铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药性探讨

目的探讨铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药性情况。方法采集2014年1月~2015年2月于德清县第三人民医院住院的3000例患者痰液、脓汁标本,按常规方法分离铜绿假单胞菌,从中选择30株铜绿假单胞菌喹诺酮耐药菌株进行试验。选择铜绿假单胞菌野生型标准株作为对照。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)进行gyrA、gyrB、parC和parE基因QRDR氨基酸变化结果分析。结果 30株铜绿假单胞菌喹诺酮耐药菌株中有3株没有发生Ⅱ类拓朴异构酶基因突变,其余均发生基因突变,突变率达到90%。基因突变主要集中在gyrA编码的83位密码子、parC的80位密码子。结论探讨铜绿假单胞菌Ⅱ类拓扑异构酶基因突变特点,对突变株进行药物敏感试验,可以为临床合理用药提供可靠的理论依据。     

大肠杆菌、金葡菌和铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药性研究

目的　研究大肠埃希氏杆菌 (大肠杆菌 )、金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )和铜绿假单胞菌分别暴露于喹诺酮类药物、染料、紫外线后耐药性产生情况及不同浓度喹诺酮类药物作用于这三种细菌后其生长和形态特征的改变。方法　采用琼脂平板表面涂菌和试管双倍稀释法。结果　引起细菌耐喹诺酮类药物的主要原因是低浓度喹诺酮药物反复作用于细菌后所致 ,未见到紫外线照射、染料物质作用后引起大肠杆菌、金葡菌和铜绿假单胞菌对喹诺酮类产生耐药性。细菌经不同浓度环丙沙星作用后 ,产生不同程度的数量减少和形态改变。结论　大肠杆菌最容易产生喹诺酮耐药性 ,在环丙沙星作用后最易发生形态和耐药性改变 ,而不易被喹诺酮类药物杀灭     

铜绿假单胞菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制

铜绿假单胞菌是一种重要的医院内感染条件致病菌,对喹诺酮类药物耐药日趋严重。目前发现铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药的主要机制为:改变抗菌药物作用的靶位点结构,从而逃避抗菌药物的作用;主动泵出系统使药物排出细菌体外。有关铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药机制,仍存在许多问题有待进一步探索。现就铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药机制研究进展进行综述。     

220株铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的本调查试图通过分析220株铜绿假单胞菌的耐药性来了解铜绿假单胞菌的耐药现状。方法选用220株来自嘉兴市中医院内、外科2008年6月～2010年5月临床标本的铜绿假单胞菌,通过药敏试验测定其对13种抗菌药的耐药性。结果药敏试验结果显示铜绿假单胞菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类和头孢类抗菌药不敏感,而敏感度最高的是阿米卡星（83．2％）和妥布霉素（79．1％）。结论通过本次调查结果可以指导临床治疗铜绿假单胞菌感染的药物选择,同时有助于了解和控制铜绿假单胞菌引起的院内感染的流行情况。     

