大鼠脑微血管内皮细胞进行培养 ,培养液中加入 10U的TM或10U的TM + 0 .4mU的组织蛋白酶G(CaspethsinG ,CATG ) ,相差显微镜动态观察内皮细胞形态的变化 ,免疫组织化学技术检测基质金属蛋白酶 2 (MatrixMetalloproteinase 2 ,MMP 2 )表达的改变。 结果 :TM使内皮细胞发生收缩 ,细胞收缩程度具有时间依赖性 ,使内皮细胞MMP 2表达水平明显增加。TM +CATG加入培养液后 ,细胞形态、MMP 2表达与对照组比较均无明显统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :TM通过激活蛋白酶激活受体 1(proteaseactivatedreceptor 1,PAR 1) ,使内皮细胞发生收缩 ,促进MMP 2表达 ,是TM增加血脑屏障 (BloodBrainBarrier,BBB)通透性的可能机制。