胃癌患者外周血中CEA mRNA的检测及其临床意义

目的 探讨胃癌思者外周血中CEAmRNA表达的临床意义。方法 采用巢式RT—PCR法，检测42例胃癌患者外周血中的CEAmRNA表达情况。采用化学发光法检测血清中CEA水平。以胃腺癌细胞株SGC—7如l作为阳性对照，以20例正常人外周血作为阴性对照。结果 42例胃癌患者CEAmRNA阳性率为45．2％(19／42)，其中25例行根治术的胃癌患者肿瘤切除术后血CEAmRNA阳性率明显高于术前(56．0％V．s28．0％，P＝0．039)。胃癌患者外周血中CEAmRNA表达与肝转移相关，但与血清CEA值、肿瘤部位、UICC分期及分化程度无关。胃腺癌细胞株SGC—790l中CEAmRNA均呈阳性表达；20例正常人外周血中CEAmRNA均呈阴性表达。结论 胃癌患者外周血中CEAmRNA表达可作为癌细胞血道播散的标志，对判断其预后及指导临床治疗具有重要意义。胃癌手术中应采用“不接触技术”以减少术中癌细胞播散。     

大肠癌外周血CEAmRNA的表达及临床意义

目的 :探讨大肠癌外周血中CEAmRNA的表达及临床意义。方法 :以CEAmRNA为靶基因 ,运用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 4 2例大肠癌术前、术后外周血中CEAmRNA的表达。结果 :2 0例正常人外周血中均无CEAmRNA表达。 2 0例大肠癌组织标本均有CEAmRNA表达。术后外周血中CEAmRNA的阳性率与大肠癌的Dukes分期密切相关 ,术后外周血中CEAmRNA呈阳性的大肠癌日后发生肝转移的概率高于CEAmRNA呈阴性的。结论 :大肠癌外周血CEAmRNA的检测可能成为判断大肠癌恶性程度、转移、复发以及疗效监测的重要指标     

大肠癌外周血CEAmRNA的表达及临床意义

目的：探讨大肠癌外周血中CEAmRNA的表达及临床意义。方法：以CEAmRNA为靶基因，运用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测42例大肠癌术前、术后外周血中CEAmRNA的表达。结果：20例正常人外周血中均无CEAmRNA表达。20例大肠癌组织标本均有CEAmRNA表达。术后外周血中CEAmRNA的阳性率与大肠癌的Dukes分期密切相关，术后外周血中CEAmRNA呈阳性的大肠癌日后发生肝转移的概率高于CEAmRNA呈阴性的。结论：大肠癌外周血CEAmRNA的检测可能成为判断大肠癌恶性程度、转移、复发以及疗效监测的重要指标。     

大肠癌患者外周血CEAmRNA和CK20mRNA的联合检测及临床意义

目的:探讨大肠癌患者外周血CEAmRNA和CK20mRNA表达情况及临床意义.方法:应用RT-PCR方法检测46例大肠癌患者、22例大肠良性肿瘤患者及30例正常人外周血CEAmRNA和CK20mRNA.结果:在良性肿瘤组及正常人组中,CEAmRNA及CK20mRNA均无表达,而在大肠癌患者中的阳性率分别是54%和61%,二者联合检测阳性(至少一项阳性)率为72%,较单项阳性率高(P＞0.05).二者表达与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关,而与临床分期及淋巴结转移明显相关.结论:联合检测有助于提高肿瘤微转移检出率,其表达与临床分期及淋巴结转移明显相关,可作预后参考指标.     

大肠癌患者外周血CEAmRNA和CK20mRNA的联合检测及临床意义

目的：探讨大肠癌患者外周血CEAmRNA和CK20mRNA表达情况及临床意义。方法：应用RT—PCR方法检测46例大肠癌患者、22例大肠良性肿瘤患者及30例正常人外周血CEAmRNA和CK20mRNA。结果：在良性肿瘤组及正常人组中，CEAmRNA及CK20mRNA均无表达，而在大肠癌患者中的阳性率分别是54％和61％，二者联合检测阳性（至少一项阳性）率为72％，较单项阳性率高（P〉0．05）。二者表达与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关，而与临床分期及淋巴结转移明显相关。结论：联合检测有助于提高肿瘤微转移检出率，其表达与临床分期及淋巴结转移明显相关，可作预后参考指标。     