铜绿假单胞菌对环丙沙星的抗药性和耐药性机制研究

目的研究铜绿假单胞菌对环丙沙星的抗药性(resistance)和耐药性(tolerance)机制,并予以区分。方法分离养殖场和医院铜绿假单胞菌33株,用微量肉汤稀释法测定铜绿假单胞菌临床分离株对喹诺酮类抗生素的最低抑菌浓度(MIC),筛选喹诺酮抗药菌5株;体外连续培养诱导铜绿假单胞菌标准菌株P.aeruginosa ATCC27853,得到对环丙沙星和头孢噻肟的高抗药性菌株PA34。检测及分析铜绿假单胞菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)的基因突变;荧光比色法检测不同抗药性表型的铜绿假单胞菌外排泵活性;荧光定量RT-PCR法检测铜绿假单胞菌外排泵、跨膜转运蛋白及喹诺酮靶酶编码基因的mRNA表达水平。结果 临床分离的5株喹诺酮抗药表型的铜绿假单胞菌,其外排泵活性均显著高于标准菌株(P<0.01),外排泵、喹诺酮靶位酶编码基因的mRNA的表达量上调、跨膜转运基因表达量下调,DNA旋转酶A亚基gyrA基因均发生点突变Thr-83→Ile。PA34和这5株抗药性菌株表现一致,但其MIC远高于这5株抗药性菌株,主要由于PA34除了gyrA基因发生点突变Thr-83→Ile外,parC基因发生多点突变Glu-84→Gln、Gln-91→Lys,且跨膜转运基因表达量极低。结论 在喹诺酮类抗生素选择压力下,铜绿假单胞菌能发展多种可能的机制以消除抗生素对细菌代谢的损伤,对类似gyrA、parC基因突变称为抗药性,其他生理性适应机制称为耐药性,其抗药性突变和耐药性调节共同决定了抗药性表型,但对其加以区分并分别研究,更容易集中研究单纯的抗药性突变机制,采取相应的用药措施。     

铜绿假单胞菌质粒介导的喹诺酮耐药机制研究

目的探讨铜绿假单胞菌对质粒介导喹诺酮类耐药（PMQR）机制,为控制其耐药性传播提供依据。方法筛选住院患者对环丙沙星耐药的69株铜绿假单胞菌,PCR筛选质粒介导的喹诺酮类耐药基因[qnr,aac（6''）-Ib-cr],阳性产物进行DNA测序,接合转移试验验证PMQR基因。结果69株受试株中,12株aac（6''）-Ib-cr基因阳性,经DNA测序、BLAST比对,3株携带aac（6''）-Ib-cr基因（含有Trp-102→Arg和Asp-179→Tyr突变）,另有3株为aac（6''）-Ib野生型;质粒接合转移试验结果阴性;未检出qnr基因。结论铜绿假单胞菌PMQR基因以aac（6''）-Ib-cr基因为主,未检出qnr基因,aac（6''）-Ib-cr基因介导低水平耐药。     

耐喹诺酮类铜绿假单胞菌的耐药机制研究

目的 探讨广州地区铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药机制.方法 对喹诺酮耐药株的gyrA和parC基因进行限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),并对其中的高水平耐药株gyrB和parE基因进行测序;用琼脂稀释法测定加入碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)前后环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC);同时用SDS-PAGE对高水平耐药株的外膜蛋白进行电泳分析.结果 有 72.7%(72/99)的菌株发生gyrA突变,主要为,Thr-83-Ile;25.3%(25/99)的菌株发生parC突变,主要为Ser-87-Leu,且均是gyrA和parC双基因突变;gyrB和parE突变较少见.53.3%(53/99)的菌株的MIC可被CCCP逆转,其MIC能明显降低;7%(7/10)的高水平耐药株的外膜蛋白在43～67kDa间条带增多,其蛋白含量有差异.结论 抗菌药物作用靶位的改变和外排泵机制是本地区铜绿假单胞菌对喹诺酮类耐药的重要机制.     

铜绿假单胞菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因的研究

目的了解广州地区质粒介导喹诺酮类耐药（PMQR）基因在铜绿假单胞菌中的流行状况并分析其与耐药之间的关系。方法收集2005-2007年临床分离到的212株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,通过PCR检测质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qnrC、qnrD、aac（6’）-Ib-cr和qepA,并对阳性扩增产物进行DNA测序分析。结果 212株铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为10.8%（23/212）和19.3%（41/212）。qnrB、qnrS和aac（6’）-Ib-cr的阳性率分别为0.9%（2/212）、0.5%（1/212）和0.9%（2/212）,qnrA、qnrC、qnrD、qepA未检出。4株PMQR基因阳性菌株中,仅1株对左氧氟沙星表现为耐药,其余对环丙沙星和左氧氟沙星均表现为敏感。结论 2005-2007年间广州地区铜绿假单胞菌耐药现象严重,该地区铜绿假单胞菌中已携带有PMQR基因,且敏感菌株中也有该类基因存在。     

铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的:了解本院2010年1-12月铜绿假单胞菌的分离情况及耐药特点.方法:从2010年1-12月老年住院患者的痰液、分泌物等标本中分离出102株铜绿假单胞菌,统计其样本来源、科室分布、对不同抗菌药物的敏感性.结果:在检出的102株铜绿假单胞菌中58株来自呼吸内科,占56.86%;其次为神经外科,占13.73%,比较敏感的抗菌药物依次是多粘菌素(100%)、亚胺培南(82.36%)、哌拉西林/他唑巴坦(74.51%).结论:铜绿假单胞菌为非发酵菌中的假单胞菌属,很容易造成机会性感染,临床应合理选用抗菌药物,从而减少耐药菌株的产生,有效抑制铜绿假单胞菌耐药率过快增长,同时应不断检测抗菌药物的敏感性,为临床合理用药提供科学依据.     

铜绿假单胞菌的耐药性特点

近年来下呼吸道铜绿假单胞菌(Pseudomnoas aeruginosa,PA)感染呈上升趋势,尤是慢性阻塞性肺病晚期和颅脑等重度创伤行机械通气后的病人,常在痰培养时发现PA感染。在所有院内感染致病菌中,PA已列入首位。为了解PA对常用抗生素的耐药性情况,本文参阅近年文献作一综述。     

葡萄球菌耐药质粒转化大肠杆菌的实验研究

目的 探讨葡萄球菌与大肠杆菌间耐药性传递的可能性.方法 抽提金黄色葡萄球菌耐氯霉素质粒,转化至对氯霉素敏感的大肠杆菌体内,以氯霉素抑菌试验筛选获得耐药性的大肠杆菌,以琼脂糖凝胶电泳分析2菌耐氯霉素质粒的DNA分子大小.结果 成功获得对氯霉素耐药的大肠杆菌,且可从其培养物提取出与耐氯霉素会黄色葡萄球菌相同大小的质粒DNA.结论 葡萄球菌可能具有天然穿梭耐药质粒,在人工条件下可成功转化大肠杆菌使之获得耐药性.     

In vitro antibacterial activity of leaf extracts of Zehneria scabra and Ricinus communis against Escherichia coli and methicillin resistance Staphylococcus aureus

ObjectiveTo evaluate the antibacterial activities of the crude leaves extracts of Zehneria scabra (Z. scabra) and Ricinus communis (R. communis) against Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus (S. aureus) and methicillin resistance S. aureus.MethodsThe crude powdered leaves of Z. scabra and R. communis were extracted successively by organic solvents in increasing polarity [benzene, chloroform:acetone (1:1), 70% alcohol and distilled water]. The antibacterial susceptibility of the crude leaves extracts of were tested against standard strains of E. coli (ATCC 25922) and S. aureus (ATCC 2923) and clinical isolates of E. coli, S. aureus and methicillin resistance S. aureus using agar well diffusion method.ResultsIn Z. scabra and R. communis leaf extracts, the most sensitive standard strain was S. aureus with an inhibition zone of (14.00±1.20) mm and (15.90±2.13) mm, respectively. The minimum inhibitory concentration (MIC) values of Z. scabra extracts against test organisms ranged from 1.95 mg/mL for extract 3 in clinical and standard strains of S. aureus to 250 mg/mL for extract 1 and 4 in clinical and standard strains of E. coli. The MIC values of R. communis extracts against test organisms ranged from 1.95 mg/mL for extract 2 and 3 standard strains of S. aureus to 250 mg/mL for extract 1 in clinical isolate of E. coli. Most of the minimum bactericidal concentration and MIC values of plant extracts were almost similar particularly in R. communis, or minimum bactericidal concentration equal to one dilution factor less than MIC value of the extracts mainly in Z. scabra.ConclusionsThe potency of plant extracts against test organisms were depend on different organic solvents used. Clinical isolate of bacterial pathogens showed less zones of diameter compared to the standard strains. Gram-positive had wide inhibition zones than Gram-negative bacteria. Further studies should be carried out to isolate the pure compounds and standardization of the methods of plant extracts for an in vitro testing.     