CK20、CK19、CEA在肺癌患者外周血中的表达及其意义

背景与目的 恶性肿瘤在其早期阶段即可能发生微转移,由于进入血液循环中的肿瘤细胞数目极少,常规的检测手段不易发现,现代分子生物学技术进展使微转移检测成为可能.本研究联合检测肺癌患者的外周血CK20、CK19、CEA mRNA表达,并分析其临床意义.方法 应用巢式RT-PCR法分析83例肺癌患者外周血单个核细胞CK20、CK19、CEA mRNA表达情况;另取15例食管癌组织为阳性对照,15例非肿瘤患者外周血为阴性对照.结果 83例肺癌患者外周血中,CK20阳性表达率为34/83(41.0%),CK19阳性表达率为30/83(36.1%),CEA阳性表达率为40/83(48.2%);三者至少一项阳性的表达率为61/83(73.5%).15例食管癌组织中CK20、CK19、CEA阳性表达率100%,15例阴性对照组外周血CK19、CEA阳性表达率均为2/15(13.3%);CK20阳性表达率为1/15(6.6796).CK20、CK19、CEAmRNA阳性表达与肿瘤有无转移有关(P<0.05),与肿瘤患者的年龄、性别无关.结论 CK20、CK19、CEAmRNA可作为检测肺癌患者外周血微转移的靶基因,联合检测CK20、CK19、CEA可增加外周血循环癌细胞的检出率,CK20、CK19、CEAmRNA同时表达可增加实验结果特异性.     

外周血CEAmRNA、CEA及VEGF检测在诊断肿瘤微转移中的意义

目的探讨检测外周血癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)表达、血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)及血清癌胚抗原(CEA)水平在诊断恶性肿瘤微转移中的临床意义。方法36例经病理确诊的恶性肿瘤患者(其中13例临床确诊远处转移,23例无确切临床转移征象),17例健康体检对照者,采用巢式逆转录聚合酶链反应(nestRT-PCR)检测外周血CEAmRNA表达,并联合检测血清VEGF水平(酶联免疫吸附法,ELISA)及血清CEA的水平(化学发光法)。结果13例远处转移患者中CEAmRNA表达阳性11例(84.6%),23例未转移患者中CEAmRNA表达阳性6例(26.1%),17例健康对照组CEAmRNA表达均阴性,肿瘤转移病人外周血CEAmRNA表达明显高于无转移病人;血清CEA在远处转移患者与未转移患者中的差异无统计学意义;远处转移患者的VEGF水平高于未转移患者及健康对照者。联合检测外周血CEAmRNA表达及血清VEGF水平在肿瘤转移诊断中有更高的敏感性。结论联合检测外周血CEAmRNA表达及血清VEGF水平可能有助于恶性肿瘤微转移的早期诊断。     

巢式RT-PCR检胃癌患者外周血循环癌细胞的研究

目的　分析胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的异常表达及意义。方法　采用RT PCR方法检测 5 2例胃癌患者术前外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的表达。结果　胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为 42 .3 % (2 2 /5 2 )及 5 1.9% (2 7/5 2 ) ,CK 2 0mRNA和CEAmRNA两者中至少 1个基因为阳性的表达率为 63 .5 % (3 3 /5 2 )。胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA表达与胃癌的远处转移有关 ,CEAmRNA表达、CK 2 0mRNA和CEAmRNA都表达、CK 2 0mR NA和CEAmRNA两者中至少 1个表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和远处转移相关 (P <0 .0 5 )。结论　胃癌患者外周血CK 2 0和CEA的RT PCR检测有助于患者预后的判断 ;联合检测CK 2 0mRNA和CEAmRNA可增加外周血循环癌细胞检测的敏感性     

RT-PCR方法检测大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达及其临床意义

目的：检测大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达并分析其临床意义。方法：用RT－PCR方法检测70例大肠癌患者和35例正常健康人外周血中组织特异性mRNA的表达。结果：70例大肠癌患者中有30例外周血中组织特异性mRNA表达阳性，阳性率为42．9％，与健康对照人群相比差异有显著性（P＜0．05），DukesC和Dukes D期大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达高于Dukes A期大肠癌患者（P＜0．05），在不同分化程度大肠癌患者外周血中的表达差异无显著性（P＞0．05），手术后比手术前的阳性表达率低，但差异无显著性（P＞0．05），结论：大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的阳性表达同肿瘤的分期有关，可作为大肠癌微转移的监测指标。     