金黄色葡萄球菌联合大肠埃希菌感染的糖尿病溃疡大鼠模型的建立及评价

目的:建立金黄色葡萄球菌联合大肠埃希菌混合感染的糖尿病溃疡大鼠模型,为糖尿病溃疡实验研究提供合适的动物模型。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为5组,普通溃疡组、糖尿病溃疡组、糖尿病溃疡治疗组、模型组、模型治疗组。造模后取局部皮肤组织行HE染色;采用酶联免疫吸附(ELISA)检测大鼠血清中高敏C反应蛋白(H-CRP)、成纤维细胞生长因子(bFGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、糖基化终末产物(AGEs)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、一氧化氮(NO)含量水平,并记录创面愈合时间,对该模型的稳定性、实用性进行评估。结果:模型组溃疡愈合时间较其他组明显延迟(P<0.001);模型组及模型治疗组血清中H-CRP水平高于普通溃疡组、糖尿病溃疡组、糖尿病溃疡治疗组(P<0.05);溃疡愈合后糖尿病溃疡组血清中H-CRP、bFGF、AGEs、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO水平均高于普通溃疡组(P<0.05);模型组血清中H-CRP、AGEs、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO水平均高于其他组(P<0.05);模型治疗组血清中的H-CRP、AGEs、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO水平均高于糖尿病溃疡治疗组(P<0.05)。结论:该模型符合混合感染性糖尿病溃疡局部环境,为相关研究提供了新的选择。     

医院和社区获得性金黄色葡萄球菌耐药性情况调查

目的 了解临床分离的社区获得性和医院获得性金黄色葡萄球菌的耐药情况,为进一步指导临床治疗,更好地控制MRSA引起的感染提供依据.方法 采用K-B纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌对不同种类抗生素的敏感性.结果 医院获得性甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(HA-MSSA)对头孢唑啉、庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率显著高于社区获得性甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌( CA-MSSA) (P＜0.05);医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( HA-MRSA)对头孢唑啉、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素、左氧氟沙星和利福平的耐药率显著高于CA-MSSA和HA- MSSA( P＜0.05);HA- MRSA多重耐药菌株所占的比率为90.4％,显著高于CA-MSSA的20.0％和HA-MSSA的37.4％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 医院获得性金黄色葡萄球菌耐药情况较严重,CA-MSSA和HA-MSSA药物敏感性明显高HA-MRSA,HA-MRSA呈现多重耐药性.     

金黄色葡萄球菌对亲水性氟喹诺酮类药物摄入的研究

为了解金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮的耐药机理,作者用荧光测定法研究了细菌对洛美沙星,氧氟沙星的摄入以及能量抑制剂对两药摄入的影响。结果显示;耐药菌ＳＡＲ,ＳＡ７０１,ＳＡ６８７对上述两种药物的摄入量均低于敏感菌ＳＡ２,ＳＡ３,ＳＡ４;加入能量抑制剂后上述细菌对药物的摄入量均有不同程度的增加。     

金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药的检测

目的通过对齐市中医院临床分离葡萄球菌株中红霉素和克林霉素耐药性及红霉素诱导克林霉素的耐药发生率,为临床提供比较可靠的药敏结果。方法采用D试验检测280株葡萄球菌的可诱导克林霉素耐药性。结果红霉素和克林霉素均耐药占35%。D试验阳性占所测葡萄球菌的20.71%,占红霉素耐药克林霉素敏感株的70.73%。结论检测葡萄球菌属诱导型耐药,避免盲目使用克林霉素而导致治疗无效,帮助临床正确选用大环内酯类-林可酰胺类-链阳霉素B类（MLSB）抗菌药物。