外周血癌胚抗原mRNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:应用RTPCR技术检测大肠癌患者外周血CEAmRNA,探讨与不同临床病理指标之间的关系,评估复发转移的早期预测意义。方法:应用RTPCR技术,选择特异性CEAmRNA引物,检测29例大肠癌患者外周血CEAmRNA,同期定量检测外周血CEA和CA199糖蛋白。另抽取12例健康志愿者外周血标本作为对照。结果:29例大肠癌患者外周血中CEAmRNA、CEA、CA199阳性率分别为24.14%(7/29)、17.24%(5/29)、13.79%(4/29)。12例对照组外周血中CEAmRNA、CEA、CA199均阴性。有淋巴结转移者外周血CEAmRNA阳性率(35.29%,6/17)高于无淋巴结转移者(8.33%,1/12),但χ2=2.79,P=0.095。TNM分期Ⅳ期中外周血CEAmRNA阳性率66.67%(4/6),Ⅲ期16.67%(2/12),Ⅰ、Ⅱ期9.09%(1/11),差异有统计学意义,χ2=7.65,P=0.022。外周血CEAmRNA表达在患者的年龄、性别、病理类型等差异无统计学意义,P>0.05。结论:CEAmRNA、CEA和CA199在大肠癌患者中的阳性率,以CEAmRNA阳性率最高,随TNM分期进展,阳性率更高,提示预后不良,应加强治疗。     

大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

原发性肝癌者外周血AFP mRNA的表达及其动态和意义

目的探讨AFP mRNA在原发性肝癌患者外周血的表达及其动态变化和临床意义.方法用巢式逆转录聚合酶链反应检测93例肝癌患者外周血AFP mRNA,并观察其中36例患者血AFP mRNA表达在治疗前后的动态变化.结果血AFP mRNA阳性率为52.7%(49/93),阳性率与肝癌临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、癌灶大小、HBV感染和肝硬化程度密切相关,并和癌组织中AFP mRNA的表达水平密切相关(P＜0.05).随访结果显示,外周血AFP mRNA呈阳性的病例发生肝内外转移率显著高于阴性病例,癌灶缓解期明显短于阴性病例(P均＜0.05).联合全身化疗和免疫治疗可显著降低肝癌患者外周血AFP mRNA的阳性率.结论外周血AFP mRNA阳性表达是预示肝癌发生肝内外转移的重要标志.联合全身化学免疫治疗可显著降低血AFP mRNA阳性率,对预防肝癌细胞的血行播散、降低肝内外转移率和提高患者预后可能有积极作用.     

荧光定量PCR检测大肠癌患者CEA mRNA表达的研究

目的 通过检测大肠癌病人外周血清中癌胚抗原(CEA),外周血及淋巴结中癌胚抗原信使核糖核酸(CEA mRNA)的相对表达量,建立外周血中定量检测CEA mRNA的方法,并探讨CEA mRNA检测在结直肠癌诊断中的临床意义。方法 采用逆转录-荧光定量PCR技术检测大肠癌病人外周血及淋巴结中CEA mRNA的相对表达量,并用电化学发光法检测外周血中的CEA。结果 50例大肠癌患者手术前外周血CEA mRNA表达阳性率为84%,与正常对照组(20人无1例阳性)比较,差异有统计学意义(P＜0.01);CEA 阳性率为22%与CEA mRNA表达阳性率相比两者差异有统计学意义(P＜0.01)。淋巴结CEA mRNA表达阳性率32.3%,与外周血中CEA mRNA表达阳性率相比两者差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 建立了SYBRGREEN 荧光定量PCR检测大肠癌患者CEA mRNA表达的方法,大肠癌患者手术前外周血CEA mRNA表达阳性率较高,且显著高于外周血中CEA含量以及淋巴结中CEA mRNA表达阳性率,可用于大肠癌患者的术前诊断。     

肺癌患者外周血癌胚抗原 mRNA和细胞角蛋白19 mRNA的联合检测

目的　观察肺癌患者外周血循环细胞中癌胚抗原 (CEA)mRNA和细胞角蛋白 19(CK19)mRNA的表达情况 ,并探讨CEAmRNA和CK19mRNA联合检测的临床意义。方法　用RT PCR方法 ,分别检测 5 0例肺癌患者、2 5例肺部良性疾病患者和 37例健康志愿者外周血中CEAmRNA和CK19mRNA的表达 ,并对CEAmRNA和CK19mRNA联合检测与单项检测的阳性率进行比较 ,分析联合检测对肺癌诊断的灵敏度与特异性。结果　 5 0例肺癌患者中 ,CEAmRNA阳性表达率为 6 0 .0 % (30 / 5 0 ) ,CK19mRNA阳性表达率为 38.0 % (19/ 5 0 ) ,两者联合检测阳性率为 82 .0 % (41/ 5 0 )。联合检测与单项检测相比 ,能显著提高诊断灵敏度 ,且并不影响特异性。联合检测与单项检测相比 ,灵敏度差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,特异度差异无显著性 (P >0 .0 5 )。同时 ,肺癌患者的联合检测阳性率亦均显著高于肺部良性疾病组 (2 5例 ,阳性率 2 8.0 % )和健康对照组 (37例 ,阳性率 8.1% ;P <0 .0 0 1)。结论　外周血循环细胞中CEAmRNA和CK19mRNA的联合检测可提高肺癌细胞向外周血播散的检出率 ;随访并扩大样本含量有助于探讨其在检测微转移中的意义     

胃癌患者外周血CEA mRNA表达相关病理因素分析

目的 探讨胃癌患者外周血CEA mRNA表达的相关病理因素.方法 对2004年1月至2004年6月手术治疗的38例胃癌患者外周血CEA mRNA表达进行检测,并回顾性分析胃癌患者年龄、性别、胃癌原发部位、大体类型、组织学类型、淋巴结转移以及胃癌组织p53和CerbB-2表达等临床病理因素与胃癌患者外周血CEA mRNA表达的关系.结果 胃癌患者外周血CEA mRNA表达的阳性率为60.5%（23/38）.单因素分析显示：胃癌患者外周血CEA mRNA表达与胃癌原发病灶部位（P〈0.05）、组织学类型（P〈0.05）及淋巴结转移（P〈0.05）相关;多因素Logistic回归分析表明：胃癌淋巴结转移、胃癌原发病灶部位为影响胃癌患者外周血CEA mRNA表达的独立因素.结论 胃癌血道转移的高危因素为胃窦癌和淋巴结转移.     

Tumor cell dissemination in colon cancer does not predict extrahepatic recurrence in patients undergoing surgery for hepatic metastases

Patients undergoing resection of hepatic metastases of colorectal cancer have a high risk of extrahepatic recurrence, most likely caused by early tumor cell dissemination or the manipulation of liver tumors during surgical resection. Using immunocytochemistry, we studied 47 patients for cytokeratin (CK)-positive (+) cells in: a) bone marrow (BM) samples to determine whether tumor cell dissemination had already occurred before surgery; and b) blood samples directly taken from the hepatic vein before and during surgery of liver metastases. In addition, normal and malignant liver tissues were evaluated for markers known to be involved in tumor progression and metastasis [urokinase plasminogen activator (uPA), Her-2/neu, epidermal growth factor receptor (EGF-R)] using sandwich enzyme immunoassays. CK+ cells were detected in the BM of 26/47 patients (55%), in blood samples of 14/47 patients (30%) before surgery and 11/47 patients (23%) during surgery with a median detection rate of 1 (range, 1-14) CK+ cell per 4x10(6) MNC. No CK+ cells were found in 15/47 patients (32%) in any sample studied. Tumor tissue was obtained from 32/47 patients and normal liver tissue from 24/32 patients. While no differences were found for EGF-R and Her-2/neu, a 9-fold higher expression of uPA could be demonstrated in tumor tissue of 20/32 patients (63%) compared to normal liver tissue. When all obtained results were correlated with clinical outcome, neither the detection of CK+ cells nor the expression pattern in the tumor tissue, or the combination of both, was predictive for extrahepatic recurrence or overall survival after a mean observation time of 43 months (range, 26-54 months). Although uPa is overexpressed in liver metastases of colorectal cancer, and dissemination of CK+ cells during surgery of these metastases is a frequent event in colon cancer, these findings do not predict extrahepatic recurrence. Further characterization of single cells, especially those spread during surgery, will help to identify those patients with an increased risk of later relapse.